孕早期人巨细胞病毒感染对仔鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基表达的影响

目的探讨孕早期人巨细胞病毒(HCMV)感染对子代SD大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚基的影响及对仔鼠学习记忆的影响。方法取8周龄SPF级SD雌鼠18只。按雌雄31合笼交配,将受精大鼠随机分为实验组和对照组,每组9只,于妊娠第5天分别腹腔内注射5×107L-1半数组织培养感染量(TCID50)HCMV悬液0.8 mL和等量的人胚成纤维细胞上清液。出生后1个月分别从每组随机抽取10只子代大鼠,取仔鼠脑组织,采用HE染色观察仔鼠海马形态学变化;使用Morris水迷宫评价子代大鼠的学习记忆功能;应用免疫组织化学方法检测大鼠海马组织NMDA受体表达变化。采用SPSS 16.0软件进行统计学处理。结果对照组子代大鼠海马未见神经元缺失,排列紧密,均匀整齐,胞核呈圆形或椭圆形,核仁明显,染色质均匀;与对照组比较,实验组子代大鼠海马有神经细胞坏死、减少、水肿、细胞核消失现象,部分细胞呈巨细胞变;在Morris水迷宫实验中,实验组子代大鼠的学习记忆成绩较对照组明显下降(Pa<0.01);免疫组织化学结果显示实验组子代大鼠海马组织NR1、NR2A及NR2B平均吸光度均较对照组低(Pa<0.01)。结论孕早期HCMV感染可导致仔鼠学习记忆能力受损,可能与其海马区NMDA受体的表达减少有关。     

孕早期大鼠人巨细胞病毒感染对仔鼠海马细胞外信号调节蛋白激酶通路的影响

目的观察孕早期大鼠人巨细胞病毒(HCMV)感染对仔鼠海马细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)通路的影响,为研究HCMV先天性感染对子代大鼠海马学习记忆损伤的机制及防治HCMV先天性感染导致的学习记忆障碍等神经系统后遗症提供实验依据。方法取8～9周龄雌性SPF级SD大鼠12只,按雌雄=31配对,孕鼠随机分为对照组和实验组,每组6只。于孕第5天实验组孕鼠腹腔内注射100半数组织细胞感染量HCMV悬液0.8 mL,对照组孕鼠腹腔内注射等量的人胚肺成纤维细胞上清液。于出生后30 d每组随机取10只仔鼠,取仔鼠脑组织,采用HE染色观察仔鼠海马齿状回(DG)区颗粒细胞的形态学改变;免疫组织化学法观察仔鼠海马DG区ERK1、ERK2、p-ERK的表达,并应用SPSS 13.0软件进行分析。结果对照组仔鼠海马未见明显的神经元缺失,排列紧密,均匀整齐,胞核呈圆形或椭圆形,核仁明显,染色质均匀;实验组仔鼠海马细胞数减少,组织结构较稀疏,排列紊乱。ERK1、ERK2、p-ERK主要表达于胞核和胞质,阳性部位呈现棕黄色。实验组仔鼠海马DG区的ERK1、ERK2、p-ERK染色强度及平均积分光密度均低于对照组,差异均有统计学意义(Pa<0.01)。结论孕早期HCMV感染可降低仔鼠海马DG区ERK1、ERK2、p-ERK的表达,可能与HCMV先天感染损伤海马的学习记忆功能有关。     

幼年大鼠反复热性惊厥脑损伤的研究

目的：观察反复热性惊厥在幼年大鼠引起的脑损伤。方法：65只16d 龄大鼠随机分为正常对照组、高热对照组和热性惊厥组,利用热水浴诱导惊厥模型。采用Morris水迷宫方法检测大鼠的空间学习记忆能力;采用尼氏染色、TUNEL染色和电镜方法观察神经元损伤情况。结果：热性惊厥组大鼠寻找平台潜伏期较正常对照组明显延长［(8.33±9.83) s vs (4.00±2.96) s］,差异有显著性(P<0.01);尼氏染色未见明显异常;TUNEL染色显示惊厥组大鼠海马区阳性细胞数较正常对照组和高热对照组增加(9.67±5.52 vs 5.08±4.12,9.67±5.52 vs 3.17±3.35),差异有显著性(P<0.05);电镜观察惊厥组大鼠可见线粒体肿胀、嵴模糊或断裂、空泡形成等。结论：在未成年大鼠,反复热性惊厥可引起脑损伤     

孕前接种人巨细胞病毒pp65 DNA疫苗对阻断小鼠人巨细胞病毒宫内传播的效果

目的探讨构建的人巨细胞病毒(HCMV)pp65 DNA疫苗能否阻断HCMV宫内垂直传播及其免疫机制。方法24只6～8周龄健康雌性Balb/c小鼠随机分为A、B二组,每组12只。A组为疫苗组,B组为对照组。A组于0、2、4周各注射pp65DNA疫苗200μg,B组同期注射9g/L盐水0.3mL。末次接种后,各组与雄鼠配笼,妊娠d3孕鼠分别注射HCMVAD169株悬液,d20仔鼠经剖宫产娩出。荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定孕鼠血清HCMVDNA载量,应用流式细胞仪技术、放射免疫法、酶联免疫吸附(ELISA)法测定其血清CD3 、CD4 、CD8 及IL-2、IFN-γ水平,比较二组间差异;比较二组孕鼠死胎率及1周内仔鼠病死率、仔鼠脑组织病理改变及血清HCMVDNA检出率。结果1.A组孕鼠死胎率及1周内仔鼠病死率分别为13.4%、3.45%,明显低于B组(54.2%、40.74%),其差异有显著性(Pa<0.01);2.A组孕鼠血清HCMVDNA拷贝数(100mg)-1为932.80±89.62,明显低于B组(387547.6±49721.07)(P<0.01);3.A组孕鼠血清CD3 、CD4 、CD8 、IL-2、IFN-γ水平明显高于B组,差异均有显著性(Pa<0.01);4.B组仔鼠脑组织有明显病理改变,A组则无;5.A组仔鼠血清HCMVDNA检测均阴性,B组检出8/12例阳性。结论pp65DNA疫苗可能通过增强孕鼠的免疫功能,尤其是细胞免疫水平阻断HCMV宫内垂直传播。     

孕期和哺乳期轻度缺锌对仔鼠学习记忆能力的影响

目的探讨孕期和哺乳期母鼠缺锌对仔鼠幼年期学习记忆能力的影响。方法怀孕1 d的孕鼠随机分为轻度缺锌组和对照组,每组3只。缺锌饲料、正常饲料含锌量分别为5 mg/kg、25 mg/kg。产后每窝随机保留4只。至21 d断乳去母鼠,每组12只仔鼠,继续饲以缺锌和正常饲料,分别于28 d及58 d以Morris水迷宫测试仔鼠的短期及长期学习记忆能力。结果学习获得实验(短期记忆)及记忆保持实验(长期记忆):对照组定位能力较好,游泳轨迹以目标象限为主;而缺锌组定位能力较差,游泳轨迹比较分散;缺锌组仔鼠找到平台的潜伏期、总游程大于对照组(P<0.01);两组游速的差异无统计学意义(P>0.05)。随着训练天数的增加,对照组上述各项记录都随着训练天数增加而变化,其中潜伏期和总游程随着训练天数增加而逐步减少,游泳速度、目标象限游程占总游程的百分比随着训练天数的增加而增加,缺锌组的变化趋势不如对照组明显。结论孕期及哺乳期母鼠轻度缺锌影响仔代生长期幼鼠短期与长期学习记忆能力。     

热性惊厥对大鼠行为运动及空间学习记忆的影响

目的　探讨热性惊厥对大鼠行为运动及空间学习记忆能力的影响。方法　 6 0只雄性SD大鼠随机均分为热性惊厥组 (FS) ,发热对照组 (FG)及正常对照组 (NG)。动态观察各组大鼠在斜板试验、悬吊试验、旷场活动试验中行为运动的变化以及在Morris水迷宫中空间学习记忆能力的改变。结果　在斜板试验中 ,大鼠转体时间为FS组 (9 1± 2 6 )s ,FG组 (5 3± 2 1)s,NG组 (5 3± 2 0 )s,FS组和其他两组比较差异存在显著性 (P <0 0 1) ;悬吊试验中 ,大鼠的悬吊时间分别为FS组 (33 4±18 1)s,FG组 (5 0 1± 2 0 3)s,NG组 (5 9 0± 2 0 7)s,FS组和其他两组比较差异有显著性 (P <0 0 1) ;旷场活动试验中 ,大鼠得分分别为FS组 (5 1± 2 0 )分 ,FG组 (10 4± 3 0 )分 ,NG组 (13 2± 2 3)分 ,FS组和其他两组比较差异有显著性 (P <0 0 1) ;在Morris水迷宫实验中 ,同其他两组相比 ,FS组逃逸潜伏期延长 ,搜寻策略变差 ,平台所在区域内的游泳时间百分比降低 ,穿过平台的次数减少。结论　多次热性惊厥发作可使大鼠的行为运动能力和空间学习记忆能力受损     

邻苯二甲酸二丁酯干预雄激素依赖性FGF8信号通路致尿道下裂发生的实验研究

目的 通过检测邻苯二甲酸二丁酯(DBP)孕期染毒所致尿道下裂雄性大鼠仔鼠睾酮(T)、雄激素受体(AR)及成纤维细胞生长因子8(FGF8)的表达,研究DBP干预雄激素依赖性FGF8通路致尿道下裂发生的相关机制.方法 20只孕鼠随机分为两组,孕14～18 d,分别予大豆油及DBP 750 mg·kg-1 ·d-1灌胃.仔鼠出生第一天,统计仔鼠出生数、尿道下裂发生率.第七天时,称量雄性仔鼠体重,拍摄尿道下裂图片,分别取两组中尿道下裂仔鼠及正常仔鼠血清和生殖结节(GT),用放射免疫法检测仔鼠血清睾酮含量;用定量逆转录聚合酶链式反应(Real-time quantitative PCR)及WesternBlot检测AR与FGF8表达水平.结果 染毒组及对照组产仔数分别为9.10±0.99和12.60±1.26,仔鼠体重(g)分别为9.53±0.12和11.93±0.15,DBP的生殖毒性作用导致染毒组孕鼠产仔数及仔鼠体重明显减少(P＜0.05),雄性仔鼠尿道下裂发生率为37.2％.染毒组仔鼠血清睾酮浓度(41.85±8.38) ng/L、生殖结节中AR0.404±0.040及FGF 80.036±0.004的表达均明显低于对照组睾酮浓度( 107.40±24.28) ng/L、AR表达1.669±0.124及FGF8表达0.168±0.004(P＜0.05).结论 DBP对孕鼠有明显的生殖毒性,DBP通过干预雄激素依赖性FGF8信号通路,导致尿道下裂的发生.     

电针对先天性脑损伤仔鼠脑组织脑源性神经生长因子表达的影响

目的探讨电针对先天性脑损伤仔鼠脑组织脑源性神经生长因子(BDNF)表达的影响和机制。方法给孕17 d的脂多糖组孕鼠腹腔注射脂多糖450μg/(kg.d),制备脑损伤模型;对照组孕鼠腹腔注射等量生理盐水。脂多糖组仔鼠随机分为非干预组和电针组,电针组于7日龄开始干预,每日1次,干预至28日龄。选取百会、曲池及足三里为干预穴位。对照组、非干预组仔鼠均常规饲养。采用免疫组织化学方法检测1、14、21、28日龄仔鼠脑组织BDNF表达情况。结果 1日龄非干预组脑组织BDNF阳性细胞计数高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),此后两组间比较差异无统计学意义(P>0.05);电针组各日龄仔鼠脑组织BDNF阳性细胞计数高于非干预组和对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论宫内感染可引起脑损伤仔鼠脑组织BDNF阳性表达增强;电针能持续上调脑损伤仔鼠脑组织BDNF阳性表达。     

癫(癎)持续状态对发育期大鼠学习记忆及海马磷酸化的c-AMP反应元件结合蛋白表达的影响

目的探讨癫癎持续状态(SE)对发育期大鼠学习记忆功能及海马磷酸化的c-AMP反应元件结合蛋白(pCREB)表达的影响。方法6周龄SD大鼠32只随机分为SE组和9g/L盐水对照组(NS组)。戊四氮(PTZ)诱导发育期大鼠SE。采用Morris水迷宫和Y迷宫观察大鼠学习记忆功能的改变,应用免疫组织化学方法检测大鼠海马各区pCREB的表达。结果与NS组比较,SE组在Morris水迷宫测试中平均逃避潜伏期明显延长(P<0.05),原平台所在象限的游泳时间明显缩短(P<0.05);Y迷宫中达标所需的训练次数显著增多(P<0.05),24h记忆保持率明显降低(P<0.05)。海马CA1区和齿状回(DG)区pCREB表达显著下调(P<0.05)。结论SE可使发育期大鼠学习记忆功能受损,其机制可能与海马pCREB表达减少有关。     

碱性成纤维细胞生长因子对新生大鼠脑缺氧缺血后学习记忆能力的改善作用

目的评估碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic!ischemicbraindamage,HIBD)后学习记忆能力的改善作用。方法建立HIBD新生大鼠模型16只,随机分成治疗组、对照组,另取8只新生大鼠作假手术组。各组于生后30d开始进行Morris水迷宫测试,动态观察其学习记忆功能。结果对照组逃避潜伏期[(51.75±11.27)s]较治疗组[(40.32±11.48)s)]和假手术组[(36.58±10.83)s]明显延长(P<0.05);对照组拆除平台后跨越平台的次数[(2.34±2.42)次]较治疗组[(5.08±3.86)次]和假手术组[(7.03±3.62)次]明显减少(P<0.05)。结论bFGF可明显改善大鼠HIBD后的学习记忆能力。     

术中判断肠活力三种方法的比较

术中准确地评价肠活力是外科医师面临的一个普遍问题。应用兔肠缺血模型，比较静脉荧光素、表面血氧测定和激光多普勒三种技术判断肠活力的精确性。结果：诊断效率静脉荧光素法为７８％，表面血氧测定为６８％，激光多普勒为９５％。后者精确度显著优于前二者，且操作简便、迅速，具有临床应用前景。     

早产儿视网膜病的危险因素分析及随访调查

研究早产儿视网膜病(retinopathy of prematurity,ROP)的发生率、高危因素、治疗与随访情况。方法对2005年7月-2007年12月温州医学院附属第一医院NICU收治的符合ROP筛查标准的早产儿,于生后2周开始由资深眼科医师开始行间接眼底镜检查眼底,并进行随访。结果434例早产儿中ROP的发生率为5.5%(24/434例),24例ROP中Ⅰ期19例,Ⅱ期3例,Ⅲ期2例。Ⅲ期阈值病变者行激光光凝治疗,全部患儿均恢复正常。对434例早产儿行单因素分析得出,胎龄、出生体重、住院时间、吸氧、吸氧浓度、吸氧时间、呼吸暂停、新生儿肺透明膜病(RDS)、肺表面活性剂(PS)的应用、机械通气、输血、光疗时间、感染与ROP的发生有相关性(P<0.05)。Logistic回归分析显示胎龄、出生体重、胎数、吸氧时间、光疗时间、代谢性酸中毒、母亲妊高症、颅内出血是影响ROP发生的主要因素。结论早产是ROP的根本原因,防治各种并发症、合理的氧疗是预防ROP的关键。建立完善有效的ROP筛查制度,早期发现、早期治疗ROP,可改善ROP的预后。     

主动脉缩窄的治疗研究进展

主动脉缩窄(coarctation of aorta,CoA)是主动脉的局限性狭窄,狭窄最常见于峡部,是一种常见的先天性心血管畸形,占所有先天性心脏病的5％ ～8％.缩窄导致上肢血压升高,下肢血压降低,并可引起心功能下降,未经治疗的CoA预后不佳.治疗方式包括外科治疗及经皮介入治疗,不同治疗方式的并发症发生率不同,术后长期监测其并发症、心功能是评估预后的重要指标.该文对主动脉缩窄的治疗方式及术后并发症、心功能情况的研究进展作一综述.     

Outcome of the Treatment of Inborn Errors of Metabolism

The use of specific dietary restrictions, cofactor administration, mobilisation of insoluble substances, environmental modifications, product replacement and selective enzyme inhibition are now established for the treatment of some inborn errors of metabolism. There is no generally accepted application for enzyme administration, cytopharmacology (manipulation of the cytoskeleton) or for cell transplantation except for bone marrow transplantation in disorders where the bone marrow is primarily at fault. The other uses of bone marrow transplantation which have been proposed require further evaluation. Results of recent research suggest that the scope of this approach is gradually being widened. There is also scope for development in the field of organ transplantation taking advantage of recent technical¹ and immunological progress. The treatment of inborn errors of metabolism by genetic modification is not yet on a practical clinical level; more laboratory and animal studies are needed before this can be attempted in man. Adenosine deaminase deficiency appears to be the disease in which this will be first attempted using a retroviral vector to insert the gene into the genome of pluripotential bone marrow cells.     

小儿法洛四联症根治术106例临床分析

目的探讨小儿法洛四联症根治术的特点,以提高手术疗效。方法对1998-02—2005-07在河南省郑州市第七人民医院接受法洛四联症根治术的106例患儿的临床资料进行回顾性分析。结果治愈103例,死亡3例,病死率为2.9%。术后随访率100%,随访3～93个月,无晚期死亡。全部病例心功能皆恢复至Ⅰ或Ⅱ级(NYHA)。结论绝大部分法洛四联症患儿可施行一期根治术,提高手术成功率的关键在于合理的体外循环灌注、严密修补室间隔缺损和恰当疏通右室流出道。     

Spectrum of clinical presentations of vein of Galen aneurysm

Aneurysm of the vein of Galen is a rare intracranial vascular malformation. It is known to have diverse manifestations and varying severity. Four cases with different modes of presentation and outcome are reported. A mortality of 50 per cent was encountered. Among the survivors, one had neurologic sequelae whereas the other had attained age-appropriate developmental milestones. The former was a rare case of spontaneous thrombosis of the aneurysm while the latter was a boy who underwent therapeutic embolization.     

Reliability of subjective estimates of exercise capacity after total repair of tetralogy of Fallot

Sixty-nine patients (age 10 × 3.5 years, median 9.7 years) operated on for tetralogy of Fallot, underwent excercise testing 5.1 × 2.5 years after total correction. Aerobic capacity was assessed by the ventilatory threshold method. After the exercise test, parents completed a validated standardized questionnaire to evaluate the habitual level of physical activity of their child. They were then asked to place their child into one of three groups, describing their child's activity level, compared to normals (below average, average and above average). In the average and above-average groups, 73% and 65% of the patients were misclassified when compared to objective exercise testing. However, in the below-average group, no misclassifications were found. Subjective estimates of activity level, and consequently exercise tolerance, were poorly associated with objective measurements of exercise performance in these patient groups. Our results question the reliability of self-reported estimates of physical activity level and consequently exercise capacity in children after surgical correction of tetralogy of Fallot.     

早产儿脑病研究进展

早产儿脑病是复杂的原发性脑损伤和继发性脑发育异常疾病.过去几年对该病有了较为深刻的认识,该文就最新的有关早产儿脑病概念演变,脑损伤后的细胞分子机制和损伤后发育障碍,尤其是活化小胶质细胞介导的少突胶质细胞损伤机制、神经/髓鞘受损和丘脑、板层下神经元及大脑皮层的受损机制或发育成熟障碍进行综述,以便对该病有更深刻的认识.     

婴幼儿法乐四联症手术治疗近期疗效的影响因素

目的 探讨影响婴幼儿法乐四联症手术治疗近期疗效的各相关因素.方法 将2003年8月至2011年2月经作者一期手术纠治的117例年龄≤3岁的法乐四联症患儿分为疗效良好、疗效较差两组.分析手术时患儿年龄、体重、术前HCT值、McGoon指数、EDVI、主动脉阻断时间、转流时间、室间隔缺损大小、升主动脉与肺动脉干直径比、...