柚皮苷抑制黑色素瘤的生长与转移

目的初步探索柚皮苷对黑色素瘤细胞生长与迁移的抑制作用。方法使用不同浓度的柚皮苷分别处理A375细胞,应用MTT法检测不同处理因素对A375细胞增殖的影响,利用TRANSWELL实验检测不同处理因素对A375细胞迁移的作用。通过WESTERN BLOT及REAL-TIME PCR方法检测不同因素作用下相关蛋白的变化。结果不同浓度的柚皮苷对A375细胞增殖与迁移均有一定的抑制作用,其中10、20、40μm/L柚皮苷作用24h后,对A375细胞增殖的抑制率分别为(40.01±0.74)%、(48.69±3.66)%和(54.32±1.61)%。20、40μm/L柚皮苷作用24 h后,对A375细胞迁移的抑制率分别为(18.44±3.89)%和(38.14±7.98)%。柚皮苷对A375细胞增殖与迁移功能的抑制作用随着剂量增加。柚皮苷对调控细胞增殖、迁移的CDK4等蛋白均有抑制作用。结论柚皮苷对黑色素瘤细胞A375细胞增殖与转移均有抑制作用,可以作为临床治疗黑色素瘤的新的潜在药物而进一步研究。     

柚皮苷抑制骨关节炎软骨细胞凋亡实验研究

目的研究柚皮苷在炎症环境下对人骨关节炎（OA）软骨细胞凋亡的影响和可能的作用机制。方法采用不同浓度（0、0．1、1、10、100 mg／L）柚皮苷对 OA 软骨细胞进行预处理2 h 后,加入或不加入炎症因子混合液（白细胞介素-1β5 ng／ml 和肿瘤坏死因子-α20 ng／ml）共作用24 h。首先检测柚皮苷对炎症环境下软骨细胞活性和凋亡的影响,然后检测软骨细胞在柚皮苷作用下的一氧化氮（NO）水平及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（caspase）-3、caspase-8活性变化情况。结果柚皮苷预处理后软骨细胞在炎症因子刺激下发生凋亡显著减轻,且其抑制细胞凋亡作用具有浓度依赖性。进一步分子生物学检测显示,柚皮苷对 NO 生成及激活的 caspase 信号转导通路具有明显抑制作用。结论柚皮苷能有效抑制人 OA 软骨细胞凋亡,其作用机制可能是柚皮苷阻断了 NO 产生并抑制了下游的 caspase 信号通路,有望应用于 OA 治疗新药的研发。     

柚皮苷促进成骨细胞分化并有效改善卵巢切除所致的骨质疏松

目的 评价柚皮苷对成骨细胞增殖与分化的作用,并采用大鼠骨质疏松模型评价柚皮苷的治疗效果.方法 采用不同浓度的柚皮苷处理大鼠骨髓基质细胞,观察其增殖、分化与功能的改变.采用低、中、高三种不同剂量的柚皮苷作为治疗组,磷酸缓冲液(PBS)作为对照组,对卵巢摘除诱发骨质疏松的大鼠灌胃2个月.应用骨质疏松大鼠右侧股骨的X线照片和显微CT扫描测量骨矿密度以及骨体积分数,使用骨质疏松大鼠左侧胫骨的病理切片检测组间骨小梁厚度和骨小梁间隙的变化.结果 体外研究表明柚皮苷可有效增加骨髓基质细胞的增殖和成骨分化,浓度为10 μg/ml时对骨钙素的表达具有最显著的作用.骨髓基质细胞对柚皮苷的治疗呈现一种延迟反应模式.柚皮苷并有效逆转了卵巢切除导致的骨质疏松,增加了骨密度、骨容量和骨小梁厚度.300 mg/kg(中剂量)是具有满意治疗效果的最优剂量.结论 柚皮苷促进骨髓基质细胞的分化与增殖,增加骨钙素的表达,它能有效逆转卵巢切除大鼠的骨质疏松过程.本研究表明柚皮苷是治疗骨质疏松的潜在有效药物.     

槲皮素治疗类风湿关节炎的作用机制探讨

目前,治疗类风湿关节炎的优选策略是控制炎症与其他病理反应,缓解其疼痛不适等临床症状。槲皮素具有抑制炎症介质的表达和分泌、抗氧化、免疫调节、抑制基质金属蛋白酶的生成,以及抑制滑膜细胞增生等多种生物活性,可抑制类风湿关节炎的病理进程。槲皮素在预防和治疗类风湿关节炎上具有广阔的应用和发展前景。     

骨碎补柚皮苷对炎症及骨作用的相关研究进展

柚皮苷广泛存在于各类植物中,是中药骨碎补的重要组成成分,目前柚皮苷还处于实验研究阶段,已有的实验结论证实了柚皮苷可通过降低炎症因子的表达,实现抑制包括骨关节炎症在内的各种炎症反应的作用,并认为其作用的分子机制是抑制NF-κB通路。此外,柚皮苷通过提高BMP-2蛋白和抑制RANKL的表达实现促进成骨细胞增殖分化和抑制破骨细胞活性的作用。动物实验中柚皮苷对骨质疏松症的治疗有效,其相关机制研究正在深入。     

柚皮苷抑制PMMA颗粒诱导的破骨细胞形成及骨溶解

目的从体外和体内实验2个方面评价柚皮苷对聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）诱发的破骨细胞性骨溶解的作用。方法培养破骨细胞前体细胞RAW264.7,使用PMMA颗粒刺激细胞,观察柚皮苷的治疗作用。检测抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色、Ca2＋释放实验以及TRAP、组织蛋白酶（CPK）、NF-κB的基因表达。采用小鼠膝关节置钉模型评价柚皮苷对PMMA诱发骨吸收的作用,对实验标本采用生物力学拔出试验进行评价。结果柚皮苷可以有效地抑制破骨细胞的形成并下调骨吸收基因标记物的表达,剂量为10μg/ml时表现出对TRAP活性的最大抑制作用。在颗粒刺激培养液中柚皮苷降低了钙的释放。柚皮苷缓解了膝关节置钉模型中PMMA颗粒刺激所造成的长期的骨吸收,表现为骨体积分数的增加和最大钉拔出力的增加。300 mg/kg的灌胃剂量可达到最好的疗效。结论柚皮苷抑制PMMA诱导的破骨细胞形成,降低PMMA颗粒刺激的钙释放。在观察慢性骨吸收的长期模型中,柚皮苷也有效抑制PMMA诱发的骨吸收,并保留了置入物的稳定性。     

柚皮苷通过HIF-1α/VEGF信号促进H型血管抗骨质疏松的研究

目的 观察柚皮苷对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织HIF-1α/VEGF信号通路和H型血管形成的影响,探讨柚皮苷防治骨质疏松症的作用机制。方法 建立去卵巢骨质疏松大鼠模型（随机将36只大鼠分为去卵巢组、假手术组和柚皮苷治疗组）。柚皮苷治疗３个月后,检测血清和骨髓上清骨代谢指标和HIF-1α/VEGF信号通路变化,检测骨密度(bone mineral density, BMD)、骨微结构及H型血管变化。结果 柚皮苷治疗组大鼠血清中成骨代谢指标[骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(BGP)、I型原胶原分子N 端前肽(PINP)]升高;而骨吸收标志物血清C端交联肽（CTX）降低;HIF-1α在血清和骨髓上清中表达均升高;VEGF在骨髓上清中表达升高,而血清中无明显改变;BMD和Micro-CT结果显示柚皮苷治疗组大鼠骨密度和骨量增加;同时股骨近端H型血管表达升高。结论 柚皮苷可以调节骨代谢,改善骨质疏松大鼠骨密度,发挥抗骨质疏松作用,其作用机制可能是通过调节HIF-1α/VEGF信号通路、促进H型血管形成来实现的。     

类风湿关节炎的时间治疗学研究进展

临床治疗类风湿关节炎的药物多种多样,但尚无根治方法.从新的角度探索类风湿关节炎治疗方案,为临床应用提供理论依据.时间治疗学是时间生物学在治疗学中的应用,优化给药时间可能会最大限度地提高疗效和减少不良反应.通过梳理国内外时间治疗类风湿关节炎的文献认为,类风湿关节炎的临床表现具有昼夜节律性,其时间治疗学药物研究涉及糖皮质激...     

交锁髓内钉与钢板内同定微创治疗胫腓骨多段骨折的病例对照研究

目的 :采用小鼠气囊模型评价柚皮苷对聚甲基丙烯酸甲酯(Polymethylmethacrylate,PMMA)诱发的破骨细胞性骨溶解的作用。方法:选取48只雌性8~10周龄Balb/c小鼠纳入研究,采用背部注入空气法在其中的32只小鼠中建立气囊模型,植入同种系小鼠颅骨(颅骨源自其余的16只小鼠)。实验共分为4组(150 mg/kg柚皮苷治疗组、30 mg/kg柚皮苷治疗组、PBS空白对照组、DMSO载体对照组),每组8只动物。对两个柚皮苷治疗组和DMSO载体对照组的小鼠使用PMMA颗粒刺激,每组8只相应浓度进行处理,颗粒刺激第7天收集囊膜和囊内植入骨进行抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色、Ca2+释放以及改良Masson染色病理分析进行评价,观察柚皮苷的治疗作用。结果:与DMSO载体组相比,柚皮苷治疗组降低了TRAP阳性细胞浸润的数量,差异有统计学意义(P<0.01);其中150 mg/kg浓度优于30 mg/kg浓度(8.90±1.75 vs 15.23±1.86)。在气囊模型骨吸收冲洗液中,柚皮苷能降低钙的释放,特别是150 mg/kg浓度组更为明显(P<0.05)。改良的Masson染色显示柚皮苷可减少PMMA刺激所致的骨胶原的丢失,但150 mg/kg浓度组作用大于30 mg/kg浓度组。大体及病理切片显示两种浓度的柚皮苷显著降低PMMA刺激所致的炎性反应,表现为气囊厚度的减低和炎性细胞浸润数量的减少。结论 :柚皮苷抑制PMMA诱导的破骨细胞形成,有效缓解PMMA诱发的炎性反应以及随后发生的急性骨吸收。     

载柚皮苷复合支架对兔骨软骨缺损修复的实验研究

目的探讨载柚皮苷复合支架的性能及其对兔骨软骨缺损修复的效果。方法利用W/O/W方法制备载柚皮苷和无载柚皮苷缓释微球;以凹凸棒石和Ⅰ型胶原蛋白为材料,通过"3层夹心法"分别构建载柚皮苷、无载柚皮苷和载TGF-β_1复合支架。分别利用体外缓释、扫描电镜和细胞计数试剂盒8法评价载柚皮苷微球的缓释效果、支架的形貌和细胞相容性。取40只日本大耳白兔随机分为A、B、C、D4组,每组10只。于兔双侧股骨髁间窝处制备直径4.5 mm、深4 mm的骨软骨缺损模型,A组为缺损组(空白对照),B、C、D组分别于骨软骨缺损处植入无载柚皮苷复合支架(阴性对照组)、载柚皮苷复合支架(实验组)及载TGF-β_1复合支架(阳性对照组)。分别于术后3、6个月时取材,行大体、HE染色、甲苯胺蓝染色,分别观察骨软骨缺损修复效果;Western blot检测新生软骨Ⅱ型胶原蛋白表达水平。结果载柚皮苷微球具有良好的缓释效果;构建的骨软骨复合支架有较好的孔隙;载柚皮苷软骨层支架细胞的增殖率与无载柚皮苷支架比较明显增加,差异有统计学意义(P0.05)。兔体内植入实验大体观察示,术后3个月C、D组缺损范围与A、B组相比明显缩小;术后6个月C组缺损处被新生软骨所覆盖,D组新生软骨与周围正常软骨整合良好。组织学染色示,术后3个月A、B组缺损处被少量纤维组织填充,C、D组可见少量软骨生成;术后6个月C、D组新生骨软骨组织与正常骨软骨类似,A、B组缺损处以大量纤维组织为主。Western blot检测示,术后3、6个月C、D组缺损处新生组织中Ⅱ型胶原蛋白表达量均显著高于A、B组,差异有统计学意义(P0.05);C、D组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论载柚皮苷复合支架具有良好的组织相容性,并对兔关节骨软骨缺损有较好的修复效果。     

浅谈中医治疗类风湿关节炎60例

探讨中医药治疗类风湿关节炎的治疗方法和临床疗效,辨别类风湿关节炎的基本证型及主要症状,通过对比说明中医药治疗类风湿关节炎的优势及其不可替代的作用.     

应用FRAX工具评估类风湿关节炎患者骨折风险及其风险因素的相关性研究

目的探讨骨折风险评估工具(FRAX)预测类风湿关节炎(RA)患者骨质疏松性骨折的临床应用价值并对其骨折风险因素进行相关性分析。方法回顾性分析2015年1月至2016年2月期间经确诊的74例类风湿关节炎患者以及正常对照组76例的相关临床指标以及骨密度值;评估FRAX对类风湿关节炎患者的骨折风险预测值以及FRAX与类风湿临床风险因素之间的关系。结果类风湿组股骨颈、腰椎的骨密度值均低于对照组,而类风湿组中10年主要骨质疏松性骨折发生概率和10年髋部骨折发生概率均高于对照组。多重线性回归分析提示FRAX评分与易激动、口味偏淡、体重指数、S-CTX具有一定的相关性。结论 FRAX工具对临床评估RA患者骨质疏松性骨折风险、预后评价等方面具有良好的应用价值。     

大黄素抗类风湿关节炎的作用机制研究进展

类风湿关节炎是一种累及关节的自身免疫性疾病,临床表现为关节炎症、骨损伤和软骨破坏、关节功能障碍和畸形,以及关节外的器官损伤。近年来,天然药物治疗类风湿关节炎的研究取得了显著的成果,大黄素是中药大黄的主要活性成分之一,具有良好的抗炎和抗氧化等作用。筛选近年来实验方法科学、研究方向新颖的文献,总结大黄素抗类风湿关节炎的作用机制,发现大黄素可通过减轻炎症反应、促进软骨细胞的增殖分化、抑制软骨细胞凋亡、延缓软骨细胞外基质降解等途径显示出抗类风湿关节炎的潜力。     

新型免疫抑制剂Leflunomide的研究进展

新型免疫抑制剂Leflunomide(LEF)是一种异恶唑类衍生物,在人体内主要代谢产物是A771726,做为一种酪氨酸激酶抑制剂能抑制T细胞、B细胞和其它类型细胞的增殖,对自身免疫疾病和移植模型都有显著免疫抑制作用。临床上已利用其治疗类风湿关节炎,疗效好且毒性低。因其独特的抗细胞和体液免疫双重作用的特点,应用LEF治疗致敏的受者和慢性排斥反应具有良好的前景。     

负载柚皮苷AKE/GB30网箱在脊柱骨缺损模型修复中的作用及对BMPs-VEGF信号通路的影响

【摘要】 目的：观察负载柚皮苷的AKE/GB30网箱在脊柱骨缺损模型中的修复作用,并基于骨形成蛋白（BMPS）-血管内皮生长因子（VEGF）信号通路探讨该生物材料的作用机制。方法：用牙钻在30只新西兰雄兔L5与L6椎间制作一个7mm×5mm×4mm的缺损,建立脊柱骨缺损模型,制备AKE/GB30网箱。测试负载柚皮苷的AKE/GB30网箱生物力学性能,检测其体外释药行为。将造模成功的新西兰兔随机数字表法分为3组,即空白组、自体骨移植组、骨移植生物材料+柚皮苷联合组,除空白组外分别予以自体骨移植、负载柚皮苷的AKE/GB30网箱进行修复。术后6周、12周每组各取5只兔,微计算机断层扫描（Micro CT）检测骨修复情况[包括骨体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）和骨小梁数目（Tb.N）];实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测骨形成蛋白2（BMP2）、VEGF、Runt相关转录因子2（RUNX2）、碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OCN）信使核糖核酸（mRNA）表达;免疫印迹法（WB）检测骨组织BMP2、VEGF、RUNX2、ALP、OCN蛋白表达。结果：AKE/GB30网箱制作成功,且其特性检测结果符合脊柱骨缺损修复要求;负载柚皮苷的AKE/GB30网箱最大抗压强度为28MPa,最大抗压力为15N,6周时其累积释药率达（98.15±1.47）%;各组术后12周时BV/TV、Tb.Th和Tb.N,骨组织BMP2、VEGF、RUNX2、ALP、OCN的mRNA与蛋白表达均高于术后6周时（P＜0.05）,且自体骨移植组、骨移植生物材料+柚皮苷联合组上述指标均高于空白组（P＜0.05）,自体骨移植组、骨移植生物材料+柚皮苷联合组上述指标差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：负载柚皮苷的AKE/GB30网箱在脊柱骨缺损模型修复的效果等同于自体骨移植,可能是通过促进BMP2、VEGF、RUNX2、ALP、OCN表达实现的。     

从太阳病论治类风湿关节炎探析

从太阳病角度对类风湿关节炎的辨证治疗进行理论剖析,为类风湿关节炎的经方治疗提供新思路。结合《伤寒杂病论》部分经典条文,从太阳病层面探讨类风湿关节炎的临床表现、病因病机及证治方药,挖掘太阳病本证经方治疗类风湿关节炎的作用机制。相关研究表明,在类风湿关节炎病程中与太阳病病证有诸多相同或相似的病机,从太阳病论治类风湿关节炎立论可靠,其能有效改善类风湿关节炎患者临床症状,提高临床疗效。     

柚皮苷通过抑制氧化应激和细胞凋亡减轻蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤的研究

目的:观察柚皮苷对蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤的影响,探讨其治疗SAH的机制。方法:采用血管内穿刺法诱导大鼠SAH模型,将24只大鼠以随机数法分为4组,分别为假手术组、SAH组、SAH+柚皮苷40 mg/kg、SAH+柚皮苷80 mg/kg,每组6只。SAH模型24 h后检测SAH评分、神经功能评分、脑水肿、伊...     

基于网络药理学探讨柚皮苷治疗骨质疏松症的潜在机制

目的基于网络药理学探讨柚皮苷治疗骨质疏松症(osteoporosis,OP)的潜在机制。方法根据TCMSP数据库、Swiss Target Prediction数据库和Uniprot数据库得到柚皮苷的结构及其靶点,利用Gene Cards、OMIM数据库获取OP相关靶点,将交集靶点输入到STRING数据库以获取蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)信息,借助Cytoscape 3.7.2软件构建PPI网络、"柚皮苷-交集靶标-骨质疏松"网络,并使用Cytoscape 3.7.2软件、R软件进行GO功能富集分析及KEGG通路富集分析。结果筛选得到柚皮苷105个作用靶标,其中与OP相关靶标44个,GO功能富集分析获得607个结果(P0.05),KEGG通路富集分析获得43个结果,其中相关信号通路有11条(P0.05),涉及p53、IL-17、NF-κB、Estrogen、Prolactin等信号通路。结论柚皮苷可能通过多靶点、多通路调节炎症反应、细胞周期和激素代谢来治疗OP。     

饮食对类风湿关节炎病情影响的研究进展

近年来,许多研究认为,饮食模式可能对类风湿关节炎高危人群具有潜在益处,饮食通过控制炎症、免疫和氧化应激在类风湿关节炎的治疗中起着关键作用。总结已有的研究报道,发现高脂、高盐、高糖食物是类风湿关节炎的高危因素,而地中海饮食、抗氧化食品、素食、益生菌、维生素、乳制品、适量肉类等可以影响类风湿关节炎的发病及进展,所以,类风湿关节炎患者可以根据此合理搭配饮食。     

柚皮苷抑制胶原诱导小鼠关节炎症作用机制的实验研究

目的检测柚皮苷干预后胶原诱导(CIA)小鼠关节炎症相关指标的变化。方法选择雄性DBA1/J小鼠35只,随机分为正常组(5只)和实验组(30只)。实验组炎症评分达2分以上再分为骨碎补组(10只)、CIA模型组(10只)、柚皮苷组(10只)。各组均以灌胃方式给药,每天1次,连续20次。给药20 d后处死小鼠,ELISA方法测定小鼠血清中IL-6、TNF-α的水平,HE染色观察滑膜炎症表达情况,免疫组化法检测小鼠膝关节滑膜组织中HIF-1α、CXCR4蛋白的表达情况。结果给药第11天开始,柚皮苷组炎症评分低于CIA模型组,差异有统计学意义(P0.05);给药第15天开始,柚皮苷组与骨碎补组炎症评分均低于CIA模型组,差异有统计学意义(P0.05);给药第19天,骨碎补组与柚皮苷组炎症评分均有降低表现,且柚皮苷组炎症评分较骨碎补组低,差异有统计学意义(P0.05)。柚皮苷、骨碎补组较CIA模型组的IL-6、TNF-α水平均下降,差异有统计学意义(P0.01)。柚皮苷组的IL-6水平较骨碎补组低,TNF-α水平较骨碎补组高,但差异无统计学意义(P0.05)。柚皮苷组HIF-1α、CXCR4的IOD值低于CIA模型组,差异有统计学意义(P0.05);骨碎补组HIF-1α、CXCR4的IOD值与CIA模型组比较差异无统计学意义(P0.05);骨碎补组与柚皮苷组2组间差异无统计学意义(P0.05)。柚皮苷、骨碎补组染色阳性区域Area值均低于CIA模型组,差异有统计学意义(P0.05);骨碎补组与柚皮苷组2组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论柚皮苷对HIF-1α上游的炎症因子IL-6、TNF-α及下游的CXCR4都具有一定调控作用,显著的降低了CIA小鼠炎症反应。