丙酸睾酮对小鼠精母细胞减数分裂前期Ⅰ分裂象影响

①目的探讨小鼠肌肉注射丙酸睾酮对小鼠精母细胞减数分裂前期Ⅰ分裂象的影响。②方法采用哺乳动物生殖细胞减数分裂制片技术,观察小鼠精母细胞减数分裂象的变化。③结果丙酸睾酮实验组药物处理后48、72、96h减数分裂象与对照组相比,差异有显著性（t=2．31～2．98,P〈0．05、0．01）。④结论丙酸睾酮能促进小鼠睾丸精母细胞减数分裂和成熟。     

缺失PUF家族基因的卵母细胞可以成熟和受精

目的:研究PUF家族基因[Pumilio1(Pum1)和Pumilio2(Pum2)]在雌性生育能力和生殖细胞减数分裂过程中的作用?方法:在Pum1基因位置携带loxP位点的Pum2基因全敲鼠的基础上,利用生殖细胞特异性表达的Cre-Vasa-Cre介导Pum1基因条件性敲除,以此获得Pum基因双敲小鼠模型Vasa-cre:Pum1F/F Pum2-/-(VDKO)?同时,对Pum基因双敲小鼠进行生殖表型分析?结果:①交配实验结果表明,雌性VDKO小鼠的生育能力显著下降,但仍可以产生后代;②VDKO小鼠卵母细胞体外成熟过程不受影响?结论:Pum蛋白不影响小鼠卵子发生发育过程?     

浅谈性染色体异常及真两性畸形

人体性别的决定，主要由遗传物质的载体-染色体来控制的。细胞中的染色体可分为两类，即常染色体和性染色体。正常人的体细胞中染色体有23对，其中正常染色体有22对，性染色体1对(女性为XX，男性为XY)，凡是进行有性生殖的生物体，在从原始的生殖细胞发展到成熟的生殖细胞(精子或卵细胞)的过程中，都要进行减数分裂。女性新生儿卵巢内含有15万～50万个初级卵泡。至青春期，成批的初级卵泡开始发育，排卵时，初级卵泡完成了第一次减数分裂，形成了次级卵母细胞和第一极体；排卵后，次级卵母细胞开始第二次减数分裂，但未全部完成停留在成熟分裂的中期，直到日后次级卵母细胞与精子相遇时，才完成第二次减数分裂，捧出第二极体，而成为成熟的卵细胞。     

甲醛对雄性小鼠生殖细胞影响的研究

目的通过对雄性昆明种小鼠经腹腔注射甲醛(Formaldehyde)后,观察动物的一般中毒情况;研究甲醛对各阶段生殖细胞的一般毒性及遗传物质的损伤。方法选用雄性昆明种小鼠为研究对象。动物染毒的甲醛低、中、高剂量分别为0.20mg/kg·bw、2.00mg/kg·bw、20.00mg/kg·bw。采用腹腔注射染毒5天,第6天处死一批小鼠,余下的小鼠于第14日处死。用HE染色法观察小鼠睾丸组织的病理改变;显微镜下观察精子数及精子头畸形;采用SCE和微核试验,判断生殖细胞遗传物质的损伤。初步揭示甲醛致生殖细胞遗传物质损伤的检测指标。结果1.甲醛导致小鼠睾丸组织的病理改变以生殖细胞变性为主,高剂量组出现个别精细胞坏死;2.甲醛各剂量组均引起精子数减少,精子头畸形率升高,与阴性对照组比较差异均有显著性(p<0.01);3.甲醛的中、高剂量组能诱致早期精细胞微核率和精原细胞SCE频率显著升高(p<0.05)。结论1.甲醛能诱致小鼠早期生殖细胞(精原细胞,初级精母细胞)遗传物质的损伤,引起较成熟、成熟的生殖细胞(次级精母细胞,精细胞,精子)变性、坏死。2.精子头畸形率是判断环境中甲醛对生殖细胞一般毒性及其遗传物质损伤的检测指标。     

布氏姜片吸虫精子形成过程

气干法制备布氏姜片吸虫染色体标本,可见精子形成过程各期生殖细胞核及其染色体形态。其精子形成过程与其它复殖吸虫大体相同。精原细胞分裂中期相有14条染色体,减数分裂中期Ⅰ有7条二价染色体,中期Ⅱ有7条单倍体染色体,可根据形态予以区分。本文结果与前人的观察在减数分裂中期Ⅰ、中期Ⅱ以及精原细胞中期染色体的认识上与廖祖荫等(1987)的不一致,就此进行了讨论     

敌百虫对小鼠精子的致畸效应及维生素C的拮抗作用

目的:初步探讨敌百虫(dipterex,Dip)对小鼠精子的致畸效应及维生素C的拮抗作用。方法:昆明种小鼠40只,随机分为5组,即对照组、Dip组、维生素C(Vitamin C,VitC)干预组Ⅰ、VitC干预组Ⅱ、VitC干预组Ⅲ,每组8只。对照组和Dip组小鼠每天分别饮用自来水和含Dip的水溶液(5 mg Dip/ml);VitC干预组Ⅰ、VitC干预组Ⅱ和VitC干预组Ⅲ小鼠每天的饮用水中除含有Dip(5 mg Dip/ml)外,同时给予补充不同剂量的VitC进行干预,50 d后观察其精子畸形率的的变化。结果:Dip组小鼠的精子畸形率显著高于对照组(P<0.01);VitC干预组Ⅰ、VitC干预组Ⅱ和VitC干预组Ⅲ的精子畸形率均显著低于Dip组(P<0.01)。结论:Dip的毒性作用可引起雄性小鼠生殖细胞的遗传损伤,导致生殖毒性效应;适量的VitC具有拮抗敌百虫致小鼠精子畸形的作用,即抗诱变作用。     

Stra8在精子发生中的研究进展

Stra8基因的表达具有发育阶段性,且仅表达于减数分裂前的生殖细胞,它在生殖细胞的胞质和胞核中进行穿梭。视黄酸是维生素A的一种代谢产物。视黄酸可促进生殖细胞中Stra8基因的表达。维生素A缺乏小鼠精子发生停滞,生殖细胞退化,雄性小鼠不能生育。目前对于Stra8表达调控的研究主要集中在其与视黄酸相互作用的机制,但Stra8在精子发生中的分子调控机制尚未完全阐明。     

“美容牌”染发剂对雄性小鼠生殖细胞非程序DNA合成的诱导

本文应用雄性小鼠生殖细胞非程序DNA合成(UDS)检测方法研究了“美容牌”染发剂对雄性生殖细胞DNA的损伤作用。发现该染发剂诱发的UDS与药物剂量呈线性正相关。提示此类染发剂对雄性生殖细胞DNA有损伤作用。其遗传毒理效应应引起注意。     

小鼠睾丸生殖细胞减数分裂标本制作方法的改进

目的 对小鼠睾丸生殖细胞减数分裂标本制作方法加以改进,以便使各期分裂细胞增多、背景清晰、结构紧密、图像清楚、利于阅片。方法 小鼠肌肉注射6．5mg／kg丙酸睾丸酮后继续饲养48h;处死前腹腔注射秋水仙素,在标本制作过程中采用低渗处理、脱水、中性树胶封片。结果 低倍镜下可见细线期、偶线期、粗线期、双线期、终变期细胞．各期细胞染色体分裂相较常规制片明显增加。结论 方法改进后可见大量分散良好、背景清晰、染色体结构紧凑的生殖细胞减数分裂各期分裂相。     

小鼠受精卵染色体分析应用于诱变剂的检测

作者应用小鼠受精卵染色体分析方法观测诱变剂的致突变作用。将雄性ICR（上海西普尔-必凯实验动物有限公司）小鼠经诱变剂（MMS）处理后在整个精子生成周期内（共48d）顺序与动情期雌鼠交配．将交配后的受精卵培养过夜后制备染色体进行分析．未处理小鼠的受精卵雌、雄原核染色体（n=1576）均未见明显染色体异常（文献报道的自发畸变率为0．0％～2．3％，平均0．07％）．处理组雄性小鼠交配的受精卵雄原核可见多种染色体异常，包括数目及结构异常。诱变剂处理后第8天的染色体异常率最高，相当于精子发生的睾丸精子阶段受到诱变剂作用，表明此期是雄性小鼠精子发生周期的最敏感期。此期取材分析的受精卵中97％雄原核染色体有异常，异常的主要类型为结构畸变。此后雄性生殖细胞的畸变率呈下降趋势，直至第20天减数分裂后期。在第20天后不再见染色体畸变．但在第48天时发现2个卵子（4％）有染色体断片，表明诱变剂在生殖细胞减数分裂前仍可能引起染色体损伤，并可能传递下去。此外，ICR小鼠的生殖细胞染色体低畸变率表明ICR小鼠可用于研究诱变剂对生殖细胞的诱变效应。     

胚胎至性成熟小鼠睾丸中的碱性磷酸酶及亮氨酸氨基肽酶的研究

对胚胎至性成熟小鼠睾丸中的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）及亮氨酸氨基肽酶（ＬＮＡｓｅ）的分布进行了研究。发现胚胎期ＡＬＰ位于原始生殖细胞，体细胞则呈阴性反应；生后２０ｄ至性成熟，ＡＬＰ位于曲细精管的基膜，曲细精管生精细胞及支持细胞则为阴性。ＬＮＡｓｅ于胚胎期位于原始生殖细胞及支持细胞；生后及性成熟期原始生殖细胞及支持细胞也都显示较强阳性。酶的这些表现提示其与生殖细胞的增殖与分化关系密切。     

小鼠原始生殖细胞分离培养方式和生物特性研究

目的：探索一种简单高效的分离、培养小鼠原始生殖细胞（PGCs）的方法,为小鼠模型提供充足的PGCs来源。方法体外分离小鼠12.5 dpc胚胎生殖嵴,剪碎后用含血清、胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂、卵泡刺激素、重组表皮生长因子的α-M EM培养基进行组织块贴壁培养;于倒置显微镜下观察细胞形态,采用流式细胞术检测阶段性特异性胚胎抗原,采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）、细胞免疫荧光等方法检测干细胞的多能性基因Oct4及减数分裂Ⅰ期的几个特异性基因的表达。结果体外分离培养的小鼠 PGCs具有良好的细胞形态、极强的增殖能力,SSEA-1表达阳性,SSEA-4表达阴性,同时检测到Oct4、Stra8、Vasa、SCP3、ZP3表达均为阳性。结论利用该实验方法能培养出高纯度、具有良好干性及极强增殖能力的小鼠PGCs ,并使该细胞进入减数分裂。     

精索静脉曲张患者的减数分裂分析

目的：探讨造成精索静脉曲张患者的生育力减弱的机理。方法：对５４例精索静脉曲张患者的睾丸作活检减数分裂分析,对其２９例同时作精液标本的减数分裂分析。结果：５４例患者睾丸活检减数分裂分析阻滞在粗线期４５例,单价体６例,多价体２例,正常减数分裂１例。其中２９例患者睾丸活检、精液标本减数分裂分析阻滞在粗线期２８例,单价体１例,两者结果一致。结论：精索静脉曲线患者的生育力减弱大多受染色体不育效应的影响。     

斯氏狸殖吸虫卵泡发育的透射电镜初步观察

用透射电镜观察斯氏狸殖吸虫雌性卵巢皮质中不同发育阶段的各级卵泡。卵泡由卵母细胞及围绕它的卵泡细胞所组成,卵母细胞在其发育过程中行减数分裂,属终端减数分裂类型。描叙了第一次减数分裂前期中的部分阶段,即细线期、合线期和粗线期。卵泡细胞通过有丝分裂进行繁殖。观察了有丝分裂的前期和后期。     

五加皮遗传毒性实验研究

目的：探讨五加皮对小鼠体细胞和生殖细胞的遗传毒性。方法：采用小鼠骨髓细胞微核试验（ Ｍ Ｎ Ｔ）、骨髓和睾丸染色体畸变（ Ｃ Ａ）试验以及精子畸形试验。结果：五加皮诱发的微核、染色体畸变和精子畸形均低于正常对照,特别是精子畸形率明显低于正常对照（ Ｐ＜ ００１）。结论：五加皮对小鼠体细胞和生殖细胞均无诱变损伤作用。     

体外诱导胚胎干细胞分化为生殖细胞的研究进展

胚胎干细胞是一种具有发育全能性的细胞系，理论上能分化为包括生殖细胞在内的各种组织细胞。由于生殖细胞是遗传物质的传递者，所以胚胎干细胞向生殖细胞分化的研究具有更深刻的科学及伦理挑战性。本文简要介绍各国科学家在胚胎干细胞向生殖细胞分化方面的研究进展。     

半翼基因蛋白在实验鼠卵细胞联会复合体中的表达位置

目的探讨半翼基因（wings apart—like,Wapl）蛋白在实验鼠粗线期的卵细胞中联会复合体（synaptonemal complex,SC）的表达位置。方法从受孕18．5d胎鼠的卵巢中分离出处于粗线期的卵细胞,然后用抗-联合复合体蛋白2（anti-synaptonemal complex protein2,SYCP2）和抗-Wapl蛋白进行双免疫染色。结果SYCP2和Wapl在所检查粗线期的卵细胞位置重叠。结论Wapl可能是粗线期卵细胞SC的一部分。     

泡状带绦虫染色体组型和减数分裂的研究

本文采用体外短期培养,空气干燥法技术,研究了泡状带绦虫染色体组型和生殖细胞的减数分裂。泡状带绦虫染色体数目为18(2n=18,n=9),染色体组型由7对中部着丝粒,一对亚中部着丝粒和一对端部着丝粒染色体组成。观察了该虫第一次减数分型前期的形态学特征和单倍体。     

STI571 combined with vincristine greatly suppressed the tumor formation of multidrug-resistant K562 cells in a human-nude mice xenograft model

Multidrug resistance (MDR), often associated with decreased intracellular drug accumulation in patient's tumor cells resulting from enhanced drug efflux,1 is a major obstacle to successful chemo- therapy in leukemia. It is related to the overexpression of a membrane protein, P- glycoprotein (P-170), thereby reducing drug cytotoxicity. For example, Philadelphia-chromo- some-positive (Ph+) chronic myelogenous leukemia (CML) is often resistant to chemotherapy in advanced phases because of the…     

甲基汞对雄性小鼠生殖细胞的毒性作用

目的：研究甲基汞（MeHg）对雄性小鼠生殖细胞氧化损伤、细胞周期、细胞凋亡及其凋亡相关蛋白表达的影响。方法：应用MTT法检测MeHg对雄性小鼠生殖细胞的毒性;采用TBA比色法、OPA荧光法和KI比色法分别检测睾丸生殖细胞中脂质过氧化产物MDA、H₂O₂的含量和GSH-Px酶活性;采用AO/EB染色法和流式细胞术2种方法检测细胞凋亡;采用流式细胞术检测MeHg对细胞周期的影响;应用免疫组织化学方法检测与线粒体途径细胞凋亡相关Caspase-9和CytC蛋白表达。结果：体外给予0.1、1.0、10.0和100.0 μmol•L^-1 的MeHg,随着甲基汞染毒剂量的增加,细胞存活率逐渐降低,作用2、4、8、24和48 h时,1.0、10.0和100.0 μmol•L^-1各剂量组与对照组比较差异有显著性（P<0.05）。体内给予1/100、1/50和1/10 LD₅₀的MeHg,随着甲基汞染毒剂量的增加,睾丸组织中MDA和H₂O₂含量有所增加,各剂量染毒组MDA含量与对照组比较差异具有显著性（P<0.05）。H₂O₂含量随着甲基汞染毒剂量的增加,1/50 LD₅₀、1/10 LD₅₀组与对照组比较差异有显著性（P<0.01）。GSH-Px酶活性随着甲基汞染毒剂量的增加有所降低,各剂量染毒组与对照组比较差异均具有显著性（P<0.05）。随着染毒剂量的增大,凋亡率先增加,1/50 LD₅₀达到最大,1/10 LD₅₀组逐渐降低,1/10 LD₅₀组与对照组比较差异具有显著性（P<0.05）。采用流式细胞术检测,G₂/M期细胞百分数增加,1/50 LD₅₀染毒组时与对照组比较差异具有显著性（P<0.05）。Caspase-9与CytC阳性表达为棕黄色染色。分析结果表明,MeHg各剂量染毒组CytC表达先增加,随着染毒剂量的增加而逐渐降低,CytC表达各剂量染毒组与对照组比较差异具有显著性(P<0.01),Caspase-9 的表达在1/50 LD₅₀组达到最高,1/50和1/10 LD₅₀ 组与对照组比较差异具有显著性(P<0.01)。结论：甲基汞可以引起生殖细胞氧化损伤,影响细胞周期进程,使细胞有丝分裂延迟,并可能诱导细胞凋亡和凋亡相关蛋白的改变,对雄性生殖细胞具有细胞毒性作用。