五灵胶囊中部分化学成分对脂多糖诱导枯否细胞释放炎症因子的影响

目的观察五灵胶囊（Wuling capsules,WL）中部分化学成分对脂多糖（lipopolysaccharider,LPS）诱导大鼠原代枯否细胞（Kupffer cell,KC）表达ERK（extracellular signal-regulated kinase）和核因子（nuclear factor-kappa B,NF-κB）调节炎症因子和介质的作用。方法分离大鼠KC,采用60μg L 1 LPS诱导KC分泌炎症因子及NOS,ELISA测定TNF-α、IL-6、IL-8,比色法测定NOS,Western blot检测全蛋白ERK、p-ERK、NF-κBp50、NF-κBp65、p-NF-κBp65、p-IκK、p-IκB及核、浆蛋白NF-κBp65、p-NF-κBp65的变化。结果 WL明显下调LPS活化KC表达p-ERK、p-NF-κBp65、p-IκK、p-IκB蛋白,模拟WL混合成分（Mix）及6单体成分明显下调LPS活化KC表达p-ERK和p-NF-κBp65信号通路蛋白。各受试药物组均能降低核内p-NF-κBp65表达,减少p-NF-κBp65入核抑制炎性基因转录,降低活化KC过量分泌TNF-α、IL-6、IL-8和NOS。结论 WL中五味子醇甲、五味子乙素、隐丹参酮、丹参酮ⅡA、柴胡皂苷D是干预LPS诱导KC表达ERK、NF-κB信号通路蛋白,抑制炎性因子与介质基因转录而减少TNF-α、IL-6、IL-8和NOS分泌的有效成分。     

孟鲁司特对哮喘患者外周血核因子-κB活性、白细胞介素-10水平及肺功能的影响

目的观察孟鲁司特对哮喘患者外周血核因子-κB（NF-κB）活性、白细胞介素-10（IL—10）水平及肺功能的影响。方法将80例急性发作期支气管哮喘患者随机均分为两组,对照组仅常规吸入激素治疗,治疗组在对照组治疗基础上口服孟鲁司特钠片,10mg／次,每晚1次,连用3月,均于治疗前和治疗3月后抽取静脉血检测培养上清液单个核细胞（PBMC）中NF-κB活性和血浆IL-10水平,并检测肺功能变化。结果与治疗前比较,两组患者治疗后培养上清液PBMC中NF-κB活性均明显下降,血浆IL—10水平均明显上升（P〈0．05或P〈0．01）,且治疗组变化更明显（P〈0．05）;两组患者治疗后肺功能指标明显改善（P〈0．01或P〈0．05）,且治疗组改善更明显（P〈0．05）。结论孟鲁司特治疗哮喘的临床疗效确切,其作用机制可能是通过上调IL－10水平,使NF-κB活性降低,从而抑制气道炎症、缓解气道痉挛、降低气道高反应性。     

同型半胱氨酸对核因子-κB活性及白介素6分泌水平的影响

目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)与外周血单核细胞(PBMC)白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达和核转录因子-κB(NF-κB)活性之间的关系.方法:抽取正常志愿者静脉血分离并培养PBMC,分别加入不同浓度的Hcy,培养不同的时间,收集细胞培养上清液,采用ELISA测定IL-6蛋白表达水平;收集细胞,采用免疫细胞化学方法检测NF-κB活性的变化.结果: (1)Hcy实验组IL-6浓度高于对照组(P<0.01),且IL-6水平随Hcy剂量升高而升高,呈剂量依赖性和时间依赖性(0～48h).(2)Hcy可诱导PBMC NF-κB活化,出现核易位.结论: Hcy能促进PBMC IL-6蛋白表达,并诱导NF-κB激活.     

氨溴索诱导痰在老年慢性阻塞性肺疾病患者气道炎症中的应用

目的观察老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者氨溴索诱导痰的安全性及有效性和急性加重期及稳定期老年COPD患者氨溴索诱导痰中细胞组分和可溶性介质水平变化,探讨其在气道炎症中的作用。方法将老年COPD急性加重期患者40例随机分为氨溴索组和高渗盐水组,每组20例。高渗盐水组雾化吸入3%高渗盐水4ml,氨溴索组给予3%高渗盐水2ml+氨溴索2ml诱导排痰。对比2组患者不良反应发生率、排痰成功率、痰液中细胞组分及炎性递质含量。测定氨溴索组患者急性加重期、稳定期诱导痰中细胞总数、单核细胞百分比、中性粒细胞百分比、白细胞介素-8(IL-8)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度及其第1秒用力呼气容积(FEV1)、FEV1占预计值百分比。结果 2组不良反应发生率、排痰成功率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。氨溴索组患者急性加重期诱导痰液中细胞总数、单核细胞百分比、中性粒细胞百分比、IL-8及TNF-α浓度与稳定期比较,差异均有统计学意义(P<0.05);氨溴索组患者痰液中细胞总数、单核细胞及中性粒细胞百分比、IL-8及TNF-α浓度和FEV1占预计值百分比呈负相关(急性加重期及稳定期r值分别为-0.728、-0.793、-0.816、-0.794、-0.605及-0.635、-0.746、-0.721、-0.658、-0.654)。结论氨溴索诱导痰是一种安全、有效的方法,在阐明老年COPD患者气道炎症的发生、发展及病情检测中有指导意义。     

氨溴索诱导痰在老年慢性阻塞性肺疾病患者气道炎症中的应用

目的 观察老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者氨溴索诱导痰的安全性及有效性和急性加重期及稳定期老年COPD患者氨溴索诱导痰中细胞组分和可溶性介质水平变化,探讨其在气道炎症中的作用.方法 将老年COPD急性加重期患者40例随机分为氨溴索组和高渗盐水组,每组20例.高渗盐水组雾化吸入3%高渗盐水4ml,氨溴索组给予3%高渗盐水2ml+氨溴索2ml诱导排痰.对比2组患者不良反应发生率、排痰成功率、痰液中细胞组分及炎性递质含量.测定氨溴索组患者急性加重期、稳定期诱导痰中细胞总数、单核细胞百分比、中性粒细胞百分比、白细胞介素-8(IL-8)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度及其第1秒用力呼气容积(FEV1)、FEV1占预计值百分比.结果 2组不良反应发生率、排痰成功率比较差异均有统计学意义(P＜0.05).氨溴索组患者急性加重期诱导痰液中细胞总数、单核细胞百分比、中性粒细胞百分比、IL-8及TNF-α浓度与稳定期比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);氨溴索组患者痰液中细胞总数、单核细胞及中性粒细胞百分比、IL-8及TNF-α浓度和FEV1占预计值百分比呈负相关(急性加重期及稳定期r值分别为-0.728、-0.793、-0.816、-0.794、-0.605及-0.635、-0.746、-0.721、-0.658、-0.654).结论 氨溴索诱导痰是一种安全、有效的方法,在阐明老年COPD患者气道炎症的发生、发展及病情检测中有指导意义.     

姜黄素通过阻断NF-κB减少IL-1β诱导的内皮脂酶表达

目的观察姜黄素对培养的人血管内皮细胞内皮脂酶表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法不同浓度的姜黄素处理HUVEC-12细胞。RT-PCR检测内皮酯酶(endo-thelial lipase,EL)mRNA的表达;Western blot检测核因子-κB抑制因子-α(inhibitor of nuclear factor-κB-α,IκB-α)蛋白的表达;间接免疫荧光检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白的活化。结果IL-1β处理HUVEC-12细胞可以明显上调EL mRNA的表达,同时降低胞质蛋白IκB-α的表达水平,激活核转录因子NF-κB,增加胞核蛋白NF-κB的水平。姜黄素预处理HUVEC-12细胞可以抑制IL-1β对EL的上调作用,同时逆转IL-1β诱导的IκB-α蛋白降解和NF-κB活化。结论姜黄素可以通过阻断NF-κB活化减少IL-1β诱导的人血管内皮细胞EL的表达。     

支气管哮喘患者诱导痰中白细胞介素-9水平及其与气道炎症的关系

目的探讨支气管哮喘患者诱导痰中白细胞介素-9（IL-9）的水平及其与炎症细胞和肺功能的关系。方法分别选择28例支气管哮喘急性发作患者（哮喘急性发作组）和28例健康对照（健康对照组）,分别检测哮喘急性发作期和治疗后缓解期及健康对照组的肺功能;并用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定诱导痰上清液中IL-9的水平。结果哮喘发作组患者诱导痰中IL-9水平明显高于哮喘缓解期,比较差异有统计学意义（P〈0.05）,哮喘发作组和缓解期组痰中IL-9水平高于健康对照组,比较差异有统计学意义（P〈0.05）。哮喘发作组患者诱导痰中IL-9水平与中性粒细胞数及嗜酸性粒细胞数均呈正相关（r值分别为0.68、0.81,P〈0.05）,与第一秒用力呼气容积占预计值的百分比（FEV%）呈负相关（r=-0.65,P〈0.05）。结论支气管哮喘患者诱导痰中增高的IL-9水平与其气道炎症和气流受限有关。     

谷氨酰胺对COPD外周血NF-κB及HSP70表达的影响

目的探讨谷氨酰胺(Gln)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞(PBMC)中核因子-κB(NF-κB)和热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法选择30例COPD急性加重期(AECOPD)患者为研究对象,设为AECOPD组,将治疗10~20 d后处于稳定期的上述患者设为SCOPD组,分别以Gln干预,收集干预前后各组外周血PBMC,并以健康人为正常对照组。采用Real-time PCR法检测各组PBMC中NF-κB P65 mRNA和HSP70 mRNA的表达水平。结果 AECOPD和SCOPD组NF-κB P65、HSP70的表达高于正常对照组(P<0.05),且急性期增高更为显著;AECOPD组和SCOPD组中,用Gln干预的较未用Gln的PBMC中HSP70表达升高(P<0.05),而NF-κB P65表达下降(P<0.01)。结论 Gln可抑制COPD患者炎症因子NF-κB的活性,升高HSP70的表达。     

慢性阻塞性肺疾病及社区获得性肺炎患者血清及痰液中IL-18治疗前后变化及意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重期及社区获得性肺炎（CAP）患者治疗前后血清及痰液中IL-18的变化及意义。方法采用双抗体夹心ELISA法对45例COPD急性加重期患者治疗前后血清及痰液中IL-18进行检测,同时与15例CAP患者及15例健康人对照。结果COPD急性加重期患者治疗前血清及痰液中IL-18水平明显高于治疗后及健康组,且治疗后水平仍高于健康组。CAP组治疗前血清及痰液中IL-18高于健康组,治疗后水平与健康组比较差异无统计学意义。结论IL-18参与了COPD的发生发展过程,持续升高的IL-18可能是造成COPD患者气道炎症迁延不愈的重要原因。在CAP的急性炎症过程中,短暂升高可能对机体起保护作用。     

马鞭草苷对口腔扁平苔藓免疫反应的抑制作用及机制

目的 探讨马鞭草苷对口腔扁平苔藓（OLP）免疫反应的抑制作用及机制。方法 用脂多糖（LPS）体外刺激角质形成细胞系HaCaT细胞构建OLP炎症模型,CCK-8法检测细胞活力;实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）法检测细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的基因表达变化;蛋白质印迹法检测细胞中核因子-κB p65(NF-κB p65)和p-NF-κB p65蛋白的表达变化。结果 在HaCaT细胞中,LPS刺激抑制细胞活力,并诱导TNF-α、IL-1β和IL-6基因的表达上调,以及NF-κB p65和p-NF-κB p65蛋白的表达上调;20 mg/L马鞭草苷作用24 h可减轻LPS诱导的HaCaT细胞损伤、抑制炎症因子的表达和NF-κB p65信号通路的活化;同时,经G蛋白偶联受体18(GRP18)抑制剂O1918预处理后,马鞭草苷的保护作用显著减弱。结论 马鞭草苷可以通过激活GPR18受体抑制NF-κB信号通路的活化,进而降低炎症因子的表达和减轻OLP口腔黏膜炎症反应。     

白藜芦醇对慢性阻塞性肺疾病大鼠核因子κB的抑制作用

目的 探讨白藜芦醇对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠核因子NF-κB的抑制作用,从而阐明白藜芦醇的抗炎作用机制.方法 用丙烯醛雾化吸入构建COPD大鼠模型.不同浓度的白藜芦醇（5、15、45 mg/kg）预处理COPD大鼠模型,逆转录PCR法检测不同浓度白藜芦醇对COPD大鼠模型肺组织核因子NF-κB的抑制作用.结果 不同浓度的白藜芦醇显著抑制COPD大鼠模型肺组织炎症因子NF-κB的水平.结论 白藜芦醇通过抑制炎症因子NF-κB的水平从而对COPD模型大鼠肺组织发挥抗炎作用.     

绿脓菌素通过PKC-NF-κB信号传导通路诱导人NCI-H292细胞表达IL-8

目的探讨绿脓菌素(PCN)对人气道上皮细胞株(NCI-H292细胞)表达IL-8的诱导作用及通过蛋白激酶C(PKC)和核因子κB(NF-κB)的调控机制。方法采用ELISA法对PCN诱导NCI-H292细胞分泌IL-8进行分析,应用Western blot检测NF-κΒ的蛋白表达,观察PKC和NF-κB阻断剂对IL-8表达的影响。结果PCN可促进NCI-H292细胞IL-8的分泌,而且具有明显的量效关系。PKC阻断剂钙感光蛋白(Cal C)及NF-κB阻断剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)均能抑制IL-8的表达(P<0.01)。PCN能直接诱导并迅速活化NF-κB,60~90 min表达明显。结论PCN可能通过PKC信号通路促进NF-κB的活化,从而启动IL-8的高效表达。     

痰热清注射液对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者诱导痰免疫因子的影响研究

目的研究痰热清注射液对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者诱导痰免疫因子的影响。方法 56例COPD急性加重期患者随机分为痰热清治疗组和对照治疗组,分别于治疗前及治疗第1,3,5天行诱导痰炎性细胞计数、测上清液hs-CRP、IL-8、TNF-α的动态变化含量。并与28例健康人比较。结果 56例COPD急性加重期患者治疗前诱导痰中性粒细胞百分比、hs-CRP、IL-8、TNF-α水平与健康人比较均明显升高,差异均有显著性(P<0.05);痰热清治疗组在治疗后第3天诱导痰PMN%、hs-CRP、IL-8、TNF-α水平较对照治疗组开始显著下降(P<0.05);第5天诱导痰PMN%、hs-CRP、IL-8、TNF-α水平均较对照治疗组显著下降(P<0.05)。结论痰热清注射液在COPD急性加重期患者治疗中,通过抑制过度的炎症反应,可减轻COPD患者气道炎症反而发挥治疗作用。     

氯胺酮对内毒素大鼠体外血单核细胞的作用

目的 研究氯胺酮对内毒素诱导的大鼠外周单个核细胞（PBMC）NF-κB激活和TNF-α产生的影响。方法 PBMC分为对照组、内毒素刺激组（LPS10μg／ml）、氯胺酮治疗组（PLS10μg／ml＋氯胺酮1、10、100、1000、5000μM／ml）。用凝胶电迁移（EMSA）方法测定1h的细胞内NF-κB的水平,用蛋白免疫印迹（Western blot）方法测定1h细胞浆内NF-κB抑制因子IκBa的水平。用酶联免疫吸附实验（ELISA）分别测定1、4、6h时TNF-α的水平。结果 LPS在体外刺激大鼠PBMC后可显著性增加TNF-α的产生和细胞核内NF-κB的激活水平,同时降低胞浆内IκBa的含量。应用氯胺酮后可明显降低PBMC细胞核内NF-κB的激活水平,并抑制TNF-α的产生,但无明显的剂量依赖效应。结论 氯胺酮可抑制LPS所诱导的大鼠PBMC中NF-κB的激活和TNF-α的产生。     

腺苷对肿瘤坏死因子-α诱导乳鼠心肌细胞肥大及核因子-κB的影响

目的探讨腺苷对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fac-tor,TNF-α)诱导心肌细胞肥大及核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法以原代培养乳鼠心肌细胞为模型,应用TNF-α100μg.L-1诱导心肌细胞肥大,观察不同浓度腺苷对心肌肥大的影响。用考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量;RT-PCR检测心肌细胞心钠素(atrial natriuretic peptide,ANP)mRNA的表达;Western blot法检测心肌细胞p65和IκBα的蛋白含量;ELISA法检测细胞外液白介素-1β(IL-1β)的含量。结果腺苷能够有效抑制TNF-α诱导的心肌肥大,表现为蛋白含量减少,ANPmRNA表达降低,并且能抑制TNF-α诱导的NF-κB活化,表现为细胞内p65蛋白表达减少,IκBα蛋白表达增加和细胞外液IL-1β表达降低。结论腺苷对TNF-α诱导的心肌肥大有保护作用,可能与腺苷抑制心肌细胞NF-κB活化有关。     

支气管哮喘患者血清及痰中IL-8、TNF-α和IL-1-β水平变化的探讨

目的探讨和比较IL-8、TNF-α、IL-1-β等细胞因子在支气管哮喘发病机制中的作用。方法哮喘急性发作期患者31例、正常对照组30例的血清和诱导痰标本,于病情缓解后作自身对照。用放免法分别测定血清和痰液中IL-8、TNF-α、IL-1-β水平。结果急性发作期血清及痰液中IL-8水平显著高于稳定期和对照组(P均<0.01);急性发作期TNF-α与缓解期比较无明显变化(P>0.05),但仍高于对照组;缓解期IL-8、TNF-α显著高于对照组(P均<0.05)。血清及痰液中IL-1-β差异无显著性(P均>0.05)。急性发作期血清中IL-8与TNF-α呈显著正相关(r=0.461,P<0.01),痰液中IL-8与TNF-α也呈显著正相关(r=0.572,P<0.01)。血清和痰液中IL-8呈显著正相关(r=0.553,P<0.01)。结论IL-8、TNF-α参与了气道炎症的形成,在哮喘的发病机制中起重要作用。     

大黄素对HT-29细胞IL-8分泌及NF-κB活化的影响

目的研究大黄素对IFN-γ和LPS刺激的人结肠癌细胞株HT-29细胞的IL-8分泌及NF-κB活化的作用,为其临床应用提供实验依据。方法用IFN-γ和LPS刺激的人结肠癌细胞株HT-29细胞来建立体外细胞炎症模型,采用ELISA检测HT-29细胞的IL-8分泌;以免疫荧光技术结合激光共聚焦显微镜观察HT-29细胞NF-κB核转位。结果大黄素在10～80mol.L-1能降低IFN-γ+LPS所引起的HT-29细胞IL-8的大量产生,并且呈明显的剂量依赖关系;大黄素不同浓度组可抑制IFN-γ+LPS刺激造成的NF-κB激活,;有剂量依赖关系。结论大黄素能有效抑制IFN-γ+LPS诱导的IL-8分泌和NF-κB激活。     

胆囊收缩素-8对大鼠急性脑损伤后核因子-κB活性的影响

目的：探讨胆囊收缩素-8（cholecystokinin-8,CCK-8）对实验性大鼠急性脑损伤后核因子-κB（necular factor kappa B,NF-κB）活性的影响。方法取成年 Wistar 大鼠60只,体重280~300 g,随机分为对照组、创伤组与CCK-8组。采用电泳迁移率改变分析方法（electrophoretic mobility shift assay,EMSA）检测核内 NF-κB 的活性,用免疫组化方法观察 NF-κB 在细胞内的表达情况,并用干湿重法测量损伤侧脑组织含水量。结果创伤组各时间点 NF-κB的活性以及脑含水量较假手术组均有明显增高,而 CCK-8组 NF-κB 的活性明显受到抑制,脑水肿也有所减轻。结论急性脑外伤后,脑组织 NF-κB 的表达明显增加,CCK-8可以通过抑制 NF-κB 的活性有效的减轻继发性炎性损害。     

丹参酮ⅡA 磺酸钠联合乌司他丁对重症急性胰腺炎患者炎症及血管内皮功能的影响

目的：观察丹参酮ⅡA磺酸钠联合乌司他丁对重症急性胰腺炎患者外周血单个核细胞NF-κB炎症信号通路和血管内皮功能的影响。方法选取2014年1月至2016年1月收治的重症急性胰腺炎患者96例,随机分为对照组和观察组,每组48例。对照组在常规治疗基础上给予乌司他丁治疗,观察组在对照组基础上加用丹参酮ⅡA磺酸钠注射液,疗程1周,服用2周。采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清白介素6（IL-6）、白介素8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、一氧化氮（NO）、血管性血友病因子（vWF）、血栓素A2（TXA2）、前列环素I2（ PGI2）变化。采用 Real time-PCR和Western-blot检测外周血单个核细胞NF-κB炎症信号通路关键蛋白（ NF-κB、IκB）表达变化。采用半自动血液流变仪检测血液流变学指标（血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数）变化。根据急性生理与慢性健康评分系统（ APACHEⅡ）、急性胰腺炎分级评分系统（ Baltha-zar CT）评估2组预后。结果与治疗前比较,治疗后2组IL-6、IL-8、TNF-α、hs-CRP、NF-κB mRNA和蛋白表达、vWF、TXA2、血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数及APACHEⅡ、Balthazar CT评分均显著降低,IκB mRNA和蛋白表达、NO、PGI2均显著增加,差异有统计学意义（ P ＜0缮．05）,但观察组改善程度更明显,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。结论丹参酮ⅡA磺酸钠联合乌司他丁能够抑制重症急性胰腺炎患者外周血单个核细胞NF-κB炎症信号通路的激活和炎性因子释放,改善血管内皮功能和血液流变学指标,这可能是丹参酮ⅡA磺酸钠的作用机制之一。     

异丙酚对兔缺血-再灌注心肌白介素-8和心肌核转录因子-κB及细胞凋亡的影响

目的观察异丙酚对缺血-再灌注心肌白介素-8（IL-8）和核转录因子-κB（NF-κB）的影响,探讨异丙酚减轻心肌缺血-再灌注损伤的机制。方法雄性新西兰大耳白兔24只,随机分为假手术组（Sham组）、缺血-再灌注组（I-R组）和异丙酚组（P组）,每组8只。实验结束取缺血区心肌组织,免疫组织化学方法检测NF-κB、IL-8的表达;流式细胞术检测心肌细胞凋亡。结果I-R组、P组NF-κB、IL-8表达及凋亡细胞数均高于Sham组（P〈0.05）,P组各指标较I-R组降低（P〈0.05）。结论抑制缺血-再灌注心肌NF-κB激活,进而降低IL-8表达,是异丙酚减少缺血-再灌注心肌细胞凋亡的机制之一。