LC-MS/MS测定大鼠血浆中咖啡酸、绿原酸及其药代动力学研究

该研究建立大鼠血浆中咖啡酸、绿原酸的LC-MS/MS测定方法,并用于大鼠体内的药代动力学研究。6只SD大鼠,单剂量静脉注射(4 mL·kg^-1)灯盏细辛注射液,以替硝唑为内标,用LC-MS/MS测定给药后血浆中的药物浓度,并用DAS 1.0软件计算药动学参数。咖啡酸、绿原酸的线性范围分别为2~128 μg·L^-1(r = 0.998 1),3~384 μg·L^-1(r = 0.998 7)。方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均小于10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。大鼠体中咖啡酸药代动力学参数:t_1/2β为(130.91±38.77) min,AUC_0-t为(4.89±0.96) mg·min·L^-1,CL为(0.12±0.02) L·min^-1·kg^-1;绿原酸药代动力学参数:t_1/2β为(49.38±8.85) min,AUC_0-t为(9.54±0.95) mg·min·L^-1,CL为(0.09±0.003) L·min^-1·kg^-1。该研究建立的LC-MS/MS分析方法准确灵敏,适于咖啡酸、绿原酸的药代动力学研究。     

绿原酸药代动力学研究进展

从研究对象、给药途径、血浆样品预处理、检测方法、研究方法、绿原酸在体内的吸收、分布、代谢、排泄、总体水平模型等几个方面着手,较为系统地综述了近十余年绿原酸药动学研究概况,以期为绿原酸进一步临床试验提供研究参考依据.     

清热养心颗粒对大鼠灌服环孢素药动学影响

目的:研究清热养心颗粒(QG)对环孢素(cyclosporine A,CsA)的药代动力学的影响。方法:超高效液相串联质谱测定大鼠全血中CsA浓度,实验动物分为对照组和实验组,对照组单独灌胃给予Cs A,实验组灌胃给予清热养心颗粒及CsA。DAS 3.0药动学软件计算药动学参数。结果:CsA单独给药、CsA-清热养心颗粒联合给药,Cs A在体内代谢动力学模型均为一室开放模型,联合给药后,CsA的t1/2显著延长,AUC显著增大。结论:清热养心颗粒可减慢CsA在体内的代谢过程。     

UPLC-MS/MS测定青蒿素代谢抑制剂猫眼草黄素及大鼠血浆药代动力学研究

目的: 建立UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中青蒿素代谢抑制剂猫眼草黄素(chrysosplenetin,CHR)的体内分析方法,并考察其药代动力学参数. 方法: 血浆样品以乙腈沉淀蛋白;采用Shim-pack XR-ODS C₁₈ 色谱柱(2.0 mm ×100 mm,2.2 μm),以地西泮为内标,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液(87:13);质谱条件为电喷雾离子源(ESI源),正离子模式检测;样品分析时间为2 min. 结果: CHR在5~5 000 μg·L^-1线性良好(r=0.999 3),提取回收率为69.0%~81.2%,日内、日间精密度和准确度符合要求.CHR口服吸收差,存在双峰甚至多峰现象;静脉注射消除半衰期短,低、中、高剂量组t_1/2分别为(17.01±8.06),(24.62±4.59),(28.46±4.63) min. 结论: 该方法特异、快速、灵敏,可用于CHR药代动力学分析.     

绿原酸的药代动力学研究

采用高效液相色谱法,测定绿原酸的体内药代动力学参数。     

清热养心颗粒质量标准研究

目的:建立清热养心颗粒的质量标准。方法:采用LC-MS联用方法对金银花中的绿原酸、咖啡酸、甘草中的甘草次酸、山豆根中的氧化苦参碱以及百合中的薯蓣皂苷元成分含量进行测定。结果:绿原酸、咖啡酸、甘草次酸、薯蓣皂苷元和氧化苦参碱线性范围分别为11.60~2970(r=0.998 6),3.05~780(r=0.995 8),1.10~282(r=0.999 1),3.63~930(r=0.993 1),0.47~120μg·L~(-1)(r=0.997 7)。结论:本法专属性强、快速灵敏、可用于清热养心颗粒质量标准的制定。     

UPLC-MS/MS快速同时测定犬血浆中补骨脂的10个活性成分及补骨脂犬药代动力学研究

建立了同时测定犬血浆中补骨脂的10个活性成分——补骨脂素、异补骨脂素、5,7,4'-三羟基黄酮、5,7,4'-三羟基异黄酮、补骨脂宁、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂苷、异补骨脂苷的UPLC-MS/MS分析方法,并对比格犬灌胃给药补骨脂水提取物后不同时间点血浆中的各成分的浓度进行了测定,绘制了血药...     

LC-MS/MS 测定大鼠血浆中香柑内酯及其药代动力学研究

目的:建立测定香柑内酯(berg)血浆药物浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱(LC-ESI-MS)联用的分析方法,并探讨其在大鼠体内的药动学。方法:采用Hypersil ODS柱(4.6 mm×250 mm,5 mm),流动相甲醇-水(77.5∶2.5),流速0.8mL.min-1,柱温30℃,检测波长300 nm。结果:Berg在8.12～162.4μg.L-1(r=0.999 9)线性关系良好。方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均<10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。结论:该法准确、灵敏、特异,适用于berg的体内定量分析,berg在大鼠体内药动学过程属于一级吸收二室模型。     

苗药黑骨藤中绿原酸在大鼠体内药动学研究

目的 采用UPLC-MS/MS法建立大鼠血浆中绿原酸含量测定的方法,并将其应用于黑骨藤中绿原酸在大鼠体内的药动学研究.方法 采用沉淀蛋白法处理血浆样品,以葛根素为内标,色谱柱:ACQUITY UPLC CSH C18(150 mm×3.0 mm,1.7μm),流动相:乙腈-水(0.2％甲酸)(80:20)等度洗脱,流速...     

京尼平苷在大鼠体内药代动力学性别差异研究

目的:建立大鼠血浆中京尼平苷和京尼平快速液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,考察毒性剂量下,性别差异对京尼平苷在大鼠体内的药代动力学特征的影响。方法:将大鼠分为雌雄两组,分别灌胃给与700 mg/kg的京尼平苷水溶液,收集各时间点的大鼠血浆,采用LC-MS/MS法测定血浆京尼平苷和京尼平浓度,通过DAS 2.1.1软件计算主要药代动力学参数。结果:大鼠灌胃京尼平苷后,体内京尼平苷主要的药代动力学参数为:雄性组AUC(0-t)为(17860±6886)μg·h/L,Cmax为(3059±1499)ng/ml,t1/2为(7.4±3.4)h;雌性组AUC(0-t)为(17197±7576)μg·h/L,Cmax为(3904±1062)ng/ml,t1/2为(5.3±2.9)h。结论:灌胃700mg/kg京尼平苷后,京尼平苷药动学特征不具性别差异,而京尼平的药动学特征可能存在性别差异。     

黄芩苷纳米混悬剂大鼠体内药代动力学研究

[目的]建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)的方法,并对大鼠灌胃给药黄芩苷纳米混悬剂(BL-NSPS)后黄芩苷的药代动力学进行研究。[方法]采用LC-MS/MS方法,色谱柱:Waters ACQUITY UPLC~HSS C_(18)柱(1.8μm,2.1 mm×50 mm,美国Waters公司);柱温:30℃;流速:0.3 mL/min;进样量:5μL;流动相:0.1%甲酸水(A)-乙腈(B);梯度洗脱。以卡马西平为内标,采用电喷雾离子源(ESI离子源),在正离子检测方式下进行多反应离子监测(MRM),检测离子对分别为m/z 447.09→270.80(黄芩苷)、m/z 237.10→193.80(卡马西平,内标),测定大鼠灌胃给药BL-NSPS后黄芩苷的血药浓度,并用Win Nonlin 6.0版药动学软件计算其药代动力学参数。[结果]黄芩苷在24.75~4 950.00 ng/m L范围内线性关系良好,血浆中内源性物质无干扰,LC-MS/MS方法回收率、基质效应、精密度、准确度和稳定性均符合生物样品的测定要求。BL-NSPS和黄芩苷原料药(BL-Bulk)的C_(max)分别为(3 329.10±499.10)ng/mL、(1 257.84±158.21)ng/mL。BL-NSPS的C_(max)较BL-Bulk有了显著提高(P0.05),BL-NSPS的相对生物利用度为(160.97±47.78)%。[结论]建立的LC-MS/MS测定方法准确度强、专属性好,可用于黄芩苷的药代动力学研究。结果显示,BLNSPS能增加药物的吸收速率,缩短了药物起效时间,提高药物体内生物利用度,可为黄芩苷制剂的进一步研发奠定基础。     

UPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中异荭草素, 野黄芩苷和木犀草苷及其药代动力学研究

目的:建立利用UPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中异荭草素、野黄芩苷和木犀草苷等3种黄酮的分析方法,并研究大鼠静脉注射3个剂量的注射用复方荭草后的药代动力学特征。方法:血浆样品采用酸化后甲醇沉淀蛋白,采用WatersAcquity BEH C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测(MRM)。结果:3种黄酮成分在大鼠血浆中线性关系良好,提取回收率78.56%～101.91%,日内、日间精密度和准确度良好,各物质在大鼠体内的平均滞留时间均较短(<22 min)。结论:该方法特异、快速、准确和灵敏,可用于注射用复方荭草在大鼠体内的药动学研究。     

HPLC法测定大鼠血浆中雷公藤内酯醇及其药代动力学研究

目的:建立大鼠血浆中雷公藤内酯醇的HPLC测定法,测定大鼠尾静脉注射雷公藤内酯醇后的血药浓度,并对其药代动力学进行评价。方法:血浆样品加入适量HCl后用乙酸乙酯提取进行HPLC分析,流动相为乙腈-水(23:77),流速为1.0ml/min,检测波长为217nm。大鼠尾静脉注射100μg/kg、200μg/kg、300μg/kg的三个剂量雷公藤内酯醇后,测定血浆中不同时间点雷公藤内酯醇的浓度,并计算主要药动学参数。结果:血浆中雷公藤内酯醇在0.02~10.0μg/ml浓度范围内线性关系良好,血浆中雷公藤内酯醇的最低检测线为0.02μg/ml,平均回收率为88.03%,日内和日间差异RSD均小于5%,峰面积与血药浓度呈良好的线性关系(r2=0.9993)。大鼠尾静脉分别注射三个剂量雷公藤内酯醇后,各剂量组相对应的分布相(t1/2α)半衰期分别为:0.033,0.021,0.026h,消除相半衰期(t1/2β)分别为:0.753,0.630,0.574h。结论:本实验方法简便,可靠,可用于雷公藤内酯醇血药浓度分析及其药代动力学研究,测定结果可为该药的临床用药提供依据。     

塞络通灌胃后人参皂苷在大鼠体内的药代动力学及脑分布研究

塞络通（SLT）是由人参、银杏叶、西红花组方,主治血管性痴呆的现代复方中药。为探讨SLT药效物质基础,并为给药方案提供依据,该文对治疗剂量SLT给与大鼠后,人参皂苷成分的血药浓度、药代特征、以及脑分布进行了研究。实验建立了同时检测生物样品中7种人参皂苷的高灵敏度LC-MS/MS分析方法,经过对线性、专属性、回收率、准确度、精密度的考察,所建立的分析方法符合临床前药代动力学研究要求。灌胃SLT 60 mg·kg^-1后,7种目标成分均在大鼠血浆中检出,其中二醇型皂苷比三醇型的皂苷有更高的血药浓度和更长的消除半衰期。血浆中人参皂苷Rg₁,Re,Rb₁,Rb₂/b₃,Rc,Rd的平均消除半衰期分别为15.26,2.46,18.41,27.70,21.86,61.58 h;平均峰浓度分别为7.15,2.83,55.32,30.22,21.42,8.81 μg·L^-1。SLT给药后人参皂苷成分能够迅速进入脑组织,但是随时间下降很快。人参皂苷Rg₁,Re,Rb₁,Rc脑组织中含量较高的成分。研究结果显示服用SLT后,人参皂苷成分能够快速吸收入血并进入脑组织。人参皂苷,尤其是Rg₁,Re可通过快速进入脑组织直接作用于神经细胞发挥作用;以二醇型为主的人参皂苷在血浆中长时间滞留,连续给药方式时会累计达到较高稳态血药浓度,它们可能是通过对外周的药理作用保护脑组织的主要成分。     

灯盏细辛注射液中总咖啡酸酯在大鼠体内的药代动力学研究

目的:研究灯盏细辛注射液中总咖啡酸酯的大鼠体内过程。方法:采用甲醇沉淀法制备血液样品,并用UV法测定。结果:浓度在20~2μg/ml范围内线性关系良好,相关系数r=0.995;样品的回收率在94%~100.8%,日内RSD和日间RSD均小于5%。总咖啡酸酯在大鼠体内的过程符合二室模型(weight=1/c/c),主要药动学参数为:α=0.1595±0.0658min-1,β=0.0037±0.0014min-1,V(c)=18.0198±2.0215(mg/kg)/(mg/ml),T1/2α=4.3456±1.2854min,T1/2β=188.6554±10.2556min,K21=0.0212±0.0046min-1,K10=0.0275±0.0089min-1,K12=0.1143±0.0594min-1,AUC=59.8192±4.1564(mg/ml).min。结论:灯盏细辛注射液中的总咖啡酯类成分在大鼠体内过程符合静脉注射二室模型。     

基于UPLC-MS/MS技术的云实皮提取物中4种成分在大鼠体内的药代动力学和组织分布研究

为探讨云实皮的药效物质基础,阐明其体内动态变化规律及组织分布特征,采用UPLC-MS/MS建立云实皮提取物中3-去氧苏木查尔酮、异甘草素、原苏木素B、原苏木素B-10-O-β-D-葡萄糖苷4种成分在大鼠血浆和心、肝、脾、肺、肾、胃、十二指肠组织中的分析方法,开展云实皮提取物在大鼠体内的药代动力学和组织分布研究。最终建立的分析方法经考察符合生物样品测定要求。药动学参数结果显示,各成分的t_1/2z在4.57～13.47 h,T_max在0.22～0.51 h,C_max在27.60～6 418.38μg·L^-1,AUC_0-t在112.45～11 824.25 h·μg·L^-1,MRT_0-t在3.89～9.01 h, CL_z/F在9.85～96.87 L·h^-1·kg^-1。组织分布结果显示,在不同时间点上,各成分在体内分布较为广泛,具有不均衡的特征,在胃和十二指肠分布较多,其次分...     

Transcutol P对痛宁凝胶中延胡索乙素在大鼠体内的药代动力学影响

[目的]建立一种快速灵敏的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法测定大鼠血浆中延胡索乙素含量,研究含7%单乙基二甘醇油醚(Trans P)的痛宁凝胶在大鼠体内的药代动力学过程,考察其透皮吸收促进效果。[方法]采用血药浓度法,UPLC-MS/MS测定大鼠体内痛宁凝胶中延胡索乙素含量,同时与空白痛宁凝胶体内药代动力学参数进行比较。[结果]7%Trans P组的Tmax、Cmax与空白对照组相比差异具有显著性(P0.05),药时曲线下面积AUC(0→24 h)和AUC(0→∞)与空白对照组相比差异具有显著性(P0.05)。[结论]应用UPLC-MS/MS技术测定痛宁凝胶中延胡索乙素的血药浓度,药代动力学参数表明7%Trans P组促渗效果明显优于空白对照组,可进一步应用于痛宁凝胶制剂中。     

UHPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中6种木脂素类成分及其药代动力学研究

目的建立利用UHPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中Gomisin D、Gomisin E、五味子醇甲、五味子甲素、Gomisin R和五味子乙素6种木脂素的分析方法,并研究大鼠灌胃给予五味子提取物后的药代动力学特征。方法采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测(MRM)。结果大鼠血浆中6种木脂素成分的校正曲线线性关系良好,日内、日间精密度和准确度符合要求,提取回收率75.76%⁸8.82%。结论该方法简便、快速、灵敏、稳定,适用于五味子提取物的体内分析,为其进一步研究奠定基础。     

补骨脂-肉豆蔻药对配伍前后主要成分的UPLC-MS/MS测定及药代动力学研究

采用UPLC-MS/MS多反应监测(MRM)定量分析,以氯霉素为内标物在正离子模式下建立血浆中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚及氢二异丁香酚药物浓度的测定方法,研究口服补骨脂-肉豆蔻药对配伍前后主要成分的药代动力学过程。将36只SD大鼠随机分为3组(A组、B组、C组)并分别灌胃补骨脂提取液、补骨脂-肉豆蔻药对提取液、肉豆蔻提取液,于不同时间点采集血浆样品。血浆样品中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚和去氢二异丁香酚分别在0.098 125~39.25,0.084 375~33.75,0.046 875~18.75,0.11~2.2 mg·L~(-1)线性关系良好,精密度、稳定性的试验结果表明,该类成分的血药浓度测定方法稳定可靠。采用DAS 2.0计算所得药代动力学参数在配伍前后均有不同程度的差异,结果表明补骨脂和肉豆蔻配伍能影响主要成分在体内的药动学过程,使分布更广泛,代谢消除更快。     

款冬花紫菀配伍对绿原酸在大鼠体内药代动力学影响

目的：研究款冬花、紫菀配伍对绿原酸在大鼠体内药代动力学参数的影响。方法：在筛选款冬花止咳有效部位、紫菀止咳增效部位的基础上,将SD大鼠随机分成4组,分别灌胃给予绿原酸单体、款冬花部位、紫菀部位、款冬花部位＋紫菀部位（即部位配伍）,采用HPLC法测定血浆中的绿原酸浓度,并用WinNonlin药动学软件根据非房室模型法计算药动学参数。结果：大鼠灌胃绿原酸单体、款冬花部位、紫菀部位、部位配伍后的主要药动参数：AUC0-t分别为245．09±14．05,349．27±62．15,105．11±18．57,496．77±77．75μg·mL^-1·min^-1;t1/2分别为323．70±51．00,464．53±126．10,408．27±31．30,203．02±7．12min;Cmax分别为1．05±0．13,1．52±0．55,0．63±0．04,4．49±0．59μg·mL^-1;Tmax分别为60．00±0．00,15．00±0．00,15．00±0．00,15．00±0．00min。结论：紫菀能促进大鼠对款冬花中绿原酸的吸收,加快绿原酸的消除,减少绿原酸在体内的蓄积,可以部分诠释款冬花、紫菀“相须配伍”增效的机理。