从皮肤的细胞外基质（NECM）中制取可注射胶原

常规制取注射性胶原的方法是用酶降解法，经反复酸提、盐析、离心、交联等步骤，进行纯化，该法将胶原降解，酶提取分子片断，用交联剂组成可注射胶原。本法是从ＮＥＣＭ开始制取，ＮＥＣＭ已为胶原框架，因此步骤简化很多，仅需解裂胶原网状结构，酶解末端蛋白以消除特异性，最后降解成３００ｎｍ左右胶原。本法不用交联剂和稳定剂。生物原材料来源广泛，有利临床推广应用。经半年动物实验证明，本法制取的可注射胶原无排斥反应和炎     

微量元素与细胞外基质

目的 论述微量元素对细胞外基质代谢的影响,探讨创伤愈合的生理和相关病理机制。方法 以基础研究结合相关临床资料,分析微量元素与细胞外基质代谢的关系。探讨创伤修复机制。结果 在创伤愈合过程中,微量元素通过参与酶的构成与激活、构成体内重要的载体及蛋白质成份、参与激素和维生素的合成以及调控自由基水平等功能,广泛参与到胶原蛋白和其它细胞外基质的合成、分解、沉积与重建过程中。结论 微量元素对细胞外基质的代谢起着一定的调控作用,在创伤愈合过程中发挥着重要作用。     

细胞外基质与下肢静脉曲张关系研究

静脉壁的细胞外基质维持了静脉壁正常的结构和功能。曲张静脉壁的细胞外基质中各种成分的分布和含量发生了不同程度的改变，且对静脉曲张的形成具有重要的意义。本文就曲张静脉壁的细胞外基质的改变作一综述。     

结缔组织细胞外基质的组织化学和免疫组织化学

结缔组织细胞外基质由细胞外基质蛋白和葡萄胺聚糖构成，其成分间的关系密切，研究结缔组织中细胞外基质的分布在特定的组织中的不同作用，对疾病的病因、病理及其发病机制将起到重要的作用。本文拟对结缔组织细胞外基质的研究方法、意义以及近年来的进展作一综述。     

从NECM制取的可注射性胶原的生物学评价

从ＮＥＣＭ制取可注射胶原是从大分子降解为胶原分子，因此不需要交联剂和稳定剂。溶液中仅有胶原分子，无交联剂。本实验是将可注射胶原液（１２０ｍｇ／ｍｌ）１ｍｌ注入大鼠尾部皮下组织内，共注射３０只，分三批杀死（１．５个月，３．０个月和半年），取注射部位的皮下组织作组织切片、染色（ＨＥ）、光镜观察（包括偏光显微镜）。发现三组在注射部位皮下组织内均有胶原分散存在。半年时胶原量少而且排列有序，未见包裹现象。除１．５个月少数动物皮下组织内有轻度炎性反应外，其余均未见到炎性反应。无排斥反应。局部组织无坏死现象。实验认为：本法所制可注射胶原液在半年内未发现特殊的生物学反应，胶原未完全吸收。     

细胞外基质、基质金属蛋白酶和ARDS(文献综述)

细胞外基质 (ECM)是位于细胞之间的主要由胶原等大分子物质组成的一个动态网状结构 ,在细胞的增殖、迁移、分化及炎症反应过程中发挥了重要作用。基质金属蛋白酶 (MMPs)是一组含锌离子的蛋白水解酶 ,可由多种细胞分泌 ,参与对 ECM的降解。近年来研究表明 MMPs与 ARDS的发生、发展有密切联系。本文就细胞外基质、基质金属蛋白酶与 ARDS之间的联系作一综述。     

从NECM制取的可注射性胶原的生物学评价

从ＮＥＣＭ制取可注射胶原是从大分子降解为胶原分子，因此不需要交联剂和稳定剂。溶液中仅有胶原分子、无交联剂。本实验是将可注射胶原液注入大鼠尾部皮下组织内，共注射３０只，分三批杀死（１．５个月，３．０个月和半年），取注射部位的皮下组织作组织切片，染色（ＨＥ）、光镜观察（包括偏光显微镜）。     

异种(猪)脱细胞真皮基质微粒注射填充研究

目的：探讨一种新型的注射填充材料，方法：将异种（猪）脱细胞真皮基质微粒（简称ADM微粒）注入兔耳背皮下并形成皮丘，定时对植入物进行测量，光镜及电镜观察，临床应用于4例面部凹陷畸形整复。结果：ADM微粒注射后从外围向中央细胞化及血管化，12周左右体积基本稳定，48周时吸收率为26．93％左右，临床应用结果满意。结论：ADM微粒安全性好，吸收率低、使用方便，微创。     

皮肤扩张条件下真皮中细胞外基质变化的研究进展

皮肤软组织扩张术是整形外科重要的治疗手段之一,主要通过机械张力作用牵张皮肤,或借助牵拉组织皮肤缺氧促进皮肤细胞增殖,获得“额外”皮肤,以满足体表皮肤软组织缺损修复的需要。但扩张后真皮变薄,严重限制了其临床应用。而真皮主要由细胞外基质和成纤维细胞构,因此,探明缺氧或机械张力作用条件下细胞外基质的合成与降解规律具有重要意义。现就扩张条件下细胞外基质的变化规律作一综述。     

细胞外基质与下肢静脉曲张关系研究(文献综述)

静脉壁的细胞外基质维持了静脉壁正常的结构和功能。曲张静脉壁的细胞外基质中各种成分的分布和含量发生了不同程度的改变 ,且对静脉曲张的形成具有重要的意义。本文就曲张静脉壁的细胞外基质的改变作一综述     

天然神经细胞外基质桥接周围神经缺损的实验研究

周围神经缺损的修复一直是困扰临床医生的一个难题,为此我们尝试了用组织工程方法修复周围神经缺损的实验研究,旨在了解天然神经细胞外基质（ＮａｔｕｒｅＥｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒＭａｔｒｉｘ,ＮＥＣＭ）在神经再生中的作用,为临床修复周围神经缺损寻求新的替代材料。实验用ＳＤ大鼠４８只各组１２只分别用ＮＥＣＭ,自体坐骨神经;腹壁浅静脉桥接坐骨神经１０ｍｍ缺损,空白对照组缺损旷置。术后８周,观察运动功能、再生神经形态学及ＨＲＰ逆行标记脊髓前角运动神经元情况表明,上述指标ＮＥＣＭ组与自体神经移植组无显著差异（Ｐ＞０．０５）优于静脉移植组（Ｐ＜０．０１）。该移植体无免疫排斥反应,具有良好的生物相容性,且富含神经再生所需生物要素,为神经再生构成了良好的微环境条件,因此在临床修复神经缺损有潜在的实用价值。     

Injectable collagen: A six-year clinical investigation

An injectable form of bovine dermal collagen has been developed for use in correcting cutaneous contour deficiencies. This material is a sterile device composed predominantly of highly purified type I collagen dispersed in phosphate-buffered physiological saline containing 0.3% lidocaine. The safety and efficacy of injectable collagen, which is now in widespread clinical use in the United States, Canada, England, Germany, France, Switzerland, Brazil, and 11 other countries, were evaluated in a 6 1/2-year investigation in which 5,109 patients were evaluated by 728 dermatologists and plastic surgeons. The incidence of adverse treatment reactions was 1.3%, most of which manifested with localized swelling and erythema. Current data covering an estimated 100,000 patients indicate that the incidence of treatment reactions has not increased during the 3 1/2 years since the material was cleared for marketing by the United States Food and Drug Administration. Subjective assessment of efficacy indicated that the material may be employed successfully to elevate dermal contour defects associated with various etiological factors.     

可注射性人胎盘胶原豚鼠皮内、皮下注射实验研究

目的 研究可注射性人胎盘胶原的理化性质及临床应用特点.方法 将实验豚鼠随机分为两组,并将浓度为8mg/ml及30mg/ml的两种胶原分别注于两组豚鼠的皮下和皮内,以生理盐水作对照.实验鼠分别在注射后1、3、5、7、14、28、49、91、196天作大体观察和组织切片观察.结果 显示可注射性人胎盘胶原不引起明显的过敏反应及炎症反应.注入宿主皮内后,能较长期稳定留存,并逐步被宿主的自身胶原替代,共同进入宿主的生命代谢过程.它还能使真皮的胶原纤维增加,真皮增厚,延缓了真皮的衰老.结论 可注射性人胎盘胶原在整形美容外科中作为改善皮肤衰老中出现的皱褶及修复皮肤浅表凹陷性缺损具有实用价值.     

人皮肤成纤维细胞与PGA进行组织构建的适宜接种浓度

目的 可吸收生物材料聚羟乙酸(PGA)与成纤维细胞已被证实可以应用于体外组织工程肌腱的构建,本试验旨在探讨应用人皮肤成纤维细胞与PGA在体外进行组织构建时的适宜接种浓度.方法 酶消化法获得人皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增至第2代,按照低、中、高三种浓度接种于PGA材料分别作为实验组1、2、3,传统浓度细胞接种的作为对照组,各组样本数n均为3,分别于接种后3天、1周、2周和4周进行观察和检测.结果 接种后3天实验各组无明显差异,细胞在材料上黏附伸展良好.1周和2周时,各组细胞均有明显增殖,并分泌细胞外基质(ECM extra cellular matrix),但实验组1、2的ECM不如实验组3和对照组丰富,此后该现象更为明显.至第4周时,实验组1仅形成厚薄不均的薄膜状物,其余三组均形成组织样结构,但实验组2形成的细胞--材料复合物结构略为松散.结论 应用本实验组中高浓度接种皮肤成纤维细胞在体外构建工程化组织可以达到传统所用更高浓度的接种效果,以节约细胞,减少取材.     

酶洗法制备兔组织工程气管支架的周期研究

目的探讨酶洗法制备兔气管支架的最适宜处理周期。方法健康新西兰兔24只,随机分为4组（n=6）。以新鲜未处理气管作为对照组（A组）,按照酶洗法2、3、4个周期处理气管作为实验组（B组、C组、D组）。对照组和实验组标本处理后光镜组织学观察．电镜扫描观察超微结构,并测量气管最大拉伸力、破裂力、变异率等生物力学性能。结果B、C组气管支架的最大拉伸力、最大破裂力和变异率均显著大于A、D组;组织学观察显示A组有大量黏膜上皮细胞,B组见部分黏膜上皮细胞,C、D组未见黏膜上皮细胞;电镜扫描显示实验A、B、C组气管支架的细胞基质和胶原纤维明显多于D组。结论经酶洗法处理3个周期的兔气管支架具有理想的去抗原效果和生物力学性能,并具有较完整的细胞外基质．适合用于构建组织工程同种异体气管。     

Platelet rich plasma (PRP) enhances anabolic gene expression patterns in flexor digitorum superficialis tendons.

Platelet rich plasma (PRP) has recently been investigated for use in tissue regeneration studies that seek to utilize the numerous growth factors released from platelet alpha-granules. This study examined gene expression patterns, DNA, and collagen content of equine flexor digitorum superficialis tendon (SDFT) explants cultured in media consisting of PRP and other blood products. Blood and bone marrow aspirate (BMA) were collected from horses and processed to obtain plasma, PRP, and platelet poor plasma (PPP). IGF-I, TGF-beta1, and PDGF-BB were quantified in all blood products using ELISA. Tendons were cultured in explant fashion with blood, plasma, PRP, PPP, or BMA at concentrations of 100%, 50%, or 10% in serum-free DMEM with amino acids. Quantitative RT-PCR for expression of collagen type I (COL1A1), collagen type III (COL3A1), cartilage oligomeric matrix protein (COMP), decorin, matrix metalloproteinase-3 (MMP-3), and matrix metalloproteinase-13 (MMP-13) was performed as were DNA and total soluble collagen assays. TGF-beta1 and PDGF-BB concentrations were higher in PRP compared to all other blood products tested. Tendons cultured in 100% PRP showed enhanced gene expression of the matrix molecules COL1A1, COL3A1, and COMP with no concomitant increase in the catabolic molecules MMP-3 and MMP-13. These findings support in vivo investigation of PRP as an autogenous, patient-side treatment for tendonitis.     

Release of growth factors from a reinforced collagen GAG matrix supplemented with platelet rich plasma: Influence on cultured human meniscal cells

Damage to meniscal cartilage has been strongly linked to accelerated articular wear and consequently to osteoarthritis. Damage might be ameliorated by delivery of growth factors from platelet rich plasma (PRP) via a fiber reinforced collagen matrix designed for meniscal repair. PRP composition, release of growth factors, and influence on meniscal cell growth and gene expression were investigated. PRP was prepared using Harvest Smartprep (HS‐PRP), Cascade Fibrinet (CF‐PRP), and a simple centrifuge protocol (DC‐PRP) from four donors each. CF‐PRP had the highest ratio of platelets, with very few other blood cell types. HS‐PRP had the highest total number of platelets but also contained high levels of red and white blood cells. Absorbed to collagen matrices HS‐PRP released the highest levels of TGF‐β1 and PDGF‐AB with DC‐PRP the most IGF‐1. Cumulative release from collagen matrix was 48 ng/cm³ IGF‐1, 96 ng/cm³ TGF‐β1, and 9.6 ng/cm³ PDGF‐AB. Collagen matrix with PRP was able to increase meniscal cell number above peripheral whole blood and up‐regulated gene expression of Aggrecan, Collagen type I (α1), and Elastin (3.3 ± 0.8‐fold, 2.9 ± 0.6‐fold, 4.0 ± 1.4‐fold, respectively). Demonstrating that PRP combined with fiber reinforced collagen matrix could influence meniscal cells and might be of use for treating meniscal defects. © 2013 Orthopaedic Research Society. Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 32:273–278, 2014.