肝癌病人树突状细胞诱导高效而特异的抗肝癌免疫

目的 以肝癌病人树突状细胞（ＤＣ）体外诱导抗肝癌免疫。方法 自肝癌病人外周血中分离出单个核细胞（ＰＢＭＣ０;以人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２肿瘤细胞的肿瘤相关抗原（ＴＡＡ）激活ＤＣ;以粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）及白介素４（ＩＬ－４）联合刺激ＰＢＭＣ中ＤＣ;ＤＣ诱导自体Ｔ淋巴细胞增殖,分化为细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）;检测ＣＴＬ及其上清液对ＨｅｐＧ２,ＢＥＬ－７４０２,ＬＯＶＯｅｙ ＨＯＳ－８６     

胃癌患者手术前后外周血白细胞介素—2mRNA的表达

观察胃癌患者手术前后外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）白细胞介素－２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ表达的变化，以探讨肿瘤切除对其ＰＢＬ ＩＬ－２表达及ＩＬ－２分泌水平的影响。结果：（１）术前ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达明显低于正常对照组（Ｐ〈０．０５），ＩＬ－２分泌减少（Ｐ〈０．０１），而术后４周，ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达明显恢复，但仍低于正常对照组（Ｐ〈０．０５）ＩＬ－２分泌接近正常。ＰＢＬ经植物血弟素活化后，其手术前后ＰＢＬ     

白细胞介素10抑制核因子кB介导的肾小管上皮细胞表达细胞间黏附分子1

目的研究白细胞介素１０（ＩＬ－１０）对人近端肾小管上皮细胞（ＨＫ－２细胞）在促炎症因子肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）作用下表达细胞间黏附分子１（ＩＣＡＭ－ｌ）及其相关核转录途径的影响。方法 用ＨＫ－２细胞作靶细胞，用细胞酶联免疫吸附法（ＥＩＪＳＡ）和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交观察ＩＣＡＭ－１的蛋白和基因的表达，以电泳迁移率变动法测定转录因子核因子ｋＢ （ＮＦｋＢ）和激活蛋白 Ｉ（ＡＰ－１）的活性。结果ＴＮＦα呈剂量依赖地诱导ＨＫ－２细胞ＮＦｋＢ的活化及ＩＣＡＭ－１的基因和蛋白表达，这些作用可以被ＮＦｋＢ的抑制剂对甲苯磺－Ｌ－苯丙氨酸氯甲基甲酮（ＴＰＣＫ）所抑制，但ＴＮＦα对ＨＫ－２细胞的ＡＰ－１活性无影响。 ＩＬ－１０（１～ ２０ｎｇ／ｍｌ）可抑制 ＴＮＦα诱导的 ＨＫ－２细胞 ＩＣＡＭ－ｌ基因和蛋白表达及 ＮＦｋＢ的活化。结论ＴＮＦα诱导人肾小管上皮细胞ＨＫ－２的ＮＦｋＢ活化，进而促进ＩＣＡＭ－ｌ基因和蛋白表达，ＩＬ－１０可抑制ＴＮＦα诱导的上述炎症效应。     

白细胞介素10抑制核因子kB介导的肾小管上皮细胞表达细胞间 …

目的 研究白细胞介素１０（ＩＬ－１０）对人近端肾小管上皮细胞（ＨＫ－２细胞）在促炎症因子肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα作用下表达细胞间黏附分子１（ＩＣＡＭ－１）及其相关核转录途径的影响。方法 用ＨＫ－２细胞作靶细胞,用细胞酶联免疫吸附法和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交观察ＩＣＡＭ－１的蛋白和基因的表达,以电泳迁移率变动法测定转录因子ｋＢ（ＮＦｋＢ）和激活蛋白１（ＡＰ－１）的活性。结果 ＴＮＦα呈剂量依赖地诱导ＨＫ     

转移生长因子—β,碱性成纤维细胞生长因子诱导人成骨细胞表达血小板衍生生

目的 探讨转移生长因子（ＴＧＦ）－β、碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对人成骨细胞血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）－ＢｍＲＮＡ表达的影响及其意义。方法 体外分离培养人成骨细胞。在体外培养的成骨细胞中分别加入１０、２０、４０、８０、１６０ｕｇ／Ｌ梯度浓度的ＰＤＧＦ－ＢＢ培养细胞２４ｈ,以摄取＾３Ｈ－ＴｄＲ为细胞增殖指标检测细胞增殖状况。以４ｕｇ／Ｌ的ＴＧＦ－β和１０ｕｇ／Ｌ的ｂＦＧＦ培养细胞２４ｈ,寡核苷酸探针检测细胞ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ的表达。结果 １０～１６０ｕｇ／Ｌ的ＰＤＧＦ－ＢＢ可促进成骨细胞增殖（Ｐ〈０．０５）。在普通培养条件下,细胞下表达ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ;当培养体系中加入ＴＧＦ－β和ｂＦＧＦ,可见ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ的表达。结论 ＰＤＧＦ－Ｂ基因的表达可能是骨组织生长的储备因素,ＴＧＦ－β和ｂＲＮ     

人B7逆转录病毒基因转移体系的建立及在肾癌细胞中的表达

将人Ｂ７基因亚克隆到逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ中，构建了人Ｂ７逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮＢ７，经Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导转染包装细胞，并通过Ｇ４１８筛选获得较高病毒滴度的细胞株ＰＡ３１７／ｐＬＸＳＮＢ７（３×１０５～１×１０６ｃｆｕ／ｍｌ）。用此逆转录病毒基因转移体系将Ｂ７基因转移到肾癌ＧＲＣ１细胞中，经ＲＴＰＣＲ、间接免疫荧光及ＬＳＡＢ细胞免疫组化等检测方法检测到转基因细胞中Ｂ７ｍＲＮＡ及Ｂ７分子的表达。介导人Ｂ７基因的逆转录病毒基因转移体系的建立，为人肾癌转基因瘤苗的应用研究提供了实验基础。     

地塞米松和川芎嗪对狼疮肾炎外周血单个核细胞白细胞介素—1 …

目的 探讨地塞米松、川芎嗪对活动期,静止期狼疮肾炎（ＬＮ）外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）白细胞介素－１２（ＩＬ－１２）表达的影响。方法 应用地塞米松,川芎嗪对ＬＮ患者ＰＢＭＣ培养,以正常人为对照,分别采用ＥＬＩＳＡ法和半定量ＲＴ－ＰＣＲ法检测细胞上清液及细胞ＩＬ－２和ＩＬ－１２ Ｐ４０ｍＲＮＡ表达。结果ＬＮ活动期,静止期较正常对照组ＩＬ－１２蛋白,基因水平明显增高（Ｐ〈０．０１）。地塞米松明显抑制狼     

逆转录病毒载体介导的人IL－2基因在膀胱肿瘤细胞T_（24）中的表达

报道逆转录病毒载体介导的人白细胞介素－２（ＩＬ－２）ｃＤＮＡ在人源性膀胱肿瘤细胞Ｔ２４中的表述，ＩＬ－２ｃＤＮＡ插入到真核表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ中，构建成ＩＬ－２ｃＤＮＡ的表达载体ｐＤＯＲＩＬ－２，磷酸钙沉淀法将其导入Ｔ２４细胞中，经Ｇ４１８选择，转染阳性率约为２０％；原位杂交技术检测ＩＬ－２ｃＤＮＡ可转录ＩＬ－２ｍＲＮＡ，细胞培养上清中ＩＬ－２活性２４小时每１０５细胞为８～３４Ｕ／ｍ１。表明ＩＬ－２基因在Ｔ２４细胞中已表达，为研制膀胱肿瘤转基因瘤苗及开展膀胱肿瘤基因治疗打下了基础。     

LFA-1共刺激诱导狼疮性肾炎外周血单个核细胞IL-10表达的研究

目的：探讨淋巴细胞功能相关抗原－１（ＬＦＡ－１）对活动性狼疮肾炎（ＬＮ）外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）白介素 １０（ＩＬ－１０）的调节作用。方法：利用半定量 ＲＴ－ＰＣＲ技术观察 ＬＦＡ－ １共刺激对活动性 ＬＮ患者 ＰＢＭＣ ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ表达的影响。结果：单独抗ＣＤ３抗体（３０ ｎｇ／ｍｌ）能诱导ＬＮ 患者ＰＢＭＣ ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ轻微表达（０．４３＋０．０３ｖｓ ０．５５±０．４４,Ｐ＜０．０５）而在抗ＣＤ３抗体（３０ ｎｇ／ｍｌ）存在的情况下,抗ＬＦＡ－１抗体（２ μｇ／ｍｌ,相当于ＬＦＡ－１配体）共刺激时明显增加了ＰＢＭＣ ＩＬ—１０ ｍＲＮＡ表达（１．３１±０．０８ｖｓ ０．５５＋０,０４,Ｐ＜０．０１）。ＬＦＡ－１中和抗体明显抑制了这种共刺激诱导的ＩＬ—１０ ｍＲＮＡ表达（１．３１±０．０８ｖｓ ０．６４ ±０．０３,Ｐ＜０．０１）。抗ＬＦＡ－１抗体单独刺激时并不引起 ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ表达变化（Ｐ＞０．０５）。结论：ＬＦＡ－１作为共刺激分子诱导 ＩＬ－ １０ ｍＲＮＡ表达可能是其参与 ＬＮ发病的机制之一。     

系膜增殖性肾炎患者肾小球细胞IL-6、GP130和JunB mRNA表达及其意义

目的探讨白细胞介素６（ＩＬ－６）信号传递过程中某些成份（ＧＰ１３０、ＪｕｎＢ）在ＭｅｓＰＧＮ分子发病机制的作用。方法用原位杂交技术观察了ＭｅｓＰＧＮ患者肾活检组织肾小球细胞中ＩＬ－６、ＧＰ１３０、ＪｕｎＢｍＲＮＡ表达，并分析了其与患者肾小球系膜扩张、系膜细胞增殖程度、尿蛋白排泄量之间的关系。结果ＩＬ－６、ＧＰ１３０、ＪｕｎＢｍＲＮＡ表达分别是７．１±０．８、８．６±０．９、６．９±０．８，明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），且相互间呈正相关；ＩＬ－６、ＧＰ１３０基因表达量与系膜扩张、尿蛋白排泄量呈正相关，中度系膜增殖性肾炎组、尿蛋白＞３．５克／日组，ＩＬ－６，ＧＰ１３０基因表达量明显高于轻度系膜增殖性肾炎组与尿蛋白＜３．５克／日组。结论ＩＬ－６及其信息传递中的ＧＰ１３０、ＪｕｎＢ基因异常表达在ＭｅｓＰＧＮ分子发病机制起一定作用。