局部应用GDNF对脊髓前角运动神经元的保护作用研究

目的:研究周围神经损伤后经蛛网膜下腔置管局部应用外源性胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对脊髓前角运动神经元的保护作用.方法:成年SD大鼠随机分为2组,GDNF组和生理盐水(NS)组各24只.切断大鼠坐骨神经致相应眷髓前角运动神经元损伤,于L5.6椎间隙行蛛网膜下腔置管,GDNF组注入外源性GDNF 6μl(10μg/ml),NS组同法注6μl生理盐水.不同时间处死动物并取材,对L4-L6节段脊髓标本冰冻切片,行HE染色,尼氏体染色、胆碱酯酶染色.结果:GDNF组脊髓前角运动神经元的存活率、胆碱酯酶阳性颗粒面积均比NS组有明显提高,两组差异有统计学意义(P<0.05).结论:周围神经损伤后通过蛛网膜下腔注入外源性GDNF对相应的脊髓运动神经元有保护作用.     

GDNF对脊髓前角运动神经元的保护作用

目的：证实胶质源性神经营养因子（glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对脊髓前角运动神经元有保护作用。方法：切断SD大鼠一侧坐骨神经建立脊髓前角运动神经元损伤模型。借助单盲端硅胶管系统在损伤神经局部给予GDNF，术后不同时间分别取L5脊髓切片，利用酶组织化学染色方法显示胆碱酯酶（CHE）和酸性磷酸酶（ACP）活性并进行图像分析。结果：坐骨神经切断可导致腰段脊髓前角运动神经元明显损害，表现为CHE活性降低。ACP活性升高；应用GDNF可显著改善上述酶学变化。结论：GDNF对损伤的脊髓前角运动神经元有保护作用。     

胶质源性神经营养因子对脊髓损伤后功能及前角运动神经元酶组织化学改变的

目的 探讨胶质细胞源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）对损伤脊髓运动功能及前角运动神经元酶组织化学改变的影响。方法 改良Ａｌｌｅｎ撞击致Ｔ１３脊髓不完全损伤。蛛网膜下腔分别给予生理盐水和ＧＤＮＦ,不同时间分别：（１）测定大鼠后肢神经功能;（２）利用酶组织化学染色方法显示脊髓侧前角运动神经元中胆碱酯酶（ＣｈＥ）和酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性并通过计算机图像分析系统将酶活性量化、比较。结果 （１）神经功能随时间延长而逐渐恢复,ＧＤＮＦ有助于功能恢复,但３周时均未达正常标准;（２）ＣｈＥ和ＡＣＰ活性随时间延长而向正常趋近,ＧＤＮＦ显著加强了这一趋势,（３）随着ＣｈＥ水平上升和ＡＣＰ水平降低。大鼠后肢运动功能逐渐恢复,两者呈现较强的相关性。结论 （１）前角运动神经元酶学改变与神经功能恢复密切相关;（２）ＧＤＮＦ加强前角运动神经元酶     

阳离子脂质体介导GDNF体内转基因对脊髓损伤后运动神经元的保护作用

目的 :观察阳离子脂质体介导的胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)体内转基因对大鼠脊髓损伤 (SCI)后伤区脊髓前角运动神经元的影响。方法 :采用改良Nystr m法制备大鼠胸段脊髓后路压迫损伤模型 ,将阳离子脂质体DC Chol和重组质粒 pEGFP GDNFcDNA混合后直接注入大鼠损伤脊髓。利用RT PCR技术和荧光显微镜检测GDNF体内转基因的表达。应用尼氏染色、酶组织化学染色方法观察前角运动神经元死亡的数目和胆碱酯酶(CHE)及酸性磷酸酶 (ACP)的变化。结果 :1周后在注射局部GDNFmRNA和GDNF有较高表达。GDNF体内转基因早期 (1～ 4周 )SCI区前角运动神经元死亡的数目减少 ,CHE和ACP变化的幅度降低。结论 :GDNF体内转基因能减少脊髓不完全性损伤后引起的神经元坏死 ,阳离子脂质体介导GDNF体内转基因治疗创伤性SCI的方法是可行的。     

胶质细胞源性神经营养因子对运动神经元发育及运动神经元性疾病的作用

目的 追溯近年国内外有关胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotropic factor，GDNF)与运动神经元发育及疾病研究的进展。方法 广泛查阅近期有关GDNF与运动神经元关系的文献，综述GDNF的分子结构、作用方式及治疗时给药方式。结果 GDNF对运动神经元发育及运动神经元疾病有广泛的作用，对脊髓运动神经元的发育起一定调控作用，可以挽救出现损伤的运动神经元。结论 GDNF在运动神经元疾病的治疗上，具有潜在的临床价值和不可估量的前途。     

胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后神经元的保护作用

神经营养因子 (ＮＴＦｓ)在神经再生、突触形成以及神经损伤修复过程中起着重要的作用[1] 。胶质细胞源性神经营养因子 (ＧＤＮＦ)是目前发现的活性最强的运动神经元神经营养因子[2 ] 。本实验旨在观察外源性ＧＤＮＦ对大鼠脊髓急性压迫损伤后神经元的保护作用。一、材料与方法1.重组人ＧＤＮＦ、神经生长因子(ＮＧＦ) :第一军医大学神经生物教研室提供 ,纯度大于质量分数 90 % ,浓度为 1ｇ/Ｌ。2 .实验动物及分组 :体重 2 5 0～ 3 0 0ｇ的雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ大鼠 45只 ,随机分为 3组 :生理盐水 (ＳＡＬ)组、ＧＤＮＦ组和ＮＧ…     

幼年大鼠神经根移植修复对GDNF及其受体影响的研究

目的 研究神经移植术修复幼年大鼠臂丛神经损伤后对神经元胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)及其受体GFRα1的影响.方法 将出生18 d SD大鼠12只等分为2组:颈5切断组,将右侧颈5神经根切除0.3 cm;颈5修复组,颈5神经根切除后取腓肠神经移植修复.于术后4周取颈5脊髓和背根神经节,行免疫组织化学染色检测脊髓前角和背根神经节及免疫阳性颗粒的数量.并比较两组间的差异.结果 颈5修复组运动和感觉神经元GDNF免疫阳性颗粒数目分别为(786.3±176.84)和(2997.0±357.99)个,颈5切断组运动和感觉神经元阳性颗粒数目分别为(335.0±49.50)和(1632.0±305.55)个,两组差异有统计学意义(P<0.01 ).颈5修复组运动和感觉神经元GFRα1免疫阳性颗粒数目分别(787.5±178.55)和(3111.0±445.72)个,颈5切断组运动和感觉神经元阳性颗粒数目分别为(397.3±41.78)和(1588.3±229.00)个,两组差异有统计学意义(P<0.01).结论 神经移植术修复幼年大鼠臂丛神经损伤后对近端神经元的保护作用与GDNF及其受体GFRα1增多有关.     

雄激素对大鼠腹叶前列腺GDNF mRNA表达的影响

目的 :探讨雄激素对大鼠腹叶前列腺中胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)mRNA表达的影响。　方法 :2 4只SD大鼠分为 3组 ,其中A组 (n =8)为假手术对照组 ,B组 (n =8)为去势组 ,C组 (n =8)为雄激素替代组 (去势后肌注十一酸睾酮 5 0mg/kg) ;术后 3d处死 ,通过半定量RT PCR检测GDNFmRNA在去势前后和雄激素替代组大鼠腹叶前列腺中的表达变化。　结果 :去势后大鼠前列腺的体积萎缩变小 ;雄激素替代组出现前列腺增生变大 ;对照组正常的大鼠前列腺有GDNFmRNA表达 ,去势组GDNFmRNA表达量减少 ,雄激素替代组GDNFmRNA表达量增加。与正常对照组比较 ,去势组的GDNFmRNA表达量显著减少 (P <0 .0 5 ) ,雄激素替代组的GDNFmRNA表达量显著增加(P <0 .0 5 )。　结论 :雄激素可增加GDNFmRNA表达 ,促进前列腺细胞生长。     

胶质细胞源性神经营养因子对周围神经再生的作用

目的研究胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对周围神经再生的作用.方法硅管套接大鼠坐骨神经,术中一次性将GDNF、生理盐水(nor-mal saline solution,SAL)分别加入硅管中.术后4周,应用溃变神经纤维染色法、辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)逆行追踪技术观察GDNF对轴突再生的影响.结果与SAL组相比,GDNF组渍变神经纤维面积明显减少,溃变神经纤维面积百分率由17.3%降低到1.9%(P＜0.01);GDNF组脊髓标记胞体显著增加,HRP标记胞体数的百分率由43.5%上升到68.3%(P＜0.01).结论外源性GDNF能明显促进周围神经再生.     

胶质细胞源性神经营养因子与神经病理性疼痛

胶质细胞源性神经营养因子（gtial cell line—derived neurotrophic factor．GDNF）是神经营养因子家族成员之一。GDNF对中枢和周围神经系统多种抻经元的生长,发育、分化,维持和损伤修复起重要作用。另外,GDNF还参与中枢和外周水平神经病理性疼痛的形成和发展。该文主要就GDNF和神经病理性疼痛的研究作一简要综述。     

大鼠脊髓损伤后坐骨神经GDNFmRNA表达变化及意义

目的：探讨大鼠脊髓损伤后GDNFmRNA在坐骨神经的表达变化及其意义。方法：Allen's方法致大鼠T13段脊髓不完全损伤后，以β-Actin为内参照物，应用半定量RT-PCR方法，观察大鼠坐骨神经在脊髓损伤前、后不同时间GDFNmRNA表达变化。结果：脊髓损伤前GDNFmRNA在大鼠坐骨神经仅有微量表达，脊髓损伤后24h表达增加4倍，72h增加15倍，7d增加3倍，10d仍高于正常水平。结论：脊髓损伤后坐骨神经高表达GDNFmRNA，是神经元通过“胞体--轴突--靶器官”途径自我保护的一种反应形式，GDNF治疗脊髓损伤时应早期用药以获得最佳效果。     

大鼠脊髓损伤后坐骨神经GDNFmRNA表达变化及意义

目的探讨大鼠脊髓损伤后坐骨神经表达GDNFmRNA的变化及其意义.方法 Allen's方法致伤大鼠T13段脊髓,造成不完全性脊髓损伤,截取坐骨神经,以β-Actin(β-肌动蛋白)为内参照物,应用半定量RT-PCR方法,观察大鼠坐骨神经在脊髓损伤前、后不同时间GDNFmRNA表达变化.结果脊髓损伤前GDNFmRNA在大鼠坐骨神经仅有微量表达,脊髓损伤后24小时表达增加4倍,72小时增加15倍,7天增加3倍,10天仍高于正常水平.结论脊髓损伤后坐骨神经高表达GDNF,是神经元通过"胞体-轴突-靶器官"途径自我保护的一种反应形式,GDNF治疗脊髓损伤时应早期用药.     

胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后运动功能的影响

目的:研究胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）对大鼠脊髓损伤后后肢运动功能恢复的影响。方法:采用改良Nystr(?)m法后路压迫大鼠胸段脊髓造成损伤模型,经蛛网膜下腔置管局部连续给予NGF （10μg/d）或GDNF（10μg/d）1周,对照组给予生理盐水。伤后4周3组分别观测:①伤段脊髓残存组织面积;②采用斜板试验和运动功能评分观察大鼠后肢运动功能恢复情况。结果:大鼠脊髓损伤后4～14d,GDNF治疗组后肢运动功能评分明显高于NGF组和生理盐水对照组（P<0.05）。伤后28d GDNF组伤段残存脊髓组织面积大于对照组和NGF组（P<0.01）。结论:外源性GDNF能减少脊髓损伤后伤区的坏死、萎缩并促进大鼠后肢运动功能的早期恢复。     

NGF对大鼠坐骨神经损伤后腰髓MBP含量及其前角神经元的影响

目的 :探讨NGF对大鼠坐骨神经完全离断后腰髓前角神经元的作用。方法 :30只大鼠分为 3组 ,Ⅰ组为生理盐水对照组 (硅胶管内注入 2 0ul生理盐水 ) ;Ⅱ组为NGF硅胶管给药 ,每只大鼠 10 0ng( 5ng/ul× 2 0ul) ;Ⅲ组为NGF硅胶管内给药后 +每日肌注NGF5 0 0ng/kg。切除单侧坐骨神经 10mm ,并用硅胶管桥接坐骨神经断端。术后 1、2、3、4个月分别进行霍乱毒素亚单位B结合的辣根过氧化酶 (CB -HRP)作为示踪剂 ,同时取标本测定脊髓髓鞘碱性蛋白 (MBP)含量。结果 :CB -HRP示踪Ⅱ和Ⅲ组优于对照组 ,前角运动神经元增多 ,突触连结成网 ;MBP含量Ⅱ组和Ⅲ组明显高于对照组 ,MBP含量减少不明显。结论 :外周神经损伤后 ,损伤局部应用NGF能减少其前角运动神经元死亡及脱髓鞘改变。     

中药神康胶囊对失神经骨骼肌及运动终板作用的实验研究

目的:观察补阳还五汤加味的神康胶囊对失神经支配后的骨骼肌及运动终板退变的影响.方法:坐骨神经切断法制作大鼠实验模型,造模后按给药量大小将实验组分为A组、B组,并设生理盐水对照组.术后4、8、12周末取腓肠肌作乙酰胆碱脂酶(AchE)染色观察运动终板的染色及形态;HE染色观察肌纤维直径及横截面积.结果:4～8周末,实验组运动终板染色及形态的退变均迟于对照组,骨骼肌截面积及直径明显大于对照组(P＜0.05);12周末,所观察和测定的图像数据与对照组差异不明显,(P＞0.05);4、8、12周末三个时段A、B组无显著性差异.结论:在一定时限内,中药神康胶囊对外周神经赖以发挥作用的终末效应器一骨骼肌及运动终板的退变,可产生一定的保护和损伤-延缓作用.     

神经干细胞移植量对PST大鼠神经病理性疼痛的影响

目的 观察不同数量神经干细胞(NSCs)鞘内注射对坐骨神经半切断(PST)大鼠神经病理性疼痛及脊髓背角、背根神经节(DRG)胶质源性神经营养因子(GDNF)表达的影响.方法 84只成年雄性SD大鼠随机均分为七组:假手术组(Ⅰ组)、PST组(Ⅱ组)、PST+NSCs 1×10<'3>组(Ⅲ组)、PST+NSCs 1×10<'4>组(Ⅳ组)、PST+NSCs 1×10<'5>组(Ⅴ组)、PST+NSCs 1×10<'6>组(Ⅵ组)、PST+NSCs 1×10<'7>组(Ⅶ组).NSCs于术后3 d鞘内注射.记录术前1 d、术后1、3、7、14、21 d机械痛及热痛阈;术后7、21 d免疫组织化学与RT-PCR检测同侧脊髓背角及DRG GDNF表达.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ～Ⅶ组术后1 d痛阈下降,术后7、14 d最低(P<0.05);与Ⅱ组比较,术后7 d Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组随着NSCs量的增加,痛阈逐渐升高,脊髓背角及DRG GDNF表达逐渐上调(P<0.05);术后21d,Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组痛阈均与术前差异无统计学意义,但其GDNF表达Ⅴ组最高(P<0.05).结论 鞘内注射1×10<'5>NSCs能最有效缓解PST大鼠神经病理性疼痛.     

电刺激对鼠坐骨神经横断后脊髓运动神经元bcl—2,c—jun及bax表达的影响

目的：观察直流电场对鼠坐骨神经横断后脊髓运动神经元bcl-2,c-jun及bax表达的作用。方法：鼠坐骨神经横断后,分批于手术后1、4、7、14、28d取材,应用免疫组化技术,光镜下观察脊髓运动神经元jcl-2,c-jun和bax的表达。结果：术后4、7、14d,实验组脊髓运动神经元bcl-2阳性数高于对照组,术后4、7、14、28d,实验组脊髓运动神经bax阳性数低于对照组,术后7、14、28d,实验组脊髓运动神经元c-jun阳性数低于对照组。结论：直流电场对鼠坐骨神经横断后脊髓运动神经元bcl-2,c-jun和bax的表达具有调节作用。