Dlx2基因过表达与前成骨细胞系MC3T3-E1成骨分化过程中的细胞凋亡和周期调控*****◆

背景：Dlx2基因在颅神经嵴细胞迁徙进入第一鳃弓过程和颅颌面骨骼发育中起重要作用,但Dlx2基因对成骨细胞分化过程中细胞凋亡和细胞周期调控的影响尚未见报道。 目的：观察Dlx2基因过表达对前成骨细胞系MC3T3-E1成骨分化过程中细胞凋亡和细胞周期调控的影响。 方法：构建反转录病毒pMSCV-puro-Dlx2并转染矿化诱导液培养下的MC3T3-E1细胞,构建稳定过表达Dlx2基因的细胞系MC3T3-E1-Dlx2。RT-PCR和Western blot验证Dlx2基因过表达细胞系的建立。Annexin V/PI双染色后流式细胞分选检测细胞凋亡,PI/RNase双染色后流式细胞分选检测细胞周期变化。 结果与结论：实验成功构建稳定过表达Dlx2基因的细胞系MC3T3-E1-Dlx2。发现Dlx2基因过表达促进细胞凋亡(P < 0.05),同时阻滞细胞周期于G1/G0期(P < 0.05),减低细胞增殖性,促进细胞分化行使功能。 关键词：成骨细胞分化;Dlx2基因;稳定过表达;细胞凋亡;细胞周期 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.10.022     

Brg1调控重组人骨形态发生蛋白2诱导成骨细胞分化

背景：Brg1是依赖ATP的染色质改变复合物的核心催化亚基,该亚基在基因的转录调控、复制、重组,骨骼肌的分化、抑制肿瘤的发生等活动中起着重要的作用。 目的：探索Brg1基因在骨形态发生蛋白2诱导成骨细胞分化过程中的调控机制。 方法：采用胶原酶消化法进行小鼠颅骨成骨细胞的原代培养;分别用0,50,200 μg/L的重组人骨形态发生蛋白2诱导原代培养的成骨细胞的分化,摸索骨形态发生蛋白2的最佳作用剂量;实时荧光定量PCR和Western blot进行骨形态发生蛋白2对Brg1的作用时间的动力学分析;实时荧光定量PCR和钙钴染色法检测敲除Brg1对骨形态发生蛋白2诱导的成骨分化的影响;构建Dlx5腺病毒重组表达载体,实时荧光定量PCR和钙钴染色法检测Brg1在骨形态发生蛋白2诱导的成骨分化过程中对Dlx5的调控作用。 结果与结论：用自行合成的重组人骨形态发生蛋白2可诱导原代培养小鼠成骨细胞分化,200 μg/L剂量有着较好的诱导分化效果;重组人骨形态发生蛋白2可诱导Brg1基因转录水平和翻译水平表达水平上调;敲除Brg1可抑制重组人骨形态发生蛋白2诱导的成骨分化;Brg1能够调控Dlx5的表达水平。说明Brg1通过调控Dlx5的表达水平调控重组人骨形态发生蛋白2诱导的小鼠成骨细胞的分化。     

Dlx基因表达改变可影响颅神经嵴细胞迁移及第一鳃弓的发育？

背景：Dlx基因在颅神经嵴细胞中高表达,并调控颅神经嵴细胞的迁移及分化。目的：综述Dlx基因高表达对颅神经嵴细胞迁移及其分化的影响及机制。方法：由第一作者用计算机检索全国期刊全文数据库(CNKI),Medline数据库,检索词分别为“神经嵴细胞,颅神经嵴细胞迁移,Dlx,Dlx高表达,Fgf,成软骨,成骨”和“cranial neural crest cells, cranial neural crest cells’migration, Dlx, Dlx overexpression, Fgf, chodrogenesis, osteogenesis”。从颅神经嵴细胞的迁移,Dlx表达改变对颅神经嵴细胞迁移的影响,Dlx基因与细胞环境的相互作用3个方面进行总结。共检索到63篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入43篇文章。结果与结论：Dlx基因表达改变导致细胞间黏附因子表达的改变,高表达会使得绝大多数颅神经嵴细胞聚集,错误迁移,致使畸形的发生。并且Dlx基因表达增高,也将导致骨或软骨的异常生成,其原因可能在于相关细胞因子间的相互作用。     

HOX基因转录调节机制的研究进展

细胞的增殖、分化过程受同源盒基因表达模式的影响,而PcG类蛋白及TrxG类蛋白则调控细胞各发育阶段的不同同源盒基因表达。如果这些同源盒基因转录调节蛋白的功能改变,则可通过改变同源盒基因的表达模式而致细胞增殖、分化异常,呈现出某些特殊病理学表型,例如白血病、个体发育畸形等。     

骨再生过程中炎症因素与牙髓干细胞的双向作用

背景：牙髓干细胞具有多向分化的优良特性,其中成骨分化潜能在骨组织工程和再生治疗中有较好的前景,而炎症因素与其关系密切。目的：综述骨再生过程中炎症因素与牙髓干细胞成骨分化双向作用的研究进展。方法：在PubMed、中国知网和万方数据库中进行检索,中文检索词为“牙髓干细胞、炎症、成骨分化、骨再生”;英文检索词为“dental pulp stem cell*,dpsc*,inflam*,osteogenic differentiation,ossification,osteogenesis,bone formation”,分别检索2012-2022年发表的相关文献,最终纳入76篇进行综述分析。结果与结论：(1)牙髓干细胞作为牙源性间充质干细胞,有着众人熟知的多向分化特性,其中成骨分化潜能是骨组织工程的研究热点。(2)炎症因素不论是作为细胞所处的微环境、可调节的免疫炎症反应、抑或是需要再生修复的炎症性骨组织缺损疾病,都与牙髓干细胞介导的骨再生有着密切的关联,近年来也不乏相关的研究。(3)文章选取了近十年以来相关的文献报道,发现即使是发炎牙髓组织来源的炎症牙髓干细胞仍然保留一定的成骨分化潜能,而进...     

不同信号通路对牙周膜干细胞成骨分化的影响

背景：牙周膜干细胞作为牙源性间充质干细胞的一种,具有成骨分化潜能,可应用于牙周组织再生修复,而牙周膜干细胞的成骨分化涉及多种信号通路的调控。目的：综述目前已研究因子介导的与牙周膜干细胞成骨分化相关的信号通路及其对成骨分化的影响。方法：在PubMed和中国知网数据库,设置检索时间为2010-2022年,总结了2010年以来与牙周膜干细胞成骨分化相关的8个信号通路的研究进展,最终纳入60篇文献进行分析讨论。结果与结论：(1)牙周膜干细胞作为牙源性间充质干细胞,具有良好的增殖、自我更新及多向分化潜能的特点;作为牙周组织再生修复的种子细胞,牙周膜干细胞应用于牙周炎的治疗具有广阔的前景。(2)目前已有大量研究证实各类因子与牙周膜干细胞成骨分化之间的潜在关系是通过介导各信号通路产生,虽然各信号通路在促进牙周膜干细胞成骨分化方面均有一定作用,但研究最多的是MAPK信号通路和Wnt信号通路。(3)MAPK信号通路包括4条途径,广泛存在于细胞中,对于调节细胞的增殖及分化发挥着重要作用;经典的Wnt/β-连环蛋白通路是控制骨稳态的最重要信号通路之一,已有大量研究证实其与牙周膜干细胞成骨分化存在相关性。(4...     

骨形态发生蛋白9诱导骨骼肌源性干细胞的成骨分化

背景：已有实验报道部分骨形态发生蛋白能够诱导间充质干细胞等向成骨细胞的分化。 目的：评估骨形态发生蛋白9定向诱导骨骼肌源性干细胞成骨分化的能力。 方法：采用Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶二步消化法提取兔骨骼肌源性干细胞,用重组腺病毒的方法将骨形态发生蛋白9导入细胞,通过碱性磷酸酶定量测定、钙盐沉积实验观察骨形态发生蛋白9对于骨骼肌源性干细胞成骨分化的定向诱导作用。 结果与结论：成功分离培养兔骨骼肌源性干细胞,免疫细胞化学染色80%以上的细胞呈Sca-1 阳性。骨形态发生蛋白9能诱导骨骼肌源性干细胞碱性磷酸酶的表达,且能够促进细胞的钙盐沉积。提示,骨形态发生蛋白9具有定向诱导骨骼肌源性干细胞分化成骨的能力。     

牙源性鳞状细胞瘤临床病理观察

目的 探讨牙源性鳞状细胞瘤的临床病理特征、诊断及鉴别诊断.方法 光镜观察及免疫组化法对1例牙源性鳞状细胞瘤进行临床病理分析,并复习文献.结果 肿瘤位于右下颌骨,病灶为多房囊性,表面骨质菲薄,内容物为灰白色凝胶样,骨质破坏.光镜下可见肿瘤组织由形态大小不等、分化良好的鳞状上皮岛和纤维间质构成,具有局部浸润性.免疫组化:Ki-67和p53均阴性.结论 牙源性鳞状细胞瘤是一种罕见的良性上皮性肿瘤,组织学形态特点是其诊断的主要依据,需与成釉细胞瘤、高分化鳞状细胞癌、牙源性钙化上皮瘤或成釉细胞纤维瘤相鉴别.     

牙源干细胞参与组织再生修复的作用

背景：随着干细胞技术的不断发展,牙源性干细胞的研究也不断深入。它们是十分理想的种子细胞来源,在牙组织工程的应用上具有无可比拟的优势。 目的：综述牙源干细胞的相关研究进展。 方法：由第一作者检索PubMed数据库、Highwire数据库及中国知网(CNKI)数据库。英文检索词为“dental stem cells,tissue engineering, application”,中文检索词为“牙源干细胞,组织工程,应用”。初步检索文献量总计156篇,选择牙源性干细胞,包括牙髓干细胞和牙周膜干细胞等在组织工程中的基础研究及临床应用相关报道,排除陈旧及重复实验文章,最终纳入30篇符合标准的文献。 结果与结论：多种牙源干细胞,都具有较强自我更新能力和多向分化的能力,与目前研究较为深入的骨髓间充质干细胞有很大的相似性,因此在组织工程,尤其是牙组织工程上有良好的应用前景。目前虽然有关牙源干细胞在牙组织再生的应用上有一定报道,但研究不多,且仅处于动物模型阶段。相信随着科技进步,在不久的将来,各种牙源干细胞有望真正进入临床,为解决人类各种口腔疾病提供可能。     

细胞力学机械刺激对牙髓干细胞的影响

文题释义：牙髓干细胞：通过GRONTHOS等对牙髓细胞的研究,发现一种具有与间充质干细胞相似免疫表型和形成矿化结节能力的细胞,称为牙髓干细胞,具有自我更新、多向分化和较强的克隆能力。细胞力学：研究细胞在力学载荷作用下细胞膜和细胞骨架的变形、弹性常数、黏弹性、黏附力等力学性质,以及机械因素对细胞生长、发育、成熟、增殖、分化、衰老和死亡等的影响及其机制研究,是生物力学的一个前沿领域,也是组织工程学的一个重要组成部分。  摘要背景：力学刺激对于机体内很多器官、组织的发育和损伤修复发挥重要的调控作用。除生物化学因素外,细胞力学等机械因素越来越被认为是影响牙髓干细胞行为和功能的关键调节因素。目的：综述细胞力学刺激对牙髓干细胞生物学行为的作用及影响。方法：通过检索PubMed、Embase、Medline、CNKI数据库,分别以“牙髓干细胞,机械压力,机械张力,剪切力,压应力,细胞增殖,成骨分化”为中文检索词和“human dental pulp stem cells(hDPSCs),mechanical strain,mechanical stretch,mechanical tension,shear stress,cell proliferation,osteogenesis differentiation”为英文检索词进行检索,选取与细胞力学机械刺激参与影响牙髓干细胞增殖、分化的56篇文献进行综述。结果与结论：细胞力学机械刺激是影响细胞增殖、分化、蛋白表达和凋亡的重要生物学因素。牙髓干细胞是牙髓组织中的间充质干细胞,其生物学行为也受到细胞力学机械刺激的影响。细胞力学刺激参与牙髓干细胞的增殖、成牙/成骨分化,并且当牙本质受到流体流动力作用时,会激活其机械感受器来调节并维持牙齿的完整性。介导牙髓干细胞生物学行为的信号通路包括MAPK、Wnt、Akt及BMP-7、Nrf2/HO-1等,通过调控这些信号通路进而对牙髓干细胞增殖及成牙/成骨分化发挥不同程度的促进及抑制作用。ORCID: 0000-0001-6191-6539(李峻青) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

伴有EWSR1断裂的非透明细胞性牙源性癌一例

报道1例伴有EWSR1断裂的上颌骨非透明细胞性牙源性癌。患者男,43岁。肿瘤组织学及形态学改变均具有硬化性牙源性癌的特征,但与目前所报道的硬化性牙源性癌的EWSR1基因重排结果有所不同。     

沉默Hoxa9基因可促进胫骨骨折后的成骨分化及骨折愈合

文题释义：同源盒基因：是一类控制胚胎发育和调节细胞分化的高度保守基因。同源盒A9基因位于同源盒A簇的5’端,其异常高表达与包括白血病、骨折损伤等疾病相关。 骨髓间充质干细胞：间充质干细胞是骨髓基质干细胞,是人们在哺乳动物的骨髓基质中发现的一种具有分化形成骨、软骨、脂肪、神经及成肌细胞的多种分化潜能的细胞亚群。 背景：研究表明,Hoxa10基因受到miRNA的调节后与成骨分化存在一定的关联性,但有关Hoxa9在成骨分化和胫骨骨折愈合中的表达和功能尚未见报道。 目的：初步探讨Hoxa9对体外骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及其体内模型的骨折损伤的治疗作用。方法：①体外实验：在成骨诱导培养基中培养小鼠骨髓间充质干细胞,分别进行Hoxa9基因被shHoxa9沉默或被MSCV-Hoxa9过表达处理;②体内实验：构建胫骨骨折模型大鼠,分别用Hoxa9和shHoxa9干预。结果与结论：①体外实验qRT-PCR及Western blot检测显示,Hoxa9的过表达能够明显抑制骨髓间充质干细胞的成骨分化(P < 0.05),细胞中成骨相关基因标记骨钙素、骨桥蛋白、Runx2和胶原蛋白Ⅰ的mRNA及蛋白均下调(P < 0.05),细胞中钙化结节的数量、成骨分化能力及碱性磷酸酶活性显著降低(P < 0.05),而沉默Hoxa9的表达可逆转上述现象;②体内实验组织学染色结果表明,经Hoxa9干预的大鼠组织中骨性损伤明显增加,未发现组织间胶原纤维和愈合损伤组织内的软骨,shHoxa9干预大鼠显示骨的大小和数量明显增加,检测到组织间胶原纤维和愈合损伤组织内的软骨;③体内实验qRT-PCR及Western blot检测发现, Hoxa9干预的大鼠骨折损伤组织中成骨相关基因标记骨钙素、骨桥蛋白、Runx2和胶原蛋白Ⅰ的mRNA及蛋白均下调(P < 0.05);而shHoxa9组大鼠骨折损伤组织中成骨相关基因标记骨钙素、骨桥蛋白、Runx2和胶原蛋白Ⅰ的mRNA及蛋白均上调(P < 0.05);④上述数据说明,沉默Hoxa9基因可促进骨髓间充质干细胞的成骨分化,进而促进骨折愈合。 ORCID: 0000-0002-1150-6184(张超) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

腺病毒介导的骨形态发生蛋白基因增强在骨组织工程中的应用

背景：将目的基因转导到靶细胞中需要载体工具,载体可协助基因进入细胞及表达蛋白,载体的选择是转基因成败的关键。 目的：总结腺病毒介导的骨形态发生蛋白基因增强用于诱导成骨和修复骨缺损的研究现状。 方法：应用计算机检索PubMed 数据库及中国期刊网全文数据库1989-01/2012-01 有关腺病毒介导骨形态发生蛋白基因转染的诱导成骨作用,骨形态发生蛋白基因修饰的组织工程化骨修复骨缺损的文章,英文检索词为“adenovirus,bone morphogenetic protein, gene transfection, bone tissue engineering”,中文检索词为“腺病毒,骨形态发生蛋白,基因转染,骨组织工程”。排除重复性及非中英文语种研究,共保留24篇文献进行综述。 结果与结论：腺病毒介导的骨形态发生蛋白基因增强的组织工程利用基因工程技术将编码特定功能因子的基因转移到种子细胞上,使其持续产生生长因子。转基因后的细胞停留支架材料表面缓慢释放生长因子,促进成骨前体细胞增殖分化,也可在骨缺损处诱导成骨前体细胞向成骨细胞定向分化,从而修复骨缺损。      

口腔疾病治疗中如何应用牙源性间充质干细胞的免疫调节特性

文题释义：间充质干细胞的免疫调节特性：间充质干细胞可以通过表达具有特异性的酶和可溶性因子以及细胞和细胞间的直接接触这3种作用机制与活化的免疫细胞相互调节,维持组织内稳态和干预炎症的进展。口腔疾病：主要指由菌斑微生物引起的牙周病和牙髓病。菌斑微生物造成牙周组织炎症性破坏,主要表现为牙周袋形成、牙槽骨吸收,晚期出现牙齿松动、脱落;菌斑微生物还可以导致龋坏,侵及牙髓后发展为牙髓炎等疾病。  摘要背景：间充质干细胞具有很强的免疫调节能力,牙源性间充质干细胞的免疫调节特性与口腔疾病的发生发展有着密切关系,但这种免疫调节特性作用于疾病的具体机制不明,因此牙源性间充质干细胞免疫调节特性的应用,可能在未来口腔疾病的治疗、预防中扮演重要角色。目的：从不同口腔组织来源间充质干细胞与活化后免疫细胞的相互调节机制,以及多种细胞因子和口腔致病菌对牙源性间充质干细胞免疫调节能力的影响3个方面综述牙源性间充质干细胞的免疫调节特性在口腔疾病中的作用。方法：以“牙源性间充质干细胞、免疫调节特性、免疫细胞、口腔疾病、牙龈卟啉单胞菌、牙周炎、牙菌斑、龋齿、Toll样受体”为中文检索词;“tooth-derived mesenchymal stem cells,immunomodulatory properties,immune cells,oral diseases,porphyromonas gingivalis,periodontitis,dental plaque,dental caries,toll-like receptors”为英文检索词,检索CNKI与PubMed数据库2000年1月至2019年6月收录的与牙源性间充质干细胞有关的文献。总计得到文献221篇,64篇文献符合标准。结果与结论：在牙源性间充质干细胞被分离提出的这20年里,研究人员对几种口腔组织来源间充质干细胞与活化免疫细胞之间相互作用进行了大量的体外实验,初步探讨了两者之间的作用机制。不同的炎性介质和细胞因子可以差异激活间充质干细胞中的各种免疫调节蛋白,并因此激活它们的免疫调节活性。研究特定刺激因素激活间充质干细胞和口腔致病菌激活牙源性间充质干细胞的具体途径,可能会提高牙源性间充质干细胞在组织愈合过程不同阶段的应用效率,从而在疾病治疗方式上作出突破。ORCID: 0000-0002-7914-4482(王真) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

同源盒基因在乳腺发育和乳腺癌发生中的作用

同源盒基因广泛存在于真核生物中 ,是转录因子中的大家族 ,具有高度的保守性 ,在个体发育和细胞分化中起重要的调控作用 ,其异常调控可导致细胞癌变。近年来对同源盒基因在乳腺发育和乳腺癌中的研究已成为探索乳腺癌发病机制的热点之一。     

涎腺肿瘤、牙源性肿瘤中WT-1的表达

目的探讨肾母细胞瘤基因-1(Wilms tumoRgene-1,WT-1)在涎腺肿瘤、牙源性肿瘤中的表达。方法采用免疫组化SP法检测141例涎腺肿瘤、84例牙源性肿瘤中WT-1的表达,分析其在涎腺肿瘤及牙源性肿瘤诊断中的应用价值。结果WT-1在多形性腺瘤、基底细胞腺瘤、癌在多形性腺瘤中、腺样囊性癌、腺泡细胞癌中阳性率分别为92.86%、75.86%、69.23%、53.33%、46.43%;在成釉细胞瘤、牙源性腺样瘤、牙源性角化囊肿、成釉细胞癌中阳性率分别为13.33%、7.69%、0、0。结论WT-1在正常涎腺组织中主要表达于导管上皮细胞,在涎腺肿瘤中主要表达于肿瘤性肌上皮细胞,在牙源性肿瘤中几乎不表达,其有望成为鉴别涎腺肿瘤及牙源性肿瘤的免疫组化标志物。     

转染胶质细胞源性神经营养因子诱导神经干细胞分化

背景：神经干细胞为神经系统功能重建和神经再生提供了一条新的途径,解决其定向诱导分化问题仍是目前的研究热点。 目的：探讨转染胶质细胞源性神经营养因子基因诱导大鼠胚胎神经干细胞向神经元和多巴胺能神经元分化的作用。 方法：构建PcDNA3-GDNF-GFP表达质粒,用脂质体介导该质粒转染大鼠胚胎神经干细胞并进行诱导分化,荧光显微镜观察转染情况,免疫荧光染色检测β微管蛋白Ⅲ和酪氨酸羟化酶表达。 结果与结论：胶质细胞源性神经营养因子基因转染后3 d,可观察到细胞呈绿色荧光细胞球状。诱导分化7 d,神经干细胞分化为神经元以及多巴胺神经元的比例明显增高。结果表明胶质细胞源性神经营养因子基因可以促进神经干细胞向神经元以及多巴胺能神经元分化。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程