内脏利什曼病患者骨髓及血内病原体特异性kDNA片…

目的：建立简易、准确的诊断内脏利什曼病和病原体鉴定技术。方法：采用作者设计的杜氏利什曼原虫（Ｌ．ｄ．）种特异引物Ｉ和Ⅱ，经ＰＣＲ扩增样品内病原体ｋＤＮＡ２９７ｂｐ片段，检测２２例确诊内脏利什曼病（ＶＬ）患者骨髓、血、血清共５５份样品和４例临床疑诊为黑热病患者的骨髓（共２６例，５９份样品）。结果：（１）ＰＣＲ法与骨髓涂片镜检符合率为９６．２％（２５／２６）；（２）ＰＣＲ法检测骨髓、血及血清的总阳性率     

杜氏利什曼原虫特异性kDNA片段扩增及用于内脏利什曼病诊断的研究

本文报道了用杜氏利什曼原虫特异的一对寡核苷酸引物Ⅰ和Ⅱ进行PCR,扩增微环kDNA分子上一种特异性kDNA片段,进行杜氏利什曼原虫虫种鉴定和病原体检测。敏感性分析表明用此法能够检测到的最低模板DNA需要量为1fg,检测健康犬全血稀释的利什曼原虫前鞭毛体,最低可达2个/ml。扩增六种不同的利什曼原虫kDNA样品,在L.donovani四川人株、四川犬株和L.infantum出现阳性产物,其长度和设计扩增长度一致,扩增产物和地高辛标记的重组质粒探针pLK2斑点杂交结果表明为利什曼原虫kDNA序列。应用此对引物,检测8份内脏利什曼病患者骨髓样品和4份血清样品,经琼脂糖凝胶电泳,Southern杂交证实,分别有7例和2例阳性,显示出可喜的应用前景。     

PCR扩增技术用于犬内脏利什曼病病原体kDNA的检测

本文报导了用作者设计的一对寡核苷酸引物Ⅰ和Ⅱ以及文献报导的一对引物A、B检测内脏利什曼病病犬的骨髓、脾和外周血内的病原体kDNA,并和骨髓涂片检查利什曼原虫的结果进行了比较。共检测人工感染犬12只,骨髓涂片阳性者8例,其中PCR检测骨髓组织样品阳性者7例,检测脾组织样品阳性者3例;对照组犬脾、骨髓和外周血所有组织样品均为阴性。根据实验结果认为此法用于检测犬内脏利什曼病病原体kDNA有较好的效果。     

喀什地区内脏利什曼病患者血常规及骨髓象变化的分析

统计分析125例内脏利什曼病患者血细胞7项参数及骨髓检查结果,发现多数患者血细胞7项参数均显著低于参考范围;骨髓检查结果显示,感染骨髓象伴缺铁性贫血（IDA）及细胞成熟障碍者占64.8%。统计结果表明,内脏利什曼病患者多表现为较严重的感染和缺铁性贫血以及血细胞参数显著降低,这可作为反映内脏利什曼病严重程度的重要指标。     

快速ELISA法诊断犬内脏利什曼病及应用价值的研究

本研究建立一种用PVC薄膜作载体,将前鞭毛体可溶性抗原包被在PVC凹板上采用HRP-SPA作第二抗体及无每的TMB作底物的加速ELISA方法,该法简便、经济、实用。与经典ELISA平行对照检测24份骨髓穿刺证实的内脏利什曼病犬血清,结果：快速ELISA法阳性符合率为100%（24/24）,而经典ELISA法为95.83%(23/24);对47份采自非流行区的正常犬血清,两法均仅有1例呈假阳性反应,占左.13%;用快速ELISA法检测实验感染了旋毛虫、肺吸虫、钩虫、弓形虫等犬血清共26份,均未见交叉反应,用该法又调查了四川汶川县黑热病重流行区的124份犬血清,同时进行骨髓涂片检查,结果快速ELISA查出阳性犬39只,占31.45%(39/124),骨髓涂片查见利什曼原虫者有24只,占19.35%(24/124),这24只犬血清对快速ELISA法均呈阳性反应。     

河南省1例输入性内脏利什曼病的实验室诊断

目的　分析河南省1例输入性内脏利什曼病病例,探讨内脏利什曼病的实验室诊断方法。方法　分析患者的流行病学资料和临床资料,镜检观察骨髓涂片中杜氏利什曼原虫无鞭毛体;rK39试纸条检测血清中利什曼原虫抗体;用两对引物K13A?K13B和 LITSR?L5.8S分别扩增利什曼原虫动基体DNA和核糖体DNA内转录间隔区基因片段。结果　 该患者曾去过内脏利什曼病流行区,有不规则发热、脾肿大、全血细胞减少、白蛋白/球蛋白比例倒置等症状,骨髓涂片查见杜氏利什曼原虫无鞭毛体,rK39试纸条检测阳性,两对引物K13A?K13B和 LITSR?L5.8S分别扩增出87 bp和285 bp的片段。两片段序列与杜氏利什曼原虫相应序列的相似性分别为94%和100%。结论　结合患者的流行病学资料和临床表现以及实验室检测结果,确诊该病例为内脏利什曼病病例,病原体为杜氏利什曼原虫。     

河南省1例输入性内脏利什曼病的实验室诊断

目的　分析河南省1例输入性内脏利什曼病病例，探讨内脏利什曼病的实验室诊断方法。方法　分析患者的流行病学资料和临床资料，镜检观察骨髓涂片中杜氏利什曼原虫无鞭毛体；rK39试纸条检测血清中利什曼原虫抗体；用两对引物K13A?K13B和 LITSR?L5.8S分别扩增利什曼原虫动基体DNA和核糖体DNA内转录间隔区基因片段。结果　 该患者曾去过内脏利什曼病流行区，有不规则发热、脾肿大、全血细胞减少、白蛋白/球蛋白比例倒置等症状，骨髓涂片查见杜氏利什曼原虫无鞭毛体，rK39试纸条检测阳性，两对引物K13A?K13B和 LITSR?L5.8S分别扩增出87 bp和285 bp的片段。两片段序列与杜氏利什曼原虫相应序列的相似性分别为94%和100%。结论　结合患者的流行病学资料和临床表现以及实验室检测结果，确诊该病例为内脏利什曼病病例，病原体为杜氏利什曼原虫。     

STEM CELL FACTOR AND THE REGULATION OF DENDRITIC CELL PRODUCTION FROM CD34+ PROGENITORS IN BONE MARROW AND CORD BLOOD

Dendritic cells (DC) are essential for the presentation of antigen in primary immune responses and they develop from CD34⁺ cells in the bone marrow. Although both granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) and tumour necrosis factor (TNF) are known to stimulate the development of mature DC from their progenitor (CFU-DL), the function of stem cell factor (SCF) in this pathway remains to be determined. The interactions of SCF with GM-CSF, TNF, interleukin-3 (IL-3) and macrophage colony stimulating factor (M-CSF) in promoting CFU-DL development have now been studied in serum-free cultures of unfractionated as well as progenitor enriched cells from either bone marrow or cord blood. Although SCF alone is without effect on colony formation, it enhances both the numbers and size of DC colonies generated in vitro by GM-CSF and TNF. It acts directly on progenitors and in the presence of GM-CSF can also induce suboptimal DC growth even in the absence of TNF. SCF appears to recruit very early progenitors of a high proliferative potential with the capacity to differentiate into erythroid and myeloid as well as dendritic cell progeny. In combination with other cytokines it may therefore be useful for the ex vivo generation of large numbers of DC for clinical purposes.