白细胞介素 - 1β对体外培养及在体脊神经节感觉神经元的作用

目的研究白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）对体外培养大鼠背根神经节感觉神经元的作用,及其对周围神经损伤后脊神经节感觉神经元的保护作用。方法(1)取乳鼠背根神经节行体外培养,培养基中分别加入IL-1β、PBS,培养48h后于相差显微镜下观察神经元的生长情况,MTT法测定神经元的活性。(2)Wistar大鼠20只,按手术先后顺序随机分成2组。切断右侧坐骨神经后用硅胶管套接神经的近端,管内分别注入1ng/ml的IL-1β(实验组10只大鼠)和PBS液15μl(对照组10只大鼠)。术后2周取材,用图像分析系统测定神经元存活数目、胞体的直径和面积。结果(1)两组间MTT值的差异,有非常显著性意义（t=9.403,P＜0.01)。(2)两组损伤侧脊神经节感觉神经元存活率的差异有非常显著性意义（t=3.932,P＜0.01)。(3)对照组损伤侧与正常侧神经元胞体的直径和面积,两者差异有非常显著性意义(t=9.188、8.379,P＜0.01);而实验组损伤侧与正常侧相比,两者差异无显著性意义(t=0.832、0.598,P＞0.05)。结论IL-1β可明显促进体外培养的背根神经节感觉神经元的存活。外源性IL-1β对周围神经损伤后脊神经节内感觉神经元具有保护作用。     

神经病理性痛大鼠背根神经节神经元高电压激活钙电流的变化

目的：观察神经病理性痛模型大鼠损伤侧损伤和邻近未损伤背根神经节神经元高电压激活钙电流的变化．以探讨两组神经元钙电流在大鼠神经病理性痛发病过程中的潜在作用。方法：采用SD雄性大鼠,以左侧L5脊神经结扎离断术建立神经病理性痛模型。酶消化法急性分离模型组损伤侧L5（SNL-L5组）、L4（SNL-L4组）以及正常对照组L5,L4背根神经节神经元（C组）,采用全细胞膜片钳技术记录神经元高电压激活钙电流。结果：SNL—L5组与SNL-L4组峰值钙流密度均较C组降低（P〈0．05）。且SNL-L5组的峰值钙电流密度亦低于SNL-L4组（P〈0．05）。与C组和SNL-L4组相比．SNL-L5组钙电流半数激活电压向超级化方向移动（P〈0．05）．其N型钙电流比例上升（P〈0．05）。三组钙电流稳态失活曲线均无显著性差异（P〉0．05）。结论：神经病理性痛模型大鼠损伤背根神经节神经元高电压激活钙电流密度降低．电流激活曲线向超级化方向移动。N型Ca^2＋电流比例升高．提示损伤背根神经节神经元高电压激活钙电流可能在诱发神经病理性痛的过程中起主导作用。     

神经再生液中相对分子质量为6.16000～10.23000的蛋白粗制品、NGF和CNTF对背根神经节细胞生长的影响

目的研究神经再生条件液中相对分子质量为６．１６０００～１０．２３０００的蛋白粗制品（ｐｒｏ－ｔｅｉｎｉｎｎｅｒｖｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｆｌｕｉｄｓ,ＮＲＣＦｐ）、睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ,ＣＮＴＦ）和神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＮＧＦ）对背根神经节感觉神经元细胞有无促进其存活和生长的作用。方法采用背根神经节体外植块培养,分散培养及ＭＴＴ微量比色法,比较在培养器,培养板孔中加入神经再生条件中相对分子质量为６．１６０００～１０．２３０００的蛋白粗制品、ＣＮＴＦ及ＮＧＦ三个实验组,对体外培养的背根神经节神经元细胞生长的影响。结果三实验组中背根神经节神经元细胞的轴突生长均旺盛,它们的四唑盐终产物与对照组（加ＤＮＥＮ培养液）相比,其差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）,但各实验组之间无明显差异。结论神经再生条件液中相对分子质量为６．１６０００～１０．２３０００的蛋白粗制品、ＣＮＴＦ及ＮＧＦ对背根神经节神经元细胞体有促进其存活和生长的作用。     

细胞因子IL-1β和TNF-α mRNA在人精子表达的变化及意义

目的：了解IL－1β和TNFα在人精子表达的变化及意义。方法应用逆转录聚合酶链式反应（RT－PCR）检测13例正常生育者、30例不育者及30例慢性及30例慢性前列腺炎患者精子IL－1β和TNFα mRNA表达。结果不育精子中IL－1β和TNFα mRNA表达增显著低于正常生育者（P＝0．018和P＝0．046）。慢性前列腺炎患者精子中TNFα mRNA的表达显著低于正常生育者（P＝0．018）。而IL－1βmRNA表达与正常生育者相比差别无显著性意义（P＝0．42）。IL－1β和TNFα mRNA－NA在不育者与慢性前列腺炎患者精子中的表达差别无显著性意义（P＝0．49和P＝0．62）。结论某些因素可能干扰不育症患者精子IL－1βTNFα合成,导致精液质量下降及不育。生殖道炎症也可能影响精子TNFα表达,其机制和意义有待进一步研究证实。     

神经移植术修复幼年大鼠臂丛神经损伤后对神经元保护作用的实验研究

目的研究神经移植术修复幼年大鼠臂丛神经损伤后对神经元的保护作用。方法将出生18 d SD大鼠24只等分为2组。神经根切断组：将右侧颈，神经根切除0．3cm。神经根修复组：颈5神经根部分切除后取腓肠神经移植修复。采用True Blue注射法逆行标记神经元。于术后4周取颈，脊髓和背根神经节，应用TUN-EL法检测运动及感觉神经元中细胞凋亡情况，并观察两组神经元数量的变化。结果与神经根切断组相比，神经根修复组神经元数量显著增加（P〈0．01），凋亡细胞数明显减少（P〈0．01）。结论神经移植术修复幼年大鼠臂丛神经损伤后对近端运动和感觉神经元有保护作用。     

巨噬细胞对体外培养的雪旺细胞及背根神经节感觉神经元作用的实验研究

目的 通过巨噬细胞、雪旺细胞及感觉神经元的联合培养，了解雪旺细胞的活性及感觉神经元的存活。方法 （1）取乳鼠坐骨神经进行雪旺细胞的分散培养，24h后在腹腔中取巨噬细胞并用分隔培养皿进行联合培养。（2）联合培养后24h、48h、72h，采用RT-PCR法，半定量分析雪旺细胞NGFmRNA含量的变化。（3）将巨噬细胞和雪旺细胞的联合培养基加入至乳鼠背根神经节感觉神经感觉神经元体外培养中，培养48h后观察神经元的生长情况，用MTT法测定神经元的活性。结果 单纯雪旺细胞培养中存在NGFmRNA但表达量较低，加入巨噬细胞后NGFmRNA表达量显著升高。联合培养条件培养基可明显促进体外培养的体外培养中感觉神经感觉神经元的存活。结论巨噬细胞可改变雪旺细胞的活性，联合培养条件培养基对感觉神经感觉神经元有明显的营养作用。     

补阳还五汤促进周围神经损伤后神经元存活的实验研究

目的 研究补阳还五汤对周围神经损伤后脊髓前角运动神经元和脊神经节感觉神经元存活的影响。方法 成年SD大鼠20只，在右侧梨状肌下缘0.5cm处切断坐骨神经，随机分为两组，对照组以生理盐水灌胃，实验组以补阳还五汤灌胃，4W后观察相应节段运动神经元和感觉神经元存活率、神经元胞体直径和面积。结果 4W后相应节段脊髓前角运动神经元存活率：对照组为59．87％，实验组为69．22％（P＜0．01）；脊神经节感觉神经元存活率：对照组为70．99％，实验组为79．13％（P＜0．01）。对照组运动神经元和感觉神经元胞体直径、面积明显小于实验组（P＜0．01）。结论 补阳还五汤能提高周围神经损伤后脊髓前角运动神经元和脊神经节感觉神经元存活率，减轻神经元胞体萎缩程度，有利于周围神经损伤后神经功能的恢复。     

失血性休克大鼠血浆及腹腔巨噬细胞释放细胞因子改变

目的：研究大鼠失血性休克前后血浆及腹腔巨噬细胞释放细胞因子的变化。方法：将30只大鼠分为失血性休克组（20只）和对照组（10只）,观察大鼠休克前后血浆和腹腔巨噬细胞释放肿瘤坏死因子（TNF）－α,白细胞介素（IL）－1β,IL－6和IL－8改变。结果：失血性休克90min后大鼠腹腔巨噬细胞释放TNF－α,IL－1β,IL－6和IL－8显著减少（P＜0．01）,而血浆中这些细胞因子水平明显升高（P＜0．01）。结论：失血性休克对大鼠细胞免疫功能有抑制作用。     

银杏叶提取物对坐骨神经损伤后感觉神经元超微结构的影响

目的　研究银杏叶提取物对大鼠坐骨神经损伤后相应脊神经节感觉神经元超微结构的影响。方法　将SD大鼠 36只随机分为银杏叶提取物组和生理盐水组。制作左侧坐骨神经部分切除及反折结扎模型。术后两组分别经腹腔注射银杏叶提取物 (1 0 0mg·kg 1 ·d 1 )和同体积的生理盐水。 2、4、6周取材 ,电镜观察L4 及L5脊神经节感觉神经元超微结构形态变化 ,体视学方法计算并比较两组感觉神经元线粒体、内质网及溶酶体体积密度变化。取L6 神经节 ,光镜下计数并计算神经节感觉神经元存活率。结果　实验组超微结构形态变化明显轻于对照组。术后 2、4、6周神经元线粒体、内质网及溶酶体体积密度值均小于对照组 ,其差异有显著性 (P <0 .0 5)。实验组 2、4及 6周感觉神经元存活率为 85 .58%、82 .45 %和 79.1 1 % ,存活率大于对照组 (P <0 .0 5)。结论　银杏叶提取物 ,对坐骨神经损伤后感觉神经元有一定保护作用     

白细胞介素1受体拮抗剂对人肾成纤维细胞增殖及产生纤连蛋白的影响

目的：研究白细胞介素1受体拮抗剂（IL－1β诱导人肾成纤维细胞（KFB）增殖及产生纤连蛋白（FN）的影响。方法：体外培养KFB,经IL－1β刺激后,分别采用^3H-TdR掺入法和ELISA法测定KFB的增殖及其FN的分泌。结果IL－1β（25－100ng/ml)可促进KFB增殖（P＜05）及分泌FN（P＜0．05）,IL－Ira(125-1000ng/ml)及IL－1ra(250-1000ng/ml)可以分别抑制IL－1β（50ng/ml)引起的KFB增殖（P＜0．05）及FN分泌（P＜0．05）。结论：IL-1β在肾间质纤维化中起了一定的致病作用,IL-lra sk c beggon IL-β的作用,从而为IL－l防治肾间质纤维化提供一定的实验依据。     

大鼠坐骨神经损伤后感觉神经元死亡数量的研究

目的 研究周围神经损伤后,脊神经节感觉神经元的死亡数量。方法 先计算正常SD大鼠两侧的脊神经节感觉神经元胞体数量是否对称,再切断并原位吻合右侧大鼠坐骨神经,左侧不作任何处理,于术后不同时间取L4-L6脊神经节作苏木素-伊红(HE)染色,计算脊神经节感觉神经元胞体数量的变化。结果 正常SD大鼠两侧的脊神经节感觉神经元胞体数量呈对称分布;右侧坐骨神经损伤后,其脊神经节感觉神经元胞体数量较左侧减少:30 d后,脊神经节细胞的死亡比率达30％,神经元死亡高峰在神经损伤后的第2周内。结论大鼠坐骨神经损伤后,脊神经节感觉神经元的胞体有死亡,其死亡具有一定的特征。     

前列腺素E2对重症胰腺炎大鼠血清肿瘤坏死因子及白介素—6的调控作用

目的：探讨前列腺素E2（PGE2）对大鼠重症胰腺炎（SAP）血清白介素－6（IL－6）,肿瘤坏死因子（TNF－a)的含量及存活率的影响。方法：SD大鼠29只随机分三组,PGE2组（N＝9）,SAP组（N＝11）和生理盐水组（NS,N＝9）。大鼠的SAP模型用5％牛磺去氧胆酸钠诱导成功后30分钟经门静脉注入PGE2,采用ELISA检测血清IL－6与TNF-a含量。动态观察同组不同时间,不同相同时间的IL-6TNF－a变化。并与未经PGE2保护（SAP组）及注入生理盐水（NS组）相比较。结果：30分钟时,PGE2组与SAP组的IL－6,TNF－a值相比较差异无显著性（P＝2．79,P＝0．907）,而与NS组比较有显著差异（P≤0．001,P＝0．014,P＜0．0001）。0．5－2h时,PGE2组的IL－6与TNF－a值明显下降,而SAP组上述二值却持续上升（P＜0．0001）。2h-6h时,PGE2组上述二值快速下降,但SAP组此二值下降缓慢（P＜0．0001）,差异显著,PGE2组在同组不同时间的IL－6和TNF-a值比较,0．5－2h与2－6h时段均呈明显下降态势（P＜0．0001）,差异有显著性。存活率比较：0－12h时PGE2保护组9只（占100％）全部存活,SAP组死亡4只（4／11,占36．4％）。0－24h时,SAP组全部死亡（11／1,占100％）,PGE2组存活4只（4／9,占44．5％）,与SAP组比较差异显著（P＝0＝026）。结论：IL－6与TNF－a在大鼠SAP全身性反应过程中起重要递质作用。PGE2能降低SAP大鼠血清IL－6与TNF－a的含量,降低病死率。     

血液供应对移植大鼠背根神经节内神经元成活的影响

目的 探讨血液供应对成年大鼠背根神经节内感觉神经元的生长与成活的影响.方法 SD大鼠分成A、B、C三组.分别摘取大鼠的一侧L4背根神经节(dorsal root ganglions,DRGs).A组:将DRGs放置于下腹部皮下脂肪内.B组:将DRGs放置于股四头肌肌肉内.C组:剥离神经节外膜后将DRGs放置于股四头肌肌肉内.于移植后3 d,7 d、14 d、21 d和28 d将背根神经节取出,进行Nissl染色和HE染色,观察不同移植环境下背根神经节内感觉神经元细胞的成活情况.同时计数三种环境下背根神经节中感觉神经元的细胞数目,并进行统计学分析.结果 A组背根神经节中成活的感觉神经元细胞数目比B、C两组少,成纤维细胞的增生比B、c两组明显.结论 丰富的供血可有效阻止神经元的死亡,减少成纤维细胞的增生,从而最大限度地增加在移植环境中成活的神经元胞体的数量.     

神农33对急性肺损伤大鼠白介素—1β因素表达的影响

目的：观察白介素－1β（IL－1β）在内毒素（LPS）所致急性肺损伤（ALI）发病过程中的作用及神农33（SN33）注射液对ALI大鼠的保护作用。方法：Wistar大鼠尾静脉注射LPS,建立ALI模型。分别采用ELISA和Northern Blotting方法检测不同时相血清中IL－1β含量及肺组织IL－1βmRNA水平的变化;同时以地塞米松为对照,观察SN33对IL－1β基因表达的影响。光镜、电镜观察大鼠肺病理形态学变化。结果：LPS诱发大鼠ALI过程中血清IL－1β水平显著高于正常对照组（P＜0．01）,峰值为LPS攻击后2h;肺组织IL－1βmRNA表达明显增高,峰值为LPS攻击后1h;以SN33保护的大鼠,IL－1β和mRNA表达均明显低于相应时相LPS攻击组;且肺损伤程度减轻,结论：IL－1β在LPS诱导的ALI过程中起着重要作用;SN33注射液可以抑制IL－1β的释放和表达,对肺脏有一定的保护作用。     

血小板源伤口愈合因子促糖尿病大鼠伤口组织胶原合成机制的研究

目的 探讨外源性血小板源伤口愈合因子（PDWHF）促糖尿病大鼠伤口合成胶原与内源性转化生长因子-β（TGF-β1）基因表达的关系。方法 33只雄性SD大鼠,分为正常组（A组n＝9）、糖尿组（n＝24）。四氧嘧啶诱导糖尿病组大鼠血糖值大于1．8g/L1、2天后,在每组大鼠背部造成两块直径为1．8 cm的全层皮肤伤口。术后当天及以后连续6天,每天一次,糖尿病组大鼠一侧伤口局部应用PDWHF（100μg/伤口）作为治疗组（B组）,另一侧伤口作为对照组（C组）。斑点杂交法测定伤后不同天数伤口组织中TGF－β1、Ⅰ型（α1）前胶原mRNA水平量。结果 伤后5、7天,B组伤口组织TGF－β1mRNA水平量是C组的4倍和5．6倍,经统计学处理有非常显著性差异（P＜0．01）,但低于A组（P＜0．05）;伤后10天,三组间TGF-β1mRNA水平量无明显差异。伤后5、7天及10天,B组I型（α1）前胶原mRNA水平量明显高于C组,分别为2．1、1．8和2．3倍有非常显著性差异（P＜0．01）;但伤后5、7天仍明显低于A组（P＜0．05）,伤后10天,两组间差异消失。结论 PDWHF促进糖尿病大鼠伤口内源性TGF－β1基因表达是其增强I型（α1）前胶原合成的重要原因。     

坐骨神经压迫性损伤大鼠背根神经节SNS/PN3钠通道表达的变化

目的 通过观察背根神经节（DRG）电压门控钠通道SNS／PN3在大鼠坐骨神经压迫性损伤（CCI）的变化，以探讨慢性神经痛的发生机制。方法 对大鼠建立慢性神经痛模型，14d后，将神经痛模型大鼠18只，均分为6组，每组3只，组内同侧（CCI）与对侧自体对照（Control)，在深麻醉下快速断头，分别取L4和L5 DRG，用Trizol试剂提取DRG总RNA。以逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）半定量分析CCI后大鼠背根神经节钠通道SNS／PN3转录物的变化，以及全细胞膜片钳技术记录CCI对急性分离大鼠背根神经节TTX－R钠电流的影响。结果 CCI术后14d，感觉神经元特异性的TTX－R钠通道转录物SNS／PN3下调，与对照组相比，下降了大约60％，TTX－R钠电流密度明显减弱，但不影响其激活与稳态失活。结论 钠通道SNS／PN3与慢性神经痛后初级感觉神经元过度兴奋有关。     

前列腺素E2对急性坏死性胰腺炎大鼠IL—10，TNF—α及IL—β的调控和对肺组织损伤的影响

目的：探讨前列腺素E2（PGE2）对大鼠急性坏死性胰腺炎（ANP）中血清白介素－10（IL－10），肿瘤坏死因子（TNF－α）以及白介素－1β（IL－1β）的含量及肺组织损伤的影响，方法：将SD大鼠91只随机分4组，假手术对照组（n=7)，ANP组（n=28),PGE2前处理组（n=28),BGE2后处理组（n=28)；观察同组不同时间，不同组同时间的IL－1β，TNF－α和IL－10的动态变化，并观察各组肺组织的病理切片。结果：各指标在1h,3h,6h和12hPGE2前处理组和PGE2后处理组与ANP组相比较差异有显著性（P＜0．01），在PGE2前处理组，TNF－α，IL－1β下降更加明显，IL－10升高两组都很明显，而且有PGE2保护的两组，其肺组织损伤出现较迟，较轻，结论：IL－1β和TNF－α在大鼠ANP的全身性反应过程中起重要的递质作用，IL－10能抵抗它们的作用，PGE2能降低ANP大鼠血清中IL－1β，TNF－α含量，提高IL－10含量，减轻肺组织损伤。     

白细胞介素13对肾小球系膜细胞增殖及白细胞介素1β表达的影响

目的：探讨白细胞介素13（IL－13）对体外培养的大鼠系膜细胞的增殖及其产生白细胞介素1β（IL-1β）的影响。方法：用四甲基偶氮唑（MTT）法测定系膜细胞增殖,用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）及酶联免疫吸附（ELISA）法测定系膜细胞IL－1β mRNA表达IL-1β蛋白水平。结果IL－13在1．0,10,100ng/ml浓度范围呈剂量依赖性地抑制系膜细胞的增殖。含5％小牛血清（FCS）的RPMI 1640培养状态下的系膜细胞检测不出IL－1β,IL－13在抑制系膜细胞的增殖的相应浓度坷显著地抑制LPS诱导的系膜细胞IL－1β mRNAg表达及L-1β分必,IL－13在10ng/ml浓度时即可几乎完全抑制LPS诱导的系膜细胞IL－1β mRNA表达,结论：IL－13对体外培养的系膜细胞增殖及炎症效应具有抑制作用。     

大鼠骶髂关节传入神经通路的实验研究

目的:通过逆行神经追踪法研究大鼠骶髂关节的传入神经通路。方法:30只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成非交感神经切除组(A组)和交感神经切除组(B组),每组15只,交感神经切除组切除左侧L1以下椎旁交感干。两组左侧骶髂关节注入30%的辣根过氧化物酶(HRP)20μl,72h后取出双侧的L1-S1背根神经节(DRG),TMB法染色后在光学显微镜下观察HRP阳性神经元细胞并计数。结果:两组左侧L1、L2背根神经节内HRP阳性神经元差异有显著性意义(P<0·05),B组HRP阳性神经元明显减少;左侧L3-S1背根神经节内HRP阳性神经元差异无显著性意义(P>0·05)。结论:L1-S1神经节含有支配同侧骶髂关节的传入神经元,同侧椎旁交感干可能是骶髂关节到L1-L2神经节重要的传入神经旁路,而不是到L3-L5神经节的传入旁路或重要的传入旁路。     

32 P局部照射对移植静脉内膜平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究β射线局部照射对自体移植静脉内膜平滑肌细胞（VSMC）增生与凋亡的影响及可能机制。方法 建立80只大鼠自体静脉移植模型,随机分成^32P局部照射组、对照组,每组按3、7、14、28d随机分成4个亚组、每亚组10只。取材固定,弹力纤维染色,增殖细胞核抗原、p53、bcl-2、bax免疫组化测定,TUNEL法检测静脉平滑肌细胞的凋亡,计算机图象分析仪测量移植血管内膜厚度,计算细胞增殖及凋亡百分化。结果 术后2组移植静脉段的内膜平均厚度：7、14、28d,照射组明显 于对照组（t＝15．694,P＜0．05）;7、14d照射组VSMC增殖较对照组受到明显抑制（t＝60．157,P＜0．01）。凋亡指数14d照射组高于对照组（t＝56．176,P＜0．01）。p53的表达,2组间差异无显著性意义（t＝0．473,P＞0．05）,bax与bcl－2的表达,14d照射组高于对照组（t＝9．783,P＜0．05）。结论 ^32P局部照射可以抑制自体移植静脉的内膜增生及VSMC的增殖,促进VSMC的凋亡,可能是通过bax、bcl－2基因的表达实现的。