NaOH消蚀法制备脱细胞真皮基质修补腹壁疝

背景：与其他疝修补材料相比,脱细胞真皮基质具有易血管化、抗感染、从而可用替代传统补片用于感染腹壁缺损重建等特点。 目的：观察NaOH消蚀法制备的脱细胞真皮基质作为修补材料应用于腹疝的应用价值。 方法：以全厚猪皮制成脱细胞真皮基质,45只SD雄性大鼠制备腹壁疝模型,随机数字表法分为腹壁疝组：直接缝合皮肤,Marlex网组和脱细胞真皮基质组：分别应用大小为3.5 cm×4.0 cm的Marlex网和脱细胞真皮基质缝合皮肤;观察修复后1周时有无腹壁疝发生,脱细胞真皮基质组修复后1,2,3,5,10周分别取材,其中每周各组取4只用于苏木精-伊红染色,光镜观察。修复后第5周Marlex网组和脱细胞真皮基质组各取6只用于抗张力试验。 结果与结论：术后1周脱细胞真皮基质组与Marlex网组腹壁疝发生率均显著低于腹壁疝组(P < 0.001)。脱细胞真皮基质的胶原纤维无明显变化,即有少量成纤维细胞植入,术后2周可见新生血管,术后5周脱细胞真皮基质内部血管密度基本稳定。将单独脱细胞真皮基质片与Marlex网行抗张力试验,Marlex网的抗张力显著高于脱细胞真皮基质(P < 0.001)。但植入体内5周后,脱细胞真皮基质筋膜组织的抗张力高于Marlex-筋膜组织(P < 0.05)。提示复合消蚀制备的脱细胞真皮基质可以作为良好的疝修补材料。     

比较两种方法制备脱细胞小血管支架

目的:比较0.5%Triton X-100 0.05%NH4OH和酶法制备脱细胞小血管支架的效果.方法:分别用含0.5%Triton X-100 0.05%NH4OH处理3 d或1.0H Triton X-100 0.125%胰蛋白酶 Dnase Rnase孵育48 h,脱去犬股静脉中的细胞成分,50Co辐照消毒,血清浸泡24 h,将平滑肌细胞和内皮细胞接种到脱细胞支架中;进行H-E染色、胶原纤维和弹力纤维染色,扫描电镜观察及力学检测.结果:0.5%Triton X-100 0.05%NH4OH法完全地脱去了血管细胞;细胞外基质较完整地保留下来,其形态结构与脱细胞前无明显改变;见种植细胞在支架内生长良好,连成片,支架具有良好的生物相容性;力学结果显示其弹性回复率和最大断裂强度好于酶组.结论:两种方法比较,0.5%Triton X-100 0.05%NH4OH法简便易行,成本低,脱细胞效果好,组织相容性佳,对力学性状影响小,是比较理想的制备脱细胞小血管支架的方法.     

脱细胞真皮基质补片修复滇南小耳猪胆管损伤☆

背景：目前胆管缺损的修复效果不佳,脱细胞真皮基质已广泛用于烧伤、疝修复、口腔黏膜及软组织修复等。 目的：观察脱细胞真皮基质修复滇南小耳猪胆管损伤的效果。 方法：将滇南小耳猪建立胆管损伤动物模型,建模成功后按修复方式分为胆肠吻合组、膨体聚四氟乙烯组及脱细胞真皮基质组,胆肠吻合组进行胆肠吻合修补,膨体聚四氟乙烯组及脱细胞真皮基质组分别用膨体聚四氟乙烯补片和脱细胞真皮基质补片制成直径稍宽管状进行修补。 结果与结论：治疗后2~4个月,脱细胞真皮基质组的总胆红素低于其他2组(P < 0.05);免疫组织化学染色显示,治疗后1~4个月,其转化生长因子β1表达均高于其他2组(P < 0.05),表达随时间增加而降低(P < 0.05)。脱细胞真皮基质组胆总管吻合口及周围组织出现胆道上皮、腺体、血管及平滑肌等再生。脱细胞真皮基质组治疗后未出现胆道狭窄、感染及排斥反应发生。结果证实,脱细胞真皮基质可生理性修复胆道并重建其功能,并发症少,生物相容性较好。 关健词：脱细胞真皮基质;补片;胆管损伤;转化生长因子β1;猪;生物相容性;细胞外基质材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.12.012     

优选人脱细胞真皮基质及荧光标记示踪与其复合培养的成纤维细胞

目的 优选人脱细胞真皮基质(ADM)并评价其生物学特性. 方法 通过高渗盐-NaOH消蚀法(A组)、高渗盐-十二烷基硫酸钠(SDS)法(B组)和DispaseⅡ-Triton X-100法(C组)制作人脱细胞真皮基质,以特殊染色、免疫组织化学观察3种方法 制作ADM的组成成分;四甲基偶氮唑盐(MTT)细胞毒性实验评价3种方法 制作ADM的细胞毒性反应;细胞培养法评价其细胞相容性,优选ADM .重组腺病毒绿色荧光表达载体(Ad-GFP)转染的人成纤维细胞(FB)接种在优选ADM上,荧光显微镜观察 FB的生长情况. 结果 3种方法 均能够保留胶原纤维、弹性纤维, A组和C组能够完全脱去细胞,B组未能完全脱去细胞;A组和B组制备ADM细胞毒性反应小于1级;C组制备ADM细胞毒性反应大于1级.A组与B组24h 3T3细胞贴壁数有统计学意义( P <0.05),3T3细胞能够在A组ADM表面贴附;优选A组ADM.转染Ad-GFP的FB在优选ADM上生长和增殖良好. 结论 高渗盐-NaOH消蚀法制备的ADM蕴涵丰富的生物信息,细胞毒性小,生物相容性好,是一种很好的生物支架材料.     

基因修饰牙龈成纤维细胞及脱细胞真皮基质制备牙周组织工程复合物

背景：前期研究发现人血小板源性生长因子B基因转染的牙龈成纤维细胞能够在体外快速增殖,且能够向胞外分泌血小板源性生长因子BB蛋白。目的：了解人血小板源性生长因子B基因修饰牙龈成纤维细胞植入脱细胞真皮基质后,在体内形成牙周组织工程化复合物的能力。方法：将人血小板源性生长因子B基因转染与未转染的Beagle犬牙龈成纤维细胞分别接种于脱细胞真皮基质上,观察细胞在脱细胞真皮基质上的生长情况。将人血小板源性生长因子B基因转染犬牙龈成纤维细胞-脱细胞真皮基质复合物(实验组)、犬牙龈成纤维细胞-脱细胞真皮基质复合物(对照组)及脱细胞真皮基质(空白组)分别植入裸鼠背部皮下,植入后2,4,8周,取背部标本进行组织学观察。结果与结论：人血小板源性生长因子B基因转染与未转染的犬牙龈成纤维细胞均能在脱细胞真皮基质上良好生长。植入后8周,空白组周围的细胞大面积进入脱细胞真皮基质内,部分脱细胞真皮基质出现完全自体化,尽管细胞进入较多,但新生成的胶原纤维较少,细胞只是占据原有的胶原支架生长;对照组开始出现大面积新生胶原纤维,脱细胞真皮基质上原有的胶原纤维逐步被新生的胶原替代,但原有的胶原结构得到保留;实验组出现大面积完全矿化,可见沿原有胶原支架排列的矿化颗粒。表明接种人血小板源性生长因子B基因修饰牙龈成纤维细胞的脱细胞真皮基质在体内获得了成骨性能。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

次氯酸钠溶液和钴-60辐照对脱细胞结膜基质中病毒灭活效果的研究

目的验证猪源脱细胞结膜基质中病毒灭活工艺的灭活效果。方法用不同浓度次氯酸钠溶液对猪睾丸(ST)细胞和牛肾(MDBK)细胞行细胞毒性实验;选择猪眼结膜、脱细胞结膜基质各3个批号,用ST细胞和MDBK细胞进行次氯酸钠灭活处理和钴-60(25 kGy)辐照处理后的样品/终止产物的细胞毒性实验;以猪细小病毒(PPV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)为指示病毒,采用细胞病变法分别测定次氯酸钠工艺和钴-60(25 kGy)辐照工艺对猪脱细胞结膜基质(中间品)病毒灭活效果,并进行细胞盲传实验。结果次氯酸钠溶液稀释至质量浓度100.00 mg/L(1.0‰)时,ST细胞增殖率大于70%;质量浓度50.00 mg/L(0.5‰)次氯酸钠溶液的MDBK细胞增殖率大于70%。1.0‰次氯酸钠溶液处理的猪眼结膜样品在10倍体积稀释后,对ST细胞和MDBK细胞均无抑制作用。脱细胞结膜基质辐照处理,经100倍体积稀释后对MDBK细胞无毒性,经10倍体积稀释后对ST细胞无毒性影响。3个批号猪眼结膜样品经过次氯酸钠溶液处理30 min后,PPV和BVDV的灭活平均降低系数分别为≥4.542 logs和≥4.333 logs;负载PPV病毒样品的盲传3代为阳性,即仍能检测到PPV。3个批号脱细胞结膜基质样品经钴-60辐照后,PPV和BVDV的灭活平均降低系数分别为≥4.792 logs和≥3.667 logs,负载BVDV的3个批号样品盲传结果为阴性,负载PPV病毒的3个批号样品盲传结果为阳性。结论用次氯酸钠溶液和钴-60辐照两个工艺分别处理脱细胞结膜基质(中间品)后的病毒灭活降低系数累加为:BVDV总降低系数大于8 logs,PPV总降低系数大于9 logs。两个工艺联合可以有效灭活猪源脱细胞结膜基质中污染的PPV和BVDV。     

猪胆总管脱细胞支架的制备及组织学评价

目的 用不同的脱细胞方法对猪胆总管进行处理,比较脱细胞前后的组织学变化,筛选适宜的脱细胞方法,为组织工程胆管支架材料的应用提供理论依据。 方法 30例猪胆总管随机分为5组：对照组（A组）：0.05% 胰蛋白酶+核酸酶（B组）：0.1%十二烷基硫酸钠（SDS）+核酸酶（C组）：1.0% Triton X-100+核酸酶（D组）：1.0% Triton X-100+0.1% SDS +核酸酶（E组）。通过HE染色光学显微镜下观察脱细胞基质的组织结构和细胞残留情况;用紫外分光光度法检测脱细胞基质的DNA含量,计算脱细胞率。结果 脱细胞B组有少量细胞残留,纤维有损伤;脱细胞C组、D组、E组的细胞均被去除,纤维无明显损伤。A组的DNA含量为（71.24 ± 2.56）μg /100 mg。B、C、Ｄ、Ｅ4个脱细胞组的DNA含量与A组的差异有统计学意义（F =15.29, P<0.01）,均有明显的脱细胞效果（P<0.01）。Ｂ组的脱细胞率为77.03%,比C组、Ｄ组、Ｅ组的脱细胞效果稍差（P<0.05）,Ｅ组的脱细胞率高达99.03%。 结论 应用1.0% Triton X-100+0.1% SDS +核酸酶的脱细胞效果好,能更好地降低胆总管的免疫原性,是一种比较理想的猪胆总管脱细胞方法。     

脱细胞血管基质材料同种异体移植10个月研究*☆

背景：异体血管移植之所以至今未能在临床应用,关键是异体组织抗原性排斥反应的难题未能得到解决。 目的：制备动脉脱细胞血管基质,探讨脱细胞血管异体移植的可行性。 方法：采用不同去垢剂(1%Triton X-100、1%SDS)多步骤对犬血管进行脱细胞处理,通过组织学和力学观测,建立犬动脉血管脱细胞的方法;并进行脱细胞血管的异体移植。 结果与结论：经胰蛋白酶、低渗溶液和去垢剂Triton X-100、SDS等多步骤处理,犬颈总动脉血管的细胞基本脱除,细胞外基质保持完好,血管的弹性、韧性保存较好;用该法制备的犬颈总动脉(直径约4.0 mm)进行异体移植,经10个月观察,4/5通畅。提示经去垢剂Triton X-100、SDS加低渗溶液、胰蛋白酶和蛋白酶抑制剂处理的多步法,可以脱除血管的细胞成分,细胞外基质和力学特性保持完好,是一种较好的方法;用该法制备的犬颈总动脉可以直接进行异体移植,是一可选择的血管移植材料。 关键词：动脉血管;犬;脱细胞;同种异体移植;血管基质 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.12.014     

脱细胞猪真皮基质与自体微粒皮复合移植28例

目的 观察脱细胞猪真皮基质作为微粒皮移植术覆盖物治疗大面积深度烧伤创面的临床效果.方法 对收治的28例大面积深度烧伤患者行早期切(削)痂术或肉芽创面清创微粒皮移植,以脱细胞猪真皮基质为覆盖物.术后观察患者全身反应、脱细胞猪真皮基质脱落过程、创面愈合等情况.结果 2例患者术后因高热、创面感染、营养不良致脱细胞猪真皮基质1周内溶脱,后经再次手术修复；26例患者术后无严重不良反应,5～7d首次换药见脱细胞猪真皮基质与创面贴附紧密、干燥、呈黄褐色或粉红色、无皮下积液.2周后脱细胞猪真皮基质保持完整干燥,颜色加深.3周后脱细胞猪真皮基质逐渐与创面分离.脱细胞猪真皮基质脱落后21例创面1次性封闭,外观平整；5例残留极少未愈创面,经2～5次换药愈合.结论 以脱细胞猪真皮基质为覆盖物的微粒皮移植术临床效果良好,脱细胞猪真皮基质能够始终保持干燥完整,不易积液,减少术后创面感染的概率.     

异种脱细胞真皮替代睑板材料重建眼睑的可行性

背景：眼睑后层重建是眼睑重建的重点和难点,其中睑板替代物更是研究的焦点。异种脱细胞真皮作为一种新型的组织工程材料,在国内外烧伤整形领域,正得到广泛的研究和应用。 目的：观察异种(猪)脱细胞真皮植入兔眼睑后的组织相容性极其组织病理学变化。 方法：剥取健康小白猪全层皮肤20 cm×20 cm,制备异种(猪)脱细胞真皮基质。同时制备兔睑板全层缺损模型并植入脱细胞真皮基质,观察大体情况,并分别于第1,2,3周取移植交界处眼睑组织光镜下观察组织学的改变。 结果与结论：大体观察未见明显排斥反应及眼睑的变形;光镜下1周时可见局部炎症细胞浸润,2周时炎症细胞减少,3周时正常纤维组织长入,逐渐分割代替植入的胶原纤维,炎症反应消失。提示异种脱细胞真皮免疫原性低,并可引导新生胶原的生长,是一种良好的睑板替代物。     

不同脱细胞方法对猪尾纤维环生物力学特性及组织结构的影响

目的探讨不同脱细胞处理方法对猪尾椎间盘纤维环生物力学特性及组织结构的影响,为构建组织工程纤维环提供实验依据。方法取新鲜猪尾纤维环60个,随机分为4组,每组15个。Triton X-100组(A组):先将纤维环放入Tris-HCl低渗缓冲液中振荡48 h,再用TritonX-100、DNaseⅠ和RNase A对纤维环脱细胞处理;SDS组(B组):将纤维环冻融3次,接着用SDS、DNaseⅠ和RNase A对纤维环脱细胞处理;胰蛋白酶组(C组):用含胰蛋白酶、DNaseⅠ和RNase A的Tris缓冲液对纤维环脱细胞处理;对照组(D组):纤维环不做任何处理。采用HE染色与扫描电镜方法,观察各组脱细胞情况以及纤维环超微结构的变化;采用生物化学和生物力学方法检测各组纤维环的胶原含量、氨基葡聚糖(GAG)含量及力学参数。结果与对照组比较,HE染色及扫描电镜可见A、B、C 3组均无细胞残留;A组纤维环超微结构未见破坏,C组纤维环超微结构可见轻度破坏,B组纤维环超微结构可见明显破坏。A、B、C 3组纤维环胶原含量与对照组比较无统计学差异(P>0.05),但GAG含量均明显低于对照组(P<0.05)。A、C两组的力学参数(极限载荷、极限应力、韧度、弹性模量、断裂功耗)与对照组无统计学差异(P>0.05),B组上述力学参数均低于对照组(P<0.05)。结论 Triton X-100组处理后的猪尾椎间盘纤维环无细胞残留,结构无破坏,基质成分及力学性能保存良好,适合于构建组织工程纤维环。     

脱细胞真皮基质补片治疗小儿肛瘘

背景：采用异体脱细胞真皮基质材料填塞治疗成人低位肛瘘具有较好的临床效果。 目的：探讨脱细胞异体真皮基质补片修补小儿肛瘘的可行性以及方法。 方法：将138例肛瘘患儿随机分为2组,用可吸收线将脱细胞异体真皮基质生物补片固定在直肠黏膜下,A组双层缝合封闭内口,B组不游离、缝合内口。 结果与结论：随访观察6个月,所有病例肛周无红肿,外观无异常,外口硬结消失,内口愈合良好,无肛门狭窄及肛门外形改变。两组在修复后均有部分患儿出现瘘口出流便,但未经特殊处理,症状均自行消失,痊愈。A组术后瘘口漏便患儿人数较B组多(P < 0.01),出现时间较B组早(P < 0.05),但总体愈合时间无差异。说明手术中仅固定补片于内口,而不游离、缝合内口即可达到满意疗效。     

脱细胞猪膀胱支架的构建

文题释义： 脱细胞：生物移植或修补材料制备过程中常用到脱细胞方法,脱细胞能很好的保留组织的成分,降低移植或修补后的免疫原性,同时保持良好的机械性能,在临床上得到较为广泛的应用。 猪膀胱支架：利用不同的脱细胞方法去除猪膀胱组织中的细胞后制备为猪膀胱支架,既保留了细胞外基质的完整性,又可以降低移植后排斥反应,为进一步的对组织工程支架材料的研究奠定了可行的基础。 背景：膀胱修补术是目前临床上治疗膀胱缺损的主要方法之一,同源性组织因各种因素的影响来源较少,组织工程膀胱脱细胞基质受到人们越来越多的关注。猪膀胱脱细胞外基质来源广泛,具备天然的细胞外支架结构,成为组织工程膀胱替代材料研究的热点。 目的：研究脱细胞猪膀胱作为组织工程支架材料的可行性。 方法：取新鲜的猪膀胱,联合液氮冻融、十二烷基硫酸钠、胰蛋白酶脱细胞方法制猪膀胱无细胞基质。按不同脱细胞方法分组：①正常对照组：不做任何处理;②实验组：0.6%胰蛋白酶+5%十二烷基硫酸钠(pH 8.0);③脱细胞对照组：分别用0.75%胰蛋白酶(pH 8.0)、1%胰蛋白酶(pH 8.0)、5%十二烷基硫酸钠(pH 7.6)或10%十二烷基硫酸钠(pH 7.6)处理。通过苏木精-伊红染色和VG染色、DNA定量、α-Gal抗原检测,观察猪膀胱脱细胞效果。 结果与结论：苏木精-伊红染色显示实验组猪膀胱细胞成分已基本去除;VG染色显示实验组完整保留了猪膀胱组织的细胞外基质成分;实验组的DNA残留量仅为(49.84±30.13) μg/g,显著低于几个脱细胞对照组(P < 0.05);同时其α-Gal抗原残留也明显低于脱细胞对照组。提示：应用0.6%胰蛋白酶+5%十二烷基硫酸钠处理猪膀胱,在完整保留猪膀胱组织细胞外基质的同时,可有效去除其细胞成分,为构建脱细胞猪膀胱支架提供一定参考价值。 ORCID: 0000-0003-1004-7390(李芹) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

异体脱细胞真皮基质作为组织工程皮肤真皮支架的可行性*

背景：组织工程皮肤是目前研究皮肤损伤修复重建的重要手段之一,异体脱细胞真皮基质不存在免疫原性,在异体移植时不会发生排斥反应,是比较理想的真皮替代物。 目的：观察异体脱细胞真皮基质的组织相容性。 方法：以正常人体真皮组织作为对照,通过体外、体内细胞毒性实验检测异体脱细胞真皮基质的组织相容性,以膨胀度、饱和含水量及生物力学分析检测异体脱细胞真皮基质的亲水性及机械性能。 结果与结论：真皮基质中未见任何细胞成分,其网孔直径介于100~180 μm 之间。脱细胞真皮基质组饱和含水量为(69.6±3.97)%,膨胀度2.30±0.42,最大断裂力为(3.082±0.046) N,与对照组相比,差异无显著性意义(P > 0.05)。体内外细胞毒性检测,未见明显细胞生长抑制及免疫排斥反应。提示异体脱细胞真皮基质机械性能接近正常皮肤,组织相容性好,免疫排斥反应小,是构建组织工程皮肤理想的真皮材料。     

应用脱细胞血管基质构建组织工程血管的初步研究

目的： 采用脱细胞处理的猪胸主动脉血管基质作为支架材料，接种人脐带血管内皮细胞，构建组织工程血管。方法: 以新鲜猪胸主动脉为原材料， 1% Triton X-100为脱细胞试剂，制备脱细胞血管基质；采用冷冻干燥和热交联法对脱细胞血管基质进行改性，并进行组织学观察及力学性能测定。用人脐带内皮细胞经培养和扩增后，再与所制备的脱细胞血管基质进行复合培养，光学显微镜及扫描电镜观察内皮细胞生长状况。结果: 1% Triton X-100处理84h的猪胸主动脉，既能完全脱除血管中细胞，同时又完整保留血管基质的三维结构；对脱细胞血管基质冷冻干燥24 h，120 ℃下热交联12 h，能有效提高材料的机械强度，断裂强度可达到1.70 MPa。扫描电镜下可见，脱细胞血管基质与内皮细胞复合培养7 d，已形成典型血管内膜样结构。结论: 经改性后的脱细胞血管基质与内皮细胞具有良好的相容性，用其作为支架材料与内皮细胞复合培养，有望应用于构建组织工程化血管。     

交联剂对脱细胞膀胱基质生物力学性能的影响

目的 研究不同交联剂对猪脱细胞膀胱基质的组织结构影响,并比较其生物力学性能,为盆底修复替代材料的选择提供依据.方法 采用表面活性剂+酶消化法去除新鲜猪膀胱的细胞成分,将脱细胞膀胱基质随机分为3组,A组经0.25％戊二醛交联,B组经0.625％京尼平交联,C组未交联.对各组材料进行HE染色,观察纤维的变化情况.使用生物力学性能测试系统检测抗拉强度、断裂伸长率、弹性模量,并进行统计学分析.结果 京尼平交联脱细胞膀胱基质后呈深蓝色,保持了天然组织构架的完整,纤维更加致密.戊二醛交联脱细胞膀胱基质后呈浅黄色,纤维排列紊乱且有断裂.新鲜猪膀胱经上述三种方法处理后,其弹性模量增大、断裂伸长率减小,而其中京尼平交联处理的脱细胞膀胱基质力学性能与新鲜膀胱组织更为相近.结论 京尼平交联的脱细胞膀胱基质组织结构的形态佳,同时较大限度地保留膀胱组织的力学性能,可能是较理想的盆底重建材料.     

纳米银－猪脱细胞真皮基质敷料治疗浅Ⅱ度烧伤创面的临床观察

目的观察纳米银－猪脱细胞真皮基质敷料在临床上治疗浅Ⅱ度烧伤创面的临床疗效。 方法2014年1月到2015年12月,选取北京军区总医院烧伤整形科收治的浅Ⅱ度烧伤患者90例,按入院顺序依次编码,采用随机排列数字表法将90例患者分为纳米银敷料组、猪脱细胞真皮基质敷料组及纳米银－猪脱细胞真皮基质敷料组,每组30例。患者入院当天,拍照计算创面面积,并用咽拭子取创面分泌物作细菌培养,行创面清创术,分别在创面上敷以纳米银敷料、猪脱细胞真皮基质敷料以及纳米银－猪脱细胞真皮基质敷料。于治疗后第5天,用咽拭子取创面分泌物作细菌培养;采用痛觉评分标准,通过询问与观察患者换药时的痛觉情况,评估患者换药时痛觉评分。于治疗后第7天,拍照计算创面面积,计算创面愈合率。记录创面最终愈合时间。数据比较采用单因素方差分析、χ²检验及SNK－q检验。 结果纳米银敷料组、猪脱细胞真皮基质敷料组及纳米银－猪脱细胞真皮基质敷料组在治疗后第5天创面细菌培养阳性数结果分别为2例(6.6%)、9例(30.0%)、1例(3.3%),3组结果比较,差异有统计学意义(χ²＝10.962,P＝0.004);纳米银－猪脱细胞真皮基质敷料组的细菌培养阳性数结果显著优于猪脱细胞真皮基质敷料组,差异有统计学意义(χ²＝7.680,P＝0.006)。纳米银敷料组、猪脱细胞真皮基质敷料组及纳米银－猪脱细胞真皮基质敷料组治疗后第5天的痛觉评分[(8.6±0.5)、(6.6±0.8)、(0.6±1.3)分],治疗后第7天的创面愈合率[(61.67±18.22)%、(86.77±15.32)%、(99.80±0.56)%],创面愈合时间[(11.5±1.3)、(10.3±0.7)、(7.3±0.7)d],组间差异均有统计学意义差异(F＝201.7、19.9、55.7,P值均小于0.05);纳米银－猪脱细胞真皮基质敷料组治疗后第5天的痛觉评分显著低于其余两组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05);治疗后第7天的创面愈合率明显优于其余两组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05);创面愈合时间显著短于其余两组,比较差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。 结论纳米银－猪脱细胞真皮基质敷料具有抗感染、促进创面愈合及减轻换药痛觉的作用。     

脱细胞异体真皮基质与人脂肪干细胞的生物相容性

背景：脱细胞异体真皮基质具有优良的生物相容性和组织细胞诱导功能。 目的：评价人脂肪干细胞与脱细胞异体真皮基质的生物相容性。 方法：取健康成年人吸脂术后的脂肪组织分离脂肪干细胞,并行原代与传代培养,传至第3代,将细胞与脱细胞异体真皮基质联合体外培养3,7 d,倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞在支架材料上的黏附、生长及增殖情况,并计算细胞在材料上的黏附率;XTT比色法检测细胞的生长增殖情况。 结果与结论：脂肪干细胞在支架材料上分布均匀,24 h内细胞开始伸展、黏附,二三天完全伸展变形,以梭形为主,呈网状排列;随着培养时间延长,支架上的细胞逐渐增多;人脂肪干细胞细胞与脱细胞异体真皮基质混合培养后平均黏附率为95.03%,并保持正常的生长增殖速度,表明支架对细胞具有良好的黏附性;脱细胞异体真皮基质材料与人脂肪干细胞复合后相容性良好。     

纳米银/脱细胞真皮基质的制备及抗菌效果评价

目的探讨含纳米银的脱细胞真皮基质的制备方法,以解决脱细胞真皮基质无抗菌活性的缺点;通过各种方法评价新型复合敷料的抗菌效果。方法通过倍比稀释法和基内接种法测定纳米银溶液的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度;将脱细胞真皮基质浸渍在不同浓度的纳米银溶液中一定时间,制备出含不同浓度纳米银的复合敷料;通过Kirby-Baucer方法比较不同浓度浸渍的脱细胞真皮基质的抑菌效果。结果纳米银溶液对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度是8mg/L,最低杀菌浓度是64mg/L;纳米银溶液对铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度8mg/L,最低杀菌浓度是32mg/L。浸渍吸附法制备出含有不同浓度纳米银的脱细胞真皮基质。纳米银/脱细胞真皮基质对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抑菌效果优于纳米银医用抗菌敷料。结论纳米银/脱细胞真皮基质拥有良好的抗菌和杀菌效果,可望成为具有抗菌活性的生物敷料。     

猪胆总管脱细胞基质构建组织工程胆管的生物力学评价

目的　用不同的脱细胞方法对猪胆总管进行处理,比较脱细胞前后的生物力学变化,筛选适宜的脱细胞方法,为组织工程胆管支架材料的应用提供理论依据。 方法　30例猪胆总管,随机分为5组,A组：对照组, B组：0.05 % 胰蛋白酶+核酸酶,C组：0.1 % SDS+核酸酶,D组：1.0 % Triton X-100+核酸酶,E组：1.0 % Triton X-100+0.1 % SDS +核酸酶。在Test Resources生物力学试验机上进行加载一卸载试验和极限抗张强度试验。计算出生物力学材料常数（α1、β1、α2、β2）、弹性模量、极限抗张强度和断裂伸长率等指标。 结果　Ｄ组、Ｅ组的生物力学材料常数（α1、β1、α2、β2）与A组的差异无统计学意义（F = 12.21, P = 0.06）,Ｂ组、C组比A组、D组和Ｅ组的小（P < 0.01）;Ｄ组、Ｅ组的弹性模量比A组的稍增大,但差异不明显（P > 0.05）,Ｂ组、C组比A组的小（P < 0.05）;Ｄ组、Ｅ组的UTS值和SOF值与A组差异不明显（P > 0.05）;B组、C组的UTS值明显小于A组（P < 0.05）,SOF值明显大于A组（P < 0.05）。 结论 应用1.0 % Triton X-100+核酸酶和1.0 % Triton X-100+0.1 % SDS +核酸酶的脱细胞效果好,且不会影响猪胆总管的生物力学特性,是一种比较理想的猪胆总管脱细胞方法。