特应性皮炎Th1／Th2／Th17平衡的研究

目的：探讨特应性皮炎（AD ）外周血清T h1／T h2／T h17平衡的变化规律及相关细胞因子的变化规律,以进一步探讨AD发病的免疫机制。方法采用流式荧光技术测定47例AD患者（AD组）和40例健康自愿者（对照组）外周血清中的γ‐干扰素（IFN‐γ）、白细胞介素（IL ）‐4、IL‐17、IL‐21、IL‐23水平并进行统计分析,从而分析T h1／T h2／T h17／T reg平衡在AD中变化规律。结果在AD患者血清中,IL‐4水平较对照组升高（ P＜0．05）,IL‐17、IL‐23的水平显著高于对照组（ P＜0．05）;IFN‐γ／IL‐4和IFN‐γ／IL‐17较对照组明显降低（P＜0．01）;IL‐17与AD严重程度（SCORAD）评分呈正相关（P＜0．05）。结论在 AD病程中T h1／T h2、T h1／T h17降低,T h1／T h2／T h17平衡的漂移可能是AD发病的重要机制。     

溃疡性结肠炎患者Th17和Th1／Th2细胞亚群的研究

目的检测溃疡性结肠炎（Ulcerativecolitis,UC）患者外周血中辅助性T细胞亚群（Th1、Th2和Th17）数量和比例的变化,探讨其在UC发病机制中的作用。方法选择40例UC患者,分离外周血单核细胞（PBMc）,采用流式细胞术（FCM）检测Th1、Th2、Th17细胞的数量及Th1／Th2比值,用ELISA测定培养上清中IFN-γIL-4、IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较并与患儿的病情进行相关性分析。结果UC患者PBMC中IFN-γ＋Th1细胞的数量、IL--γ7＋Th17细胞的数量均高于健康对照组[（27．0±2．9）％,（23．2±1．7）％,P〈O．05;（26．61±2．6）,（11．4±1．2）,P〈0．011;Th1／Th2比值高于健康对照组[（12．8±1．6）,（8．60±1．9）,P〈0．01],Th17细胞的数量与疾病程度呈正相关（P〈0．05,r=0．42）。结论IL-17＋Th17细胞与Th1／Th2比值变化可能参与UC患者的免疫学发病机制。     

老年特应性皮炎患者外周血Th1、Th2、Th17细胞与鳞状上皮细胞癌抗原水平的变化及意义

目的 探究外周血辅助性T细胞Th1、Th2、Th17和鳞状细胞癌抗原（SCCA）水平在老年特应性皮炎患者中的变化及其意义。方法 以2022年3月—2022年7月于四川省人民医院皮肤科就诊的25例老年特应性皮炎患者（老年特应性皮炎组）及同期33例健康体检者（健康对照组）为研究对象。采取流式细胞术测定外周血Th1、Th2和Th17细胞占CD4⁺T细胞的比例;检测老年特应性皮炎患者的外周血嗜酸性粒细胞（EOS）计数、总免疫球蛋白E（IgE）及血清SCCA水平;采用Spearman法进行相关性分析。结果 老年特应性皮炎患者皮损严重且分布广泛,主要表现为四肢伸侧及背部苔藓样湿疹,部分患者有1种或多种系统性疾病。老年特应性皮炎组的外周血EOS计数较健康对照组明显增加（P <0.05）。老年特应性皮炎组外周血中Th2和Th17细胞比例均高于健康对照组（P <0.05）,而Th1细胞比例与健康对照组比较,差异无统计学意义（P >0.05）。老年特应性皮炎组外周血EOS计数与Th2细胞比例、SCCA水平有相关性（r_s =-0.399和0.607,均P <0.05）。老年特应性皮炎患者的SCCA水平与SCORAD评分呈正相关（r_s =0.416,P <0.05）。结论 老年特应性皮炎患者具有特有的临床特征,以Th2和Th17型炎症为主。老年特应性皮炎患者血清SCCA水平可在一定程度上反映其疾病的严重程度。     

寻常性银屑病患者外周血Th1和Th17细胞亚群的研究

目的检测寻常性银屑病患者外周血中Th极化细胞Th1和Th17细胞数量和比例的变化,探讨其在银屑病发病机制中的作用。方法选择30例寻常性银屑病患者,采用流式细胞术(FCM)检测寻常性银屑病患者外周血中CD4+T细胞上IFN-γ+IL-17-(Th1)、IL-17+IFN-γ-(Th17)的表达,并与健康对照组比较,分析寻常性银屑病严重指数PASI和Th极化细胞表达量、Th1/Th17比值之间的关系。结果寻常性银屑病患者PBMC中IFN-γ+Th1细胞的数量、IL-17+Th17细胞的数量均高于健康对照组(P<0.01);Th1/Th17比值低于健康对照组(P<0.01),Th17细胞的数量与PASI呈正相关(P<0.01,r=0.726),Th1/Th17细胞比值与PASI指数呈负相关(P<0.01,r=0.573)。结论寻常性银屑病患者外周血存在Th1/Th17细胞失衡现象,Th1/Th17比值变化可能参与银屑病患者的免疫学发病机制。     

Th1/Th2、Th17/Treg细胞的平衡与临床

T细胞是一个非常复杂的高度异质性群体,其中Th细胞是根据功能分类的一个T细胞群。Th细胞包括多种功能亚群[1],许多研究证实这些亚群不是分化定型细胞,具有一定的可塑性(plastici-ty)[2-3],它们通过分泌的细胞因子相互影响、相互制约、形成网络维持动态平衡,一旦失衡就可能发生     

支原体肺炎患儿外周血Th1／Th2及B细胞的数量分析

目的探讨外周血Th1/Th2及B细胞数量在支原体（MP）肺炎免疫学发病机制中的作用。方法应用单克隆抗体免疫荧光标记法通过流式细胞术对42例MP肺炎患儿的外周血B淋巴细胞CD19^＋及Th1亚群CD4^＋CD45RA^＋、Th2亚群CD4^＋CD45RO^＋的表达情况进行分析。结果MP肺炎患儿外周血B淋巴细胞CD19^＋表达明显升高。Th1亚群CD4^＋CD45RA^＋表达明显升高,Th2亚群CD4^＋CD45RO^＋表达无显著性变化。CD4^＋CD45RA^＋/CD4^＋CD45RO^＋明显升高。结论MP肺炎患儿主要表现为Th1细胞为主的免疫反应及B淋巴细胞过度增殖,符合自身免疫性疾病的免疫病理基本特征,故推测支原体肺炎与自身免疫性疾病密切相关。     

毛细支气管炎患儿外周血T细胞亚群Th1/Th2及相关细胞因子的变化

目的探讨毛细支气管炎患儿外周血T细胞亚群与Th1／Th2免疫变化。方法流式细胞仪检测32例毛细支气管炎患儿、16例支气管哮喘患儿及20例健康儿童外周血T细胞亚群;ELISA法检测以上儿童血清IFN-γ（ng／L）、IL-4（ng／L）。结果毛细支气管炎组CD4^＋百分率略高于对照组,CD8^＋百分率略低于对照组,但两组间均无显著差异（P〉0．05）。而CD4^＋／CD8^＋比值则明显高于对照组（P〈0．05）。哮喘组CD4^＋百分率高于对照组,CD8^＋百分率低于对照组,两组间有显著差异（P〈0．05）,且CD4^＋／CD8^＋比值明显高于对照组（P〈0．05）。毛细支气管炎组、哮喘组与对照组IFN-γ、IL-4、IFN-γ／IL-4水平变化差异显著（P〈0．05）。哮喘组IL-4水平略高于毛细支气管炎组（P〉0．05）。毛细支气管炎组IFN-γ水平低于哮喘组,有显著差异（P〈0．05）。结论毛细支气管炎和哮喘患儿均存在细胞免疫失调,以Th2型细胞占优势。     

妊娠早期亚临床甲状腺功能减退孕妇外周血Th1、Th2、Th17、Treg及细胞因子变化研究

目的 探讨妊娠早期亚临床甲状腺功能减退（SH）孕妇体内Th1、Th2、Th17和Treg细胞及其相关细胞因子的变化,以期为妊娠早期SH提供新的治疗靶点。方法 选取2019年11月至2020年4月在自贡市第一人民医院就诊建卡的妊娠早期SH患者30例为试验组,选取同期于该院就诊建卡的30例正常孕妇为对照组,采集两组孕妇带促凝剂管的血清标本和乙二胺四乙酸二甲（EDTA-2K）抗凝的全血标本,采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-35(IL-35)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;采用流式细胞术检测外周血辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞2(Th2)、辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞（Treg）细胞水平。结果 试验组白细胞计数（WBC）、中性粒细胞百分比（Neu%）高于对照组（P<0.05）;红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、淋巴细胞计数（Lym%）水平低于对照组（P<0.05）。试验组Th1表达水平升高（P<0.05）,...     

1型糖尿病患者Th1/Th2细胞亚群的研究

目的研究Th1/Th2细胞亚群分泌的不同细胞因子,探讨1型糖尿病患者体内Th1/Th2细胞亚群的变化。方法用放射免疫法(RIA)检测了48例1型糖尿病患者(7例合并有下肢血管病变)血清中Th1型细胞亚群分泌的细胞因子IFN-γ、TNF-α和Th2型细胞亚群分泌的细胞因子IL-4、IL-10的水平变化,19例健康志愿者做为对照。结果1型糖尿病患者血清中Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-α的水平分别(63.30±14.3)ng/L和(65.03±24.98)Fmol/ml,显著高于正常对照组(29.48±11.98)ng/L和(23.66±13.51)Fmol/ml(P<0.01);Th2型细胞因子IL-4、IL-10的水平分别为(2.21±0.96)ng/L和(24.98±7.31)ng/L,明显低于正常对照组(5.37±1.10)ng/L和(62.87±5.97)ng/L(P<0.01);糖尿病并发下肢血管病患者Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-α和Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平分别为(90.03±5.20)ng/L、(109.28±26.74)Fmol/ml和(0.55±0.22)ng/L、(12.12±2.39)ng/L,单纯糖尿病患者组四种细胞因子水平分别为(58.76±9.57)ng/L、(56.98±15.43)Fmol/ml和(2.49±0.72)ng/L、(27.18±5.30)ng/L,两组相比,四种细胞因子水平差异均有显著性(P<0.01)。结论1型糖尿病患者体内Th1/Th2细胞亚群发生了Th2→Th1的漂移改变,并与病情相关,为探讨该病的发病机制及病情监测提供了理论依据。     

特应性皮炎患者负向调节性B细胞的研究及意义

目的研究特应性皮炎(Atopic Dermatitis,AD)患儿外周血中调节性B细胞(Breg)的变化,分析其与Th22、Th17的关系,并探讨在AD患儿免疫学机制中的作用。方法选择28例AD患儿,分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FCM)检测调节性B细胞与Th22、Th17的变化,用ELISA测定培养上清中IL-10、IL-22及IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较。结果 AD患儿PBMC中CD19+IL-10+调节性B细胞数量低于健康对照组[(1.15±0.31)%vs(2.36.±0.82)%,P0.05],Th22、Th17细胞的数量均高于健康对照组,培养液上清中细胞因子IL-10的水平也低于健康对照组,IL-22与IL-17水平高于对照组,差别有统计学意义(P0.05)。结论 AD患儿外周血调节性B细胞与以及相关的细胞因子IL-10的的下调,以及Th22、Th17细胞上调,可能共同参与了AD的免疫学机制,它们免疫紊乱的调节可为AD的临床治疗提供了新思路。     

特应性皮炎患者外周血白介素-17和白介素-23水平的检测

目的探讨特应性皮炎(AD)患者外周血中白介素-17(IL-17)、白介素-23(IL-23)的含量及其在AD发病机制中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测40例AD患者外周血中IL-17、IL-23的含量,并与AD疾病严重程度作相关性分析。AD疾病严重程度用SCORAD评分标准判断。同时以30例性别、年龄匹配的健康人作为对照组。结果AD组外周血中IL-17的含量为(36.23±8.66)pg/L,明显高于健康对照组(17.11±2.25)pg/L(t=13.38,P0.01);其含量与SCORAD评分呈显著正相关(r=0.412,P0.05)。AD组外周血中IL-23的含量为(52.78±8.56)pg/L,高于健康对照组(24.86±3.12)pg/L(t=19.02,P0.01);其含量与SCORAD评分呈显著正相关(r=0.493,P0.05)。结论AD患者外周血中IL-17、IL-23的含量增高且与病情的正相关性,提示过量表达的Th17细胞调控因子IL-23可能激发Th17细胞处于功能活跃状态,Th17细胞分泌过量的效应因子IL-17促进AD发病发挥一定作用。     

喉癌患者外周血Th1／Th2细胞因子的表达及其临床意义

目的 探讨喉癌患者外周血CD3T细胞分泌细胞因子的水平变化,分析Th1和Th2细胞的细胞因子免疫活动。为肿瘤的免疫治疗提供实验依据。方法采用刺激物刺激细胞,增加细胞内细胞因子的表达,再加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,特异性抗原抗体结合,最后应用流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平。用酶联免疫吸附法（ELISA）检测相应的细胞因子的方法进行研究。结果喉癌患者Th1型细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-12（IL-12）表达水平较正常对照组显著降低,Th2型细胞因子白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-10（IL-10）表达水平较正常对照组升高,差异有统计学意义。肿瘤坏死因子-α（TNF—α）表达水平较正常对照组升高,差异有显著性。喉癌患者体内Th2型细胞因子模式占优势状态。结论肿瘤细胞发生免疫逃逸,从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一。     

胞内细胞因子染色分析艾滋病人CD4^＋T淋巴细胞Th1／Th2漂移

目的建立CD4^＋T淋巴细胞胞内细胞因子染色法，研究艾滋病人在治疗过程中Th1／Th2平衡漂移。方法胞外CD分子染色和胞内细胞因子染色相结合，应用流式细胞术分析CD4^＋T淋巴细胞的Th1／Th2亚群百分比。结果艾滋病人Th1型细胞百分比的均值在治疗过程中呈阶梯状上升趋势，其与治疗时间在68周内的回归系数为0.741，但无统计学意义（r=0.741，P=0.057）；Th2细胞百分比的均值在治疗过程中呈明显的下降趋势，其与治疗时间在68周内的回归系数为0．847，有统计学意义（r=0．847，P=0．016）。结论细胞内细胞因子染色能监测CD4^＋T淋巴细胞Th1／Th2亚群漂移，对了解艾滋病人治疗效果有重要价值。     

特应性皮炎小鼠中Th1/Th2类细胞因子失衡对神经生长因子表达的影响

目的 初步探讨特应性皮炎(AD)小鼠中Th1/Th2 类细胞因子失衡对脾淋巴细胞神经生长因子(NGF) mRNA 表达的影响.方法 用卵清蛋白经皮肤致敏建立小鼠AD模型, ELISA测定血清总IgE水平.分离脾淋巴细胞并培养.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法测定细胞在刀豆素A(ConA)刺激下表达NGF mRNA的基础水平及γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL -4)干预后NGF mRNA表达改变.结果 ①AD小鼠脾淋巴细胞在基础状态下具有表达NGF mRNA的功能,在12、24、36、48 h时基础NGF mRNA表达量随着时间的延长逐渐升高,IL-4组(50 μg/L)随着时间的延长基础NGF mRNA表达量逐渐升高,并高于同时间空白对照组(P均<0.01). 相反, IFN-γ组(25 μg/L)的NGF mRNA水平随时间逐渐下降,并均低于同时间空白对照组(P均<0.01).②干预24 h时,随着IL-4干预浓度的增加,NGF mRNA的表达水平亦升高,并且分别与前一梯度低浓度干预组比较差异有统计学意义(P均<0.01),随着IFN-γ干预浓度的增加, NGF mRNA的表达水平却逐渐减低,分别比前一梯度低浓度干预组有显著降低(P均<0.01).结论 在特应性皮炎中Th2类细胞因子IL-4可上调淋巴细胞NGF mRNA表达,Th1类细胞因子IFN-γ可下调淋巴细胞NGF mRNA表达,两者均呈时间和浓度依赖性,Th1 / Th2类细胞因子免疫失衡可能通过调控NGF mRNA 表达间接促进其诱导神经源性炎症. Abstract： Objective To explore the effect of Th1 / Th2 cytokines on the expression of nerve growth factor (NGF) in splenic lymphocytes in atopic dermatitis mice.Methods Four AD mice were sensitized and challenged with ovalbumin to establish AD model, and serum IgE level was measured by ELISA.The mouse splenic lymphocytes were isolated and cultured with ConA. The expressions of NGF mRNA were detected by RT-PCR, and were observed after the lymphocytes were exogenously added with interferon -γ(IFN-γ) or interleukin-4 (IL-4). Results ①The lymphocytes of the AD model stimulated by ConA in vitro expressed NGF mRNA in a time-dependent manner. After the lymphocytes had been cultured with IL-4 for 12 h, 24 h, 36 h, and 48 h, 50μg/L IL-4 upregulated the expressions of NGF mRNA in a time-dependent manner and all the NGF mRNA expressions were significantly higher than the basal values at the same time (P all<0.01), however,25μg /L IFN-γ downregulated the expressions of NGF mRNA in a time-dependent manner and all the NGF mRNA expressions were significantly lower than the basal values at the same time (P all<0.01).②The lymphocytes of the AD model stimulated by ConA in vitro also expressed NGF mRNA in a dose-dependent manner.After 0,10, 25,50, and 100 μg /L IL-4 had been added for 24 h, IL-4 upregulated the expressions of NGF mRNA in a dose-dependent manner and the NGF mRNA expressions were all significantly higher than the values of the lower dose IL -4 (P all <0.01), however,after 0, 1, 10, 25,and 50μg /L IFN-γ had been added for 24 h, IFN-γ downregulated the expressions of NGFmRNA in a dose-dependent mannerand all the NGF mRNA expressions were significantly lower than the values of the lower IFN-γ dose (P all<0.01).Conclusions In the splenic lymphocytes of atopic dermatitis mice, IL -4, one of the Th2 cytokines, can upregulate the expressions of NGF, IFN-γ, one of the Th1 cytokines, can downregulate the expressions of NGF both in a time-dependent manner and in a dose-dependent manner. Th1 /Th2 cytokine immune imbalance may indirectly induce the skin neurogenic inflammation by regulating the NGF mRNA expression.     

疗效不同的Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者TH1/TH2的比较研究

目的 :探讨辅助性T细胞 (Th1、Th2 )在Ⅲ、Ⅳ期NSCLC发病中的作用及其在判断预后中的重要意义。方法 :采用酶联免疫吸附法 (ELISA)通过检测外周血中γ -干扰素 (IFN -γ)、白细胞介素(IL) - 4的水平 ,间接分别反应Th1、Th2的活性 ,并比较晚期 (Ⅲ、Ⅳ期 )NSCLC患者外周血Th1、Th2变化与疗效及预后的关系。结果 :患者外周血中Th1的值较对照组结核患者低 ,统计学上有显著性差异(P <0 .0 5 ) ;疗效显著者 ,治疗后外周血Th1、Th1 /Th2较治疗前增高 (P <0 .0 5 ) ;疗效不显著或病情进展者 ,治疗后较治疗前外周血中Th1变化有减低的趋势 ,但统计学上无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,Th2增高明显 (P <0 .0 5 ) ,Th1 /Th2减低 (P <0 .0 5 )。结论 :Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者外周血Th1、Th1 /Th2检测可用于鉴别结核性疾病 ,外周血Th1、Th1 /Th2检测可成为Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者诊断、判断预后的重要指标