肾移植术后受者新型隐球菌感染的临床分析

目的分析肾移植术后患者新型隐球菌感染的临床特点。方法回顾性分析9例肾移植术后新型隐球菌感染受者的临床资料,包括受者的感染部位、临床表现、真菌学、组织病理学、影像学检查结果及治疗经过和转归。结果 9例肾移植受者术后常规应用他克莫司(FK506)+吗替麦考酚酯(MMF)+泼尼松三联免疫抑制治疗。发病中位时间为术后6(1～13)年。其中单纯隐球菌性脑膜炎1例、隐球菌性脑膜炎合并隐球菌肺炎5例、单纯隐球菌肺炎2例、皮肤隐球菌病1例。隐球菌肺炎临床多表现为发热、咳嗽、咳痰、气促及胸痛等症状,胸部CT示结节、胸腔积液等。主要经肺穿刺活组织检查(活检)及肺泡灌洗液墨汁负染色确诊。隐球菌性脑膜炎患者临床表现以发热、阵发性头痛伴呕吐症状居多,主要经血培养及脑脊液墨汁负染色确诊。皮肤隐球菌病表现为右肩部包块,经皮肤活检确诊。所有患者分别给予两性霉素B、氟康唑等规范抗真菌治疗,免疫抑制剂减量治疗。9例受者中1例死亡,其余受者预后情况良好。结论肾移植术后受者新型隐球菌感染多发生于术后中晚期,临床症状缺乏特异性,对怀疑隐球菌病者应及时做血培养、肺穿刺活检、脑脊液等检查以确诊。规范抗真菌治疗可降低病死率。     

隐球菌脑膜炎16例的临床特点及误诊分析

目的:探讨新型隐球菌脑膜炎(CNM)的临床特点及对误诊原因,提高诊治水平。方法:对16例CNM患者的临床资料进行回顾性分析。结果:新型隐球菌脑膜炎以颅高压征象多见,意识障碍、精神异常、抽搐、视力及听力的损害也较常见。16例患者中亚急性或慢性起病14例(87.5%)。近期使用皮质类固醇和(或)免疫抑制剂7例(43.75%),患者具有系统性红斑狼疮、肾病综合征、白血病、糖尿病等基础疾病9例(56.25%)。首次涂片即发现隐球菌8例(50%),重复送检发现隐球菌4例(25%),反复涂片阴性2例(12.5%),隐球菌培养后确诊。曾被误诊为其他疾病10例(62.5%)。结论:新型隐球菌颅内感染大多数以亚急性或慢性起病,目前CNM的基础疾病谱更加广泛,因临床表现缺乏特异性,易于误诊。     

艾滋病合并新型隐球菌肺炎和新型隐球菌脑膜炎2例

新型隐球菌(Cryptococcus neoformans)广泛存在于自然界土壤中,鸽粪为隐球菌的重要传染媒介[1],当机体免疫功能低下时,经呼吸道进入体内,导致肺、骨、皮肤及中枢神经系统感染,主要引起新型隐球菌脑膜炎(Cryptococcus meningitis).新型隐球菌也是艾滋病合并机会感染的常见机会感染真菌.本文报告我院2005年10月至2007年8月收治的540例艾滋病患者中,2例合并新型隐球菌肺炎、新型隐球菌脑膜炎.……     

HIV感染与非HIV感染患者新型隐球菌脑膜炎临床特点比较

新型隐球菌广泛分布在自然界中,可引起人类感染,大多经呼吸道吸入,在肺部引起轻度炎症,或隐性传染,亦可由破损皮肤及肠道传人.当机体免疫功能下降时可向全身播散,主要侵犯中枢神经系统.新型隐球菌感染的风险因素包括HIV感染、肝硬化、糖尿病、实体器官移植、恶性肿瘤、类风湿性疾病、皮质激素的使用和慢性肾脏疾病等¨].在未知或没有免疫抑制的人群中,也会发生隐球菌感染[2].在HIV感染高流行区,新型隐球菌性脑膜炎发病率高,且预后差.艾滋病患者并发隐球菌脑膜炎的病死率为9％ ～ 55％,非HIV感染者病死率为15％ ～44％[3].新型隐球菌脑膜炎的诊断和治疗对临床医师来说仍是一个挑战.本研究比较分析我院非HIV感染与HIV感染患者新型隐球菌脑膜炎的临床特点,为提高疾病的诊治水平积累经验.     

脑脊液半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在隐球菌性脑膜炎中临床价值的探讨

目的 探讨脑脊液半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C)在隐球菌性脑膜炎(CM)中的临床应用价值.方法 前瞻性观察和对比分析本院2007年1月~2011年5月所收治的隐球菌性脑膜炎(n = 14)、单纯结核性脑膜炎(n = 61)和结核性脑膜脑炎患者(n = 37)脑脊液cystatin C水平及相关生物化学指标的差异.结果 隐球菌性脑膜炎患者脑脊液cystatin C水平(3.18 ± 1.14 mg/L)显著低于单纯结核性脑膜炎的患者(4.62 ± 1.42 mg/L)(P< 0.01),而与结核性脑膜脑炎患者脑脊液cystatin C水平(3.68 ± 1.42 mg/L)相比,差异无统计学意义(P> 0.05);CM组的其他脑脊液生化标志物,如糖(Glu)、氯化物(Cl-)、总蛋白(TP)、腺苷脱氨酶(ADA)、乳酸(LAC)、C-反应蛋白(CRP)和微量蛋白(mALB)等,与其他两组比较均无统计学意义(P> 0.05).HIV(+)的隐球菌性脑膜炎患者(6例)cystatin C水平为(3.48 ± 1.16 mg/L),与HIV(-)隐球菌性脑膜炎组(8例)(2.96 ± 1.15 mg/L)相比,差异无统计学意义(P> 0.05).结论 脑脊液cystatin C可作为脑膜疾病鉴别诊断的一种新的标记物,有利于隐球菌性脑膜炎与结核性脑膜炎的鉴别,但其与结核性脑膜脑炎的鉴别诊断应慎重考虑.     

获得性免疫缺陷综合征合并新型隐球菌性脑膜炎及结核性脑膜炎一例并相关文献复习

目的提升对获得性免疫缺陷综合征（AIDS）合并中枢神经系统新型隐球菌及结核分枝杆菌混合感染的认知。 方法分析1例AIDS合并新型隐球菌性脑膜炎及结核性脑膜炎患者的诊疗过程，并结合相关文献进行复习。 结果1例38岁男性患者因AIDS合并新型隐球菌性脑膜炎于2015年3月17日于武汉大学中南医院住院诊治，完善检查后确诊为新型隐球菌及结核分枝杆菌颅内混合感染，给予抗感染及对症综合治疗后，病情缓解，预后较好。 结论AIDS合并隐球菌性脑膜炎及结核性脑膜炎患者应及时诊断，予以抗隐球菌、抗结核综合治疗并适时启动抗逆转录病毒治疗，可改善预后。     

27例隐球菌性脑膜炎患者的临床分析

目的探讨隐球菌性脑膜炎的临床特征,以提高该病的诊治水平及预后。 方法回顾性分析复旦大学附属华山医院收治的27例诊断为隐球菌性脑膜炎患者的临床资料。 结果88.89%（24例）隐球菌性脑膜炎患者以头痛为首发症状;脑脊液糖（1.81 ± 0.69 mmol/L）降低尤为显著;若并发颅神经损害,多累及视神经和听神经;头颅CT或MR可见脑缺血病灶（37.04%）及软脑膜不同程度强化灶（59.26%）;所有患者均有不同程度的颅内压增高,病原学脑脊液墨汁染色阳性患者22例（占81.48%）,隐球菌培养阳性患者20例（占74.07%）,荚膜多糖抗原检测（乳胶凝集试验）阳性占100%;两性霉素B（AmpB）联合5-氟胞嘧啶（5-FC）治愈好转率100%（17/17）,AmpB + 5-FC +氟康唑治疗的4例患者中好转3例。 结论隐球菌性脑膜炎早期误诊率较高,脑脊液墨汁染色、隐球菌乳胶凝集试验及培养有助于确诊;两性霉素B联合5-氟胞嘧啶仍是目前经典的抗真菌治疗方案,两性霉素B与伊曲康唑联合治疗方案有待大样本的临床验证;早期控制真菌及颅高压是改善预后关键,必要时可尽早外科干预。     

新型隐球菌性脑膜炎的护理体会

隐球菌性脑膜炎是较少见的神经系统真菌性脑膜炎。本病随着抗生素、激素类药物的大量、广泛应用,发病率有逐渐增高的趋势。本病发病隐袭、进展缓慢、病程长,其临床症状并无特异性,常有头痛、恶心、发热等,重症患者治疗及护理较为复杂。我院自1969～1986年共收治7例,其中2例为新型隐球菌性脑膜炎,现从护理角度总结如下:     

格特隐球菌vgⅡ基因型的快速鉴定和序列分型研究

目的 建立一种核糖体基因内间隔区(igs)的特异性pcr扩增和序列分析方法,用于快速鉴定格特隐球菌vgⅡ基因型及其亚型.方法 选取新型和格特隐球菌核糖体igs区中可变度最高的1区为靶点,经clustalx 2多重比对后,设计特异性扩增格特隐球菌vgⅡ基因型的引物用于pcr分析.通过扩增新型和格特隐球菌其余基因型以及其他致病酵母菌来评价引物的特异性,并对阳性扩增片段(vgⅡ基因型)进行测序和序列分型研究.结果 基于核糖体igs区的特异pcr引物扩增所有受试格特隐球菌vgⅡ基因型菌株均为阳性,而新型和格特隐球菌其余基因型以及其他致病酵母菌均为阴性.序列分型显示,在扩增片段的72、79和104 bp处存在3个多态性位点,可用于区分vgⅡ基因型中的不同亚型.结论 该研究建立的特异性pcr扩增方法可快速、准确地鉴定格特隐球菌vgⅡ基因型,对扩增片段的序列分型可初步筛查高致病性的vgⅡa亚型. abstract： objective to establish a pcr method for rapid identification and sequence typing of vg Ⅱ allele of the intergenic spacer region (igs) of cryptococcus gattii.methods since igs1 was of high sequence variation,multiple alignments were conducted by clustalx 2 in igs1 of cryptococcus gattii and cryptococcus neoformans,and then primer sets specific to genotype vg Ⅱ was designed for pcr analysis.the specificity of the primer pair was detected by amplification of the other genotypes in cryptococcus gattii,cryptococcus neoformans,and other pathogenic yeasts.the amplified fragments from vg Ⅱ genotype were sequenced and subtyped.results using the pcr analysis developed in this study,all vg Ⅱ genotype strains tested were amplified,whereas no amplification was obtained from other genotypes or yeast species involved herein.three polymorphic nucleotide sites at 72,79 and 104 bp in the fragment amplified could be used to distinguish sub-genotypes within vg Ⅱ genotype.conclusions the pcr analysis developed in this study can be used for rapid identification of genotype vg Ⅱ of cryptococcus gattii.the sequence typing based on the amplified fragment from igs1 may be performed for screening the highly virulent sub-genotype vgⅡ a.     

颅内感染患者脑脊液病原菌分布及耐药性分析

目的分析颅内感染患者脑脊液病原菌分布及其耐药性的特点。方法收集2009年1月至2019年12月本院送检的脑脊液标本328份,根据外伤史分脑外伤组与非脑外伤组,分析两组病原菌的分布及耐药性。结果脑外伤组中,分离出病原菌38株,其中革兰阳性球菌15株,革兰阴性杆菌23株;非脑外伤组中,分离出病原菌24株,其中革兰阳性球菌18株,革兰阴性杆菌6株。革兰阴性杆菌前六种常用体外药物敏感试验显示:阿米卡星总敏感率最高,为87.4%;其次为环丙沙星,总敏感率83.3%。革兰阳性杆菌前六种常用体外药物敏感试验显示:万古霉素总敏感率为100.0%;其次为米诺环素,总敏感率86.7%。结论脑外伤颅内感染患者与非脑外伤颅内感染患者的脑脊液病原菌构成不同,脑外伤颅内感染患者常见革兰阴性杆菌感染,非脑外伤颅内感染患者常见革兰阳性球菌感染。随着病原菌不同,抗生素敏感率也有所差异。     

Bacterial meningitis in HIV patient: think about co-infections!

The authors report the case of an African 34-year-old patient who was admitted to the intensive care unit for bacterial meningitis due to Streptococcus pneumoniae. A meningeal co-infection due to Cryptococcal neoformans was found the 3rd day in an HIV infection context. Cryptococcus neoformans detection in cerebrospinal fluid, using the India-ink stain, has a low sensibility which imposes the search of cryptococcal antigen and the culture of cerebrospinal fluid. These last two exams have a sensibility of at least 90%.     

二代测序技术应用于脑脊液检测在结核性脑膜炎中的早期诊断价值

目的评价二代测序技术应用于脑脊液检测在结核性脑膜炎（TBM）患者中的早期诊断价值。 方法前瞻性纳入2018年2月2日至2018年8月2日于山东省胸科医院就诊的临床怀疑TBM的患者共50例,并跟踪随访其诊疗结局。送检脑脊液标本均进行二代测序,测序所得原始序列与病原微生物数据库进行对比得到最终结果。二代测序结果以检测到结核分枝杆菌复合群唯一比对序列为阳性,未检测到唯一比对序列为阴性。以符合脑脊液结核分枝杆菌培养阳性、涂片阳性、Xpert MTB/RIF检测阳性及结核分枝杆菌核酸检测阳性等4项中至少1项即为确诊TBM患者;临床可疑TBM且抗结核治疗有效为临床诊断患者;有其他病原学依据或临床排除TBM者为非TBM患者。分析二代测序在TBM早期诊断中的敏感性和特异度。 结果确诊为TBM患者22例中Xpert MTB/RIF检测阳性13例,培养阳性6例,结核分枝杆菌核酸PCR检测阳性5例,临床诊断为TBM患者12例,非TBM患者16例。在确诊及临床诊断患者中,二代测序技术检测到结核分枝杆菌复合群系列20例,敏感性为58.8%（20/34）,特异度为100%（16/16）。在确诊患者中,二代测序的敏感性为63.6%（14/22）;在同步进行结核分枝杆菌培养、Xpert MTB/RIF检测与二代测序的50例标本中,以临床诊断为标准,3种方法的特异度均为100%（16/16）;传统方法、Xpert MTB/RIF检测及二代测序的敏感性分别为29.4%（10/34）、38.2（13/24）和58.8（20/34）,前两种检测方法与二代测序敏感性差异均有统计学意义（McNemar检验：χ² = 8.333、P = 0.013,χ² = 8.333、P = 0.065）。传统方法与二代测序联合检测的敏感性高达82.4%（28/34）。 结论二代测序技术能够较快速地检测脑脊液中的结核分枝杆菌复合群,且其敏感性和特异度均较高,可作为TBM的早期诊断指标。二代测序联合传统检测方法可提高检出率。     

Enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of mycobacterial antigens in the cerebrospinal fluid in tuberculous meningitis

Fifty-three cerebrospinal fluid specimens from meningitis patients were investigated by enzyme-linked immunosorbent assay for detection of mycobacterial antigens. After heating at 56 degrees C for 1 hour to eliminate nonspecific interference, all 22 tuberculous meningitis (TBM) specimens had an optical density of greater than 0.05 (sensitivity 100%). Six out of 31 non-TBM cases gave false-positive results (specificity 81%).     

脑脊髓液中腺苷脱氨酶活性对结核性脑膜炎诊断价值的临床研究

目的 探讨脑脊髓液中腺苷脱氨酶（CSF-ADA）活性对结核性脑膜炎的诊断价值及在病程中的动态变化.方法 选择160例患者纳入本研究,76例结核性脑膜炎为病例组;84例非结核性脑膜炎为对照组,其中细菌性脑膜炎36例,病毒性脑膜炎30例,隐球菌性脑膜炎18例.每例患者均于治疗前抽取CSF,采用酶耦联Trinder法测定CSF-ADA活性,结果以（-x）±s表示,组间差异使用Mann-Whitney U检验.47例结核性脑膜炎患者于抗结核治疗后2周和6周时再次检测CSF-ADA,治疗前后差异使用配对t检验.结果 结核性脑膜炎组CSF-ADA活性为（12.9±6.4）U/L,非结核性脑膜炎组为（6.0±4.1）U/L,两组比较差异有统计学意义（U=7.860,P＜0.05）.取CSF-ADA≥9 U/L作为临界值时鉴别结核性脑膜炎与非结核性脑膜炎价值最高,灵敏度为84.21%,特异度为83.33%.随着患者病情好转,CSF-ADA活性逐渐降低.结论 CSF-ADA活性≥9 U/L可作为诊断结核性脑膜炎的一项辅助诊断指标,抗结核治疗后CSF-ADA活性可作为疗效判断的参考指标.     

Rapid specific and visible detection of porcine circovirus type 3 using loop‐mediated isothermal amplification (LAMP)

In this study, a rapid and specific assay for the detection of porcine circovirus type 3 (PCV 3) was established using loop‐mediated isothermal amplification (LAMP ). Four primers were specifically designed to amplify PCV 3. The LAMP assay was effectively optimized to amplify PCV 3 by water bath at 60°C for 60 min. The detection limit was approximately 1 × 10¹ copy in this LAMP assay. Compared to porcine circovirus type 2 (PCV 2), both gE and gD genes of pseudorabies virus (PRV ) and porcine parvovirus (PPV ), the LAMP assay showed a high specific detection of PCV 3. A visible detection method was developed using SYBR Green I to recognize the results rapidly. Based on the detection of 20 clinical tissue samples, the LAMP assay was more practical and convenient than classical PCR due to its simplicity, high sensitivity, rapidity, specificity, visibility and cost efficiency.     

64例结核性脑膜炎患者的预后及相关因素分析

目的：探讨影响结核性脑膜炎预后的独立危险因素。方法回顾性分析2009年1月至2012年1月本院收治的64例结核性脑膜炎患者的临床资料,以患者一般临床指标、临床表现和脑脊液化验指标等为研究参数,将患者分为好转组和预后不良组（在院死亡和自动出院）,对两组患者参数进行比较采用非条件Logistic回归模型进行分析,确定影响结核性脑膜炎预后的独立危险因素。结果结核性脑膜炎的预后与脑脊液中葡萄糖含量和脑脊液压力有关,与其他因素无关。结论脑脊液压力和葡萄糖含量是结核性脑膜炎预后的主要相关因素。     

Development and Application of a Loop‐mediated Isothermal Amplification Assay for Rapid Detection of Borrelia burgdorferi s. l. in Ticks

A loop‐mediated isothermal amplification (LAMP) assay was developed to detect Borrelia burgdorferi s. l. in ticks, which is a pathogen that causes Lyme disease. Cross‐reactions with Chlamydia psittaci, Mycoplasma mycoides subsp. capri and some tick‐borne pathogens were excluded. Analytical sensitivity of LAMP showed its detection limit was from 0.02 to 0.2 pg of DNA in detection of the reference samples at 65°C for 40 min. The performance of LAMP was assessed by testing 110 samples from susceptible tick species and comparing the results with conventional and nested PCR tests previously described. The results demonstrated that LAMP was significantly more sensitive than the conventional PCR (32.7% versus 15.5%, P < 0.05) and slightly more sensitive, although not significantly so, than nested PCR (32.7% versus 26.4%, P > 0.05). The assay was used to analyse a total of 1052 ticks collected from eight provinces in China. The results showed that the infection rates of B. burgdorferi s. l. varied from 12.5% to 88.9% across the different geographical sites. Selected positive samples were subjected to sequencing and sequence analysis for conformation of the accuracy of the assay. Here we report a highly sensitive, specific and easy diagnostic assay based on LAMP technology. These data indicate that LAMP is a useful approach for detecting B. burgdorferi s. l. in field‐collected ticks and has the potential as an alternative tool for the ecological and epidemiological surveillance of Lyme disease.     

环介导等温扩增法检测血浆游离DD3mRNA在前列腺癌诊断中的价值

目的：采用环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技术进行前列腺癌（PCa）特异基因DD3检测,探讨其诊断PCa的可行性.方法：选择血清PSA异常者60例,行前列腺穿刺活检的同时留取血标本;另留取15例正常男性血进行DD3检测,将DD3检测结果和前列腺病理检查结果进行比较,探讨血DD3mRNA在PCa诊断中的临床应用价值.结果：60例血清PSA异常者中,27例病理检查诊断为PCa,这些患者均检测到DD3表达,33例前列腺增生患者中有1例DD3阳性表达,15例正常对照组均未见DD3阳性表达.结论：LAMP法检测DD3与病理检测具有极高的一致性,方法简单、快速,可大大减少不必要的前列腺穿刺活检,对PCa的诊断具有重要的临床指导价值.     

脑脊液降钙素原及乳酸脱氢酶动态测定在小儿化脓性脑膜炎中诊疗的应用

目的研究化脓性脑膜炎患儿的脑脊液中降钙素原及乳酸脱氢酶浓度的动态变化。方法选取化脓性脑膜炎患者作为观察组,健康者为对照组,每组患者各20例,脑脊液乳酸脱氢酶（LDH）检测使用强生VITROS 350全自动干化学生化分析仪进行。降钙素原（PCT）检测使用梅里埃Mini VIDAS全自动免疫分析仪进行检测。结果与对照组患儿进行比较,观察组脑脊液降钙素原及乳酸脱氢酶水平均显著升高（t=2.869,P=0.007;t=2.284,P=0.018）。经有效治疗72 h后,患儿脑脊液降钙素原及乳酸脱氢酶水平显著下降。化脓性脑膜炎患儿PCT与LDH水平呈正相关关系（r=0.453,P=0.0455）。结论脑脊液中降钙素原及乳酸脱氢酶的浓度联合检测有助于化脓性脑膜炎的诊断,也助于病情的动态观察及疗效评估。