中华按蚊幼虫肠壁膜泡的制备及其鼠抗血清对幼虫？…

搞清Ｂ．ｓ杀虫蛋白对纹幼虫肠细胞膜的作用机理，从而改进杀虫蛋白活性。方法差速离心制备肠细胞膜泡，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析其蛋白组分；测试其鼠抗血清对蚊幼虫的效应。     

孕鼠香烟烟雾染毒对胎鼠视杯和视泡上皮细胞凋亡的影响

[目的]观察孕鼠香烟烟雾染毒致胎鼠眼畸形的作用及对视杯、视泡上皮细胞和问充质细胞凋亡的影响.[方法]将怀孕的金黄地鼠随机分为吸烟组和对照组,吸烟组共3组(每组10只动物)分别于孕第6、7、8天开始用香烟烟雾染毒(即A、B、C组);对照组(共15只动物)除无烟熏外,其他条件同吸烟组.分别于染毒第3天时,在体视显微镜和光镜下观察各组鼠胚的发育情况及眼畸形的形态学变化;采用原位末端标记法定量分析金黄地鼠胎鼠视杯、视泡上皮细胞及间充质细胞凋亡的变化.[结果]孕鼠香烟烟雾染毒对胚胎有显著致畸作用,吸烟组总畸形率为40.08%,眼畸形率为10.32%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01),其中以孕7天开始染毒组畸形率最高(51.69%).吸烟组视杯、视泡上皮细胞及间充质细胞的凋亡细胞数明显高于对照组(P<0.05),且以孕7天开始染毒组凋亡细胞计数最高,为(29.1±2.1)个.组织学观察发现,吸烟组胎鼠视杯的发生明显迟干对照组.[结论]香烟烟雾染毒对胚胎有明显眼致畸作用;香烟烟雾可以诱导视杯、视泡上皮细胞及间充质细胞过度凋亡,导致视杯的发生明显延迟,这可能是香烟烟雾染毒致胚胎眼畸形发生的机制之一.     

鼠伤寒沙门氏菌yejE基因缺失对沙门氏菌囊泡结构完整性的影响

目的 沙门氏菌囊泡（Salmonella-containing vacuole, SCV）是沙门氏菌进入宿主细胞后产生的一种类似于吞噬体的结构。SCV结构完整性一旦被破坏，其内包裹的沙门氏菌将进入细胞质并通过MHC-I途径激活宿主CD8 + T细胞免疫应答。有研究表明沙门氏菌yejE基因能够影响宿主CD8 + T细胞免疫应答，但具体机制尚不明确。本研究将观察并计算yejE基因缺失后鼠伤寒沙门氏菌的SCV逃逸率，探讨沙门氏菌yejE基因是否通过改变SCV的结构稳定性，影响宿主的CD8 + T细胞免疫应答。方法 （1）采用Red同源重组技术或P22噬菌体转导技术，在减毒沙门氏菌TT-16（ΔclpP TT-1）的基础上构建缺失了sifA、yejE基因或二者同时缺失的减毒沙门氏菌，随后导入质粒pGEX-6P-1-sf-GFP，获得一系列能够在IPTG诱导下表达绿色荧光蛋白的减毒沙门氏菌；（2）用构建好的菌株分别感染小鼠巨噬细胞RAW264.7，于感染后2h和6h进行免疫荧光染色；（3）采用激光共聚焦显微镜观察并计算各菌株的SCV逃逸率。结果 感染后2h和6h，鼠伤寒沙门氏菌yejE和sifA单缺失株的逃逸率均显著高于亲本株，且sifA与yejE双基因缺失株的逃逸率与yejE或sifA单缺失株的SCV逃逸率相比无显著差异性。结论 鼠伤寒沙门氏菌yejE基因能通过改变SCV的结构完整性，影响宿主CD8 + T细胞免疫应答；此外，sifA与yejE基因可能通过相同的途径影响SCV的结构完整性。     

中华按蚊对杀虫剂的敏感性测定

目的了解南阳市中华按蚊对DDT、马拉硫磷、溴氰菊酯及氟氯氰菊酯4种杀虫剂的抗药性现状,为制定防治对策提供科学依据。方法采用WHO成蚊滤纸接触法,以区分剂量死亡率判定抗性程度。结果中华按蚊对溴氰菊酯、氟氯氰菊酯、马拉硫磷3种药物的区分剂量死亡率在80%～97%之间,为初步抗性群体。对DDT的区分剂量死亡率<80%,为抗性群体。结论 DDT停用多年后仍有较高的抗药性,而菊酯类药物的抗药性初步形成,其未来抗药性发展可能成为媒介按蚊控制的最大障碍,应加强抗药性监测,以便有效控制媒介按蚊。     

中华按蚊对溴氰菊酯的抗药性研究

本文报告溴氰菊酯选育中华按蚊抗性品系的结果。选育5～10代可产生低度抗药性,11代以后引起基因突变,29代发现带有致死基因的黑体或黑头幼虫,并有器官畸形。黑体幼虫死亡率100%,不能继续繁殖;黑头幼虫死亡率为65.98%,能继续繁殖。自交实验初步证明,黑头幼虫的特征为隐性隔代遗传。致死基因的存在,降低了中华按蚊的生存力,致使带有致死基因中华按蚊种群对溴氰菊酯的抗药性下降;当黑体幼虫消失、黑头幼虫减少时,中华按蚊幼虫的LC_(50)开始回升。     

湖北省中华按蚊对溴氰菊酯的抗药性监测

目的了解中华按蚊对溴氰菊酯抗药性现状,为合理使用杀虫剂提供科学依据。方法采用WHO的成蚊滤纸接触法,观察首只蚊虫击倒时间、击倒率和死亡率,以区分剂量判定抗性级别。结果江陵县、襄州区、枣阳市、通城县、天门市、夷陵区、武穴市、广水市、曾都区、京山县和恩施市被溴氰菊酯击倒的首只中华按蚊时间分别为6、20、ll、9、20、6、30、5、14、25和23min,60min时的击倒率（％）分别为9．62、7．69、14．55、2．11、3．00、48．94、2．80、10．78、14．00、1．00和3．06;11个地区中华按蚊在溴氰菊酯区分剂量作用下的死亡率除恩施市为70．85％外,其余均〈50．00％,为高抗群体。结论湖北区域范围内中华按蚊对溴氰菊酯的抗击倒力强,抗性程度高,抗性发展快,应加强监测,现场应用宜适当加大使用剂量,确保防制效果。     

溴氰菊酯喷洒蚊帐对改变中华按蚊传疟作用的定量研究

本文应用Ｇａｒｒｅｔｔ－Ｊｏｎｅｓ媒介能量理论，在浙江省苍南县水头乡用溴氰菊酯喷洒蚊帐，对中华按蚊传疟作用的影响进行了定量调查。结果：中华按蚊传疟作用喷洒后比喷洒前下降９７．９％，较对照组下降９８．４５％。     

合肥市3县中华按蚊对溴氰菊酯抗性现状的研究

目的探明合肥市中华按蚊对溴氰菊酯的抗性现状。方法选择合肥市肥东、肥西和长丰县,每县各选取1个自然村,于2011年7-8月采用牛诱和猪诱法捕获饱血中华按蚊,采用WHO推荐的成蚊接触筒法对按蚊进行敏感性测试。结果肥东、肥西和长丰县中华按蚊经0.05%溴氰菊酯测试后,击倒率分别为0、1.96%和4.72%;校正死亡率分别为4.90%、12.23%和20.05%。结论合肥市3县中华按蚊对溴氰菊酯已经产生明显抗性。     

苏云金芽孢杆菌以色列变种的两种漂浮颗粒剂灭中华按蚊幼虫效果比较

用美国Ｂａｃｔｉｍｏｓ可湿性粉剂（Ｂｔｉ－１８９７）和国产Ｂｔ－１８７乳剂生产的两种漂浮颗粒剂灭中华按蚊幼虫的结果表明：后者对中华按蚊幼虫的效价（１２０ＩＴＵ／ｍｇ）比前者（３７０ＩＴＵ／ｍｇ）低，但制成颗粒剂后（效价２２０ＩＴＵ／ｍｇ）比前者（效价１３０ＩＴＵ／ｍｇ）高。稻田应用０．８１ｇ／ｍ２剂量Ｂｔ－１８７漂浮颗粒剂控制中华按蚊幼虫，持效可达１６天，Ｂａｃｔｉｍｏｓ漂浮颗粒剂为１３天。     

中华按蚊实验室品系对杀虫剂的敏感性测定

目的 研究实验室品系中华按蚊成蚊及幼虫对常用杀虫剂的敏感性,为中华按蚊的抗药性测定和比较提供参考品系.方法 测定成蚊抗药性水平参考WHO对按蚊的诊断剂量使用接触筒法;测定幼虫对双硫磷、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、氯菊酯、多杀菌素、呋虫胺的半数致死浓度(LC50)及其95％置信限(95％CI)使用WHO推荐的浸渍法.结果 中华按蚊成蚊对4％DDT(1 h)死亡率为56.5％;对0.05％溴氰菊酯(1 h)、0.05％高效氯氰菊酯(1 h)和0.75％氯菊酯(1 h)死亡率均为100％,对0.025％溴氰菊酯(1 h)、0.025％高效氯氰菊酯(1 h)和0.25％氯菊酯(1 h)死亡率分别为100％、99.6％和100％;中华按蚊幼虫对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、氯菊酯、双硫磷、多杀菌素、呋虫胺的LC50值(95％ CI)分别为0.0025 (0.0021～0.0030)、0.0047 (0.0035～0.0062)、0.0190 (0.0156～0.0224)、0.1125(0.0921～0.1407)、0.0047(0.0035～0.0062)和0.1744(0.1653～0.1840) mg/L.结论 本实验室品系中华按蚊成蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂敏感,对DDT有抗性.     

中华按蚊幼虫稻田孳生状态的研究

对中华按蚊幼虫在田间孳生状态的研究分析表明:蚊幼虫在稻田的周边区(距田埂1.5m)和中间区各区间的变异系数(C.V.)在124.21～149.56%,其栖息的个体群数量差异不大;周边区与中间区的平均密度比较(1.6504:1.8937),μ=1.71,P>0.05,也无显著差异;对不同方位(东南、东北、西南、西北)的中间区各区间幼虫的密度作方差分析检验,F=0.58,P>0.05,无显著差异。但对不同方位周边区的幼虫密度比较,则有显著性差异,以南边及东边区为高,该两区均靠近居民村一侧。     

温度对蚊虫发育历期的影响及与疾病的关系

目的：观察温度对蚊虫发育历期的影响及与疾病发生的关系。方法：在实验室不同恒温条件下，观察中华按蚊各虫期发育情况及间日疟原虫在该蚊体内子孢子繁殖时间；用直线回归公式求出各虫期发育起点温度（Ｃ值）和有效积温（Ｋ值日度）。结果：蚊虫各历期均以２５～２８℃时发育时间短，繁殖快；蚊虫体内子孢子增殖快，密度高。并结合不同地区气温，预测了各地蚊虫生长繁殖的高峰期为７～９三个月，证实与疟疾流行情况相一致。结论：蚊虫的发育历期随温度升高而缩短；间日疟原虫子孢子在中华按蚊体内增殖，温度以２５～２８℃最为适宜。     

珠海市横琴岛嗜人按蚊和中华按蚊吸血习性研究

目的：探讨珍开发区嗜人按蚊和中华按蚊吸血习性。方法：清晨搜捕全部人房和蚊帐内外以及牛房内的吸血按蚊;半通宵人牛诱捕;通宵人诱捕蚊。结果：嗜人按蚊和中华按蚊都嗜牛血兼嗜人血,整夜都有吸血活动,嗜人按蚊和中华按蚊夜间吸血高峰值同在下半夜。结论：防蚊措施的采用,特别在下半夜,是疟防的关键。     

中华按蚊生殖与寿命特性实验室观察

目的 :在实验室内观察每天供血中华按蚊的生殖与寿命特性。方法 :在每天供血的情况下 ,观察中华按蚊吸血及产卵情况 ,并记录雌雄蚊死亡历程 ,另同时设置未供血蚊作实验对照。结果 :194只雌蚊共产卵 2 8377粒 ,羽化后 1.5～ 38d均观察到蚊虫吸血 ;吸血后 3d开始产卵 ,整个成蚊历期最迟产卵至第 35d。其中产卵高峰见于第 5～ 16d ;雄蚊、每天供血雌蚊、对照雌蚊 (未供血 )的平均寿命分别为 12 .44± 5 .78、2 4.2 9± 9.0 8和 17.46± 5 .76 (d)。经统计学分析 ,不同性别中华按蚊以及供血与不供血雌蚊的寿命差别均有非常显著性意义 (P <0 .0 0 1) ,亦即每天供血蚊寿命大于未供血雌蚊 ,雌蚊寿命又较雄蚊长。结论 :充足的血源供应可大大延长雌蚊的寿命 ,亦可增加雌蚊的生殖强度     

中华按蚊幼虫田间分布型研究

本文报道了1987～1989年在浙江丽水市稻作区对中华按蚊幼虫田间分布型研究的结果。根据连续三年对6块稻田分层随机抽样所得的数据,经分布型公式拟合,认为符合负二项分布规律,即属于聚集分布型。进一步进行集聚强度测定的结果表明,k值及c值均>0,m*-m回归式,α值>0,β值>1,说明中华按蚊幼虫在稻田主要以个体群(集团)形式呈聚集型分布。但在蚊幼虫由1龄到4龄期的发育过程中,k值由低而高地增大;c值由高而低地减小,说明低龄中华按蚊幼虫受到雌蚊产卵相对集中的影响,其聚集强度相对较高,随着蚊虫龄期的增长逐渐向四周扩散,但仍然停留于聚集分布的水平上。     

中华按蚊对拟除虫菊酯抗击倒因子分布频率的研究

本文报道中华按蚊敏感品系及不同地区自然种群对溴氰菊酯和氯菊酯的抗击倒因子分布频率。结果表明：这两种拟除虫菊酯对敏感品系幼虫的２０ｍｉｎ致死中浓度（ＬＣ５０）分别为０．０２０９和０．１７４７ｐｐｍ；用敏感品系幼虫致死率达９９％的剂量测试自然种群，发现已有抗性产生，其中用药试验的温州苍南，其致死率仅为６０％左右。自然种群成虫的神经不敏感因子分布频率明显大于敏感品系，最大差率达４０％左右（温州苍南用药地区种群）。     

中华按蚊幼虫田间水平分布的研究

在浙江省丽水市石牛乡一片2000余亩的平坦水稻区,对离居民点50、100、200、300及500m 5个不同点的稻田,调查了中华按蚊幼虫的孳生密度与人居点距离的关系。在水稻生长前期,各距离点稻田内蚊幼的平均密度与居民点距离呈高度负相关,r=-0.9446,p<0.01,回归方程为。而在水稻生长后期,稻田内蚊幼平均密度与居民点距离呈抛物线关系,相关指数R~2=0.8509,回归方程。田间蚊幼的最高密度约在150m处。     

四川省嗜人按蚊与中华按蚊对溴氰菊酯和二氯苯醚菊酯的敏感性测试

目的 了解四川省主要媒介按蚊对菊酯类杀虫剂的敏感性，为继续使用菊酯类杀虫剂控制媒介按蚊提供依据。方法 采用WHO推荐使用的接触筒强迫接触法，观察测试蚊虫死亡数，计算校正死亡率。结果 嗜人按蚊的校正死亡率平均为100％，中华按蚊的校正死亡率平均为90．86％。结论 四川省仍可采用澳氰菊酯处理蚊帐灭蚊防疟。     

氯氰菊酯浸泡蚊帐对中华按蚊和三带喙库蚊的毒效试验

普通棉纱蚊帐浸泡10%氯氰菊酯EC,浓度为60mg a.i/m~2。实验室的残效生物测试,对中华按蚊的毒杀率达50.0%以上,可维持14个月;在广州市近郊的番禺县大石镇洛溪村,以牛作诱饵,进行实验小屋试验,氯氰菊酯浸泡蚊帐后1年内对中华按蚊的平均毒杀率为54.2%,其中窗阱死亡率为45.2%,吸血率为3.1%;对三带喙库蚊的平均杀灭率54.2%,其中窗阱死亡率为43.4%,吸血率为1.1%。同时有增加窗阱逃入率的作用,对中华按蚊为30.1%,而对三带喙库蚊不很明显。在蚊帐穿孔(10×10cm)条件下,所有孔的面积之和占蚊帐面积的5%,浸泡蚊帐后8个月内对中华按蚊的杀灭率为35.8～76.1%。对三带喙库蚊的杀灭率为53.5～64.2%;且可降低吸血率,中华按蚊为23.2%,三带喙库蚊为46.8%。研究结果表明:氯氰菊酯浸泡蚊帐具有毒杀、接触兴奋驱避和降低吸血率的作用,但未见有明显减少飞入屋内蚊虫数量的拒虫作用。     

盐城北部中华按蚊嗜血习性观察

７次吸血趋性观察，人饵诱获率６．１９％（２９０／４６８４）；连续４年测定，平均人血指数０．０９４（２２４／２４７９）；羽化到吸血的平均时距为３８±１８．５４ｈ，产卵到再吸血的时间为１．３９±０．８５ｈ，吸血活动高峰在上半夜。表明盐城北部中华按蚊主吸畜血，兼吸人血。结合以前从吸血到产卵时间观察的数据，估算初产蚊的生殖营养周期为４ｄ，经产蚊约２．５ｄ。