大豆异黄酮联合顺铂对A549细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨大豆异黄酮(ISF)联合顺铂(DDP)化疗对A549肺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)法观察ISF和DDP联用对A549肺癌细胞增殖的影响,并计算联合指数(Q值)判定联合用药的相互作用,同时采用TUNEL染色法检测二者对A549细胞凋亡的影响。结果 ISF和DDP单独使用均可时间和浓度依赖性地抑制肺癌A549细胞的增殖。DDP浓度在3 mg/L时,ISF和DDP联用后抗细胞增殖作用增强,二者有相加或协同作用,且在一定浓度范围内,联合用药对细胞生长的抑制作用呈量效关系。ISF单用或和DDP联用均可浓度依赖性地诱导肺癌细胞凋亡。结论 ISF可通过诱导A549细胞凋亡而发挥抗肺癌作用;ISF和DDP联用可增强对肺癌A549细胞增殖的抑制和凋亡的诱导,二者具有协同抗肿瘤作用。     

参苓白术散含药血清影响A549/DDP的顺铂耐药的研究

目的:研究参苓白术散含药血清对肺腺癌顺铂细胞株(A549/DDP)顺铂耐药的影响.方法:动物随机分组,制备参苓白术散大中小剂量血清(给药剂量分别为11.34,5.67,2.83g·kg-1·d-1),将A549,A549/DDP细胞体外分为顺铂(DDP)组,空白血清+DDP组,含药血清大剂量+DDP组,含药血清中剂量+DDP组,含药血清小剂量+DDP组,细胞对照组,经过15%各组血清联合DDP不同浓度(10,20,40,80,100,200μmol·L-1)作用48 h,采用MTT法检测参苓白术散不同浓度含药血清对A549/DDP顺铂耐药的作用;结果:与DDP组比较,参苓白术散不同浓度含药血清作用于A549/DDP后IC50和耐药倍数均有显著降低(P<0.05),以中剂量组(等临床剂量组)作用最为显著(P<0.01).结论:参苓白术散能增强A549/DDP对顺铂的敏感性.     

AG490单用或联合顺铂对人宫颈癌裸鼠移植瘤STAT3/Survivin信号转导通路的影响

目的:探讨STAT3信号转导通路对人宫颈癌裸鼠移植瘤生长、凋亡的影响以及与Survivin表达之间的关系。方法:建立宫颈癌裸鼠移植瘤模型并分组,AG490单用或联合顺铂(DDP)处理各组裸鼠,治疗期间观察并记录各组裸鼠皮下移植瘤的生长情况,计算肿瘤体积、肿瘤生长抑制率,绘制肿瘤生长曲线,观察用药后裸鼠体重变化;免疫组化、Western blot分别检测移植瘤P-STAT3、Survivin表达,流式细胞技术检测细胞凋亡。结果:AG490与DDP可以抑制宫颈癌移植瘤生长,促进宫颈癌细胞凋亡,同时使宫颈癌细胞P-STAT3、Survivin表达与活性明显下降;联合应用AG490与DDP,可以起协同作用,AG490可以增强DDP的药物敏感性并且减轻药物副作用。结论:JAK激酶抑制剂AG490与DDP联合应用可能为治疗宫颈癌提供了新的理论基础。     

白英提取物单独或与顺铂联合对宫颈癌Hela细胞的影响

目的:观察中药白英提取物(Solanum lyratum Thunb extract,STE)对体外培养宫颈癌HeLa细胞的作用,以及STE对HeLa细胞对顺铂(DDP)的敏感性的影响。方法:体外培养宫颈癌HeLa细胞分别用STE、DDP、DDP+STE处理细胞,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:白英提取物及DDP对宫颈癌HeLa细胞的生长均表现出明显的抑制作用,低剂量STE可加强DDP对HeLa细胞的抑制作用;流式细胞术检测结果显示,白英提取物作用后HeLa细胞出现凋亡,且随着时间的延长,凋亡细胞的比例明显增加。结论:白英提取物对宫颈癌HeLa细胞有明显的抑制生长和促凋亡作用,同时能提高HeLa细胞对顺铂的敏感性。     

缺氧对肺癌细胞中lncRNA H19的表达及耐药机制的研究

目的 探索缺氧对非小细胞肺癌细胞株A549和H1650中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) H19表达的影响,并与顺铂耐药的关系。方法 在常氧和缺氧条件下对肺癌细胞A549和H1650采用qPCR检测lncRNA H19、HIF1-α、MRP1和HO-1 mRNA的表达;采用Western blot检测HIF1-α、MRP1、HO-1和P-gp的表达;并进行肿瘤细胞迁移和侵袭实验;采用Annexin V-APC和流式细胞仪检测顺铂诱导的细胞凋亡率。结果 在缺氧条件下非小细胞肺癌细胞株A549和H1650中lncRNA H19、HIF1-α、HO-1、MDR相关蛋白1和P-gp的表达水平升高。肿瘤细胞的侵袭和迁移能力增强,顺铂诱导的细胞凋亡减少。结论 缺氧增加非小细胞肺癌细胞株A549和H1650中lncRNA H19的表达水平,顺铂诱导的细胞凋亡减少,对顺铂产生耐药性。     

顺铂作用下卵巢癌敏感细胞A2780与耐药细胞A2780/DDP凋亡与自噬水平的变化及意义

目的:通过分析自噬对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响,探讨自噬与卵巢癌顺铂耐药性的关系,为卵巢癌治疗提供依据。方法:培养卵巢癌细胞株A2780和A2780/DDP,进行卵巢癌细胞系A2780及A2780/DDP顺铂敏感性的测定,流式细胞仪测定顺铂作用下A2780和A2780/DDP细胞的凋亡率;将10μM顺铂作用48h的A2780细胞和40μM顺铂作用48h的A2780/DDP细胞经处理,采用Western blot法检测Beclin1蛋白的表达;电镜下观察10μM顺铂作用48h的A2780细胞和40μM顺铂作用48h的A2780/DDP细胞经固定染色处理的自噬细胞活性。结果:顺铂主要通过诱导凋亡对卵巢癌耐药细胞A2780/DDP及敏感细胞A2780发挥细胞毒效应;顺铂作用下,耐药细胞的自噬活性明显增强,而敏感细胞自噬活性无明显增强。结论:顺铂诱导耐药卵巢癌细胞发生凋亡的能力较亲代敏感细胞降低,在其发生过程中,反应性自噬活性增强可能与其顺铂耐药性的形成有关,提示对肿瘤细胞的自噬水平进行监测及调控可能为逆转卵巢癌铂耐药提供新的思路。     

阿托伐他汀对人非小细胞肺癌A549细胞化疗敏感性的影响

目的 探讨阿托伐他汀对人非小细胞肺癌A549细胞化疗敏感性的影响.方法 人非小细胞肺癌A549细胞预先暴露于浓度为O、20、40 nmol/L阿托伐他汀的培养液中(对照组、20 nmol/L组、40 nmol/L组),实验重复3次,磺酰罗丹明B(SRB)法研究常用化疗药物紫杉醇、吉西他滨和顺铂对肿瘤细胞增殖的影响.结果 顺铂40 nmol/L组的半抑制浓度(IC50)显著低于对照组和20 nmol/L组[(1.37±0.10) mg/L比(1.89±0.06)、(1.81±0.04)mg/L,P＜0.01].紫杉醇和吉西他滨不同组间IC50比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 阿托伐他汀体外能增加人非小细胞肺癌A549细胞对顺铂的敏感性,合用有助于降低化疗的不良反应.     

沙利度胺联合顺铂对A549肺腺癌细胞株的体外实验

目的观察沙利度胺与顺铂（DDP）联合应用对A549人肺腺癌细胞凋亡的影响,观察沙利度胺对肺腺癌A549细胞VEGF、BFGF蛋白表达的影响。方法采用PI单染法流式细胞检测细胞凋亡率;采用免疫细胞化学方法检测沙利度胺处理后肺腺癌A549细胞VEGF、BFGF蛋白表达的变化。结果在一定浓度范围内,沙利度胺联合DDP处理组细胞凋亡率明显高于单药组;沙利度胺（7.5mg/L）作用于人肺腺癌A549细胞后,处理组的VEGF、BFGF蛋白表达与未加药组比较差异显著。结论沙利度胺DDP联合,可增加A549人肺腺癌细胞的凋亡率;沙利度胺可抑制A549人肺腺癌细胞VEGF、BFGF的蛋白表达。     

三仙保宫汤对小鼠宫颈癌U14细胞抑制作用的研究

目的:观察三仙保宫汤、顺铂(cisplatin,DDP)及其两者联合应用对小鼠宫颈癌细胞株U14移植瘤的抑制作用及凋亡诱导作用,并初步探讨三仙保宫汤的抗肿瘤作用机制。方法:随机分为模型对照组、顺铂组、三仙保宫汤组、三仙保宫汤联合顺铂组,分别给予不同药物干预21天,并采用免疫组织化学法检测各组肿瘤组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。。结果:三仙保宫汤联合顺铂组的作用优于单药组。结论:1.三仙保宫汤具有明显抑制小鼠宫颈癌移植瘤生长的作用,其联合顺铂组肿瘤组织的Bax蛋白表达率明显高于单独用药。     

抑制自噬基因Beclin 1的表达对耐药卵巢癌细胞A2780/DDP顺铂敏感性的影响及相关机制研究

[目的]观察抑制自噬基因Beclin1的表达对卵巢癌耐药细胞A2780/DDP顺铂敏感性的影响并探讨其中机制。[方法]利用脂质体将自噬基因Beclin1RNA干扰质粒pSUPER-Beclin1和对照质粒pSUPER-non分别转染耐药卵巢癌细胞A2780/DDP,筛选稳定表达株,检测顺铂作用下各组细胞(pSUPER-Beclin1组、pSUPER-non组和未转染组)生长抑制率、半数抑制浓度(IC50)、自噬和凋亡率的变化。[结果]A2780/DDP细胞转染干扰质粒pSUPER-Be-clin1后,细胞内Beclin1蛋白的表达明显下降;比较3组细胞顺铂48hIC50,pSUPER-Beclin1转染组最低(P﹤0.01);对3组细胞自噬与凋亡水平的检测显示,抑制Beclin1蛋白表达,在顺铂作用下,细胞自噬水平明显下降,而凋亡细胞比例明显升高,凋亡蛋白Caspase-3的表达亦明显上调,实验组与对照组相比差异有统计学意义(P﹤0.01)。[结论]抑制耐药细胞A2780/DDP自噬基因Beclin1的表达,可通过抑制自噬,增强凋亡提高耐药细胞对顺铂的敏感性。     

体内外实验研究青蒿琥酯联合热疗对A549细胞生物学特性影响

[目的]了解青蒿琥酯联合热疗对肺腺癌A549细胞生物学特性的体内外影响. [方法]150μmol/L青蒿琥酯、青蒿琥酯联合热疗(43℃,1 h)作用A549细胞24h,吉姆萨染色、、Y啶橙/溴化乙啶双染、损伤修复实验、平板集落形成实验、观察A549细胞形态及生物学特性改变.BALB/C-nu/nu品系裸鼠24只接种A549细胞107/只,7-10d肿瘤长出后随机分为4组:青蒿琥酯组(青蒿琥酯60mg/kg,腹腔注射);青蒿琥酯联合热疗组(青蒿琥酯60mg/kg,腹腔注射,联合43℃加热1h);同时设对照组和热疗组,每周处理2次,3周后处死裸鼠取出瘤结节称重并计算抑瘤率.[结果]青蒿琥酯、青蒿琥酯联合热疗作用24h后,A549细胞失去正常长梭形或多角形形态,细胞变圆、胞体变小、部分细胞见胞核破碎和凋亡小体.细胞损伤修复能力和集落形成能力下降,以青蒿琥酯联合热疗作用效果明显.抑制A549细胞裸鼠移植瘤体内生长,青蒿琥酯联合热疗瘤结节重量低于单用青蒿琥酯、单用热疗和对照组,差异有统计学意义(P<0.05).青蒿琥酯、青蒿琥酯联合热疗组抑瘤率为22.86%和27.86%. [结论]青蒿琥酯、青蒿琥酯联合热疗改变肺腺癌A549细胞形态,降低细胞损伤修复能力和集落形成能力,体内抑制A549细胞裸鼠移植瘤生长. 合热疗作用24h后,A549细胞失去正常长梭形或多角形形态,细胞变圆、胞体变小、部分细胞见胞核破碎和凋亡小体.细胞损伤修复能力和集落形成能力下降,以青蒿琥酯联合热疗作用效果明显.抑制A549细胞裸鼠移植瘤体内生长,青蒿琥酯联合热疗瘤结节重量低于单用青蒿琥酯、单用热疗和对照组,差异有统计学意义(P<0.05).青蒿琥酯、青蒿琥酯联合热疗组抑瘤率为22.86%和27.86%. [结论]青蒿琥酯、青蒿琥酯联合热疗改变肺腺癌 549细胞形态,降低细胞损伤修复能力和集落形成能力,体内抑制A549细胞裸鼠移植瘤生长. 合热疗作用24h后,A549细胞失去正常长梭形或多角形形态,细胞变圆、胞体变小、部分细胞见胞核破碎和凋亡小体.细胞损伤修复能力和集落形成能力下降,以青蒿琥酯联合热疗作用效果明显.抑制A549细胞裸鼠移植瘤体内生长,青蒿琥酯联合热疗瘤结节重量低于单用青蒿琥酯、单用热疗和对照组,差异有     

甲羟孕酮对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP耐药的逆转作用

目的:应用甲羟孕酮(Medroxyprogesterone Acetate,MPA)体外逆转人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的耐顺铂(cisplatin,DDP)效应,并对其作用机制进行初步探讨。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测MPA对SKOV3/DDP的细胞毒作用,确定MPA对此细胞株的非细胞毒性剂量作为逆转剂量,同法测定非细胞毒性剂量MPA联合DDP作用后SKOV3/DDP对顺铂耐药性的变化,采用流式细胞技术(FCM)检测细胞周期及凋亡情况。结果:单用MPA浓度大于7.50 g/L时对SKOV3/DDP细胞有不同程度的抑制作用,且呈剂量依赖性。MPA浓度小于15.85 g/L时,其对细胞生长无明显抑制作用(细胞存活率均>90%),因此选用15.00 g/L作为逆转剂量。DDP联合15.00 g/L的MPA作用24、48、72 h后,顺铂的IC50分别下降至(57.72±0.48)g/L、(13.39±0.21)g/L、(7.93±0.18)g/L,逆转倍数分别为1.22,1.90,2.44倍。DDP与MPA联合作用于SKOV3/DDP细胞,使其细胞周期阻滞于G0/G1期,S期细胞比例下降,并可以增加耐药细胞的凋亡率。结论:MPA可以逆转DDP引发的卵巢癌耐药,其可能的逆转耐药机制为促进细胞的凋亡,阻滞细胞周期进程。     

人参皂苷Rg3对人肺腺癌细胞株A549/DDP抑制转移及逆转耐药作用的研究

目的:探讨人参皂苷Rg3抑制人肺腺癌细胞株A549/DDP的浸润及转移和逆转其耐药作用及机制。方法:应用MTT法检测Rg3对A549/DDP细胞逆转耐药的作用;用细胞膜流动性实验检测Rg3对A549/DDP细胞膜流动性的改变用穿膜实验检测Rg3对A549/DDP细胞侵袭和转移的影响;用Western blotting实验检测Rg3对转移和耐药相关蛋白表达的影响。结果:Rg3作用后,A549/DDP细胞对顺铂的耐药性下降I,C50明显降低(P<0.05),细胞膜的流动性明显降低(P<0.05),细胞的穿膜能力明显降低(P<0.05),Rg3作用后,nm23及caspase-3的表达明显上调,LRP的表达无明显改变。结论:Rg3可通过上调nm23的表达抑制A549/DDP细胞的侵袭和转移能力,还可通过上调caspas-3的表达,降低细胞膜的流动性达到逆转耐药的作用。     

c-FLIP反义寡核苷酸对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤抑制作用

目的 研究细胞型Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白反义寡核苷酸(c-FLIP-ASODN)对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑制作用.方法 采用肺癌A549细胞株建立裸鼠移植瘤模型,将其分为ASODN组及空白对照组、脂质体转染组、无义寡核苷酸(SODN)组,通过移植瘤生长曲线、终末瘤重免疫组化法检测c-FLIP蛋白表达、增殖指数,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测移植瘤c-FLIP mRNA变化,TUNEL检测凋亡指数.结果 ASODN干预后移植瘤生长缓慢,22 d时瘤体积达到最大,此后呈缩小趋势,终末瘤体积及瘤重分别为(376.9±45.8)mm3、(512.4±33.6)mg,明显低于其他各组(P＜0.01),抑瘤率为64.31%;ASODN组移植瘤组织增殖指数为(25.71±5.42),c-FLIP mRNA表达量为(0.30±O.05),c-FL.IP蛋白表达阳性率为(19.54±6.36),均明显低于各对照组;凋亡指数为(39.68±6.28),明显高于其他各组(P＜0.01).结论 c-FLIP-ASODN对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长有抑制作用,其机制与降低c-FLIP mRNA和蛋白表达、抑制移植瘤细胞的增殖活性和促进肿瘤细胞凋亡有关.     

人核糖体蛋白S19在非小细胞肺癌中的表达及与顺铂耐药的关系

目的 分析人核糖体蛋白S19(RPS19)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达,及与顺铂(DDP)耐药的关系。方法 根据DDP化疗的疗效,将50例NSCLC患者分为有效组与无效组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和蛋白免疫印迹(WB)法检测患者癌组织与癌旁组织中RPS19表达情况。将si-RPS19质粒、si-阴性对照(NC)序列分别转染至人NSLCL耐顺铂株A549/DDP细胞,并设为si-RPS19组、si-NC组、空白对照组,采用RT-qPCR、WB法检测各组RPS19的表达,CCK-8法和流式细胞术分别检测DDP对细胞的半抑制浓度(IC₅₀)和细胞凋亡率,采用WB检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3、caspase-9的表达。结果 NSCLC患者癌组织中RPS19 mRNA及蛋白相对表达量(0.61±0.11、0.53±0.09)均较癌旁组织(0.38±0.06、0.21±0.05)升高,差异均有统计学意义(t=12.980、21.978,均P<0.001)。各组A5...     

双氢青蒿素联合顺铂对荷瘤大鼠的免疫功能的影响

目的：研究不同剂量的双氢青蒿素联合顺铂对荷瘤大鼠的免疫抑制作用的影响。方法：1.将低分化上皮性卵巢癌细胞株NUTU-19注入F344大鼠的右腋皮下,建立人卵巢癌移植瘤的动物模型。2.将建模成功的40只F344大鼠分随机为5组,即顺铂对照组、空白对照组、顺铂＋双氢青蒿素高剂量组、顺铂＋双氢青蒿素中剂量组、顺铂＋双氢青蒿素低剂量组。观察干预后各组移植瘤抑瘤率,取出瘤体,进行肿瘤形态学观察,显微镜下进行组织病理学检测。无菌取脾,测T/B淋巴细胞转化功能的测定,用ELISA方法检测大鼠血清IL-2及IFN-γ变化情况。结果：1.顺铂＋双氢青蒿素各组抑瘤率与顺铂组相比升高显著,差异有统计学意义（P〈0.001）。2.移植瘤组织病理学监测：瘤细胞的体积较大,胞质疏松,核深染,有不同程度的核固缩、核碎裂及核溶解,细胞中可见局灶性坏死。3.顺铂＋双氢青蒿素高剂量组大鼠T/B淋巴细胞转化率、血清IL-2及IFN-γ明显高于顺铂组（P0.001）。结论：（1）DHA联合顺铂对荷瘤大鼠卵巢癌皮下移植瘤的生长有抑制作用,其联合作用功效强于单用顺铂,增强了顺铂的敏感性。（2）DHA联合顺铂对荷瘤大鼠机体免疫功能有增强作用,通过提高荷瘤大鼠脾淋巴细胞转化功能及血清IL-2和IFN-γ的水平,可能降低患者卵巢癌复发和淋巴结转移的风险。     

灵芝多糖联合顺铂对肺癌A549细胞增殖抑制作用的研究

目的 研究顺铂及联合灵芝多糖(Ganoderma Lucidum Polysaccharides,GLP)对人肺癌A549细胞TGF-β1及Smad4表达的影响,探讨二者联合应用治疗肺癌的效果及可能的分子机制。 方法 选取处于对数生长期肺癌细胞株A549分别用顺铂及顺铂与不同浓度的灵芝多糖联合组干预,并设立对照组,采用MTT检测细胞增殖并计算细胞增殖抑制率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中TGF-β1的含量;Western blot法检测细胞中TGF-β1及Smad4蛋白的表达水平。 结果 MTT实验显示,对照组、顺铂组、顺铂联合不同浓度GLP组细胞增殖抑制率分别为0%,(28.2±5.7)%,(30.2±2.7)%,(59.4±3.2)%,(74.8±5.4)%,联合组显著高于顺铂组,并呈现一定的剂量依赖性。ELISA及Western blot法显示:与对照组比较,各用药组均能降低TGF-β1表达,提高Smad4蛋白表达,且二者联合效果更加明显,且呈剂量依赖性。 结论 顺铂联合灵芝多糖对A549细胞增殖抑制作用更强,其作用可能与激活TGF-β/Smad信号通路,降低TGF-β1蛋白表达,增加Smad4蛋白表达有关。     

体外培养人卵巢癌细胞株SKOV-3、SKOV-3/DDP并探讨卵巢癌顺铂耐药机制

目的:通过对人卵巢癌细胞株SKOV-3、SKOV-3/DDP体外培养,探讨卵巢癌顺铂耐药机制。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞仪测定SKOV-3、SKOV-3/DDP细胞顺铂耐药指数及细胞周期变化,并分析细胞内Bcl-2蛋白及细胞膜上Fas、Fas-L表达情况。结果:相对于SKOV-3细胞;SKOV-3/DDP细胞顺铂耐药指数约为4倍,其细胞周期主要分布于G0/G1期、S期,细胞内Bcl-2蛋白表达及细胞膜Fas、Fas-L水平明显升高。结论:细胞主要分布于潜伏期、细胞内凋亡抑制蛋白Bcl-2水平升高及细胞膜Fas、Fas-L表达增加,可能是卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV-3/DDP顺铂耐药的部分机理。     

汽车尾气提取物对hOGG1低表达细胞的氧化损伤作用

[目的]研究汽车尾气提取物对DNA碱基切除修复基因hOGG1低表达细胞的氧化损伤作用,为揭示汽车尾气提取物通过氧化损伤导致肺癌的发病机制提供更有力的证据。[方法]以肺腺癌A549细胞和通过稳定转染hOGG1核酶而使hOGG1低表达的A549-R细胞为研究对象,用MTT试验铡定汽车尾气提取物处理后两种细胞的生存能力;彗星试验检测两种细胞DNA损伤与修复的差异;并通过测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,比较两种细胞抗氧化水平。[结果]A549-R细胞的IC50显著低于A549细胞(P<0．05);汽车尾气提取物作用下两种细胞均有不同程度DNA损伤,A549-R细胞的拖尾率和DNA迁移长度显著大于A549细胞(P<0．05);损伤后A549细胞修复发生较A549-R快,与A549细胞相比A549-R细胞更不易修复;汽车尾气提取物作用下两种细胞内SOD及GSH-Px活性均下降,A549-R细胞的抗氧化水平较A549细胞更低。[结论]hOGG1低表达使肺腺癌细胞:DNA修复能力降低,从而使其对汽车尾气提取物的敏感性增强,汽车尾气提取物可能通过氧化损伤途径导致肺癌的发生。     

MDR1及MDR3基因与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系

目的:探讨MDR1(Multidrug resistance gene-1)及MDR3(Multidrug resistance gene-3)基因与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系。方法:两种质粒一起瞬时转染A2780/DDP细胞,空载体组及未转染组作为对照。Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术、MTT法、RT-PCR、western blot分别检测A2780/DDP细胞早晚期凋亡、细胞增殖活性、MDR1和MDR3 mRNA表达及caspase-3蛋白水平。结果:两种质粒(pSuppressorNeo MDR1 siRNA,MDR3 siRNA)均未能逆转A2780/DDP细胞顺铂耐药:①流式显示转染MDR1 siRNA组、MDR3 siRNA组和pSuppressorNeo空载体组后相比较未转染A2780/DDP细胞凋亡率无显著改变(P>0.05);②在一定药物浓度范围内,转染MDR1和MDR3小分子干扰RNA均未能增强顺铂对A2780/DDP细胞的细胞毒作用;③与空载体组和未转染细胞相比,A2780/DDP细胞的MDR3及MDR1 mRNA表达均低下(P>0.05);④Caspase-3蛋白表达未见增加。结论:顺铂所致的卵巢癌细胞多药耐药与MDR1及MDR3基因过度表达均无关,卵巢癌细胞顺铂耐药为非P-gp