液相肽图法推断聚乙二醇化重组人生长激素的聚乙二醇修饰位点研究

 目的 利用液相肽图法对聚乙二醇（PEG）化重组人生长激素(rhGC)（PEG-rhGH）的聚乙二醇修饰位点进行测定。方法 通过优化酶切条件,建立肽段分离度高、信息完整的液相肽图方法。继而通过引入高分辨率质谱,对重组人生长激素的液相肽图准确定性。最后通过比较发生改变的修饰前后的肽段,推断聚乙二醇的修饰位点。结果 3个厂家的聚乙二醇化重组人生长激素中发生较为明显修饰的肽段有5个,分别为T1（N-end）、T4（lys38）、T13（lys140）、T14（lys145）及T15（lys158）。结论液相肽图法可用于对结构复杂、不均一性较高的多位点异构体聚乙二醇修饰药物的位点测定。
     

聚乙二醇化重组人生长激素的免疫原性及药动学研究

 目的研究聚乙二醇化重组人生长激素的免疫原性及药动学。方法用rhGH及其两种mPEG修饰物PGH₁、PGH₂免疫家兔,检测兔血清中的抗体滴度;对家兔单次背部皮下给药,定时取血清,建立rhGH及其修饰物的ELISA双抗夹心检测法,检测血清中的药物浓度,并计算药动学参数。结果经过mPEG修饰后,明显降低了rhGH的抗体滴度,缩短了抗体持续时间。在药动学研究中发现,其t_1/2β从3.1h显著延长到PGH₁的9.9h和PGH₂的22.5h,其AUC也有很大的提高。结论mPEG修饰后可明显降低rhGH的免疫原性,延长药物在动物体内的半衰期,降低清除率,改善其药动学性质。且改善程度随mPEG相对分子质量的增大而增强。     

半乳糖化重组人生长激素的制备及其肝靶向性

 目的:将重组人生长激素(rhGH)进行半乳糖化修饰,制得半乳糖化重组人生长激素(Gal-rhGH),并研究其在小鼠体内的分布特征。方法:以D-半乳糖为原料,制得双功能试剂 2-亚氨基-2-甲氧基乙基-1-硫代-β-D-半乳吡喃糖苷(IME),利用IME与重组人生长激素的碱性氨基酸偶合,制得Gal-rhGH。以¹²⁵I标记Gal-rhGH和rhGH,iv,比较其在小鼠体内的组织分布。结果:差热分析(DTA)证实Gal-rhGH是共价偶联物,平均糖密度为5。Iv后,¹²⁵I-rhGH-Gal浓集于肝脏,最大分布量是¹²⁵I-rhGH的2.3倍;在胃脏,最大分布仅为¹²⁵I-rhGH的43%。Gal-rhGH在血、肝、肾、心、肺、脾、肠中全组织相对放射性分布的ACU分别是rhGH的60%,1.55倍,58%,31%,95%,43%,67%。结论：成功地制备了化学偶联物Gal-rhGH,小鼠体内分布表明其具有明显的肝靶向性。     

聚乙醇化重组人生长激素的免疫原性及药动学研究

目的：研究聚乙二醇化重组人生长激素的免疫原性及药动学。方法：用rhGH及其两种mPEG修饰物PGH1、PGH2免疫家兔，检测免血清中的抗体滴度；对家兔单次背部皮下给药，定时取血清，建立rhGH及其修饰物的ELISA双抗夹心检测法，检测血清中的药物浓度，并计算药动学参数。结果：经过mPEG修饰后，明显降低了rhGH的抗体滴度，缩短了抗体持续时间。在药动学研究中发现，其t1／28从3.1h显著延长到PGHI的9.9h和PGH2的22.5h，其AUC也有很大的提高。结论：mPEG修饰后可明显降低rhGH的免疫原性，延长药物在动物体内的半衰期，降低清除率，改善其药动学性质。且改善程度随mPEG相对分子质量的增大而增强。     

生长激素联合续断对去垂体幼龄大鼠生长及骨代谢的影响

目的探究生长激素（GH）联合中药酒制续断对去垂体幼龄大鼠干预后的促生长作用及骨矿含量（BMC）的影响。方法采用经颅咽去垂体术建立生长激素缺乏大鼠模型,筛选合格动物分为假手术组（正常组,15只）、阴性对照组（模型组,13只）、GH干预组（GH组,13只）、GH联合中药续断组（联合组,12只）,GH组和联合组每日相同时间给予GH（0.25 mg/kg）颈部皮下注射,其他组注射等量生理盐水,联合组同时给予续断煎剂（0.7 mL/100 g）灌胃,其他组灌胃等量生理盐水,干预期间测量体重、尾长、身长,干预14天后采血,取股骨、胫骨,检测GH、类胰岛素生长因子I（IGF-1）、碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OC）等水平,测量胫骨骨骺板宽度,用双能X线测量同侧股骨的骨密度（BMD）及BMC。结果干预2周后,与模型组比较,用药组体重、身长、胫骨长、股骨长、骨骺板宽度值、GH、IGF-1、ALP、OC升高,差异有统计学意义（P〈0.01）,尾长值增高,但差异无统计学意义（P〉0.05）,两组间以上指标比较差异无统计学意义（P〉0.05）;与模型组比较,联合组BMD值升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。与模型组比较,用药组BMC值升高（P〈0.01）,联合组最高,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 GH联合中药酒制续断对促生长作用不明显,但能提高BMD和BMC,改善骨代谢。     

四君子汤、推拿联合重组人生长激素对矮小症患儿生长发育的影响

目的观察四君子汤、推拿联合重组人生长激素(rhGH)对矮小症(SS)患儿生长发育的影响。方法将我院78例SS患儿随机分为观察组与对照组各39例。观察组采用四君子汤、推拿联合rh GH治疗,对照组采用rhGH治疗。治疗12个月后比较两组临床指标、血清饥饿激素(Ghrelin)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的水平、不良反应发生情况。结果治疗后,两组身高、体质量、骨龄、生长速度与治疗前相比增加,观察组身高、体质量、骨龄、生长速度高于对照组(P<0.05);两组血清Ghrelin与治疗前相比降低,IGF-1、IGFBP-3与治疗前相比增高,观察组血清Ghrelin低于对照组,IGF-1、IGFBP-3高于对照组(P<0.05);观察组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论四君子汤、推拿联合rh GH显著促进SS患儿的生长发育,能改善血清Ghrelin、IGF-1、IGFBP-3的水平,不良反应较少。     

酶联免疫法研究注射用聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子的临床药动学

目的 研究癌症患者化疗后单次sc不同剂量的注射用聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-rhG-CSF)的药动学.方法 采用酶联免疫分析检测(ELISA)法测定癌症患者se PEG-rhG-CSF后的血药浓度,实验数据用3P97药动程序拟合分析并计算药动学参数.结果 癌症患者化疗后48 h单次sc PEG-rhG-CSF 30、60、100、200μg/kg,每组4例病人的平均消除半衰期(t1-2ke)差异不大,分别为(47.8±7.3)、(49.8±6.9)、(45.7±9.6)和(44.6±6.3)h;平均达峰时间(tmax)分别为(21.0±6.0)、(24.0±0)、(21.0±6.0)、(42.0±12.0)h;平均清除率(CL)分别为(5.44±0.86)、(5.06±0.69)、(3.36±0.35)、(3.31±1.20)mL/(kg·h),CL有随剂量增加而下降的趋势;平均达峰浓度(Cmax)分别为(54.0±10.8)、(129.0±20.9)、(344.9±73.4)、(828.9±245.6)ng/mL;平均药时曲线下面积(AUC0～432h)分别为(5 714±786)、(12 781±1 745)、(32 714±6 486)、(85 142±26 186)h·ng/mL;Cmax和AUC与剂量均呈正相关.结论 PEG-rhG-CSF的较长半衰期和较慢清除率(与rhG-CSF相比)保证了该药在体内的长效特性.     

健脾助长汤联合重组人生长激素治疗特发性矮小症的疗效及对患儿血清IGF-1、Ghrelin的影响

目的：探讨健脾助长汤联合重组人生长激素治疗特发性矮小症的疗效及对患儿血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、生长激素释放肽（Ghrelin）的影响。方法：选取2021年3—9月本院收治的特发性矮小症患儿84例,随机分为对照组和观察组,各42例。对照组采用重组人生长激素治疗,观察组联合健脾助长汤治疗。比较两组治疗前、后生长发育指标,血清IGF-1、Ghrelin水平及不良反应发生率。结果：治疗6个月,观察组身高、年生长速度及骨龄分别为（129.66±7.89）cm、（9.76±2.65）cm/年、（7.85±0.72）岁,均高于对照组的（125.11±7.63）cm、（8.33±2.51）cm/年、（7.33±0.67）岁（t=2.687、2.539,3.426,P<0.05）;治疗1年,观察组血清IGF-1(316.43±52.45)μg/L,高于对照组的（275.30±47.58）ng/mL(t=3.764,P<0.05),Ghrelin(3.67±0.51)ng/mL,低于对照组的（4.55±0.63）ng/mL(t=7.036,P<0.05);两组不良反应发生率...     

调运枢纽推拿术联合重组人生长激素对矮小症患儿生长发育的影响

目的:探讨基于经络腧穴理论的"调运枢纽"推拿术联合重组人生长激素治疗对矮小症患儿的生长发育影响的研究。方法:160例矮小症患儿作为研究对象,随机分为观察组80例和对照组80例。对照组采用药物治疗,观察组接受基于经络腧穴理论的"调运枢纽"推拿术治疗。比较治疗后生长指标及甲状腺功能,检测并比较血清胰岛素样生长因子(IGF-1)、血清胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平,观察不良反应发生情况。结果:与对照组比,观察组患儿体重明显增加,身高增加差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患儿身高标准差及生长速率均有增高,观察组3个月后较对照组身高SDS改变明显,生长速率显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后血清IGF-1均有增加,观察组患儿血清IGF-1、IGFBP-3水平高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者不良反应发生情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组仅一例患儿出现轻微眼睑浮肿,1周后自行消失。结论:基于经络腧穴理论的"调运枢纽"推拿术联合药物治疗矮小症患儿临床效果较好。     

重组人生长激素对癫痫持续状态大鼠神经元凋亡及XIAP、Caspase-3表达的影响

目的探讨重组人生长激素对大鼠在癫痫持续状态（SE）后海马神经元凋亡的影响及其可能作用机制。方法将大鼠随机分成对照组、模型组和重组人生长激素组。采用免疫组化法对氯化锂-毛果芸香碱（匹罗卡品）诱发癫痫大鼠模型脑内XIAP、Caspase-3及TUNEL阳性细胞的表达进行测定。结果模型组海马区TUNEL、XIAP、Caspase-3较对照组明显增多（P〈0.05）;重组人生长激素组TUNEL、Caspase-3较模型组明显减少（P〈0.05）,而XIAP较模型组显著增加（P〈0.05）。结论重组人生长激素可能通过促进XIAP生成进而抑制Caspase-3表达,从而起到保护神经元的作用。     

重组人生长激素聚乙交酯-丙交酯微球体外释放度研究

 目的 研究重组人生长激素(rhGH)聚乙交酯-丙交酯共聚物微球体外释放规律,并考察附加剂对药物释放的影响。方法 以分子排阻色谱法测定34 d释放液中rhGH含量。考察①不同有机溶剂;②不同比例PLGA;③外水相中加入缓冲盐;④内水相中加入乳化剂;⑤rhGH投入量不同对微球释放的影响。结果制备载生长激素聚乙交酯-丙交酯(PLCA)微球时,采用醋酸乙酯或二氯甲烷做溶剂对微球中药物释放没有显著性影响;采用不同比例PLGA对微球释放有显著性影响,其中以乙交酯:丙交酯=75:25比例的PLGA累积释放量最高;外水相中加入缓冲盐,内水相中加入乳化剂使累积释药量降低;随着生长激素投药量的增加,累积释药量增加。结论 重组人生长激素聚乙交酯-丙交酯共聚物微球体外释放有显著的长效作用,释放速度受到前面5种因素的影响。     

重组人生长激素联合早期胃肠内营养在有创-无创序贯通气治疗的慢性阻塞性肺疾病并呼吸衰竭病人中的应用

目的：观察重组人生长激素联合早期胃肠内营养支持在有创-无创序贯通气治疗的慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并呼吸衰竭患者中的作用。方法：①慢性阻塞性肺疾病急性发作合并II型呼吸衰竭患者68例入选。患者均知情同意。将患者随机分为2组：重组人生长激素联用全胃肠内营养（EEN＋rhGH）组35例,全胃肠内营养（EEN）组33例。②所有患者入ICU后均经口或经鼻气管插管和放置鼻胃管。均接受有创-无创序贯通气、抗感染、祛痰、平喘、强化血糖控制等治疗,入ICU当日开始鼻饲能全力。治疗组在一般治疗的同时给予重组人生长激素8u/天。③治疗1周时,分别测体重、上臂肌围、血清白蛋白、外周血淋巴细胞计数,总结一周内每日平均血糖水平与胰岛素用量;出ICU时总结住ICU天数、有创机械通气时间。④组内及组间计量资料差异比较分别采用配对t检验和独立样本t检验,计数资料比较进行卡方检验。结果：68例患者均进入结果分析。①营养指标：EEN组治疗后体重、上臂肌围、血清白蛋白、外周血淋巴细胞计数差别无显著性（P〉0.05）。EEN＋rhGH组治疗后体重、上臂肌围、血清白蛋白、外周血淋巴细胞计数均明显高于治疗前（P〈0.05）。治疗后两组间外周血淋巴细胞计数有显著差异。②住ICU天数和有创呼吸机带机时间：EEN＋rhGH组明显短于EEN组（P〈0.05）。③两组胰岛素使用量差异具有显著性,血糖水平组间差异无显著性。结论：短期使用重组人生长激素配合早期胃肠内营养对于接受有创-无创序贯通气的慢性阻塞性肺疾病并II型呼吸衰竭患者,可望提高其体重、营养水平和细胞免疫功能,缩短有创机械通气时间和住ICU时间;短期生长激素的使用在强化血糖控制基础上对血糖影响不大,但会增加胰岛素用量。     

Yeast hydrolysate induces longitudinal bone growth and growth hormone release in rats

This study investigated the growth promoting effects of yeast extract (YH) fed to Sprague‐Dawley male rats (3 weeks old) for 4 weeks. The negative (N)‐control and positive (P)‐control groups were given a daily oral administration of saline and foremilk (1 g/kg of BW), respectively, and the YH‐1 and YH‐2 groups were given daily administrations of YH (0.5 and 1 g/kg of BW, respectively). After 4 weeks, the YH‐1, YH‐2 and P‐control groups showed significant differences in the body weight gain compared with the N‐control group (p < 0.05). The YH‐1 and YH‐2 groups also had significantly different tibial bone growths (0.47 and 0.49 mm/day, respectively) and femur bone growths (0.52 and 0.53 mm/day, respectively) compared with the N‐control group (0.37 mm/day of tibial growth and 0.42 mm/day of femur growth) (p < 0.05). The YH‐1 and YH‐2 groups had significantly different growth plate (proximal epiphysis) height increments (0.62 and 0.56 mm, respectively) compared with the N‐control group (0.17 mm) (p < 0.05). Lastly, the YH‐1 and YH‐2 groups presented different growth hormone (GH) levels (1.77 and 2.10 ng/mL, respectively) than the N‐control group (0.82 ng/mL) (p < 0.05). YH administration increased longitudinal bone growth and GH secretion in rats. Consequently, YH may offer an improved ability to treat GH deficiency‐related disorders. Copyright © 2008 John Wiley & Sons, Ltd.     

国产与进口重组人胰岛素注射液Beagle犬皮下注射的生物等效性研究

目的以美国礼来公司重组人胰岛素注射液（优泌林R,Humulin R）为对照品,评价国产重组人胰岛素注射液（Insulin R）的相对生物利用度和生物等效性。方法采用自身随机交叉给药方案,12只健康Beagle犬分别sc同剂量Insulin R和Humulin R,按设计采集6 h内动态血标本。采用罗氏血糖仪与检测血药浓度同步测定动物血糖水平;放射免疫分析（RIA）法检测血药浓度;试验数据采用DAS 3.0药动学程序拟合计算参数,并进行生物等效性分析。结果 Beagle犬自身交叉sc Insulin R和Humulin R 0.5 U/kg后的血浆最低葡萄糖浓度（Cmin）分别为（1.6±0.4）、（1.6±0.2）mmol/L;达到最低浓度所需时间（tmin）分别为（1.0±0.5）、（1.1±0.6）h。Insulin R和Humulin R的主要药动学参数均值分别为：达峰时间（tmax）为（0.43±0.21）、（0.42±0.09）h;峰浓度（Cmax）为（203.2±63.3）、（193.5±63.1）μU/m L;药时曲线下面积（AUC0-6 h）为（281.2±47.5）、（266.6±62.5）μU/（m L·h）;受试药Insulin R相对于对照药Humulin R的相对生物利用度为（109.4±25.5）%。结论两种重组人胰岛素注射剂在健康Beagle犬体内具有生物等效性。     

人甲状旁腺激素片断1-34对去卵巢大鼠骨量和骨生物力学特性的作用

 目的探讨人甲状旁腺激素1-34[human parathyroid hormone(1-34),hPTH_1-34]对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用。方法 分别予去卵巢6周的Wister大鼠hPTH_1-34(40μg·kg^-1·d^-1,sc每周5次)或生理盐水干预8周,假手术大鼠不予治疗。留取 腰椎1-6(L_1-6)、右侧股骨及血、尿标本分别进行骨密度、骨生物力学和生化指标的测定。结果 hPTH_1-34组L_1-6、股骨远端和股 骨干骨密度值明显高于去卵巢对照组,且L_1-6和股骨干的骨密度值与假手术组无差异;凹入试验中hPTH_1-34组Can．Load和 Can．Stiff明显高于去卵巢对照组,和假手术组无差异;三点弯曲实验中hPTH_1-34组E．Modulus值与对照组无统计学差异;hPTH_1-34 组血ALP和UDpd／Cr水平低于去卵巢对照组,但高于假手术组。结论 hPTH_1-34可以明显增加去卵巢骨质疏松大鼠的骨量和 骨生物力学特性。     

葛根素对代谢综合征-高血压大鼠胰岛素抵抗、高血压的干预作用及机制研究

目的观察葛根素（puerarin,Pue）对代谢综合征（MetS）-高血压大鼠胰岛素敏感性、血压、肾素-血管紧张素系统以及糖脂代谢的作用。方法：SD大鼠,♀♂各半,除空白对照组食用标准饲料外,其余动物随机喂饲富含高盐（8%）、高脂肪（25%）和高蔗糖（10%）饲料,连续8周;当造模动物出现高血压、糖耐量减退,即建成MetS-高血压病理模型;然后将大鼠随机分为模型对照、模型咪达普利（imidapril,Imid）7mg·kg-1和Pue300,150,75mg·kg-1三个剂量组;分别灌胃给药或蒸馏水,qd×4周后,测定大鼠血压、空腹血糖（FBG）和口服糖耐量试验2小时血糖（OGTT-2hBG）及血浆胰岛素（Fins）、血糖（FPG）,并计算胰岛素敏感性（ISI）以及血清甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、肿瘤坏死因子（TNF）-α、内皮素、肾素和血管紧张索含量。结果：与正常对照组比较,MetS大鼠血压升高、FBG和OGTF-2hBG,FPG和Fins含量增高,ISI减弱,血清TGTC,TNF-Ⅱ和肾素、血管紧张素含量增高（P〈0．05或P〈0．01）。经Pue3（Ihng·kg。或Imid处理MetS大鼠后,血压降低（尸〈0．01）,FPGFBGOGTr．2hBG降低和IGT改善（P〈0．05或P〈0．01）,纠正高胰岛素血症（尸〈O．05或P〈0．01）,增强ISI（P〈O．01）,降低TG和TC含量（P〈0．05或P〈0．01）,下调内皮素、肾素、血管紧张素和TNF—a含量（P〈O05或P〈0．01）,上述观察资料,差异均有显著性;而Pue150mg·kg^-1组,对Fins、TNF—α含量和ISI作用,差异则未见显著性（P〉0．05）;Pue75mg·kg^-1组对上述各指标,差异均未见显著性（P〉0．05）。结论：Pue或Imid对MetS大鼠,能对抗胰岛素抵抗、增强胰岛素敏感性、纠正高胰岛素血症,降低血糖和血脂,拮抗内皮素、肾素．血管紧张素系统,降低血压。葛根素以上效应呈量效关系。