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1.
喉癌旁组织DNA倍体及CD44检测的预后意义   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:探讨喉癌旁组织DNA倍体及CD44检测的预后意义.方法:应用流式细胞免疫学方法,作者对42例喉癌旁组织进行DNA及CD44含量分析,并做了89个月的术后临床随访.结果:喉癌旁组织DNA异倍体检出率为59.5%,异倍体中CD44平均含量为26.8±12.1.二倍体组织中CD44含量为7.9±4.8,癌旁异倍体患者的5年生存率和生存期均明显低于二倍体患者(分别为32.0%,32.1±33.6月和82.4%,65.8±21.7月,P<0.01).异倍体者生存曲线也明显低于二倍体者,CD44含量高的异倍体患者术后复发率及转移率均高.结论:癌旁组织DNA倍体变化及CD44含量可作为客观判断喉癌术后预后的生物学指标.  相似文献   

2.
目的观察原发性闭角型青光眼患者白内障超声乳化吸出联合人工晶状体植入手术前后的前房结构的变化。方法对18例(34眼)原发性闭角型青光眼合并白内障患者实施白内障超声乳化联合人工晶状体植入术,手术前后行眼前段相干光学断层扫描(optical coherence tomography,OCT),观察前房结构的变化。同时监测手术前后眼压,观察手术对闭角型青光眼的治疗作用。结果前段OCT扫描显示,手术后角膜前后曲率半径(7.53±0.81)mm、角膜陡峭度K值(44.46±4、64)dpt与术前(7.60±1.19)mm、(43.90±6.93)dpt相比差异均无统计学意义(P〉0.05);前房深度、前房体积、500μm房角开放距离[(3.06±0.25)mm、(138.25±16.33)mm^3、(0.62±0.35)mm]与术前[(2.29±0.22)mm、(94.50±27.28)mm^3、(0.25±0、12)mm]相比,差异均有显著统计学意义(P〈0.01);500μm小梁网虹膜间隙面积(0.26±0.15)mm^2与术前(0.14±0.05)mm^2相比,差异有统计学意义(P〈0.05)。术后眼压在脱离药物治疗的情况下稳定于正常范围,术后视力均好于术前。结论前段OCT提供了对眼前节快速、非接触的检查方法。白内障超声乳化术对房角未全部粘连的闭角型青光眼有较好的治疗作用。  相似文献   

3.
目的:通过测定全身麻醉手术中的泪液分泌,研究其变化规律,为全身麻醉的眼部保护提供依据。方法:随机选取了本院因喉癌而进行全身麻醉的20名患者40眼,其中男12人24眼,女8人16眼,平均年龄32岁,术前检查无眼部疾患。用标准Shirmer滤纸分别测定了术前、麻醉前肌注阿托品后以及麻醉后10’、30’和60’时的泪液分泌情况,测定时均在结膜囊内滴用了表面麻醉剂l%地卡因以抑制反射性泪液分泌。结果:所有眼术前的基础泪液分泌为12.67±3.95mm/5min,术前30分钟使用硫酸阿托品后为10.97±2.74mm/5min,全身麻醉后l0分钟为3.6l±1.53mm/5min,30分钟为0.71±0.32mm/5min,60分钟为0.64±0.32mm/5min。在所有时间段内的数值存在递减现象,除了麻醉前注射阿托品后的数值与术前无统计学差异外,其余全身麻醉后10’、30’和60’的泪液分泌数值与术前在统计学上均存在显著性差异(P<0.01)。全身麻醉后30分钟患者的泪液分泌接近于0。结论:在全身麻醉后10’、30’和60’,所有患者的基础分泌受到明显的抑制,但麻醉前使用硫酸阿托品对基础泪液分泌的影响不大。提示在全身麻醉手术中除了使用人工泪液替代物对眼球进行保护外,还要防止对角膜的机械性损伤。  相似文献   

4.
目的评价双手微切口晶状体超声乳化及Acri.smart人工晶状体植入术的临床效果。方法75例(89眼)老年性白内障随机分为两组,一组34例(40眼)行双手超声乳化术,另一组41例(49眼)行传统超声乳化术。观察术后视力、超声乳化时间、角膜内皮细胞丢失率、前房蛋白浓度、散光变化及手术并发症。结果双手组的平均超声能量(12.34±7.52)%低于传统组的(17.16±9.35)%,术后1d、1周的裸眼视力优于传统组。双手组术后1d的前房蛋白浓度(19.47±5.28)pc/ms低于传统组的(22.86±4.30)pc/ms。术后1月双手组散光度(0.78±0.40)D低于传统组(1.12±0.48)D。两组的有效超声乳化时间、超声乳化时间、角膜内皮细胞丢失率和六角形细胞比率的差异均无统计学意义。结论白内障双手超声乳化及Acri.smart人工晶状体植入术是安全有效的,手术切口小,散光小,炎症反应轻,视力恢复快。  相似文献   

5.
目的探讨丝裂霉素C(MMC)在准分子激光上皮下角膜磨镶术(LASEK)术中应用对眼压的影响。方法在术前和术后第1、4周及第12周,分别采用非接触式眼压计(NCT)和Goldmann眼压计(GAT)测量接受LASEK治疗的对照组和MMC组近视患者各150只眼的眼内压。结果术前MMC组和对照组NCT眼压值分别为(15.77±1.90)mmHg和(15.60±2.11)mmHg;术前MMC组和对照组GAT眼压值分别为(16.21±1.90)mmHg和(15.90±2.11)mmHg。术后第1、4周及第12周MMC组和对照组NCT眼压值分别下降至(14.44±1.60)mmHg、(14.62±1.47)mmHg、(14.51±1.87)mmHg和(14.62±1.47)mmHg、(14.94±1.34)mmHg、(14.66±1.54)mmHg;术后第1、4周及第12周MMC组和对照组GAT眼压值分别下降至(14.35±1.58)mmHg、(14.42±1.38)mmHg、(14.75±1.80)mmHg和(14.76±1.47)mmHg、(14.84±1.32)mmHg、(14.55±1.45)mmHg。手术前后眼压差异有统计学意义。对照组和MMC组术前和术后第1、4周及第12周NCT和GAT眼压值,差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论LASEK术后压平式眼压计眼压测量值偏低,按传统正常值衡量眼压测量结果可能延误皮质类固醇性青光眼的早期诊断。MMC对LASEK术后眼压无明显影响。  相似文献   

6.
刘兵  陈威  赵蓉  何佳  文香 《临床眼科杂志》2009,17(5):392-394
目的评价准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)通过非对称切削初次治疗角膜地形图为非对称的近视眼的疗效。方法应用美国雷赛准分子激光机(5.3版;300Hz),采用AstraPro Planner2.2Z个体化切削软件进行LASIK手术。对手术前后视力、屈光状态和角膜非球面系数(Q值)进行对比分析。结果本组157例(294只眼),平均术前裸眼视力0.11±0.06(0.02~0.5),等效球镜(-6.01±1.87)D,Q值-0.19±0.18;随访(6.47±5.73)(1~28)个月;术后平均裸眼视力1.12±0.16(0.4~1.5),等效球镜(-0.22±0.72)D;Q值0.40±0.45。结论美国雷赛AstraPro Planner2.2Z角膜地形图引导的LASIK进行的非对称切削,初次治疗角膜地形图为非对称性的近视眼安全、有效,术后屈光状态稳定,同时节省角膜组织,提高视觉质量。  相似文献   

7.
目的比较前表面光学改良的非球面人工晶状体与传统球面人工晶状体对超声乳化白内障吸除人工晶状体植入眼球差和视觉功能的影响。方法将169例(169只眼)拟行超声乳化白内障吸除人工晶状体植入术的老年性白内障患者随机分为2组,分别植入非球面人工晶状体(试验组)和传统球面人工晶状体(对照组)。术后检测人工晶状体眼的球差、矫正远视力、矫正远视力后的近视力、对比敏感度、眩光敏感度和表观调节力;随访时间为3个月。结果术后3个月,瞳孔直径5mm情况下人工晶状体眼的总球差试验组为(0.024±0.076)μm,对照组为(0.217±0.137)μm,差异有统计学意义(P〈0.05),而两组角膜球差的差异无统计学意义(P〉0.05)。4.0°和2.5°视角的对比敏感度试验组分别为39.18±11.94和28.30±12.07,对照组分别为33.28±11.84和24.50±8.20,差异有统计学意义(P〈0.05);6.3°、4.0°、2.5°和1.6° 视角的眩光敏感度试验组分别为30.90±9.21、27.09±8.45、19.20±8.71和12.08±4.44,对照组分别为27.08±8.24、23.30±6.24、15.53±4.37和10.04±4.20,差异有统计学意义(P〈0.05);两组的矫正远视力、矫正远视力后近视力、表观调节力比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论与传统球面人工晶状体比较,非球面人工品状体可以减少人工晶状体眼的球差,提高视觉对比度,改善白内障患者术后的视觉质母。  相似文献   

8.
目的分析小切口非超声乳化白内障术摘除联合人工晶状体植入术后手术源性散光的状况,并对手术效果进行评价。方法对198例(206只眼)白内障患者分别于术后1周、1、3、6个月用自动角膜曲率仪测量角膜散光度、轴向及裸眼视力,并比较各组之间差异。结果术后1周(0.42±0.12)、1个月(0.58±0.21)、3个月(0.68±0.13)视力逐渐提升,差异有显著性;6个月(0.60±0.20)组视力与3个月组比较无显著性差异。术后均为顺规性散光,散光度数逐渐减小,1周(+2.34±0.18)、1个月(+1.85±0.20)、3个月(+1.08±0.11)差异有显著性,3个月与6个月(+0.92±0.21)组差异无显著性。视力与散光度数呈正相关,r=0.725。结论小切口非超声乳化白内障术后散光度数逐渐减少,3个月稳定,视力恢复快,简便安全,便于基层开展。  相似文献   

9.
甲状腺相关眼病患者斜视手术量效关系分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
Lu ZQ  Yan JH 《中华眼科杂志》2007,43(11):982-986
目的探讨甲状腺相关眼病(TAO)患者斜视手术量与矫正效果的关系。方法回顾分析作者在中山大学中山眼科中心自1999年1月至2006年3月期间诊治的甲状腺相关眼病患者行斜视矫正手术的全部病例。结果TAO患者因斜视需要手术矫正者共30例(32只眼),其中男性19例,女性11例;平均年龄49.4岁;左眼21只,右眼11只。32只患眼中,10只眼行下直肌后徙术,10只眼行上直肌后徙术,6只眼行内直肌后徙术,3只眼行上直肌断腱术,2只眼行下直肌后徙联合内直肌后徙术,1只眼行上直肌后徙联合内直肌后徙术。32只眼中眼位完全矫正30只眼,术后正位率为93.75%。以29只眼行直肌后徙术后正位的28只眼计算每毫米矫正量,平均为(3.93±1.67)°/mm。上直肌矫正量最小为(2.63±0.83)°/mm,内直肌矫正量最大为(5.33±1.46)°/mm,下直肌矫正量为(4.11±1.55)°/mm;斜视度数≤15°者,矫正量为(2.30±1.09)°/mm;斜视度数16°-30°者,矫正量为(3.56±0.79)°/mm;斜视度数〉30°者,矫正量为(6.02±1.01)°/mm。结论TAO斜视患者单位手术矫正量均大于其他类型斜视的单位手术矫正量;随着斜视度数的增加,每毫米矫正量增大。但其手术定量性仍较差,手术效果预测较为困难。(中华眼科杂志,2007,43:982-986)  相似文献   

10.
目的探讨内源性神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratom-ileusis。LASIK)后干眼中的作用机制。方法LASIK术前及术后1天、2天、10天及30天在17例患者(34眼)下睑结膜囊内抽取泪液标本,采用双抗体夹心酶联免疫吸附分析法检测泪液中NGF含量,同时行泪膜稳定性的检查,并对两者行相关性分析。结果NGF含量在术前平均值为(21.96±8.22)μg/ml,术后1天、2天、10天含量分别为(12.76±3.55)μg/ml、(11.01±4.66)μg/ml、(13.55±4.93)μg/ml,与术前比较差异有统计学意义(P〈0.05);术后30天含量(19.16±8.79)μg/ml,与术前比较差异无统计学意义(P〉0.05)。术前泪膜破裂时间(breaking-up time,BUT)均值为(12.62±1.99)s,术后1天、2天、10天和30天分别为(4.68±1.77)s、(4.84±1.92)s、(7.36±1.53)s和(8.82±3.08)s,与术前比较差异有统计学意义(P〈0.05);术后1天与2天比较差异无统计学意义(P〉0.05),术后1天(2天)、10天、30天比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。泪液中NGF含量与泪膜稳定性具有正相关(r=0.484,P〈0.01)。结论LASIK术后泪液NGF的含量存在一个由降低到正常的动态变化过程,NGF含量变化是泪膜稳定性下降的相关因素之一。  相似文献   

11.
目的 研究兔眼球不同部位眼压测量值的相关性规律。方法 采用Tono—pen眼压计在全身麻醉下测量40只新西兰白兔角膜中央、旁中央区、角膜缘及巩膜部位眼压值,同时采用Schioetz眼压计测量角膜中央眼压值。采用SPSS软件分析不同部位眼压测量值间的相关性。结果 兔角膜中央区、旁中央区、角膜缘及角膜缘后4mm巩膜部位眼压值分别为(19.44±2.33)mmHg、(19.44±1.95)mmHg、(21.66±4.26)mmHg和(21.83±4.84)mmHg,Schioetz眼压计测量角膜中央眼压值为(19.27±3.14)mmHg。角膜旁中央区与角膜中央区眼压值有相关性.检验有统计学意义(r=0.615,P=0.007),而角膜缘、角膜缘后4mm巩膜与角膜中央区眼压值相关系数r及P值分别为0.537/0.021.0.215/0.391。结论 采用Tono-Pen眼压计测量兔眼角膜旁中央区或角膜缘眼压可以反映眼压实际值.  相似文献   

12.
目的观察青光眼减压阀植入手术治疗新生血管性青光眼的远期疗效。方法采用Ahmed青光眼减压阀治疗新生血管性青光眼32例(32只眼)。青光眼控制标准为6mmHg≤眼压≥21mmHg。结果手术总成功率81.25%,术后随访3~36个月,眼压从术前平均(54.66±9.30)mmHg下降为术后平均(17.30±6.70)mmHg。主要并发症:术后早期低眼压10只眼(31.25%),浅前房8只眼(25.0%),前房出血1只眼(3.12%),脉络膜脱离2只眼(6.25%),前房导管口阻塞2只眼(6.25%)。术后视力无改变。结论应用青光眼减压阀植入手术治疗新生血管性青光眼是一种相对有效、安全的治疗方法。  相似文献   

13.
目的观察小梁切除术联合术中应用丝裂霉素和术后应用干扰素治疗新生血管性青光眼的临床疗效。方法对17例(17眼)新生血管性青光眼行小梁切除联合术中一次性应用丝裂霉素,浓度为0.4mg/ml,共2min,分别于手术时、术后第3天、7天、10天、14天,在滤过区旁球结膜下注射干扰素5×10^5IU。术后随访时间6~15个月,观察术后阻止瘢痕性滤过泡形成的效果、降眼压作用和手术成功率。结果17例17眼新生血管性青光眼患者术后6个月眼压控制正常,从术前的(36.42±5.64)mmHg降至(15.73±2.99)mmHg(t=11.465,P〈0.01),角膜恢复透明,虹膜面新生血管完全消退或仅余很少。17眼中16眼形成功能性滤过泡,1眼为非功能性滤过泡,术后12个月手术成功率94.1%。结论小梁切除术联合术中应用丝裂霉素和术后应用干扰素治疗新生血管性青光眼可以有效控制眼压,缓解疼痛,促使新生血管消退,并保留残存视功能和眼球外形。  相似文献   

14.
Yang J  Lu Y  Luo Y  Wang L 《中华眼科杂志》2007,43(6):519-524
目的评价在晶状体悬韧带异常情况下行超声乳化白内障吸除术时植入囊袋张力环(CTR)来提供晶状体囊袋支持的中长期临床效果。方法对2003年1月至2004年7月期间因晶状体悬韧带松弛或部分断裂或合并白内障在我院行超声乳化白内障吸除及CTR和人工晶状体(IOL)植入术的19例患者(22只眼)进行为期2年的随访。随访指标为最佳矫正视力和屈光度数、眼压、CTR和IOL及囊袋复合体的位置、晶状体后囊膜混浊(PCO)和晶状体囊袋的收缩程度。应用眼前节成像系统Pentacam采集各眼的Scheimpflug图像,分析术后1、6、12和24个月IOL的偏心值与倾斜度。结果术后2年随访结果:末次随访最佳矫正视力较术前提高≥2行者20只眼(90.9%),提高1行者2只眼(9.1%)。CTR位置:21只眼CTR位于囊袋内,1只眼CTR部分脱出于囊袋外。IOL位置:22只眼的IOL均位于囊袋内,术后1个月1只眼轻度偏中心,术后2年5只眼轻度偏中心。PCO情况:末次随访3只眼(13.6%)因重度PCO行掺钇钕石榴石激光后囊膜切开,余19只眼为轻度PCO,无需处理。晶状体囊袋收缩程度:末次随访1只眼囊袋中度收缩。Pantacam检查术后1、6、12和24个月IOL的平均偏心值分别为(0.393±0.094)、(0.406±0.094)、(0.415±0.093)、(0.463±0.172)mm,术后1、6与24个月比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。倾斜度分别为2.637°±0.369°、2.653°±0.349°、2.682°±0.348°、2.714°±0.360°,各组间差异无统计学意义(P=0.220)。结论CTR合并IOL植入治疗晶状体悬韧带异常可获得良好视力。术后2年的随访观察证实CTR的植入抑制了PCO和囊袋收缩的发生,并维持IOL在囊袋内位置的良好稳定性。(中华眼科杂志,2007.43:519-524)  相似文献   

15.
目的研究脂质体介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因对体外培养的鼠视网膜Müller细胞转染的有效性及安全性。方法采用视网膜组织块法培养鼠视网膜Müller细胞,振荡法分离纯化细胞,并对其进行免疫细胞化学鉴定。用阳离子脂质体Lipofectamine 2000负载pEGFP-N1质粒转染Müller细胞,荧光显微镜检测转染后12、24、48、72h的转染效率。台盼蓝排斥实验检测转染和未转染细胞的活力,明确脂质体Lipofectamine 2000对Müller细胞的毒性作用。结果成功培养视网膜Müller细胞,传代后90%以上的细胞呈神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性。Lipofectamine 2000介导质粒pEGFP-N1转染Müller细胞后12、24、48、72h的转染效率分别为(9.7±1.9)%、(18.1±16)%、(17.2±2.5)%、(16.9±1.7)%。台盼蓝排斥实验显示Lipofectamine 2000转染前后活细胞率分别为(98.2±5.6)%、(96.1±6.2)%。结论脂质体Lipofectamine 2000可安全有效地介导Müller细胞的转染,为进一步明确Müller细胞的病理、生理功能及靶向Müller细胞的基因治疗提供了新的手段。  相似文献   

16.
目的 探讨在表麻下一种新的透明角膜及巩膜梯形隧道切口白内障超声乳化吸除植入硬性人工晶体的手术技巧,评价其疗效。方法 对510例病人,在表麻下,先做3.0mm透明角膜隧道切口行白内障超声乳化吸除,然后使用3.0mm穿刺刀,在透明角膜切口的两端,向巩膜方向扩大切口。其扩大的外切口是以视轴为中心的放射状切口,与透明角膜的外切口相连接形成一个无底边的等腰梯形。梯形的顶边长为3.0mm,两腰各长2.0mm,底边的距离为3.5-4.0mm。扩大的内切口仍在透明角膜内,与原有的内切口连接呈弧形(与角膜同弧)。隧道内部的形状是一个非平面(三个平面)立体的,酷似一个展翅的蝴蝶形状。植入5.5mmPMMA硬质人工晶体。动态观察术前及术后1d、1w、1m、3m裸眼视力、角膜散光和角膜地形图变化。结果 510例手术均在表麻下完成,病人无明显疼痛,均配合良好。切口闭合良好,前房深度正常。术后第1d裸眼视力≥0.5者483例,占94.7%;术后1周裸眼视力≥0.5者477例,占93.5%;术后1m裸眼视力≥0.5者486例,占95.3%;术后3m裸眼视力≥0.5者484例,占94.9%。将术前散光度分别与术后各时期的散光度比较,差异均无统计学意义(X2检验P值均〉0.05)。术前及术后1d、1w、lm、3m角膜表面规则指数(surfaceregularity.index.SRI)分别为:0.63±0.32,0.73±0.44,0.71±0.42,0.68±0.37,0.64±0.39;角膜表面不规则指数(surfaceasymmetryindexSAI)分别为:0.57±0.39,0.69±0.48,0.66±0.50,0.62±0.47,0.60±0.45;术后1w各项值逐渐下降,在1m-3m渐趋平稳;术后与术前比较无统计学意义(P〉0.05)。结论 在表面麻醉下,采用透明角膜及巩膜梯形隧道切口的超声乳化白内障摘除,硬质人工晶体植入术。具有操作简单,手术时间短;在选择切口的位置时,有较大的选择空间;不增加角膜散光,切口闭合良好;术后视力恢复快且稳定;手术成本低;适合我国国情,有利于规模化手术。  相似文献   

17.
张慧  罗清礼 《眼科研究》2005,23(3):314-316
目的测定角膜结膜上皮性肿瘤中的DNA含量,并分析其在角膜结膜上皮性肿瘤诊断及鉴别诊断中的意义。方法用流式细胞术测定30例角膜结膜上皮性肿瘤石蜡标本(乳头状瘤10例、非典型增生8例、鳞状上皮癌12例)的DNA含量。结果乳头状瘤,非典型增生和鳞状细胞癌的DNA指数(DI)均值分别为1.01,1.38和1.75;其DNA异倍体率均值分别为10%,37.5%和91.7%;其S期百分比(SPF)均值分别为13.87%,24.18%和33.97%。在不同病变中,其DI值,DNA异倍体率及SPF均有统计学显著性差异(P<0.05)。结论应用流式细胞术进行DNA定量分析,对提高角膜结膜上皮性肿瘤的早期诊断率有一定的意义。  相似文献   

18.
目的 评价多层羊膜填塞术在治疗单疱病毒性角膜溃疡中的效果.方法 临床选择单疱病毒引起的坏死性角膜基质溃疡患者40例(46眼),均行多层羊膜填塞术,随访观察其临床疗效。结果 平均随访(16±2.4)周,成功率达86.9%(40/46眼),溃疡的平均愈合时间为(4.2±1.4)周,术前角膜基质厚度为(407±32)μm,术后2个月增加至(428±21)μm,差异有非常显著性(P〈0.01)。6例(6眼)角膜溃疡未愈合,其中2例(2眼)因渍疡穿孔改行穿透性角膜移植术。结论 多层羊膜填塞术可有效治疗单疱病毒引起的坏死性角膜基质炎.该手术可以快速修复角膜创面.为后期角膜移植术创造良好的局部条件.  相似文献   

19.
目的 运用眼前段分析系统获得Scheimpflug图像,对晶状体半脱位患者手术后人工晶体的位置进行客观定量观察和分析。方法 对14例24眼晶状体半脱位患者,根据术中观察的晶状体半脱位情况,采用不同方式完成手术和人工晶体固定。术后12月通过Scheimpflug图像,测量人工晶体偏中心距离、倾斜度数和前房深度。结果 人工晶体偏中心距离:折叠人工晶体囊袋内植入组(A组):0.27±0.21)mm,折叠人工晶体双襻固定,光学区置于囊袋内组(B1组):(0.70±0.33)mm;折叠人工晶体双襻固定,光学区置于囊袋外组(B2组)(0.49±0.20)ram;硬性人工晶体双襻固定组(C组);(0.54±0.16)。人工晶体倾斜度数:A组:(1.10±0.69)度;B1组:(3.30±2.71)度;B2组:(2.14±1.03)度;C组:(3.39±0.77)度。前房深度:人工晶体囊袋内植入眼为(4.38±0.25)mm,人工晶体睫状沟固定眼为(0.40±0.86)mm。结论 Scheimpfiug图像可客观、定量地运用于分析人工晶体位置,评估各种人工晶体固定方法的临床效果,并有助于指导术后人工晶体并发症的处理。  相似文献   

20.
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)短发夹RNA(shRNA)表达质粒稳定转染对视网膜母细胞瘤(RB)细胞中VEGF表达的作用。方法构建VEGF shRNA表达质粒p4.1CMV—VEGF shRNA,以脂质体介导其转染两种RB细胞系SO—RB50和HXO—RB44,新霉素筛选结合梯度稀释法获得p4.1CMV—VEGF shRNA阳性RB细胞单克隆,继续培养扩增建立p4.1CMV—VEGF shRNA阳性RB细胞,用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测RB细胞中VEGF基因的表达,并用酶联免疫吸附(ELISA)法检测RB细胞上清中VEGF蛋白的表达;以与哺乳动物基因组无同源性的shRNA表达质粒p4.1CMV—Neg shRNA作为阴性对照,同时以未做任何处理组作为空白对照。结果成功构建p4.1CMV—VEGF shRNA并获得其表达阳性的RB细胞克隆。阴性对照组和空白对照组SO-RB50细胞的VEGF基因表达量分别为实验组的5.02倍和6.32倍;阴性对照组和空白对照组HXO—RB44细胞分别为实验组的5.70倍和4.86倍。实验组SO—RB50细胞上清中,VEGF蛋白浓度为(187.69±83.89)μg/L,显著低于阴性对照组(822.98±187.98)μg/L和空白对照组(865.76±170.33)μg/L,差异有统计学意义(均P〈0.01);实验组HXO—RB44细胞上清中,VEGF蛋白浓度为(162.20±66.33)μg/L,与阴性对照组(764.33±164.79)μg/L和空白对照组(828.22±145.94)μg/L比较,差异也有统计学意义(均P〈0.01)。结论VEGF shRNA表达质粒稳定转染可高效抑制RB细胞中VEGF的表达,靶向VEGF的RNA干扰可作为拮抗VEGF并治疗RB的有效手段。(中华服科杂志,2007,43:493-498)  相似文献   

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