超声对软骨细胞凋亡、caspase-8和caspase-3表达的影响

背景：超声治疗能够缓解疼痛,改善膝骨关节炎患者的运动功能,但目前关于超声治疗的文献缺乏一致性。 目的：进一步验证超声治疗的膝骨关节炎有效性。 方法：24 只兔子随机分为3组,正常组不干预;模型组兔行前交叉韧带离断诱导膝骨关节炎,不接受任何治疗;超声组兔建模后接受超声波治疗10 min/次,1次/d,0.3 W/cm2,1 MHz,共治疗10次。采用苏木精-伊红染色进行兔关节软骨组织学观察,运用免疫印迹和 RT-PCR技术检测兔软骨中的caspases3和caspases8 的表达,TUNEL技术检测兔膝骨关节软骨细胞凋亡率。 结果与结论：正常兔软骨组织软骨细胞呈柱状整齐的排列,模型中软骨层变薄,软骨细胞排列无序而少。超声治疗后软骨细胞重新排列,趋于整齐,细胞数增加。模型组为膝骨关节炎模型;与正常组比较,模型组和超声组改良Mankin 评分较高,模型组和超声组软骨细胞凋亡指数更高,模型组高于超声组。与正常组比较,模型组和超声组caspase-3 和caspase-8表达较高,超声治疗后两项指标表达下降。结果表明,超声可以改善软骨组织结构、降低caspase-3、caspase -8的表达,降低软骨细胞凋亡。提示超声治疗膝骨关节炎是有效的。     

富血小板血浆与透明质酸钠修复兔膝骨关节炎

 背景：研究表明,透明质酸钠可抑制膝骨关节炎对软骨的破坏,加速软骨细胞的再生,达到稳定和修复关节软骨的目的。目的：观察富血小板血浆与透明质酸钠治疗兔膝骨关节炎的疗效。方法：将40只新西兰大白兔随机均分为5组,联合组、玻璃酸钠组、富血小板血浆组与模型组制作右侧膝骨关节炎模型,造模后分别向膝关节腔内注射透明质酸钠联合自体富血小板血浆、玻璃酸钠、自体富血小板血浆与生理盐水进行治疗,1次/周,连续5周;对照组不做任何处理,为正常对照。治疗完成1周后,ELISA法检测血液中白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平,光镜下观察关节软骨的变化。结果与结论：与对照组比较,其余4组白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平均升高(P < 0.01);联合组、透明质酸钠组、富血小板血浆组白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平均低于模型组(P < 0.01或P < 0.05),且以联合组下降最显著。模型组关节软骨破坏明显,联合组、透明质酸钠组、富血小板血浆组关节软骨破坏程度轻于模型组,且以联合组破坏程度最轻。表明透明质酸钠配合自体富血小板血浆关节内注射可降低膝骨关节炎的炎症反应,保护关节软骨,效果优于单一药物注射。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

温阳益髓中药干预兔膝骨关节炎软骨基质金属蛋白酶的表达

背景：目前临床上关于温阳益髓中药治疗膝骨关节炎对软骨基质金属蛋白酶表达影响的研究还较少有报道。 目的：制作兔膝骨关节炎模型观察温阳益髓中药对软骨基质金属蛋白酶表达的影响。 方法：健康成年新西兰大白兔96只,随机选取72只采用石膏外固定方法制作兔膝骨关节炎模型。确定造模成功后再随机分为3组,模型组不做处理;中药治疗组每日灌胃方药提取液24 mL/kg,药物对照组每日灌胃葡立胶囊(盐酸氨基葡萄糖)24 mg/kg,1次/d,至造模成功后8周。另外24只新西兰大白兔作为空白对照。 结果与结论：PCR方法定量分析骨关节炎模型组软骨组织中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13表达水平均显著高于其他3组。中药治疗组及药物对照组中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶13的表达较模型组明显降低。说明温阳益髓中药治疗兔膝骨关节炎能够有效抑制兔骨关节炎软骨基质金属蛋白酶的表达。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

健膝强骨丸对膝骨关节炎家兔模型关节软骨病理改变的影响

背景：膝骨关节炎的病理学改变不可逆转,属中医“痹证”范畴,治疗目的是缓解或解除症状,延缓关节退变。健膝强骨丸方是武汉大学基础医学院荆州市第三人民医院的经验方,可补益肝肾,祛风散寒,除湿通络,强骨健膝。 目的：观察健膝强骨丸对膝骨关节炎兔模型膝骨关节软骨的保护作用,及其对软骨细胞骨形态发生蛋白7表达的影响。 方法：36只新西兰兔随机分为3组,每组12只,分别运用改良Hulth术制备兔膝骨关节炎模型。造模后第6周,给药组予健膝强骨丸0.1 g/kg灌胃,模型组和正常对照组予等量生理盐水灌胃。给药4周后通过软骨Mankin’s评分方法行兔膝关节软骨评分,电镜下观察软骨形态,免疫组化法检测膝关节软骨细胞骨形态发生蛋白7表达情况。 结果与结论：给药组兔膝关节软骨病理退变程度较其他2组轻,膝关节软骨细胞骨形态发生蛋白7的表达量较其他2组高,差异有显著性意义(P < 0.05)。提示健膝强骨丸可增强膝骨关节炎模型兔关节软骨细胞骨形态发生蛋白7的表达,从而促进膝关节软骨再生,减少软骨变形坏死,达到治疗关节炎的目的。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

温针灸抑制NLRP3炎症小体激活改善兔膝骨关节炎的软骨损伤

背景:温针灸治疗膝骨关节炎疗效显著,但其作用机制尚不明确。目的:观察温针灸对兔膝骨关节炎软骨组织中NLRP3、基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13、Ⅰ型胶原蛋白表达的影响。方法:取6月龄新西兰雄兔40只,采用随机数字表法分成空白组、模型组、温针灸组、抑制剂组,每组10只:除空白组外,其他3组均采用石膏管型固定法建立右后肢膝骨关节炎模型。造模成功后,温针灸组进行温针灸治疗,1次/d,连续治疗4周;抑制剂组膝关节腔内注射NLRP3抑制剂MCC950,1次/周,注射4次。干预结束后,采用Lequesne MG评分评估兔行为学改变,苏木精-伊红染色观察软骨形态学结构,免疫组织化学染色及蛋白质印迹法检测软骨组织中NLRP3、基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13、Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果与结论:(1)Lequesne MG评分:模型组Lequesne MG评分高于空白组(P <0.05),温针灸组、抑制剂组Lequesne MG评分低于模型组(P <0.05);(2)苏木精-伊红染色:与空白组比较,模型组软骨细胞数量减少,结构完整性被破坏,Mankin’s评分升高(P <0.05...     

维骨力预防骨关节炎软骨退变的实验研究

目的:观察维骨力(viartrils)对兔实验性早中期骨关节炎(OA)病变发生发展是否有预防作用及其对OA软骨细胞增殖的影响。方法:24只新西兰兔用切断膝关节前、后交叉韧带的方法复制兔OA模型,随机分为对照组和实验组各12只,实验组术后即加服维骨力(主要成份为硫酸氨基葡萄糖)每天2粒,对照组常规饲养。术后第10周处死动物,取股骨髁负重面软骨标本进行HE、safranin’O/fast green组织化学染色及骨关节炎评分、分级,采用免疫组化方法观察软骨细胞增殖状况。结果:切断兔前后交叉韧带成功复制出OA早、中期模型,第10周时实验组(维骨力组)骨关节炎病理评分显著低于对照组(P<0.05),软骨细胞增殖指数显著高于对照组(P<0.05)。结论:维骨力对兔膝骨关节炎软骨细胞有刺激增殖的作用,可以较好地预防OA的发生发展。     

低能量体外冲击波对兔膝骨关节炎软骨细胞修复和重塑能力的影响

目的研究低能量体外冲击波(ESW)对兔膝骨关节炎软骨细胞刺激作用。方法清洁级健康5月龄30只大白兔,体质量2.0~2.8 kg。随机分为研究组、模型组与对照组,各10只。研究组与模型组采用石膏固定6周成功建立膝骨关节炎模型,对照组未建模;其中研究组采用0.1 m J/mm2 ESW治疗1 000次,余2组不采用任何干预措施。进行组织病理检查,做Moran评分、Mankin法评分,实验室测定基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3、MMP-13基因表达和白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。结果 4周后,研究组兔膝骨关节软骨变薄,表面见少量疏松纤维组织,软骨表面部分修复;模型组兔膝骨关节呈典型关节炎改变;对照组兔膝骨关节光滑,软骨结构清晰。与对照组比较,研究组和模型组Moran评分明显降低,Mankin法评分和软骨细胞凋亡率明显增高,软骨MMP-1、MMP-3、MMP-13基因表达水平均明显升高,关节滑液IL-1β、TNF-α水平明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。研究组膝骨关节Moran评分明显高于模型组,Mankin法评分和软骨细胞凋亡率明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。研究组软骨MMP-1、MMP-3、MMP-13基因表达水平均明显低于模型组,关节滑液IL-1β、TNF-α水平明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论低能量体外冲击波通过降低软骨MMP与关节滑液炎性因子水平,从而改善兔膝骨关节炎软骨细胞修复能力和重塑作用,值得临床推广应用。     

中成药无敌丹对骨关节炎软骨细胞活力和软骨细胞凋亡的影响

背景：研究发现,无敌丹能够抑制病变关节局部的炎症反应,保护关节软骨。 目的：验证无敌丹对家兔软骨细胞活力和软骨细胞凋亡的影响及对家兔骨关节炎病变的治疗效果。 方法：用含无敌丹的血清培养基培养大鼠软骨细胞,通过与溶剂对照组对比,观察无敌丹对软骨细胞活力及凋亡的影响;采用改良Hulth法构建兔膝骨关节炎模型,无敌丹给药组给予无敌丹;溶剂对照组给予生理盐水,2次/d,连续给药4周。观察无敌丹对兔膝骨关节炎的治疗作用;镜下观察关节局部的软骨细胞情况;用免疫组织化学的方法检测软骨中白细胞介素1、基质金属蛋白酶3的水平。 结果与结论：无敌丹血清培养的软骨细胞凋亡率显著低于对照组;兔膝关节病理检查显示溶剂对照组软骨破坏程度较高,无敌丹组软骨破坏程度低;免疫组织化学染色显示无敌丹给药组胞质和胞外基质着色浅,阳性细胞数量少,白细胞介素1表达低;无敌丹给药组阳性表达的细胞数量少,着色浅,基质金属蛋白酶3表达被抑制。结果表明,无敌丹能够有效保护家兔骨关节炎病变部位关节软骨,减少炎症反应,对于骨关节炎有很好的治疗作用,其机制可能与抑制软骨细胞凋亡、减少细胞因子的生成及抑制基质金属蛋白酶的蛋白表达有关。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

骨关节炎兔软骨细胞凋亡与八味柔肝散的抑制效应

背景：传统中药对骨关节炎具有镇痛等治疗作用,但对关节软骨是否有保护作用及其通过何种机制起作用少有报道。 目的：观察八味柔肝散对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响。 方法：将新西兰大白兔随机分为正常组、模型组和治疗组,模型组和治疗组行Hurth 法骨关节炎造模。建模后1 周,正常组和模型组每天生理盐水灌胃,治疗组行八味柔肝散水提液灌胃。建模后8周行组织学观察Mankin's评分,硝酸还原酶法测定关节液一氧化氮、诱导型一氧化氮合酶活性,原位末端转移酶标记技术检测软骨细胞的凋亡指数。 结果与结论：结果显示,治疗组关节软骨Mankin's评分,关节液一氧化氮、诱导型一氧化氮合酶活性,关节软骨细胞凋亡指数均低于模型组(P < 0.05)。证实八味柔肝散对兔骨关节炎软骨细胞凋亡有抑制作用。     

睾酮干预雄兔膝骨关节炎软骨中胰岛素样生长因子1的表达

背景：睾酮对骨关节炎的作用尚无一致的观点,其调节软骨代谢的作用鲜有文献报道。 目的：观察睾酮对膝骨关节炎雄兔关节软骨中胰岛素样生长因子1表达的影响。 方法：24只雄兔随机分成4组,采用改良Hulth法建立右膝骨关节炎模型;假去势组不切除睾丸,其余3组切除双侧睾丸。第8周末处死假去势组和去势8周组兔取材。第9周开始,激素组肌注生理剂量十一酸睾酮(6 mg/kg, 2周1次),去势16周组正常喂养,并于16周末处死并取材。 结果与结论：大体和组织学观察显示各组兔膝关节软骨的病变程度为假去势组优于去势8周组,激素组优于去势16周组。免疫组化染色显示胰岛素样生长因子1在所有兔膝关节软骨中均有表达,阳性细胞个数假去势组高于去势8周组(P < 0.05),激素组高于去势16周组(P < 0.05),去势8周组与去势16周组差异无显著性意义(P > 0.05)。说明睾酮可通过上调去势雄兔关节软骨中胰岛素样生长因子1的表达,延缓软骨退变。     

软骨Ⅱ型胶原和蛋白多糖变化与温阳益髓方干预的影响

背景：骨关节炎发病过程中软骨破坏以Ⅱ型胶原和蛋白多糖破坏丢失最明显,而软骨基质中的主要成分Ⅱ型胶原和蛋白多糖的质和量的改变是导致骨关节软骨退变继而发生骨关节炎的直接原因。如何逆转或者阻止此进程的发展,成为当今医学的研究重点。 目的：观察温阳益髓方对兔膝骨关节炎软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达的影响,探讨其保护软骨细胞的作用机制。 方法：选取9月龄新西兰大白兔96只,雌雄各半,采用伸直位石膏管型制动法进行骨关节炎造模,采用信封隐藏随机方法,分为4组：空白组(不做处理)、模型组(单纯造模)、中药组(每日灌胃“温阳益髓方”方药提取液)和西药组(每日灌胃“盐酸氨基葡萄糖”), 中药组每日灌胃方药提取液24 mL/(kg•d),西药组每日灌胃24 mL/(kg•d),1次/d,持续6周。通过运用反转录聚合酶链技术,观察温阳益髓方对软骨Ⅱ型胶原和蛋白多糖的影响,并通过病理切片观察Ⅱ型胶原和蛋白多糖的染色结果。 结果与结论：空白组及中药组软骨表面平整,甲苯胺蓝染色染色均匀,未见明显失染,模型组及西药组软骨表面不规则,甲苯胺蓝染色染色极度不均,表、中层失染明显;模型组蛋白多糖及Ⅱ型胶原模型组显著低于空白组(P < 0.01);中药组蛋白多糖及西药组蛋白多糖高于模型组(P < 0.05或P < 0.05);中药组Ⅱ型胶原及西药组Ⅱ型胶原高于模型组(P < 0.05);中药组蛋白多糖比西药组蛋白多糖高(P < 0.05);中药组Ⅱ型胶原比西药组Ⅱ型胶原高(P < 0.05)。结果说明,温阳益髓方能增加兔膝骨关节炎软骨中Ⅱ型胶原表达及蛋白多糖的水平,对维持正常胶原表型、保护关节软骨有一定的作用。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

木瓜蛋白酶诱导大鼠膝早期骨关节炎软骨表面的电镜扫描

背景：木瓜蛋白酶注射建立骨性关节炎动物模型是用于骨关节炎防治研究的常用方法之一。 目的：观察木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸混合注射诱导大鼠膝早期骨关节炎进程中扫描电镜下软骨表面形态学变化。 方法：2%木瓜蛋白酶和0.03 mol/L左旋半胱氨酸按2∶1比例混匀,取0.15 mL注射至SD大鼠右膝关节腔诱导骨关节炎模型,左膝注射等量生理盐水为对照组,另取2只4膝不做处理为正常对照组,于注射后第2,4,6周后分别使用扫描电镜观察股骨内侧髁关节软骨表面形态学变化。 结果与结论：正常和对照组可见表面分布较均匀的浅坑。木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸混合注射2周后大鼠软骨表面出现凹凸不平,皱缩扭曲变形;4周表面变薄,局部出现小裂纹;6周出现深大裂纹,软骨缺损。提示2%木瓜蛋白酶和0.03 mol/L左旋半胱氨酸混合注射诱导的早期骨关节炎模型的时间节点可以定在4-6周。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

体外冲击波治疗兔膝骨关节炎:白细胞介素1β及基质金属蛋白酶13的表达

背景:白细胞介素1β和基质金属蛋白13能促进软骨细胞的分解代谢,抑制软骨细胞的合成修复能力,引起细胞外基质的降解,在骨关节炎的发生中有十分重要的作用。目的:观察体外冲击波对兔膝骨关节炎软骨细胞中白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13表达的影响。方法:将30只新西兰兔随机分为治疗组、模型组、对照组,每组10只。治疗组和模型组均采用改良伸直位固定6周,制备兔膝骨关节炎模型。治疗组造模后给予体外冲击波治疗1次,能流密度0.1 mJ/mm2,冲击次数1 000次。对照组不作任何处理。各组兔于治疗后4周处死,取膝关节液和关节软骨。苏木精-伊红染色和甲苯胺蓝染色法检测各组膝关节病理学形态改变,采用酶联免疫吸附法测定关节液白细胞介素1β水平,免疫组化法检测白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13的表达。结果与结论:治疗组和模型组关节液白细胞介素1β水平较对照组明显增高(P0.01),治疗结束后治疗组关节液白细胞介素1β水平较模型组下降(P0.05)。治疗组和模型组软骨组织Mankin评分较对照组明显增高(P0.01),治疗结束后治疗组软骨组织Mankin评分较模型组下降(P0.05)。治疗组和模型组软骨细胞白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13阳性表达率较对照组明显增高(P0.01),治疗结束后治疗组软骨细胞白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13阳性表达率较模型组下降(P0.05)。结果可见体外冲击波能下调膝骨关节炎软骨细胞白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13的表达,促进Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的合成,从而对膝骨关节炎起防治作用。     

维药买朱尼对关节软骨前炎性因子的影响

背景：骨关节炎病理过程中,白细胞介素1β被认为是促进软骨基质降解和关节软骨破坏的最重要的细胞因之一。 目的：观察白细胞介素1β在关节软骨中的表达,并观察维药买朱尼对其的影响。 方法：将40只SD大鼠随机数字表法随机等分为模型对照组、维药买朱尼组、假手术组、正常对照组。模型对照组和维药买朱尼组采用改良Hulth造模法建立大鼠膝骨关节炎模型,假手术组仅显露膝关节,不切断韧带,不切除内侧半月板。维药买朱尼组建模第2周开始灌胃维药买朱尼10.31 mg/(kg•d),模型组及假手术组大鼠均灌服等量生理盐水,连续4周。 结果与结论：模型组软骨退变程度明显重于维药买朱尼组,模型组软骨大体评分及Mankin评分均明显高于维药买朱尼组(P < 0.05),模型组软骨细胞白细胞介素1β的表达强度亦明显高于维药买朱尼组(P < 0.05)。与正常对照组比较,假手术组软骨大体评分、Mankin评分及软骨细胞白细胞介素1β差异无显著性意义 (P > 0.05)。结果说明,维药买朱尼可以抑制关节软骨前炎性因子白细胞介素1β的表达。     

当归-牛膝对兔骨关节炎PI3K/AKT通路的影响

目的：为探讨当归注射液-牛膝总皂甙对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡及PI3K/AKT通路的影响。方法：60只新西兰兔随机分为6组,每组10只,分别为：正常组、模型组、当归注射液-牛膝总皂甙组、牛膝总皂甙组、布洛芬组、当归-牛膝中药颗粒配伍组,正常组常规饲养余各组采用改良Hulth法复制膝骨关节炎模型。取材前14d灌胃,造模术后45d处死。流式细胞术检测软骨细胞的凋亡率,应用免疫印迹法检测关节软骨PI3K/AKT通路AKT的Thr308表位活化程度。结果：①软骨细胞凋亡率检测：模型组软骨细胞凋亡率高于正常组;当归注射液-牛膝总皂甙组、牛膝总皂甙组、布洛芬组分别与模型组比较有统计学差异（P〈0.01）,组间比较无差异;中药颗粒组与模型组比较有统计学差异（P〈0.01）;中药颗粒组低于布洛芬组有统计学差异（P〈0.05）;当归注射液-牛膝总皂甙组和牛膝总皂甙组的凋亡率均低于当归-牛膝中药颗粒配伍组有统计学差异（P〈0.05）。②软骨组织AKT1的表达量：模型组的软骨组织AKT的Thr308表位活化程度低于正常组,当归注射液-牛膝总皂甙组、牛膝总皂甙组和布洛芬组与正常组接近,中药颗粒组低于正常组。当归注射液-牛膝总皂甙组、牛膝总皂甙组和布洛芬组软骨组织AKT的Thr308表位活化程度高于模型组,中药颗粒组与模型组相近。当归注射液-牛膝总皂甙组、牛膝总皂甙组和布洛芬组软骨组织AKT的Thr308表位活化程度几近相等,以当归注射液-牛膝总皂甙组稍高,比中药颗粒组高。结论：当归注射液-牛膝总皂甙组及布洛芬组可以有效的减少骨关节炎病变过程中软骨细胞的凋亡,一定程度改善骨关节炎病理,其机制可能与其干预兔早期膝骨关节炎软骨组织PI3K/AKT信号通路有关。     

低频脉冲超声干预膝骨关节炎模型兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达

背景：研究表明,低频脉冲超声能促进全层关节软骨缺损修复,延缓实验性早期骨关节炎的病变进展。水通道蛋白3存在于关节软骨及滑膜上,并在骨关节炎的发病机制中发挥重要作用。 目的：探讨低频脉冲超声对实验性膝骨关节炎兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3表达的影响。 方法：成年新西兰兔左后膝关节用管型石膏固定于伸直位制动6周制备实验性兔膝关节骨关节炎模型,造模成功后随机分为两组：实验组予以低频脉冲超声治疗(频率为1 MHz,功率为2.0 W),1次/d,15 min/次;对照组不接受超声治疗。分别于治疗后2,4,8周,采用免疫组织化学方法观察兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达。 结果与结论：随着造模后时间的延长,各组兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达均有所增加;与对照组比较,实验组兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3表达明显降低(P < 0.01)。说明低频脉冲超声能降低实验性兔膝骨关节炎关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达,从而缓解关节肿胀,延缓软骨及滑膜的退变,具有软骨及滑膜保护作用。     

维药买朱尼对骨关节炎大鼠模型关节软骨中基质金属蛋白酶1和基质金属蛋白酶抑制剂1的影响

背景：骨关节炎患者关节软骨的损害与基质金属蛋白酶1和基质金属蛋白酶抑制剂失平衡有关。 目的：观察基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1在关节软骨中的表达及维药买朱尼对其影响。 方法：将20只SD大鼠采用改良Hulth造模法建立大鼠膝骨关节炎模型,按随机数字表法随机等分为买朱尼组和模型组,建模第2周开始分别灌胃维药买朱尼和生理盐水,连续4周。 结果与结论：相比于模型组,买朱尼组大鼠膝关节软骨退变程度减轻,软骨大体评分及Mankin评分降低(P < 0.05),且膝关节软骨细胞中基质金属蛋白酶1的表达降低,基质金属蛋白酶抑制剂1的表达增加(P < 0.05)。说明维药买朱尼可以通过下调基质金属蛋白酶1的表达水平、上调抑制剂的表达水平,对软骨产生保护作用。     

低能量体外冲击波对兔膝骨关节炎软骨细胞修复能力和MAPK通路蛋白的影响

目的研究采用低能量体外冲击波冲击刺激对兔膝骨关节炎软骨细胞生长修复的影响,并探讨其是否通过调控上游细胞内MAPK通路蛋白ERK、JUK的表达而抑制MMPS的表达,从而减少细胞外基质的降解和降低炎症因子对软骨细胞的破坏作用。方法选取30只健康大新西兰兔分三组各10只。处理组与模型组采用hunt法切断兔膝关节内半月板后前交叉韧带以建立膝骨关节炎模型,对照组未给予如何处理;其中处理组采用0.16 Mpa/次,每侧1200的体外冲击波治疗,一周一次,余2组不采用任何处理措施,检测软骨细胞损伤和修复情况,并分析组织细胞内MMPs蛋白、关节滑液炎性因子IL-1β、TNF-α和MAPK通路蛋白ERK、JUK蛋白的表达。结果处理组兔膝关节软骨变薄、表面纤维增生呈修复反应,而模型组可见典型骨关节炎的膝关节改变;模型组Mankin评分均高于对照组和处理,差异具有统计学意义(P0.05)。免疫组化显示处理组软骨MMP-1和MMP-13表达水平亦明显高于对照组,关节滑液炎性因子IL-1β、TNF-α亦明显升高,组间比较差异具有统计学意义(P0.05)。western blot显示ERK、JUK蛋白在模型组中表达最高,处理组在治疗后其水平明显降低(P0.05)。结论低能量体外冲击波刺激膝骨关节炎软骨细胞,可以降低关节MMP蛋白与炎性因子水平,从而促进兔膝关节软骨细胞的修复,其作用机制可能是通过调控上游细胞内MAPK通路蛋白ERK、JUK的表达而实现。     

手术诱导膝骨关节炎兔模型的制备方法

背景：目前常用的膝骨关节炎动物模型制备方法主要有手术创伤和关节腔内注射蛋白酶诱导两大类。关节腔内注射药物诱导模型并不稳定,传统的手术造模方法对膝关节损伤较大,且成模过程与临床膝骨关节炎的发展过程差异较大。目的：通过不同手术方式损伤膝关节制备兔膝骨关节炎模型,探讨膝骨关节炎动物模型的最佳制备方法。方法：将16只雄性五六月龄新西兰大白兔随机分为假手术组、模型A组、模型B组、模型C组,每组4只。假手术组切开右侧膝关节内侧后立即缝合;模型A组磨损右侧膝关节半月板、磨损前交叉韧带;模型B组摘除右侧膝关节半月板、磨损前交叉韧带;模型C组摘除右侧膝关节半月板、切断前交叉韧带。术后连续3 d注射抗生素,记录一般情况。4周后通过X射线片观察关节情况,苏木精-伊红染色观察软骨组织变化,酶联免疫吸附法检测右侧膝滑膜液和血清中炎症因子水平。结果与结论：(1)模型组右侧膝关节明显出现红肿热痛情况,皮温明显高于假手术组;(2)术后模型组右侧膝关节皮温较假手术组明显升高,差异有显著性意义(P <0.05);(3)X射线片显示假手术组膝关节未见异常,模型组出现不同程度的关节面破坏及关节间隙狭窄,其中模型C组最为...     

金骨莲灌胃对兔骨关节炎模型软骨细胞凋亡相关蛋白表达的影响

文题释义： 细胞凋亡：为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主有序的死亡。与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等作用，是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。 P-p38蛋白：磷酸化p38蛋白，存在于P38MAPK信号通路中，该通路是丝裂原活化蛋白激酶的亚类之一，该通路中的特异性p38蛋白经过磷酸化级联反应直接磷酸化，从而被激活并具备生物活性，存在于软骨组织中，可反映骨关节炎严重程度。 背景：金骨莲胶囊为传统的苗药组方，其成分主要包含金铁锁、汉桃叶等成分，既往研究表明该药物具有软骨保护作用，但对其软骨保护的机制还不清楚。 目的：探讨金骨莲灌胃治疗骨关节炎的可能机制。 方法：从40只家兔中随机挑选10只作为空白对照组，余下的30只家兔以改良Hulth法在兔右侧后膝建立骨关节炎模型，并随机分为骨关节炎模型组(10只)、金骨莲灌胃组(10只)，p38抑制剂组(10只)。建模7 d后，金骨莲灌胃组给予金骨莲与双蒸水混合液10 mL灌胃[57.5 mg/(kg·d)]；p38抑制剂组给予兔右侧后膝关节腔注射10 μmol/L p38抑制剂(SB203580)0.5 mL，每周1次；空白对照组及骨关节炎模型组仅灌服等量双蒸水，1次/d，干预8周后处死动物取右侧后膝关节股骨髁及胫骨平台。采用Pelletier评分评估软骨损伤情况；苏木精-伊红染色、番红O染色及Mankin评分评估软骨退变情况；Western blot检测软骨组织中P-p38及Cleaved Caspase-3蛋白的表达；实时荧光定量PCR检测各组软骨组织中Bcl-2、Bax mRNA表达。 结果与结论：①金骨莲灌胃组Pelletier评分及Mankin评分较骨关节炎模型组及p38抑制剂组明显降低(P < 0.05)；②金骨莲灌胃组软骨组织中Bax mRNA、Cleaved Caspase-3蛋白表达较骨关节炎模型组及p38抑制剂组明显降低(P < 0.05)；③金骨莲灌胃组Bcl-2 mRNA的表达较骨关节炎模型组及p38抑制剂组均明显升高(P < 0.05)；④金骨莲灌胃组软骨组织中P-p38蛋白表达较骨关节炎模型组与p38抑制剂组明显降低(P < 0.05)；⑤结果表明，金骨莲可抑制骨关节炎模型兔软骨组织中凋亡相关蛋白和P-p38蛋白的表达，从而延缓关节软骨退变。 ORCID: 0000-0002-6664-8008(彭旭) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程