定标血清在酶催化浓度测定中的应用

目的:应用定标血清校正酶催化浓度的结果,观察采用国产试剂测定酶催化浓度的准确性.方法:采用国产试剂来测定定标血清和定值质控血清的GPT、GOT、CK、ALP、γ-GT、HBDH的浓度值及校正因数(K值).结果:用国产试剂测定定标血清和定值质控血清的六项酶的浓度,经K值校正后的结果靠近靶值.结论:应用酶标准物,可有效地保证酶催化浓度测定结果的准确性.     

丙氨酸氨基转移酶测定3种参数设置的比较

血清酶的测定可利用化学的方法测定酶的催化活性和将酶作为蛋白用免疫方法测定酶的质量。测定酶的催化活性是最为常用的方法，它具有快速，灵敏、成本低等特点，是目前临床上测定酶水平广泛使用的常规方法但这种方法存在严重不足，使空间结果缺乏可比性，为了提高酶活性测定的质量水平，提倡用实测摩尔吸光系数校正酶活性测定的计算因数(K值)及使用酶标准物的方法，     

血清酶校准品在不同检测系统中的应用

目的:通过观察4种酶校准品在6套不同检测系统的使用情况,探讨酶校准品适用性.方法:应用Beckman、Roche cfas、Dade、Randox 4种校准品分别对BECKMAN.LX20临床生化系统及日立7170生化仪各自与希森美康、朗道试剂组成的检测系统进行校正,在校正前后测定60份新鲜血清和Beckman、Roche cfas、Dade、Randox 4种校准品的ALT、AST、GGT及LDH活性,然后用各校准品标示值与测定值之比作为校正因子,校正60份新鲜血清的测定结果,最后进行校正前后的结果比较和校准品可转换性分析.结果:校正前各检测系统的测定结果CV值在4.39%～19.51%之间,校正后各检测系统的测定结果CV值在5.20%～16.51%之间,校准后差异并没有缩小.但以Beckman校准品校正的BECKMAN.LX20临床生化系统/原装试剂测定结果CV值最小.酶标准品可转换性分析结果为Beckman校准品仅适合于BECKMAN.LX20临床生化系统.结论:酶校准品的校正有专一性,以使用仪器原厂提供的专用试剂和校准品为佳.     

生化分析仪酶学测定的K值校正及其意义

目的　通过对 3种型号生化分析仪酶学测定K值的检测 ,观察实测K值 (KR)与理论K值 (KT)的偏差 ,探讨校正K值的必要性。方法　用对硝基酚标准液校正碱性磷酸酶(ALP)的K值。用已糖激酶 (HK)法测葡萄糖的方法校正用还原性辅酶Ⅰ (NADH)或还原性辅酶Ⅱ (NADPH)作指示反应的 6种酶的K值。计算KR 与KT 及其偏差。用保灵曼公司(BM )的校准物 (c .f.a .s)和RANDOX质控血清检测K值校正效果。结果　所检测的 3种型号生化分析仪都有较好的精密度。但KR 与KT 之间都有一定偏差。用KR 代替KT 输入测定程序 ,测定质控血清结果在定值范围之内。结论　酶学测定的K值应定期校正 ,采用实测K值校正法是简易可行的方法     

参加国际比对的三种血清酶实验分析

目的:应用国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)公布的参考方法对血清乳酸脱氢酶、γ-谷氨酰基转移酶及淀粉酶进行测定,其准确性通过参考实验室国际比对计划的评估。方法:按照IFCC有关酶学活性在37℃测定参考方法的标准操作程序,使用Hitachi测定系统进行3个酶的测定。通过测定质控血清监测系统稳定状态、有证参考物和参加酶学国际比对,验证参考方法的准确性。结果:本测定系统测定室内质量控制血清3种酶日间测定变异系数为0.5%～1.4%;有证参考物测定结果在允许的范围内,初步验证了参考方法的准确性;3种国际比对样本A、B两个浓度的测定值均位于所有参考实验室测定值的軃x±2s范围内。结论:应用IFCC参考方法采用本测定系统对3个酶进行的测定结果稳定、准确,具有一定的可比性。     

校正后K值在酶活性测定质量控制中的应用

目的 为了提高酶活性测定的准确性。方法 通过测定定值质控血清校正酶活性测的K值。结果 使用校正后的K值测定结果的准确度明显的高于校正前。结论 K值的设置不能一成不变，可根据室内及室间质控结果而校正。     

肝素对电极法钾离子测定结果的影响分析

目的探讨肝素对电极法钾离子测定的影响。方法实验1分别使用电极法和火焰光度计法测定肝素抗凝血浆和血清标本中钾离子含量,比较测定结果的差异。实验2在血清标本中加入不同浓度肝素后,用电极法测定钾离子含量,观察加入不同量肝素后测定值之间差别。结果肝素对电极法测定钾离子存在负干扰,可引起钾离子测定值偏低,但肝素与血浆的比例与干扰的程度无关。结论钾离子测定应使用血清标本,如使用肝素抗凝血浆标本应对测定结果作校正。     

电极法酶法干化学法测定钾、钠结果的比较

目的:用不同的仪器和方法测定急诊生化项目钾、钠并对其结果进行比较和质控。 方法:通过实验比对的方法,以及对新鲜标本和质控血清进行检测结果比较。 结果:不同的仪器和方法测定钾、钠,其精密度均好(CV:0.7-1.7),线性范围、回收率均符合要求,重复性良好,批内批间CV(变异)系数均在允许范围内,r>0.95,t检验无显著差异,p>0.05,同一质控血清采用不同方法测定基质效应较小。 结论:试验结果显示方法学,酶法、干化学法和电极法有较好的相关性,同一实验室不同方法间定期比对校正是分析结果的精密度好和准确性高的保证。校正后电极法酶法和干化学法做室内质控时可使用同一质控血清和同一靶值。     

校准K值在日立7600全自动生化分析仪上的应用

目前临床实验室广泛使用自动生化分析仪测定血清酶的催化活性。尽管已经推荐使用统一的测定方法 ,但酶活性的测定结果仍不能令人满意 ,不同的实验室以及不同的仪器、不同的试剂之间测定的结果差异仍很大[1,2 ] 。目前许多单位仍采用理论Ｋ值来计算酶的活性 ,ＩＦＣＣ曾经提出过用酶校正品对测定系统进行校正的解决方法[3] 。我们在日立 760 0全自动生化分析仪上采用罗氏酶校正品测定罗氏配套试剂和国产试剂的校准Ｋ值 ,现报告并作进一步探讨如下。1　材料与方法1.1　材料和仪器　①试剂 :谷丙转氨酶 ,谷草转氨酶 ,碱性磷酸酶 ,谷酰转肽酶 ,…     

K值在HITACHI(日立)7170S生化分析仪上酶类测定中的应用

目的 通过酶标准品在生化仪上的应用,提高酶检测结果 的准确性和一致性,从而更好地服务于临床.方法 使用酶标准品校准生化仪的K值及使用理论K值,在两种状态下分别测定质控血清.结果 用实际K值和理论K值对质控品测定的结果 存在较大的差异.结论 由于实际K值和理论K值存在较大的差异,为使检测结果 准确可靠,应采用酶校准品对生化仪进行校准,不能使用理论K值.     

校准验证在自建生化检测系统的应用

目的应用病人血清验证自建的日立7170A生化检测系统在线性范围内校准的稳定性及测定结果的准确性,明确校准验证在自检生化检测系统的作用.方法比较16个生化检测项目在可溯源的罗氏Modular PI生化检测系统和自建的日立7170A生化检测系统上测得的结果,以可溯源的罗氏Modular PI生化检测系统所测值为靶值,通过绘制线性回归图及百分差异图对自建的日立7170A生化检测系统进行可接受判断分析.结果自建的日立7170A生化检测系统测定ALT、AST、ALB、UA、Crea、Urea、GLU、LDH、GGT、ALP、TC、TG、钙、磷等14个分析物的校准有效,CK和HDL-C校准无效.结论应用病人血清对自建生化检测系统进行校准验证的方法实用、有效.     

碱性磷酸酶(ALP)试剂对血清镁测定的影响

目的 探讨在使用日立7060A型全自动生化分析仪时,碱性磷酸酶试剂对镁离子测定的影响情况及解决办法.方法 采用不同的测试方式、两种剂型、两种含镁离子浓度的碱磷酶试剂来研讨对两种方法检测血清镁的影响情况.结果 含镁浓度越高的ALP试剂对血清镁测定影响越大,对两种方法测定血清镁的影响程度不一样.结论 可使用不含或少含镁离子的ALP试剂、清洗试剂针、设置合理的通道和选择适当测定方法来消除或减少ALP试剂对血清镁测定的影响.     

血清尿素参考方法的建立以及临床常用试剂盒的比对研究

目的建立血清尿素测定的酶偶联平衡的参考方法(紫外分光光度法),对此方法进行性能验证,并评价4种临床常用的试剂盒是否可以接受。方法以美国CDC推荐的血清尿素酶偶联平衡候选参考方法为依据建立本实验的参考方法;通过测定标准物质(SRM909b),以及参加RELA-2009比对实验(ring-tiral),来验证参考方法的准确性;按CLSI《EP9-A2》要求,以酶偶联平衡参考方法作为比对方法,4种临床常用的检测试剂盒为待评方法,对40份血清样品的结果进行分析比较。结果用酶偶联平衡参考方法测定SRM909b水平1和2,与靶值的偏倚分别为2.19%,0.24%;参加参考实验室国际比对,血清尿素结果在可接受范围内;4种常用的试剂盒在医学决定点(Xc=9.64 mmol/L)预期偏差的95%可信区间值在实验室定义的可接受偏差(4.5%)范围内,也在生物学变异的可接受偏差(5.5%)范围内。结论本室已建立并验证了血清尿素测定的酶偶联平衡参考方法;4种常用血清尿素试剂盒的测定结果与参考方法的测定结果存在差异,但误差在临床可接受范围。     

溶血对生化检验准确性的影响及纠正措施分析

目的:探讨溶血对生化检验结果准确性的影响,提出校正措施。方法:将2010年6月~2012年6月我院血液科收集的128份正常血液标本分为未溶血血清标本和人工制成溶血血清标本,分别测定2组TP、AST、、K+、CK、ALB等生化学指标及Hb浓度。结果:观察组在TP、AST、CK、K+、LDH、TG、TCHO等项目测定值均高于未溶血的对照组,比较差异有统计学意义(P0.05或0.01);同时研究结果发现随着血清Hb浓度的升高,K+LDH和CK等生化指标项目也会随之升高,可以看出血清Hb浓度变化值与3个指标溶血变化值存在一定的相关性。结论:溶血会对多项生化指标检测准确性产生影响,且与血清Hb浓度有关联。利用血清Hb浓度参与校正生化项目有一定的临床应用价值。     

根据血清CPK-MB变化估测心肌梗塞范围

动态测定了35例急性心肌梗塞血清肌酸磷酸激酶同功酶(CPK-MB)时间-活性变化曲线,探讨对估测心肌梗塞范围(MIS)的临床意义及缺少早期测定值对估测MIS的影响程度、校正方法。结果表明,MIS的大小是决定预后的重要因素,当MIS在60CPK-MB-g-Eq以上,病死率为26.7%,在此以下,仅为5%。两者差异极显著(P<0.01)。虽缺少早期测定值可低估MIS,但应用校正方法可准确作出估测。     

血清中过氧化氢酶活力的化学发光微量分析法

本文设计了一种用化学发光法检测过氧化氢酶活性的方法。其原理是利用H_2O_2与化学发光剂反应,使之发光,用发光仪可检测到其发光值。过氧化氢酶可加强此发光反应,其程度与酶活力呈线性关系。此法方便、快速、且可微量测定。用此法测定了30名健康成人的血清中酶活力,其平均值:323.7±16.5U/ml。     

猴副流感病毒SV5 PCR检测方法的建立与初步应用

目的建立检测SV5的PCR方法并加以初步应用。方法根据GenBank中报道的SV5序列,针对其中的SH基因设计引物进行PCR反应,扩增产物进行测序并用BLAST软件进行同源性比对,同时利用限制性内切酶的酶切反应以证实此PCR反应的特异性。在此基础上设计巢式PCR提高此方法的灵敏度。利用此方法对20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本进行检测。结果利用设计的引物扩增出的序列测序结果证实与报道的SV5SH基因相对位置的序列一致。AccⅢ限制性内切酶可对PCR产物进行特异性酶切。巢式PCR比一次PCR的敏感度有所提高。用此方法检测的20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本结果为阴性。结论初步建立了检测SV5病毒的PCR方法,排除实验室用20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本SV5的污染。     

不同来源血清碱性磷酸酶km值的比较研究

目的 寻找血清中单底物酶ｋｍ值测定实验的材料来源。方法 分别测定人脐血清、人静脉血清（人血清）及羊血清中碱性磷酸酶的ｋｍ值，并通过统计学处理进行比较。结果 显示：三种血清中酶的活性、ｋｍ值无显著性差异，并显示羊血清的结果接近脐血清并优于人血清。结率 开设碱性碱酸酶ｋｍ值的测定实验时可使用羊血清。     

血清AST测定方法的比较及其与IFCC法结果转换的计算方法

目的 :研究血清标本及校正品或标准品用不同方法测定天冬氨酸转氨酶 (AST)结果间的关系以及转换成IFCC法结果的计算方法。　方法 :采用八种常用的AST测定方法 (试剂盒 )测定 87份血清标本 ,以IFCC推荐的方法H(不含磷酸吡哆醛 )为基准 ,其他七种方法测定的血清AST值与之进行相关分析 ;并研究两种酶校正品(RANDOX、c .f.a .s)和一种酶参考品 (ERM)与人血清AST的转换性。　结果 :八种方法间血清AST测定值的相关性较好 ,相关系数 (r)接近 1.0 ,截距接近 0。ERM在以上各方法间均与人血清AST反应性相近 ,具转换性 ;校正品RANDOX、c .f.a .s则与人血清AST反应性有差异 ,转换性欠佳。　结论 :采用统一的合格的酶参考品可以大大减小各方法间测定值的离散度 ,是酶测定标准化的新途径     

血气分析仪与生化仪测钾离子的比较分析

目的 采用不同仪器不同方法测定动脉血和静脉血的钾离子,并对结果进行比较分析.方法 用血气分析仪测定40例患者同时抽取的动脉全血和静脉血血清钾离子浓度,同时使用生化分析仪检测静脉血血清钾离子浓度,对两种检测仪器的测定数据进行配对t检验并进行回归相关分析.结果 生化仪血清与血气分析仪全血钾离子测定值、生化仪血清与血气分析仪血清钾离子测定值、血气分析仪全血与血清钾离子测定值结果比较均有显著性差异(P＜0.01).相同标本性质、不同检测仪器测定结果具有良好的相关性.结论 不同标本性质,不同分析仪器都会影响钾离子检测结果,血气分析仪检测的钾离子不能替代生化仪检测的钾离子.