3种组织来源的间充质干细胞体外成骨能力的比较

目的比较成人骨髓间充质干细胞(BMSCs)、人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)和人胎盘间充质干细胞(P-MSCs)的成骨能力。方法用含10%胎牛血清的DMEM/Ham's F-12培养液培养3种MSCs,CCK8法检测增殖能力,流式细胞仪鉴定3种细胞。碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色观察细胞经成骨诱导后成骨分化蛋白-ALP的分泌和矿化钙结节的沉积。实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法检测MSCs骨再生相关基因的表达。Western blot方法检测MSCs成骨再生相关基因的蛋白表达。结果 MSCs在第3天进入对数增殖期。3种细胞的表面标志物阳性率:CD44、CD90和CD105均高于98%。3种MSCs成骨诱导9 d时,3种MSCs的实验组均表达大量成骨分化蛋白-ALP,成骨诱导18 d时3种MSCs均呈现较好的矿化能力;3种MSCs成骨诱导9 d时,实验组RUNX2和ALP基因显著性高表达(P0.05),成骨诱导18 d时,实验组RUNX2和骨钙素(OCN)亦显著性高表达(P0.05);3种MSCs成骨诱导9 d时,实验组均检测到RUNX2和ALP的蛋白表达;成骨诱导18 d时,实验组细胞亦检测到RUNX2和OCN的蛋白表达。结论 UC-MSCs和P-MSCs具有良好的成骨分化能力,有望作为骨组织工程的种子细胞用于治疗骨缺损。     

P2X7受体对牙周膜干细胞成骨分化的作用

背景：研究影响牙周膜干细胞成骨分化的相关离子通道。 目的：初步观察P2X7受体在人牙周膜干细胞成骨分化中的作用。 方法：分离培养人牙周膜干细胞,分为4组,分别添加成骨诱导液和100 nmol/L三磷酸腺苷、成骨诱导液、100 nmol/L三磷酸腺苷及普通培养基培养,于成骨诱导7,14 d,利用茜素红染色检测成骨效果,qRT-PCR,Western blot检测OCN、Runx2以及P2X7受体的表达。 结果与结论：茜素红染色显示成骨诱导液+三磷酸腺苷组牙周膜干细胞的成骨效果在7 d时显著好于成骨诱导液组,但在14 d时成骨诱导液组成骨效果显著好于成骨诱导液+三磷酸腺苷组(P < 0.05);在成骨诱导7 d时,qRT-PCR结果显示成骨诱导液+三磷酸腺苷组Runx2,OCN mRNA的表达达到峰值,而14 d时明显降低(P < 0.05)。成骨诱导7 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体mRNA的表达量明显高于三磷酸腺苷组(P < 0.05),成骨诱导液组和对照组未见P2X7受体mRNA的表达,成骨诱导14 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组表达量下降,明显低于三磷酸腺苷组,差异有显著性意义(P < 0.05)。Western blot结果显示,成骨诱导7 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体的表达达到峰值,高于三磷酸腺苷组,而成骨诱导液组表达量低,对照组几乎没有表达;成骨诱导14 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体的表达比7 d时明显下降,而三磷酸腺苷组P2X7受体的表达比7 d时有所增加。结果表明外源性三磷酸腺苷可在牙周膜干细胞成骨诱导前7 d明显提高成骨效果,但在7 d后,抑制成骨诱导效果,三磷酸腺苷可以激活牙周膜干细胞P2X7受体表达,且P2X7受体的表达与牙周膜干细胞的成骨效果正相关。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

高糖微环境下糖原合酶激酶3β抑制剂Tideglusib干预大鼠骨髓间充质干细胞的增殖及成骨分化

背景：高糖环境能够抑制骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化能力,如何提高成骨细胞在高糖状态下的生物学活性,是改善糖尿病患者种植体骨结合的关键。目的：探究非ATP竞争性的特异性糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)抑制剂Tideglusib在高糖微环境下对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法：采用全骨髓贴壁法培养并纯化大鼠骨髓间充质干细胞,将骨髓间充质干细胞分为4组：正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),Tideglusib+正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖+20 nmol/L Tideglusib),高糖组(25.5 mmol/L葡萄糖),Tideglusib+高糖组(25.5 mmol/L葡萄糖+20 nmol/L Tideglusib)。(1)CCK-8法检测细胞的增殖情况;(2)成骨诱导培养4,7 d后检测碱性磷酸酶的活性;(3)成骨诱导培养21 d后采用茜素红染色检测钙化结节的形成;(4)细胞接种24 h后鬼笔环肽染色观察细胞的初期黏附形态;(5)RT-qPCR检测成骨基因Runx2、OPN的mRNA表达,Wester...     

维甲酸诱导小型猪牙周膜干细胞的体外成骨

背景：近期研究发现维甲酸对胚胎干细胞及多种成体干细胞具有成骨方向诱导的作用。 目的：观察维甲酸对小型猪牙周膜干细胞体外成骨作用的影响。 方法：采用组织块法获得小型猪牙周膜细胞,有限稀释法纯化小型猪牙周膜干细胞,免疫荧光法检测STRO-1、免疫细胞化学法检测波形蛋白、角蛋白鉴定小型猪牙周膜干细胞。CCK8法测定小型猪牙周膜干细胞增殖曲线,检测小型猪PDLSC克隆形成率。使用维甲酸对第3代小型猪牙周膜干细胞进行成骨诱导,茜素红染色检测矿化结节,免疫细胞化学方法检测成骨相关基因骨桥蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达。 结果与结论：有限稀释法分离纯化小型猪牙周膜干细胞STRO-1,波形蛋白阳性表达,角蛋白阴性表达,克隆形成率为2.8%,维甲酸诱导14 d后,碱性磷酸酶染色阳性,诱导21 d后茜素红染色阳性,免疫细胞化学法检测骨桥蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原阳性表达,Ⅲ型胶原阴性表达。结果表明小型猪牙周膜干细胞能够被维甲酸诱导向成骨样细胞分化。     

糖尿病骨质疏松症模型小鼠脂肪干细胞的成骨能力北大核心

背景:长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)-DANCR可调节包括骨代谢的多个生物学过程。课题组基因芯片结果显示糖尿病骨质疏松小鼠脂肪组织中LncRNA-DANCR显著高表达。目的:探究LncRNA-DANCR通过Wnt/β-catenin信号通路对糖尿病骨质疏松小鼠脂肪干细胞成骨能力的影响。方法:分离培养糖尿病骨质疏松小鼠和正常对照小鼠脂肪干细胞,成骨诱导3 d后,采用qRT-PCR、Western blot检测LncRNA-DANCR、Wnt信号分子β-catenin以及成骨转录因子(RUNX2、OPN)的表达。设计LncRNA-DANCR特异性siRNA转染糖尿病骨质疏松小鼠脂肪干细胞,成骨诱导3 d后,采用qRT-PCR、Western blot和碱性磷酸酶染色检测Wnt信号分子β-catenin、成骨转录因子(RUNX2、OPN)的表达以及成骨能力改变。结果与结论:①成骨诱导3 d后,糖尿病骨质疏松小鼠脂肪干细胞的LncRNA-DANCR表达水平显著高于正常对照小鼠脂肪干细胞,Wnt信号分子β-catenin和成骨转录因子RUNX2、OPN的表达显著低于正常对照小鼠脂肪干细胞;②siRNA转染糖尿病骨质疏松小鼠脂肪干细胞成骨诱导3 d后,β-catenin以及RUNX2、OPN显著高表达,成骨能力增强;③结果表明,LncRNA-DANCR通过抑制Wnt/β-catenin信号通路降低糖尿病骨质疏松小鼠脂肪干细胞的成骨能力,沉默LncRNA-DANCR可恢复其成骨能力。     

地塞米松诱导牙周膜干细胞的定向成骨分化及凋亡

背景：牙周膜干细胞是一类起源于牙组织的成体干细胞,具有良好的成骨分化能力,有望在骨组织工程中得到应用。 目的：观察成骨诱导液对牙周膜干细胞成骨分化能力及细胞早期凋亡的影响。 方法：从原代牙周膜组织中分离得到牙周膜干细胞,以1×10⁴/cm²浓度铺板后开始诱导。利用1,10,100 nmol/L地塞米松、β-磷酸甘油钠、维生素C为成骨诱导剂,以碱性磷酸酶活性检测、茜素红矿化结节染色、荧光定量PCR等方法对细胞成骨情况进行鉴定,采用AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡情况。 结果与结论：地塞米松可有效诱导牙周膜干细胞成骨分化,可显著提高碱性磷酸酶活性,促进茜素红矿化结节形成,提高成骨相关基因骨粘连蛋白及Ⅰ型胶原表达。根据碱性磷酸酶活性和矿化结节实验结果,地塞米松的成骨诱导具有浓度梯度效应,其中100 nmol/L 地塞米松具有最佳成骨诱导能力。细胞凋亡结果提示,地塞米松诱导的成骨分化具有一定促凋亡作用,可诱导牙周膜细胞的早期凋亡。     

骨关节炎患者膝关节滑膜组织来源间充质干细胞的增殖与分化

背景：相对于其他来源的间充质干细胞,滑膜间充质干细胞来源丰富,并且滑膜组织可以在部分切除后迅速再生,并发症少,已逐渐成为近年来干细胞研究的热点。 目的：观察骨关节炎患者膝关节滑膜组织来源间充质干细胞的增殖和定向分化能力。 方法：对滑膜组织来源间充质干细胞进行分离及培养,采用MTT法检测细胞增殖能力,于成骨诱导第7天定量检测碱性磷酸酶活性,诱导第7,14,21天检测成骨相关基因表达,诱导第21天行茜素红染色。 结果与结论：①第3代滑膜间充质干细胞增殖速度较快,接种第1,2天处于潜伏期,3-6 d为对数增长期,第7天细胞增殖速度变慢,进入平台期。②成骨诱导后第3,7,10天诱导组碱性磷酸酶活性均显著高于对照组(P < 0.05)。成骨诱导21 d,茜素红染色阳性,细胞外基质中出现钙沉积以及钙结节。③成骨诱导第7天可见骨结合蛋白以及Runx-2的表达,至第21 天时,骨结合蛋白以及Runx-2的表达水平达到最大值。④以上结果表明来源于晚期骨关节炎患者膝关节滑膜组织的间充质干细胞具有很强的增殖能力,在体外可成功诱导分化为成骨细胞。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

亚微米拓扑结构磷酸三钙陶瓷的研制及骨诱导性能

背景：人工合成的磷酸钙陶瓷材料与天然骨组织无机成分相似,通过表面形貌和化学组成进行功能化设计可赋予其优异的骨传导和骨诱导性能,研发具有骨诱导性能的磷酸钙陶瓷材料是目前的研究热点。目的：通过材料形貌调控和功能化设计赋予亚微米拓扑结构磷酸三钙陶瓷骨诱导性能,检测其理化性能及骨诱导性能。方法：采用高温烧结法制备亚微米拓扑结构的磷酸三钙陶瓷,以市场可供商品化的骨修复材料Bio-Oss骨粉为对照组,表征两种材料的表面形貌、蛋白吸附能力及体外矿化性能。将第3代人牙周膜干细胞与两种材料浸提液共培养,采用CCK-8法检测细胞增殖,茜素红染色检测细胞矿化性能;将第3代人牙周膜干细胞分别接种至两种材料表面,采用碱性磷酸酶染色检测早期成骨,qR T-PCR检测成骨相关因子的表达。结果与结论：(1)扫描电镜下可见两种材料均具有颗粒状纹理的微孔表面,Bio-Oss颗粒明显小于磷酸三钙陶瓷,两种材料的总孔隙度、大孔隙度和微孔隙度相似,磷酸三钙陶瓷主要为亚微米级孔隙,晶粒粒径100 nm-1.0μm,Bio-Oss骨粉主要为纳米级孔隙;体外矿化实验显示,磷酸三钙陶瓷表面诱导骨磷灰石沉积的能力强于Bio-Oss骨粉;...     

BMP9通过Orai1途径促进小鼠骨髓间充质干细胞骨向分化

目的探索钙释放激活钙通道蛋白1(Orai1)在骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的作用。方法贴壁法分离BMSCs,取第3代BMSCs加入10~(-5)mol/L BMP9在不同时间点观察Orai1 mRNA表达;Orai1基因敲减后利用RT-qPCR和Western blot检测转染效果;利用茜素红染色、碱性磷酸酶(ALP)染色观察BMP9诱导BMSCs骨向分化效果,RT-qPCR检测骨性标志物RUNX2、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)基因表达。将细胞复合在骨组织工程支架材料羟基磷灰石/聚乳酸/壳聚糖(hydroxyapatite/PLA/chitosan)植入裸鼠皮下,4周后通过HE染色和Masson染色观察体内成骨效果。结果 BMP9诱导第5天开始Orai1 mRNA表达逐渐升高(P0.05);基因敲减后Orai1基因和蛋白表达显著降低(P0.05);Orai1基因敲减后成骨效果显著下降(P0.05),并且骨性标志物RUNX2、OPN和OCN基因表达显著下降(P0.05);过表达BMP9能显著提高体内BMSCs异位成骨能力,Orai1敲减后显著抑制了这一效果(P0.05)。结论 BMP9促进BMSCs骨向分化,可能是通过调控Orai1发挥效应。     

矿化明胶静电纺丝诱导牙周组织成骨的有效性

背景：当前国内外关于矿化明胶电纺丝纤维对牙周组织成骨诱导有效性的文献较少。 目的：观察矿化明胶静电纺丝对牙周膜成纤维细胞增殖及向成骨方面分化的影响。 方法：将人牙周膜成纤维细胞分别与未矿化明胶静电纺丝、纳米羟基磷灰石矿化1 d的明胶静电纺丝、纳米羟基磷灰石矿化5 d的明胶静电纺丝复合培养,采用MTT法检测培养1,4,7,10,13 d的细胞增殖;应用生化仪检测培养1,7,14 d的细胞碱性磷酸酶活性。 结果与结论：培养10 d时,矿化明胶静电纺丝膜组表面的牙周膜细胞分布均匀,生长良好,铺展成片状并分泌大量细胞外基质,细胞与材料结合紧密,且以矿化5 d组效果更明显,细胞生长密度和状态优于未矿化明胶静电纺丝膜组。不同时间点的细胞增殖活性与碱性磷酸酶活性：矿化5 d明胶静电纺丝膜组>矿化1 d明胶静电纺丝膜组>未矿化明胶静电纺丝膜组(P均< 0.05)。表明经纳米羟基磷灰石矿化的明胶静电纺丝,可促进牙周膜成纤维细胞增殖及向成骨方向分化,且矿化时间越长效果越明显。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

丙戊酸促进大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化

背景：丙戊酸作为一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂,具有促进细胞成骨分化的能力,但相关机制尚不明确。目的：探讨丙戊酸对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及机制。方法：从SD大鼠中分离提取骨髓间充质干细胞,流式细胞仪进行鉴定;CCK-8检测不同浓度丙戊酸对大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响,以确定丙戊酸的使用浓度;然后加入丙戊酸和成骨培养基对大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导分化,在成骨诱导培养第7天进行碱性磷酸酶染色以及第21天进行茜素红染色;成骨诱导培养第3,7天进行q RT-PCR检测成骨相关基因及EZH2的表达;成骨诱导培养第5天进行Western blot检测Runt相关转录因子2、EZH2和H3K27me3相关蛋白的表达。结果与结论：（1）CCK-8细胞增殖实验显示,随着丙戊酸浓度的增加,骨髓间充质干细胞增殖受到显著抑制;（2）碱性磷酸酶染色及茜素红染色结果显示,丙戊酸能提高细胞碱性磷酸酶的表达,增强骨矿化能力;（3）q RT-PCR结果显示,丙戊酸可提高成骨相关基因的表达,降低EZH2基因的表达;（4）Westernblot结果显示,丙戊酸使Runt相关转录因子2蛋白表达增强,EZH2和H3...     

周期性牵张力介导BMP9通过PI3K/AKT信号通路调控人牙周膜成纤维细胞成骨分化

目的　研究在周期性牵张力介导下,骨形态发生蛋白9（bone morphogenetic proteins 9,BMP9）能否激活PI3K/AKT信号通路调控人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament fibroblasts,hPDLFs）成骨分化。 方法　利用FlexCell系统对体外培养的hPDLFs加载正弦波、形变率10%、频率0.5 Hz的周期性牵张力,免疫荧光法检测细胞骨架蛋白的表达及分布,qPCR检测RUNX2、OCN、OPN、OSX mRNA的表达情况,免疫印迹法检测成骨标志蛋白OCN、OPN的表达,加入PI3K信号抑制剂LY294002后AKT、P-AKT以及OCN、OPN的变化。 结果　与对照组比较,6 h、12 h组的细胞骨架蛋白表达增多且呈受力方向分布,OCN、OPN表达上调,差异有统计学意义（P<0.05）,qPCR检测mRNA的表达趋势与蛋白检测结果一致。 结论　周期性牵张力介导BMP9可以通过PI3K/AKT信号通路调控hPDLFs成骨分化。     

炎症微环境下蛋白激酶样内质网激酶通路对牙周膜干细胞成骨分化能力调控机制研究

目的探讨炎症微环境下蛋白激酶样内质网激酶(PERK)通路对牙周膜干细胞成骨分化能力的调控机制。方法选择因正畸拔除的新鲜前磨牙或第三磨牙10例,牙周组织无炎症,完整无龋,患者年龄18～32岁。选择因慢性牙周炎而拔除的离体牙6例,患者年龄20～35岁。健康牙周膜干细胞(H-PDLSCs)和炎症牙周膜干细胞(P-PDLSCs)分别用正常和炎症牙周膜组织制备。采用免疫组织化学检测牙周膜组织中PERK通路相关因子PERK、CHOP、GRP78及ATF4的表达情况。构建稳定干扰PERK的炎症牙周膜细胞系(P-PDLSCs-PERK shRNA),采用RT-qPCR和Western blot检测PERK基因的抑制效率;对构建的稳定干扰PERK细胞系及另外3个对照组细胞P-PDLSCs-Vector、P-PDLSCs和H-PDLSCs进行成骨诱导,RT-qPCR检测成骨相关因子碱性磷酸酶(ALP)、Runx2及OCN的mRNA水平,Western blot检测Runx2和OCN的蛋白水平,ALP染色鉴定ALP活性,茜素红染色分析细胞成骨能力。结果免疫组织化学结果表明,炎症组织中PERK信号通路相关因子PERK、CHOP、GRP78及ATF4均显著高于正常组织(P 0.05)。RT-qPCR及Western blot检测结果显示,PERK基因抑制效率达到59%,PERK蛋白表达的抑制效率为54%。成骨相关因子的m RNA水平检测结果显示,诱导后P-PDLSCs和P-PDLSCs-Vector相差无几(P 0.05);诱导后H-PDLSCs中3种成骨相关因子水平显著高于前2种细胞(P 0.05);PERK基因被抑制诱导后P-PDLSCs-PERK shRNA相比未被抑制的PPDLSCs,3种成骨相关因子的基因表达均显著升高(P 0.05);成骨相关因子Runx2及OCN蛋白表达和ALP活性与mRNA水平保持一致。茜素红染色后,诱导后H-PDLSCs中矿化结石数量显著高于另外3种细胞(P 0.05),而诱导后PPDLSCs-Vector和P-PDLSCs差异无统计学意义(P 0.05);而相比诱导后P-PDLSCs,沉默PERK基因后的P-PDLSCsPERK shRNA中形成矿化结石的数量明显回升(P 0.05)。结论炎症微环境能通过激活PERK信号通路抑制牙周膜干细胞的成骨分化能力,在PERK被沉默时,炎症微环境对牙周膜干细胞成骨分化能力的抑制作用能够得到逆转。     

周期性牵张力介导BMP9通过PI3K/AKT信号通路调控人牙周膜成纤维细胞成骨分化

目的　研究在周期性牵张力介导下，骨形态发生蛋白9（bone morphogenetic proteins 9，BMP9）能否激活PI3K/AKT信号通路调控人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament fibroblasts，hPDLFs）成骨分化。 方法　利用FlexCell系统对体外培养的hPDLFs加载正弦波、形变率10%、频率0.5 Hz的周期性牵张力，免疫荧光法检测细胞骨架蛋白的表达及分布，qPCR检测RUNX2、OCN、OPN、OSX mRNA的表达情况，免疫印迹法检测成骨标志蛋白OCN、OPN的表达，加入PI3K信号抑制剂LY294002后AKT、P-AKT以及OCN、OPN的变化。 结果　与对照组比较，6 h、12 h组的细胞骨架蛋白表达增多且呈受力方向分布，OCN、OPN表达上调，差异有统计学意义（P<0.05），qPCR检测mRNA的表达趋势与蛋白检测结果一致。 结论　周期性牵张力介导BMP9可以通过PI3K/AKT信号通路调控hPDLFs成骨分化。     

激素性股骨头坏死模型大鼠骨髓间充质干细胞增殖及定向诱导能力均降低

背景：近年来,干细胞治疗股骨头早期骨坏死已经成为一种可选的方法,但干细胞质量影响治疗效果。 目的：评价激素性股骨头坏死模型大鼠骨髓间充质干细胞的增殖能力以及定向诱导分化能力。 方法：20只SD大鼠随机分为对照组和观察组,每组10只,观察组构建激素性股骨头坏死模型,分离培养两组大鼠骨髓间充质干细胞。采用CCK-8法检测第3代骨髓间充质干细胞增殖情况。选择第3代骨髓间充质干细胞进行成骨、成脂定向诱导分化。成骨诱导7,14 d行碱性磷酸酶染色和茜素红染色,成脂诱导21 d行油红O染色。 结果与结论：培养第1,3,5天观察组细胞吸光度值均低于对照组,差异均无显著性意义(P > 0.05);但第7天时观察组吸光度值显著低于对照组,差异有显著性意义(P < 0.05)。观察组碱性磷酸酶活性显著低于对照组(P < 0.05)。与对照组比较,观察组的钙结节和脂滴数量较少。以上结果表明激素性股骨头坏死模型大鼠骨髓间充质干细胞的增殖能力和成骨成脂诱导分化能力均减弱。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

胶原蛋白支架对载杜仲叶提取物处理的人牙周膜干细胞增殖和成骨分化的作用

文题释义：杜仲：是中国特有的杜仲科植物,其活性成分具有促进某些间充质干细胞的增殖,调节骨代谢和促进骨生成,同时抑制骨吸收,并加速骨痂改建的药理作用。临床上,杜仲主要用于预防和治疗骨质疏松症、骨关节炎和骨折等疾病。 人牙周膜干细胞：一种来自牙周韧带的多能间充质干细胞,具有良好的自我更新和多向分化潜能。通过不同的体外诱导条件刺激,它可以分化成骨样细胞、软骨样细胞、牙周韧带细胞、脂肪样细胞和神经元样细胞,并且就细胞来源而言,它是用于牙周组织再生的优选种子细胞。 背景：胶原蛋白支架是一种良好的组织工程材料,但目前其对于载杜仲叶提取物的人牙周膜干细胞的生物相容性、增殖及成骨活性的影响尚未有报道。 目的：通过对载杜仲叶提取物的人牙周膜干细胞与胶原蛋白支架的体外共培养,研究人牙周膜干细胞在支架材料上的形态特征、黏附情况、增殖及成骨分化功能。 方法：将载杜仲叶提取物的人牙周膜干细胞与胶原蛋白支架体外共培养作为实验组,以人牙周膜干细胞与胶原蛋白支架的共培养作为阳性对照组,无支架的人牙周膜干细胞常规培养作为空白对照组。 结果与结论：①扫描电镜下可见,实验组支架上有大量人牙周膜干细胞附着,且细胞突触与支架紧密相连,生长状态良好,细胞间相互接触、紧密相连;②共培养4,8和12 h后,实验组和阳性对照组人牙周膜干细胞的黏附率均呈上升趋势,实验组黏附率高于阳性对照组(P < 0.05);③MTT结果显示,复合培养3,5和7 d后,实验组的细胞吸光度值高于阳性对照组(P < 0.05);④成骨诱导7,14 d后,实验组碱性磷酸酶活性高于阳性对照组(P < 0.05);⑤RT-PCR检测结果显示,成骨刺激作用21 d后,实验组和阳性对照组中成骨相关基因Runx2、OPN和OCN的表达显著高于空白对照组(P < 0.01),实验组上述基因的表达均高于阳性对照组(P < 0.05);⑥上述数据说明,胶原蛋白支架对于载杜仲叶提取物的人牙周膜干细胞具有较好的生物相容性,复合培养后可保持细胞形态、促进其增殖及成骨分化功能。 ORCID: 0000-0002-6784-9979(刘焱) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

芦丁通过抑制TXNIP/TRX-ROS信号通路促进人脐带间充质干细胞成骨分化

目的 探究芦丁对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)成骨分化的作用，并探究其机制。方法 不同浓度芦丁处理成骨分化的hUCMSCs,通过CCK-8检测细胞增殖活性，通过茜素红染色检测细胞矿化结节形成，通过碱性磷酸酶染色检测细胞碱性磷酸酶活性，通过Western blot检测细胞成骨相关蛋白和TXNIP/TRX信号通路蛋白表达，通过ROS探针检测细胞ROS水平。结果 芦丁剂量依赖的促进hUCMSCs增殖，能增加hUCMSCs矿化结节形成及ALP活性；芦丁处理增加hUCMSCs成骨相关蛋白RUNX2和OPN蛋白表达水平，降低hUCMSCs ROS水平和TXNIP蛋白表达，增加TRX蛋白表达。结论 芦丁促进hUCMSCs增殖及成骨分化，其机制可能与其抑制TXNIP/TRX-ROS信号通路有关。     

异种骨材料浸提液对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

背景：如何在去抗原等处理基础上保留异种骨材料的生物学性能及成骨诱导活性成为研究热点之一。目的：探讨异种骨材料浸提液对骨髓间充质干细胞增殖迁移及成骨分化能力的影响。方法：SD大鼠骨髓间充质干细胞分别用异种骨材料浸提液(实验组)和含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养(对照组)。MTT法、Transwell小室法、流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞增殖能力、迁移能力、细胞周期变化。取第3代SD大鼠骨髓间充质干细胞,实验组加入成骨诱导分化浸提液,对照组加入成骨诱导分化培养液,培养至第7,14天进行碱性磷酸酶染色,培养第21天进行茜素红染色,观察钙结节形成情况。结果与结论：实验组培养1,3,5,7 d的细胞增殖活性与对照组比较差异无显著性意义(P > 0.05),两组细胞周期差异无显著性意义(P > 0.05)。对照组迁移细胞数显著少于实验组(P < 0.05)。培养第7,14天时实验组碱性磷酸酶水平均显著高于对照组(P < 0.05),成骨诱导第21天进行茜素红染色可见两组均有钙结节形成,实验组钙结节面积更大。结果表明异种骨材料无细胞毒性,具有良好的细胞相容性,可以对骨髓间充质干细胞增殖迁移及定向分化成骨细胞产生有利的促进作用。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

镁黄长石浸提液诱导多潜能干细胞的成骨分化

背景：镁黄长石属于硅酸盐生物活性陶瓷,在生物体内具有降解作用,降解溶出的离子产物能够诱导细胞成骨分化,是组织工程骨支架材料的良好选择。目的：通过研究不同浓度的镁黄长石浸提液对诱导性多潜能干细胞增殖和成骨分化的影响,确定镁黄长石浸提液促进诱导性多潜能干细胞成骨分化的最佳浓度。方法：将诱导性多潜能干细胞培养于不同浓度的镁黄长石浸提液中,用MTT法检测细胞的增殖情况;在第7,14,21天时,分别收集培养上清液,检测其中碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白含量。结果与结论：镁黄长石浸提液促进诱导性多潜能干细胞增殖的作用具有时间依赖性,第3天时,诱导性多潜能干细胞增殖明显,第5天与第3天相比差异无显著性意义,至第7天时则明显减弱。同时,1/4浓度浸提液组促进诱导性多潜能干细胞增殖作用最强。作为细胞成骨分化标志的碱性磷酸酶和骨钙素含量随时间增加而增加,1/4浸提液浓度组含量最高。作为细胞成骨分化早中期标志的Ⅰ型胶原蛋白在第7天时各组均未检出,第14,21天时,同样是1/4浓度浸提液组含量最高,这些说明镁黄长石浸提液中的Ca、Mg、Si离子参与了诱导性多潜能干细胞的成骨分化,其中1/4浓度浸提液(Ca离子2.37 mmol/L、Mg离子1.12 mmol/L、Si离子1.05 mmol/L)促进诱导性多潜能干细胞体外成骨分化的效果最好。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：