乌头汤调控lncRNA GAS5抑制骨关节炎软骨细胞炎症反应的研究

目的：探讨乌头汤调控lncRNA GAS5进而干预白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞炎症反应的效果及机制,为乌头汤的临床应用提供实验依据。方法：4周龄SPF级SD雄性大鼠10只,提取大鼠双膝关节软骨,进行体外软骨细胞的分离与培养,采用Ⅱ型胶原免疫组化法对软骨细胞进行鉴定;经10 ng·mL^-1 IL-1β干预24 h诱导软骨细胞退变。将软骨细胞随机分为空白对照组、模型对照组(10 ng·mL^-1 IL-1β)和乌头汤组(150μg·m L^-1乌头汤水提物)。通过Real-time PCR检测各组软骨细胞中lncRNA GAS5的相对表达水平。免疫荧光染色技术检测软骨细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和解聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMTS-5)的荧光表达量。结果：与空白对照组比较,模型对照组lncRNA GAS5相对表达水平显著升高(P <0.01),TNF-α、MMP-3和ADAMTS-5荧光表达增强;与模型对照组比较,乌头汤组lncRNA GAS5相对表达水平显著降...     

重楼总皂苷对多发骨折-脂多糖两次打击模型大鼠血清细胞因子水平的影响

目的：探讨重楼总皂苷（RPTS）对多发骨折-脂多糖两次打击模型大鼠血清TNF-α、IL-1β及IL-6水平的影响。方法：68只Wistar大鼠随机分成5组,除空白对照组外,其余各组按多发骨折-脂多糖两次打击模型标准制模。制模成功后1h,除空白对照组和模型对照组外各组予以不同浓度的RPTS灌胃,干预后6h采血,以ELISA法检测血清中TNF-α、IL-1β及IL-6浓度。结果：大鼠血清TNF-α、IL-1β及IL-6浓度,模型对照组与空白对照组相比较明显升高（P〈0.001）,而RPTS各干预组与模型对照组相比较却明显下降（P〈0.001）,差异均有统计学意义。结论：重楼总皂苷可以降低多发骨折-脂多糖两次打击模型大鼠血清中的TNF-α、IL-1β及IL-6水平。     

左归丸对5/6肾切除大鼠IL-1β、p65及胸主动脉钙化的影响

目的:观察左归丸对5/6肾切除大鼠IL-1β、p65及胸主动脉钙化的影响。方法:SPF级Wistar雄性大鼠予以5/6肾切除并给予高磷饮食造模，造模大鼠分为模型组、左归丸组，并同时设空白对照组。术后空白对照组予以普通饮水，模型组和左归丸组予以高磷饮水。术后4周空白对照组和模型组给予灭菌注射用水灌胃，左归丸组行左归丸水溶液灌胃，共8周。灌胃8周后处死大鼠，检测血清BUN、Scr、IL-1β,免疫组化检测胸主动脉IL-1β、p65表达，von kossa染色观察胸主动脉钙化情况。结果:给药8周后，空白对照组和左归丸组BUN与模型组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组和左归丸组Scr与模型组比较，差异有统计学意义(分别为P<0.01,0.05)。空白对照组和左归丸组IL-1β与模型组比较，差异有统计学意义(P<0.01)。空白对照组大鼠各组IL-1β、p65在动脉血管壁几乎无表达，模型组大鼠表达明显，左归丸组大鼠与空白对照组比较增加，但明显少于模型组；von kossa染色观察空白对照组大鼠胸主动脉中内膜层无明显钙盐沉积，模型组大鼠主动脉钙盐沉积明显，左归丸组...     

润燥灵对干燥综合征患者外周血单个核细胞白细胞介素-17调控作用研究

目的：探讨解毒化瘀药润燥灵对干燥综合征患者外周血单个核细胞(PBMCs)白细胞介素-17(IL-17)的调控作用。方法：选取符合诊断标准的干燥综合征患者30例,抽取静脉血20 mL,分离提取PBMCs,加入10 ng·mL^-1的白细胞介素-1β(IL-1β)、10 ng·mL^-1的IL-6、1 ng·mL^-1的转化生长因子-β(TGF-β)、1 ng·mL^-1的肿瘤坏死因子-α诱导CD4⁺T细胞分化成Th17细胞。将细胞分为空白对照组,IL-17刺激组,IL-17抑制组和润燥灵高、中、低剂量组。采用CCK-8检测润燥灵对干燥综合征患者Th17细胞的抑制率;ELISA法检测IL-17A、IL-17F、IL-23、TGF-β的分泌,qRT-PCR检测IL-17A、IL-17F m RNA的表达水平。结果：CCK-8检测结果显示,经润燥灵处理24 h、48 h后,Th17细胞增殖能力下降。ELISA法检测结果显示,与IL-17刺激组比较,IL-17抑制组及润燥灵高、中剂量组IL-17...     

IL-6R抗体调节PMMA骨水泥介导的滑膜成纤维细胞MMPs和血管化因子mRNA表达

目的 探讨IL-6R抗体对PMMA骨水泥介导的滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA表达的调节.方法 从全髋关节置换术中获取滑膜组织消化并传代培养.倒置相差显微镜对滑膜细胞进行形态学观察,免疫细胞化学(SABC法)染色对滑膜成纤维细胞进行鉴定.根据加入不同培养物,实验分为3组:PMMA组:75μg/mL PMMA骨水泥颗粒;IL-6R抗体组:10 ng/mL IL6R抗体+75μg/mL PMMA骨水泥颗粒;空白对照组.采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测IL-6R抗体、PMMA对滑膜成纤维细胞增殖活力影响;实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)检测MMP-1、MMP-3、VEGF和PDGF mRNA 表达.结果 原代滑膜细胞贴壁后,初期为短梭形.连续3次传代后,95%以上细胞为长梭形成纤维细胞样细胞.SABC法染色检测结果显示:上述成纤维样细胞抗CD68抗体阴性,抗vimentin抗体呈棕黄色,为阳性反应.CCK-8检测显示:与PMMA组和空白对照组相比,IL-6R抗体组吸光度(A)值明显降低(P<0.01);而空白对照组与PMMA组间吸光度(A)值无统计学差异(P>0.05).FQ-PCR 检测发现:与PMMA组和空白对照组相比,IL-6R抗体组中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA 的表达明显受到抑制(P<0.01);PMMA组中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF表达较空白对照组升高(P<0.05).结论 IL-6R抗体能显著抑制滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA的表达,为生物制剂预防和治疗假体无菌性松动提供分子生物学的理论依据.     

白细胞介素13对胆管成纤维细胞TGF-β1/Smads通路表达的影响及地塞米松的干预作用

目的:探讨白细胞介素13(IL-13)对胆管成纤维细胞转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads通路活性的影响及地塞米松(Dex)的干预作用。方法:分离、培养兔胆管成纤维细胞并鉴定后分别给予IL-13、IL-13联合不同浓度的Dex(0.01、0.05、0.25 mg/mL)干预48 h,以无处理的胆管成纤维细胞为空白对照,分别用CCK-8细胞计数法测定各组细胞增殖水平;real-time PCR检测各组细胞TGF-β1、Smad3及Smad4基因mRNA表达;Western blot检测各组细胞TGF-β1及Smad4蛋白表达。结果:与空白对照组比较,在IL-13干预48 h后,胆管成纤维细胞增殖明显加速、TGF-β1、Smad3及Smad4 mRNA表达均明显上调,TGF-β1、Smad4蛋白表达明显上调(均P0.05),而Dex对IL-13引起的上述变化有明显的抑制作用,并呈一定的浓度依赖趋势(部分P0.05)。结论:IL-13能增加胆管成纤维细胞TGF-β1/Smads通路的活性,削弱该通路的活化可能是Dex抑制良性胆道狭窄形成的机制之一。     

重组Furin蛋白对类风湿关节炎滑膜细胞生物学行为的影响

[目的]探讨重组弗林蛋白(Furin)对于类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜细胞增殖、迁移、侵袭和细胞因子分泌的影响。[方法]从类风湿关节炎患者关节内提取RA滑膜组织后培养原代滑膜成纤维细胞(fibroblast-like synovial cells,FLS);将重组Furin蛋白按照不同浓度(250 ng/ml,500 ng/ml)加入RA滑膜细胞培养基中诱导培养并采用MTT、细胞划痕、Transwell、ELISA等方法检测重组蛋白处理对细胞增殖、迁移、侵袭和炎性因子分泌等生物学特性的影响。[结果]与空白对照组比,加入重组Furin蛋白处理24 h、48 h,对类风湿滑膜细胞增殖活动没有明显影响(P>0.05)。处理24 h后与空白对照组比,迁入划痕伤口内细胞数无显著区别(P>0.05),滑膜细胞穿透基底膜细胞数明显减少(P<0.05),且与剂量浓度呈正相关。培养液上清中IL-1α和IL-17含量升高(P<0.05),而各组间IL-1β和TNF-α含量差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]重组Furin蛋白诱导可抑制类风湿关节炎滑膜细胞侵袭能力同时可促进其分泌IL-1α和IL-17。     

基于JNK信号通路探讨豨莶草对痛风性关节炎影响

目的基于JNK信号通路探讨豨莶草对痛风性关节炎影响。方法将48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、SP600125组(JNK抑制剂)和豨莶草高(4 g/kg)、中(2 g/kg)、低(1 g/kg)组,对照组和模型组灌胃给予生理盐水,其他各组给予相应的药物,连续7天,第5天给药1 h后向大鼠膝关节腔注射尿酸钠建立痛风性关节炎模型,对照组不做处理,采用HE染色观察滑膜组织病理情况,ELISA检测大鼠血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量,western bloting测定JNK和p-JNK蛋白含量和RTPCR测定c-jun、AP-1和NF-κB mRNA表达。结果与对照组比较,模型组炎性细胞浸润,滑膜细胞增生,成纤维细胞,SP600125组和不同浓度豨莶草组对滑膜组织炎性细胞浸润明显减少,滑膜细胞增生和成纤维细胞增生明显减轻;模型组大鼠血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量明显增高,SP600125组和不同浓度豨莶草组血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量明显降低;western bloting和RT-PCR结果显示模型组滑膜组织中JNK和p-JNK蛋白含量明显增加,AP-1、c-jun和NF-κB mRNA表达明显增加,不同浓度豨莶草组和SP600125组能够明显降低痛风性关节炎大鼠JNK和p-JNK蛋白含量及c-jun、AP-1和NF-κB mRNA表达。结论豨莶草能够改善急性痛风性关节炎症状,其可能机制是调控JNK信号通路异常激活。     

豨莶草对尿酸钠引起痛风性关节炎IL-1β、TNF-α、NF-κB表达的影响

目的:研究豨莶草对尿酸钠引起的痛风性关节炎细胞炎性因子的作用机制。方法:选取健康清洁级10~13周龄雄性Wistar大鼠108只,随机分为空白对照组、模型对照组、莶草高剂量组、莶草中剂量组、莶草低剂量组、秋水仙碱组,每组18只。除空白对照组外,其余各组均通过尿酸钠致大鼠痛风性关节炎模型,用莶草不同剂量和秋水仙碱对模型大鼠灌胃给药。观察各组大鼠关节组织的病理学变化和测定白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子-κB(NF-κB)的表达。结果:模型对照组大鼠膝关节红肿明显且不敢发力,肿胀关节浸出液中IL-1β、TNF-α、NF-κB水平显著升高,滑膜细胞增生、炎性细胞浸润,排列紊乱,成纤维细胞增生,组织坏死并且炎性渗出。莶草高、中剂量组治疗效果明显,红肿减弱,莶草高剂量组周围软组织中炎细胞浸润并不明显,肿胀关节浸出液中IL-1β、TNF-α、NF-κB均显著降低。结论:莶草通过抑制IL-1β、TNF-α、NF-κB表达,可有效抑制痛风性关节炎局部的炎症反应。     

β1转化生长因子体外诱导入表皮干细胞分化为成纤维细胞的初步研究

目的探讨β1转化生长因子（transforming growth factorp1,TGF-β1）诱导入表皮干细胞（human epidermal stemcells,hESCs）分化与瘢痕形成之间存在的关联。方法将包皮环切术后的包皮用中性蛋白水解酶消化,采用改良的Ⅳ型胶原选择黏附法分离、培养,传代至第3代时经过hESCs表面标志物β1整合素和CK19检测,证实为hESCs后接种于24孔板,随机分为3组：3d组、7d组、空白对照组,前两组分别加入梯度浓度的TGF-β1（0．1、5．0、10．0ng／m1）诱导,采用HE常规染色及Masson胶原特殊染色、免疫组织化学染色等手段检测量波形蛋白表达和羟脯氨酸试剂盒法测量各组上清液中胶原含量。结果hESCs在TGF-β1诱导下,形态由圆形转变为梭形类成纤维细胞样,Masson胶原染色阳性,释放到细胞上清液中的胶原浓度,均显著高于对照组,抗-波形蛋白染色阳性率各组都至少在（95．00±1．20）％以上,大于对照组的（5．70±0．20）％（P〈0．05）。结论结果表明,hESCs与病理性瘢痕发生关系极其密切,在TGF-β1体外诱导下向成纤维细胞分化,分泌胶原,提示在病理性瘢痕的发生中,hESCs可能是活化的成纤维细胞的另一个来源,hESCs可能参与瘢痕增生发生过程。     

冬虫夏草在肾间质纤维化大鼠模型中的作用及其对TGF-β1、α-SMA的影响

目的：探讨冬虫夏草在肾小管间质纤维化大鼠模型中肾脏保护作用及其可能的作用机制。方法：采用单侧输尿管结扎术（UUO）致肾小管间质纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为3组：假手术组、模型组、虫草治疗组。手术后第9d处死各组大鼠，用免疫组化半定量检测各组肾脏TGF-β1、α-SMA、Ⅳ型胶原的表达，Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果：模型组TGF-β1、α-SMA、Ⅳ型胶原的表达及肾小管间质损伤指数明显高于假手术组（P〈0．01），而虫草治疗组明显低于模型组（P〈0．01）。结论：冬虫夏草可能通过下调TGF-β1，抑制肾小管上皮细胞、成纤维细胞转化为成肌纤维细胞防治。肾小管间质纤维化。     

前列腺素E2对大鼠急性胰腺炎IL-10抗TNF-α、IL-1β的免疫干预作用

目的:探讨前列腺素E2(PGE2)免疫干预对急性胰腺炎大鼠血清抗炎因子IL-10与前炎症因子TNF-α及IL-1β的平衡调控作用.方法:将SD大鼠91只随机分4组:假手术组(n=7),ANP组,PGE2前干预和PGE2后干预组(每组n=28);后三组又随机分1 h、3 h、6 h以及12 h时段组(每组n=7),大鼠ANP模型用5%牛磺胆酸钠诱导,PGE2前干预组在ANP模型制作前2 h肌肉注射150μg@kg-1PGE2,PGE2后干预组在ANP模型完成时即刻肌肉注射150μg@kg-1PGF2.采用ELISA检测各组各时段大鼠血清的IL-10、TNF-α与IL-1β含量.结果:PGE2前干预组和后干预组所有时段(1 h、3 h、6 h以及12 h)的TNF-α和IL-1β含量均比ANP组降低,差异有显著性(P＜0.001);PGE2前干预组3 h时段IL-10值比后干预组相应时段升高,而6 h时段IL-10含量比后干预组低,差异均有显著性(P＜0.001).本实验结果显示,大鼠血清IL-10的上升幅度因PGE2的给药时间不同而不同,TNF-α和IL-1β随IL-10上升而下降.ANP组血清IL-10与TNF-α呈正相关(r=0.585,P＜0.01);PGE2前、后干预组呈负相关(r=-0.045,P＜0.01;r=-0.143,P＜0.01).结论:无论是前干预还是后干预,PGE2均能上调大鼠血清抗炎症性因子IL-10,并可下调前炎症性因子TNF-α和IL-1β.     

补肾通络颗粒对膝骨关节炎大鼠血清细胞因子及关节软骨含水率的影响

目的:观察补肾通络颗粒高、中、低剂量对膝骨关节炎大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平以及关节软骨含水率的影响。方法:将60只大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,补肾通络颗粒高、中、低剂量组,美洛昔康组,每组10只。除空白对照组外,其余各组均予膝关节腔注射木瓜蛋白酶造模,并予药物干预后,用ELISA法测定大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α的水平,同时光镜下观察关节软骨并检测软骨含水率。结果:实验结束后,根据病理组织学检测发现模型对照组大鼠膝关节软骨退行性改变明显。与空白对照组比较,模型对照组膝骨关节炎大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及关节软骨含水率均升高(P0.05)。与模型对照组比较,补肾通络颗粒高、中剂量组与美洛昔康组膝骨关节炎大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均降低(P0.05),且补肾通络颗粒高、中剂量组关节软骨含水率亦较模型对照组降低(P0.05),而补肾通络颗粒低剂量组仅IL-1β、TNF-α水平低于模型对照组(P0.05)。与补肾通络颗粒低剂量组及美洛昔康组比较,补肾通络颗粒高剂量组膝骨关节炎大鼠血清IL-6水平及关节软骨含水率均降低(P0.05),补肾通络颗粒中剂量组仅关节软骨含水率降低(P0.05)。补肾通络颗粒高、中剂量组膝骨关节炎大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及关节软骨含水率差异均无统计学意义(P0.05)。结论:补肾通络颗粒可能通过调节大鼠膝骨关节炎动物模型血清细胞因子水平及降低关节软骨含水率达到治疗作用,尤以中、高剂量组作用显著。     

角质形成细胞源促成纤维细胞增殖的细胞因子研究

目的:研究正常角质形成细胞分泌的促进成纤维细胞增殖的细胞因子。方法:采用免疫组化法测定角质形成细胞所合成分泌的TGF-β1,IL-1α,分别单独及联合应用TGF-β1抗体I、L-1α抗体中和角质形成细胞条件培养基,以Cellcountingkit-8测定中和前后其对成纤维细胞增殖的影响。结果:正常角质形成细胞可合成分泌大量TGF-β1,IL-1α,抗体中和前后角质形成细胞条件培养基对成纤维细胞的增殖作用有明显差异。结论:正常角质形成细胞分泌TGF-β1,IL-1α及一些未知的活性因子,可促进成纤维细胞增殖。     

松萝提取物对胶原诱导性关节炎大鼠高迁移率族蛋白B1介导的细胞自噬及炎症因子的影响

目的：研究松萝提取物对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜细胞中凋亡相关因子的影响,进一步探讨松萝提取物对CIA大鼠关节炎症及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)介导的细胞自噬的影响。方法：将54只Wistar雌性大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,羟氯喹组,松萝提取物低、中、高剂量组,每组9只。松萝提取物低、中、高剂量组给药剂量分别为2 mg·kg^-1、6 mg·kg^-1、54 mg·kg^-1,羟氯喹组给药剂量为36 mg·kg^-1。建立CIA大鼠模型后,连续灌胃给药28 d。ELISA法检测血清中HMGB1、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度,RT-PCR检测HMGB1、Beclin1、PI3K C3 m RNA的表达,Western Blot法检测HMGB1、Beclin1、PI3K C3蛋白表达。结果：与空白对照组比较,各模型组HMGB1、TNF-α、IL-1β含量均增高,HMGB1、PI3K C3蛋白表达上升,Beclin1蛋白表达下降,差异有统计学意义(P &...     

骨成形蛋白7对人肾小管上皮细胞增殖和转分化的影响

目的观察骨成形蛋白7(BMP-7)对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响,以探讨其延缓小管间质纤维化病变的作用及其可能机制。方法将体外培养的人肾小管上皮细胞分为空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1 50ng/mlBMP-7组、TGF-β1 100ng/mlBMP-7组。应用MTT比色法测定BMP-7对人肾小管上皮细胞增殖的作用;间接免疫荧光法测定人肾小管上皮细胞α-SMA、角蛋白、波形蛋白的表达;流式细胞仪检测表达α-SMA阳性的HK-2细胞百分率;RT-PCR检测细胞中α-SMAmRNA的表达。结果与空白对照组相比,不同浓度的BMP-7处理HK-2细胞24、48h后,HK-2细胞均明显增殖(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,经TGF-β1刺激后,角蛋白表达减弱,α-SMA和波形蛋白表达增强;加入50ng/mlBMP-7处理24、48h后,细胞中α-SMA和波形蛋白表达减弱。流式细胞仪检测发现,加入50ng/mlBMP-7处理24、48h后,表达α-SMA的HK-2细胞阳性率逐渐下降,与TGF-β1处理组相比差异有显著性意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示,空白对照组无α-SMAmRNA表达,5ng/mlTGF-β1组与空白对照组相比,α-SMAmRNA表达明显上调(P<0.05),而TGF-β1 50ng/mlBMP-7组、TGF-β1 100ng/mlBMP-7组与TGF-β1组相比,α-SMAmRNA表达有下降趋势,但无显著性差异(P>0.05)。结论TGF-β1促进肾小管上皮细     

凝血酶对人皮肤成纤维细胞增殖作用的研究

目的：观察不同浓度的凝血酶对成纤维细胞的刺激作用,以及阿加曲班对这种刺激的抑制作用。方法：采用贴壁法进行人皮肤成纤维细胞原代培养,并传代、鉴定。用MTT法检测不同浓度凝血酶刺激后的成纤维细胞活力。用氯胺T法检测不同浓度凝血酶刺激后的细胞上清中羟脯氨酸含量。用免疫组化的方法检测凝血酶刺激后的成纤维细胞中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况。在培养液中加入阿加曲班后重复上述检测。结果：①培养的细胞为典型的成纤维细胞形态,波形蛋白单克隆抗体免疫组化染色呈阳性;②加入不同浓度凝血酶的各组吸光值均高于不加凝血酶组（A组）（P〈0.01）,加入阿加曲班和凝血酶的各组吸光值与A组无显著性差异（P〉0.05）;③加入不同浓度凝血酶的各组细胞上清中羟脯氨酸含量均高于不加凝血酶组（A组）（P〈0.01）,加入阿加曲班和凝血酶的各组上清中羟脯氨酸含量与A组相比无统计学差异（P〉0.05）;④凝血酶刺激后的成纤维细胞中有α-SMA的表达,加入阿加曲班后此种表达被抑制。结论：凝血酶能诱导成纤维细胞增殖、胶原分泌量增加,能刺激成纤维细胞表达α-SMA,使成纤维细胞转变为肌成纤维细胞。阿加曲班能抑制凝血酶的这种作用。     

补肾活血中药含药血清对滑膜细胞分泌TNF-α、IL-1β水平的影响

目的:探讨补肾活血中药是否可以抑制兔滑膜细胞分泌TNF-α、IL-1β等炎性因子。方法:制作补肾活血方含药血清,体外分离并培养兔滑膜细胞,并鉴定、传代。实验分含空白血清对照组、含10%西乐葆血清组、含5%、10%、20%中药血清组等5组。以西乐葆含药血清作为对照,将不同浓度的中西药血清加入培养传代的第3代滑膜细胞,继续培养。观察药物对滑膜细胞分泌TNF-α、IL-1β水平的影响。结果:补肾活血方含药血清具有和西乐葆含药血清类似的抑制滑膜细胞分泌TNF-α、IL-1β的作用,其抑制TNF-α分泌的作用随药物浓度的增加作用增强。结论:补肾活血中药可抑制滑膜细胞分泌TNF-α、IL-1β等炎性因子。     

逍遥散对雷公藤多苷致胃黏膜损伤大鼠TNF-α、IL-1β、NF-κB P65表达的影响

目的：研究逍遥散对雷公藤多苷致大鼠胃黏膜损伤的治疗效果及机制。方法：将24只SD大鼠随机分为空白对照组、雷公藤多苷组、逍遥散组,每组8只。雷公藤多苷组和逍遥散组通过灌胃雷公藤多苷混悬液(0.037 5 g·kg^-1)制备胃黏膜损伤模型大鼠,逍遥散组在灌服雷公藤多苷混悬液1 h前灌服逍遥散水煎液(19.27 g·kg^-1),给药每日1次,持续5周。观测各组大鼠体质量、摄食量;采用苏木素-伊红染色法(HE)观察各组大鼠胃黏膜病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化;免疫组化、实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(WB)检测胃黏膜IL-1β、TNF-α、核转录因子-κB P65(NF-κB P65)蛋白和基因表达。结果：胃黏膜损伤模型大鼠体质量及摄食量明显低于正常大鼠,胃黏膜细胞排列紊乱,腺上皮萎缩呈囊状,黏膜层变薄,毛细血管充血明显,细胞发生水肿现象,肠上皮化生明显,黏膜固有层内有大量中性粒细胞浸润,核分裂多见,核大深染,异型性明显,细胞增生、细胞凋亡与坏...     

乌头汤对膝骨关节炎大鼠软骨细胞焦亡相关基因表达的影响

目的：探讨乌头汤通过调控软骨细胞炎性焦亡途径延缓膝骨关节炎软骨退变的作用与机制。方法：将36只SD大鼠(雄性,8周龄)随机分为空白对照组、模型对照组和乌头汤组,每组12只。空白对照组不造模,模型对照组和乌头汤组采用改良Hulth法造模。空白对照组与模型对照组采用生理盐水(3 mg·kg^-1·d^-1)灌胃,乌头汤组采用乌头汤(生药浓度4.2 g·mL^-1)灌胃。干预8周后,麻醉状态下摘取大鼠膝关节软骨。采用Western blot检测不同组别关节软骨中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的蛋白含量表达;采用Real-time PCR检测不同组别关节软骨中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18的基因相对表达变化。结果：模型对照组和乌头汤组NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白含量与基因相对表达量均上调,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P <0.01);乌头汤组能够下调NLRP3、Caspa...