骨形成发生蛋白在兔关节软骨全层缺损修复中的作用

关节软骨的修复能力极为有限 ,目前尚无理想的方法促进其再生或修复。近年来用生长因子加速关节软骨修复或促进关节软骨再生越来越受到重视 ,骨形成发生蛋白 (ＢＭＰ)是个很有希望的生长因子。目前认为 ,成骨细胞与成软骨细胞是同源的[1 ] 。笔者研究发现 ,ＢＭＰ可促进骨髓基质细胞 (ｍａｒｒｏｗｓｅｒｏｍａｌｃｅｌｌ,ＭＳＣ)向骨形成细胞方向分化。据此 ,笔者用ＢＭＰ ＤＢＭ(脱钙骨基质 )修复兔全层关节软骨缺损 ,最长观察 48周 ,以评价ＢＭＰ在关节软骨损伤修复中的作用。一、材料与方法1.ＤＢＭ制备 :选取新鲜牛股骨上端松质骨 ,截…     

人骨形态发生蛋白-7在昆虫细胞中的表达

骨形态发生蛋白 7(ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ 7,ＢＭＰ 7)又称成骨蛋白 1(ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｐｒｏｔｅｉｎ 1,ＯＰ 1)是骨形态发生蛋白家族的成员 ,具有广泛的生理功能 ,尤其在诱导骨组织和肾组织形成方面起重要作用。至今已有大量报道证实ＢＭＰ 7有助于骨及软骨组织缺损的修复 ,显示了良好的临床应用前景。此外 ,ＢＭＰ 7能减轻大鼠急性缺血性肾衰竭的严重程度 ,将来有可能用于肾衰的治疗。人ＢＭＰ 7全长ｃＤＮＡ编码 431个氨基酸 ,分为信号肽段、前体肽段和成熟肽段。成熟肽具 7个Ｃｙｓ,形成三个链内二硫…     

地塞米松、β─甘油磷酸钠和维生素C对猪骨形态发生蛋白体外诱导小鼠肌组织成骨的影响

目的：研究地塞米松（Ｄｅｘ）、β－甘油磷酸钠（β－ＧＰ）和维生素Ｃ（ＶｉｔＣ）对猪骨形态发生蛋白（ｐＢＭＰ）体外诱导小鼠肌组织成骨的影响．方法：借助组织培养、组织学和组织化学技术，动态观察ｐＢＭＰ体外诱导小鼠骨骼肌成骨过程．结果：改良体系下，软骨形成率为８１．２％，钙化率为５０．０％；常规体系下，软骨形成率为４４．８％，钙化率为６．９％，均明显低于改良体系组．结论：含Ｄｅｘ、β－ＧＰ和ＶｉｔＣ的改良体系可使ｐＢＭＰ体外诱导肌组织成骨加速，并有助于钙化和软骨内骨化     

骨形态发生蛋白和转化生长因子—β及碱性成纤维细胞生长因？…

观察骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）、转化生长因子－β、碱性成纤维细胞生长因子在骨折修复中的表达及分布情况,进而探讨其作用机制。方法以成年雄性新西兰兔为研究对象,制作桡骨骨折愈合模型。伤后不同时期处死取材,分别进行这和ＢＭＰ、ＴＧＦ－β和ｂＦＧＦ免疫组化染色观察。结果（１）伤后３ｄ开始形成原始骨痂。１周时肉芽组织中的间质细胞开始分化为软骨细胞,软骨形成后再进行软骨内化骨。４周时形成连接骨折端的桥接骨痂。２     

骨形成蛋白复合生物活性陶瓷修复骨缺损时血管的变化

目的研究骨形成蛋白（ＢＭＰ）复合生物活性陶瓷（ＢＧＣ）修复骨缺损时血管的变化。方法采用血管铸型方法，取大白鼠８只，随机分为４组。在麻醉下造成股骨中段１ｃｍ×０．５ｃｍ缺损，然后植入ＢＭＰ－ＢＧＣ复合材料。术后不同时相分别处死动物，观察缺损区微细血管的变化。结果植入ＢＭＰ－ＢＧＣ复合物后１周，在颗粒之间可见血管芽和新生血管形成。植入后２周，更多的血管形成，并构成血管网。植入后３周，血管网仍可见，有些血管向ＢＧＣ颗粒孔中生长。术后４周，骨缺损已愈合。与对照组相比，在ＢＭＰ－ＢＧＣ植入组中，新生血管的数量在４个时间点上都比对照组多，新骨形成也明显较早。结论ＢＭＰ不仅可诱导间质细胞向成骨细胞分化，而且也可以刺激血管的形成。这些新生血管既为骨缺损的愈合带来营养物质，又为新骨形成提供了更多的靶细胞     

不同孔径钻孔术对兔关节软骨缺损修复的影响

目的：观察钻孔修复关节软骨缺损的过程，比较不同孔直径钻孔术对软骨缺损的修复效果．方法：用中国白兔２４只，在股骨关节面造成６ｍｍ×８ｍｍ全层软骨缺损，分别施行孔径１ｍｍ和１．５ｍｍ的钻孔术，术后４、８周取材，行组织学，光、电镜检查并进行评估．结果：（１）两组的优势修复组织均混有类透明软骨、幼稚软骨和纤维软骨，对照组为纤维组织．（２）修复组织厚度，１ｍｍ孔比１．５ｍｍ孔厚．（３）修复组织覆盖缺损的面积，两组间无显著性差异．结论：软骨下骨钻孔可修复关节软骨全层缺损，小孔比大孔修复效果好，非钻孔的缺损修复效果较差．     

骨形态发生蛋白对培养胎儿关节软骨细胞代谢的影响及意义

为了解骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）在关节软骨损伤与修复及异位化骨中的作用，本研究观察了部分纯化的牛骨形态发生蛋白（ｂＢＭＰ）和高度纯化的人骨形态发生蛋白（ｈＢＭＰ）对体外贴壁培养原代、反分化人胎儿关节软骨细胞及鼠３Ｔ３成纤维细胞ＤＮＡ、胶原和蛋白多糖合成的影响。结果发现：部分纯化的ｂＢＭＰ和高度纯化的ｈＢＭＰ均不促进原代人关节软骨细胞合成ＤＮＡ和胶原，并显著抑制其蛋白多糖的合成。部分纯化的ｂＢＭＰ对反分化关节软骨细胞和鼠３Ｔ３成纤维细胞的ＤＮＡ合成、胶原合成和蛋白多糖合成却有明显促进作用。因此，本研究认为，ＢＭＰ诱导下的关节软骨细胞不会发生反分化，而有可能进一步向肥大软骨细胞样细胞或成骨细胞样细胞方向分化，并可能使反分化的软骨细胞重新表达软骨细胞表型。     

IL1,TGFβ和BMP在骨性关节炎的关节软骨中的表达

采用免疫组织化学染色技术，检测白细胞介素１（ＩＬ１），转化生长因子β（ＴＧＦβ）和骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）在骨性关节炎的关书软骨中的表达。结果显示：（１）ＩＬ１与ＴＧＦβ在病损的关节软骨表浅层细胞中表达，ＴＧＦβ还在病损的关节软骨中由发生族集的软骨细胞表达。（２）在关节软骨病损达软骨下骨部位，ＢＭＰ，ＴＣＦβ和ＩＬ１在新生的软骨组织的一些细胞中表达。我们的结果提示，ＩＬ１，ＴＧＦβ和ＢＭＰ以自分泌和（或）旁分泌的形式，在骨性关节炎的病理过程中起重要作用，涉及关节软骨的病损及修复。     

地塞米松,β—甘油磷酸钠和维生素C对猪骨形态发生蛋白体外诱…

目的：研究地塞米松（Ｄｅｘ），β－甘油磷酸钠（β－ＧＰ）和维生素Ｃ（ＶｉｔＣ）对猪骨形态发生蛋白（ｂＢＭＰ）体外诱导小鼠肌组织成骨的影响。方法，借助组织培养，组织学和组织化学技术，动态观察ｐＢＭＰ体外诱导小鼠骨骼肌成骨过程，结果，改良体系下，软骨形成率为８１．２％和钙化率为５０．０％，常规体系下，软骨形成率为４４．８％和钙化率为６．９％均明显低于改良系组，结论：含Ｄｅｘ，β－ＧＰ和ＶｉｔＣ的改良体     

骨形成蛋白在颌骨骨折愈合过程中的表达及mRNA水平分析

目的：观察骨形成蛋白（ＢＭＰ）在骨折愈合过程中的基因表达及发挥作用方式．方法：在建立兔颌骨骨折愈合模型的基础上，用免疫组织化学及原位杂交的方法在骨折愈合的不同时间分别检测ＢＭＰ表达产物和ＢＭＰ２ｍＲＮＡ转录水平．结果：在骨折愈合早期由受创伤的骨基质释放的ＢＭＰ在骨膜及骨断端骨髓中的骨诱导中发挥着重要的作用；此外，受到诱导刺激的细胞在分化为具有成骨及成软骨能力的细胞的同时，也具有合成及分泌ＢＭＰ的能力，这种能力保证了正常骨组织的形成．结论：本实验结果进一步证实了ＢＭＰ骨诱导贯穿于骨折愈合整个过程，ＢＭＰ在骨折愈合中发挥着重要的作用     

带血管骨膜和同种脱钙骨基质联合移植与自体骨移植修复骨缺损的比较研究

目的了解带血管骨膜（ＶＰ）和同种脱钙骨基质（ＤＢＭ）联合移植替代自体骨移植修复大段骨缺损的可能性。方法以兔桡骨中央２５ｍｍ的大段骨缺损为模型，通过Ｘ线观察、Ｘ线平片骨缺损修复Ｌａｎｅ评分、组织学观察、骨组织形态计量分析和生物力学测试，比较术后４，８，１６周时ＶＰ＋ＤＢＭ联合移植与自体骨移植修复骨缺损的效果。结果术后４周ＶＰ＋ＤＢＭ联合移植及自体骨移植均已较好地完成了缺损的修复，而前者的Ｌａｎｅ评分、皮质骨密度、力学抗扭刚度均显著高于后者（Ｐ＜０．０５）。但术后８，１６周时两者之间已无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论ＶＰ＋ＤＢＭ联合移植早期修复兔桡骨大段骨缺损的效果好于自体骨移植。后期两种方法修复效果基本一致。ＶＰ＋ＤＢＭ联合移植后，两者之间建立了相互协同、相互促进的关系。     

带血管骨膜和同种脱钙骨基质联合移植与自体骨移植修复骨缺损 …

目的 了解带血管骨膜（ＶＰ）和同种脱钙骨基质（ＤＢＭ）联合移植替代自体骨移植修复大段骨缺损的可能性。方法 以兔桡骨中央２５ｍｍ的大段骨缺损为模型，通过Ｘ线观察、Ｘ线平片骨缺损修复Ｌａｎｅ评分、组织学观察、骨组织形态计量分析和生物力学测试，比较术后４，８，１６周时ＶＰ＋ＤＢＭ联合移植与自体骨移植修复骨缺损的效果。结果 术后４周ＶＰ＋ＤＢＭ联合移植及自体骨移植均已较好地完成了缺损的修复，而前者的Ｌａｎ     

骨折愈合过程中BMP2和TGFβ1的基因表达及分析

目的：探讨骨形成蛋白（ＢＭＰ）和转化生长因子β（ＴＧＦβ）在骨生长愈合中的组织细胞来源、作用方式及二者的关系．方法：建立颌骨骨折模型，利用原位杂交方法检测与骨组织关系较为密切的ＢＭＰ２和ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ在骨折愈合不同时期的表达．结果：处于分化状态的未分化间充质细胞内ＢＭＰ２ｍＲＮＡ的水平较高，处于功能活跃期的成骨细胞和软骨细胞内ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ的水平较高．ＢＭＰ２的基因表达水平在骨折愈合的膜内成骨阶段较高；ＴＧＦβ１的基因表达水平在骨折愈合的软骨形成期和软骨骨化阶段较高．结论：未分化间充质细胞与ＢＭＰ的合成有关，成骨细胞和软骨细胞与ＴＧＦβ的合成有关．ＢＭＰ在骨折愈合早期的骨诱导中发挥重要作用，使未分化间充质细胞向骨细胞系分化，而ＴＧＦβ则主要在骨折愈合后期调节成骨细胞和软骨细胞的增殖，并增强其合成基质的能力．     

异种脱钙骨基质,骨基质胶诱导成骨的研究

采用初生公牛长骨干制成异种脱钙骨基质（ＸＤＢＭ）和异种骨基质胶（ＸＢＭＧ），加ＤＳ－ＣａＳｏ４或ＣａＣｌ２＋Ｎａ２ＨＰｏ４＋ＫＨ２Ｐｏ４，分别移植至Ｗｉｓｔａｒ大鼠颅骨８ｍｍ直径圆形骨缺损区和双侧股四头肌穴内。经Ｘ线照片和组织学观察２０周，证实均可以发生诱导成骨，与对照组（ＸＤＢＭ或ＸＢＭＧ加生理盐水）比较差异显著（Ｐ〈０．０５）；其成骨方式为软骨内骨化，但成骨迁延时间较长且不够完善。作者认为：实     

聚乙醇酸负载同种异体软骨细胞移植修复兔关节软骨缺损

目的：应用聚乙醇酸（ＰＧＡ）负载的兔软骨细胞培养移植修复同种异体关节软骨缺损．方法：应用在生物体内可降解吸收、纤维状多孔态的ＰＧＡ作为支架行兔软骨细胞培养．培养１４天后，软骨细胞在ＰＧＡ提供的三维空间中大量分裂、增殖并合成大量软骨基质，形成ＰＧＡ－软骨细胞复合体，然后利用该复合体移植修复同种异体兔膝关节全层软骨缺损，对侧膝关节作对照．术后行大体、组织学、电镜动态观察及修复组织厚度测定．结果：ＰＧＡ在术后８周完全降解吸收，实验侧与对照侧修复组织的厚度有显著性差异（Ｐ＜０．０１）；术后１６周在实验侧可见典型的软骨组织，电镜下为成熟的软骨细胞，而对照侧为纤维组织修复．结论：应用ＰＧＡ－软骨细胞复合体移植，可修复同种异体的兔关节软骨缺损，为临床治疗关节软骨缺损奠定了基础．     

放射性核素显像在骨缺损修复研究中的应用

用ＳＰＥＣＴ检查骨缺损修复效果。４０只新西兰白兔均于两侧桡骨干造成１５ｃｍ缺损后分成４组，Ａ组植入２５ｍｇ骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）与纤维蛋白的复合物；Ｂ组植入２５ｍｇＢＭＰ；Ｃ组单纯植入纤维蛋白；Ｄ组不植入任何材料。术后不同时间进行骨骼显像，同时进行放射学和组织学检查。结果术后１周发现再生性骨盐沉积活动，以Ａ组最为活跃，Ｂ组其次，所揭示规律与组织学和放射学检查结果吻合。因此，ＳＰＥＣＴ和常规检查方法联合应用，可以更早、更全面地评价骨缺损修复的效果。     

局部注射DBM,BMG修复骨缺损的实验研究

实验选用Ｗｉｓｔａｒ大白鼠尺骨中段截骨造成骨缺损模型，骨缺损长度平均６．１ｍｍ。８１只大白鼠随机分为３组，每组２７只。术后２周各组分别于骨缺损部位注射脱钙骨基质（ＤＢＭ）、骨基质胶（ＢＭＧ）及明胶各５０ｍｇ的生理盐水混悬液。结果表明：ＤＢＭ、ＢＭＧ组注射２周，Ｘ线照片示骨缺损开始修复，ＢＭＧ组１２周完全修复，ＤＢＭ组１６周完全修复。新骨形成较其它报道略为提早。本实验未见免疫排斥反应。     

脱蛋白骨、骨形态发生蛋白和肿瘤坏死因子重组合的人工骨实验研究

在５０只兔的１００个颅骨缺损动物模型中分别植入：（１）牛骨形态发生蛋白（ｂＢＭＰ），牛脱蛋白骨（ｂＤＰＢ）和人重组肿瘤坏死因子α（ｒｈＴＮＦα）；（２）ｂＢＭＰ和ｂＤＰＢ；（３）ｒｈＴＮＦα和ｂＤＰＢ；（４）ｂＤＰＢ。植入后第１、２、４、６、８周行组织学检查及Ｘ线摄片；植入后第１０天、４２天行３５Ｓ和４５Ｃａ液闪计数以及灰重测定。结果显示：三种材料复合物较两种材料复合物成骨更好，而后者又较单一的ｂＤＰＢ成骨好（Ｐ＜０．０１）。全部移植材料均与受体有极好的生物相容性。ＴＮＦα可促进新生血管形成，并能减轻免疫反应及在低浓度情况下有刺激成骨作用。我们认为：载体、骨诱导因子和生长因子的组合是构成具有生物活性人工骨的理想模式，而ＢＭＰ、ＤＰＢ和ＴＮＦα是一种新的有价值的骨移植材料。     

诱导性人工骨膜成骨效应与骨形态发生蛋白的量效关系

目的 研制一种新型的胶原－骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）人工骨膜，探讨它在肌内诱导成骨中的生物效应和吸附ＢＭＰ的最佳含量，以求得最佳的量效关系。方法 先从猪皮中提取纯化胶原，制成厚约１ｍｍ的白色、柔软易折叠的胶原膜，以每１０ｍｇ胶原膜为载体，分别吸附不同含量的猪ＢＭＰ。     

生物陶瓷／微孔钛混合烧结种植体复合骨形成蛋白的实验研究

采用热等压技术将Ｔｃ４、ＨＡ、ＢＧＣ以３０∶３５∶３５比例混合烧结成生物活性微孔钛种植体。孔内复合ｂＢＭＰ移植成年狗颌骨与股骨中，经ＬＭ、ＳＥＭ、ＦＭ、ＥＤＸＡ等检测．ＢＭＰ组１周界面出现大量松骨细胞及骨基质沉积，成骨细胞活跃。生物力学测试：２周２．３６２ＭＰａ，对照组４周才达２．２１４ＭＰａ。种植体综合３种材料的优点，克服各自不足，不但可进行切削性加工，制成形态各异植入体。而且还可行颌骨缺损修复。与骨组织通过３相（Ｔｉｏ、ＨＡ、ＢＧＣ）形成化学结合及物理、机械嵌合。ＢＭＰ的加入使界面成骨活动提前启动和加强，但ＢＭＰ并未改变种植体内在成分和骨性融合机制。