雷公藤多苷致雌性小鼠肾虚生殖功能低下动物模型的研究

目的探讨雷公藤多苷(GTW)致育龄期雌性小鼠生殖功能低下的药理作用机理,建立GTW致雌性小鼠生殖功能低下的动物模型。方法采用7～8周龄雌性性成熟昆明种小鼠,随机分为GTWA(60mg·kg-1·d-1)、B(40mg·kg-1·d-1)、C(30mg·kg-1·d-1)、D(20mg·kg-1·d-1)、E(15mg·kg-1·d-1)5组及正常对照组。观察给药后小鼠动情周期,分别在部分小鼠周期延长,周期均延长、不规则,周期完全紊乱、甚至消失等3个时段分批处死小鼠,考察GTW在不同时段对小鼠生殖功能的影响。采用放免法检测血清E2、P水平,计算卵巢、子宫指数,卵巢、子宫作组织形态学观察,计数各级卵泡、黄体数,测量子宫内膜、肌层厚度。结果给药10周时,A、B、C组子宫指数明显降低,子宫内膜、肌层变薄,卵巢成熟卵泡数及黄体数减少;A、B组E2水平降低,各组P水平及卵巢指数无明显变化。结论GTW连续给药10周,可损伤雌性小鼠生殖功能,造成肾虚生殖功能低下状态。建议GTW40mg·kg-1·d-1给药10周建立雌性小鼠肾虚生殖功能低下模型。     

雷公藤多甙致大鼠生殖功能低下模型初探

目的:通过测定大鼠动情周期、卵巢和子宫指数、性激素水平及透射电镜下观察卵巢超微结构的改变,探索生殖功能低下大鼠模型的制备方法,进而为临床治疗此类疾病提供可靠的实验依据。方法:采用12周龄SD雌性大鼠20只,随机分为正常组和模型组,模型组借鉴前期研究中小鼠的造模剂量和时间,采用雷公藤多甙40mg/(kg·d)灌胃,连续10周,正常组不给药。分别观察2组大鼠动情周期、性激素、子宫和卵巢指数,并观察卵巢超微结构的改变。结果:与正常组相比,模型组大鼠动情周期紊乱,表现为动情周期缺失、不完整或延长,血清E2/P水平明显下降,子宫及卵巢质量下降且卵巢组织结构受损。结论:胃饲雷公藤多甙40mg/(kg·d)10周能损伤大鼠生殖功能,造成雌性大鼠生殖功能低下。     

乌鸡白凤片对4-去氧乙烯基环已烯所致小鼠早发性卵巢功能不全的影响

[目的]运用4-去氧乙烯基环已烯（VCD）建立早发性卵巢功能不全（POI）小鼠模型,探究乌鸡白凤片对VCD致POI小鼠的治疗作用。[方法] 1）建立POI小鼠模型：8周龄雌性昆明小鼠60只,随机分为正常（CON）组30只,模型（MOD）组30只。MOD组腹腔注射160 mg/（kg·d）VCD复制POI模型,CON组注射同体积芝麻油。造模期间每日阴道涂片观察动情周期;造模第15～65天,每5 d进行眼眶取血,酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清促卵泡生长素（FSH）、促黄体生成素（LH）水平;造模第45～65天,每5 d取小鼠子宫卵巢,称质量后计算脏器指数,苏木精-伊红（HE）染色观察卵巢形态学改变。2）乌鸡白凤片对POI小鼠的治疗作用：按照上述造模方法再选取8周龄雌性昆明小鼠60只,造模成功后随机分为MOD组、戊酸雌二醇（E2）组[0.3 mg/（kg·d）]、乌鸡白凤片低、中、高剂量组[410、820、1640 mg/（kg·d）],每组10只。CON组和MOD组予以等体积羧甲基纤维素钠（CMC-Na）灌胃。每日1次,连续给药45 d,给药期间观察小鼠动情周期。于给药第46天处死小...     

坤泰胶囊对卵巢储备功能下降大鼠的影响

目的探讨坤泰胶囊对卵巢储备功能下降大鼠的影响。方法雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、坤泰胶囊组(0.5 g/kg)、西药组[戊酸雌二醇片(0.12 mg/kg)、黄体酮胶囊(18 mg/kg)]、中西药组,雷公藤多苷片(50 mg/kg)灌胃14 d建立卵巢储备功能下降模型。ELISA法检测抗苗勒氏管激素(AMH)、雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)水平,HE染色观察卵巢变化,Western blot、实时荧光定量PCR检测大鼠卵巢组织Smad2、Smad3、Smad7表达。结果与模型组比较,坤泰胶囊组、中西药组、西药组能显著提高E2、AMH水平及Smad2、Smad3表达,且显著降低Smad7表达(P<0.05);中西药组、西药组能显著降低FSH、LH水平(P<0.05)。药物干预后,各级卵泡发育,卵泡结构完整,卵泡外围包绕的颗粒细胞层数、黄体数量多于模型组,排列规则,发育尚可。结论坤泰胶囊可能通过调控卵巢组织Smad2/3/7表达,促进及维持卵泡发育,从而改善卵巢储备功能下降大鼠卵巢功能。     

补肾填精中药仙子益真胶囊对卵巢早衰模型小鼠卵巢PI3K/AKT通路的影响

目的研究补肾填精中药仙子益真胶囊对卵巢早衰小鼠磷酯酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、Ki67蛋白表达及各级卵泡数量的影响。方法选用动情周期规律的57只SPF级雌性C57BL/6J型小鼠随机分为空白对照组(7只)、模型组(50只)。模型组使用雷公藤多苷片造模,将成功造模的35只小鼠随机分为模型组、益真低剂量组[仙子益真胶囊0. 75 g/(kg·d)]、益真中剂量组[仙子益真胶囊1. 5 g/(kg·d)]、益真高剂量组[仙子益真胶囊3. 0 g/(kg·d)]和西药组[戊酸雌二醇片0. 15 mg/(kg·d)],每组7只。给予相应药物治疗,治疗21天后采用HE染色法检测卵巢组织的形态变化,计算各级卵泡数目,免疫组化方法检测Ki67蛋白表达,Western blot法检测小鼠卵巢AKT及PI3K蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组原始卵泡、次级卵泡、窦状卵泡百分比降低,Ki67表达、AKT及PI3K蛋白表达降低(P 0. 05,P 0. 01),闭锁卵泡百分比升高(P 0. 01)。与模型组比较,益真低、中、高剂量组及西药组原始卵泡、次级卵泡、窦状卵泡百分比升高,闭锁卵泡百分比降低(P 0. 05,P 0. 01),Ki67表达、AKT及PI3K蛋白表达增高(P 0. 05)。结论补肾填精中药仙子益真胶囊改善卵巢功能的机制可能与提高了卵巢细胞中PI3K/AKT通路活性及细胞增殖状态相关,从而增加了原始卵泡、次级卵泡、窦状卵泡的含量,降低了闭锁卵泡的含量。     

锁阳蜜干预雷公藤多甙对小鼠生育影响的研究

目的：观察不同时间和剂量的雷公藤多甙（GTW）对昆明小鼠怀孕率的影响;锁阳蜜（CSR）干预和停用GTW后的自愈倾向。方法：空白组小鼠给1％羧甲基纤维素（CMC）溶液;GTW分为5个剂量组,灌服45mg／kg、30mg／kg、22．5mg／kg、15mg／kg、7．5mg／kg的GTW混悬液;联合组为锁阳蜜水煎剂3．9g／kg＋GTW7．5mg／kg、7．8mg／kg＋GTW30mg／kg,停药组给30mg／kgGTW混悬液,以上各组先灌胃20d。20d后与成年雌鼠1：2合笼7d。第28d起各组按照剂量继续给药,停药组停用GTW。20d后再次合笼7d。每次合笼后观察雌鼠怀孕率。结果：随着GTW给药时间的延长和剂量的增加雌鼠怀孕率呈下降趋势。45mg／kg组给药40d后怀孕率降为0％（P〈0．01）。锁阳蜜7．8g／kg组怀孕率由20d时的20％上升到40d时的65％。停药组怀孕率由20％上升到55％,与同一时间段的GTW组比较P〈0．05,与空白组比较P〉0．05。结论：GTW对雄性小鼠的生殖毒性是呈时间依赖和剂量依赖的。锁阳蜜可以改善GTW对雄鼠生殖系统的抑制作用,提高雌鼠的怀孕率。停用GTW20d,怀孕率可以基本恢复正常。     

孕康口服液对早发性卵巢功能不全小鼠的影响

目的 观察孕康口服液对早发性卵巢功能不全小鼠的影响.方法 采用正常动情周期ICR小鼠灌胃给予雷公藤多苷溶液40 mg/kg构建早发性卵巢功能不全模型,大鼠随机分为正常组、模型组及孕康口服液高、中、低剂量组(36、18、9 mL/kg),灌胃给药10周.给药期间定期观察小鼠动情周期;ELISA法检测血清中雌二醇(E2)、孕激素(P)、促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、抗苗勒管激素(AMH)、抑制素B(INHB)水平;HE染色观察卵巢组织形态;TUNEL染色检测卵巢颗粒细胞凋亡;免疫组化检测Bax、Bcl-2蛋白表达.结果 与模型组比较,孕康口服液高剂量组能缩短小鼠动情周期(P<0.05),改善卵巢组织形态学并增加窦状卵泡数量(P<0.05);升高血清E2水平(P<0.05);减少卵巢颗粒细胞凋亡数量,并能降低Bax表达以及升高Bcl-2表达.结论 孕康口服液能改善雷公藤多苷致小鼠早发性卵巢功能不全,其机制可能是通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,减少卵巢颗粒细胞凋亡.     

雷公藤多苷通过PI3K/AKT信号通路影响大鼠卵泡发育的实验研究

目的:基于PI3K/AKT信号通路探索雷公藤多苷片致大鼠卵泡发育障碍的分子机制。方法:将动情周期正常的7⁸周、体重2008周、体重200²20g的雌性SD大鼠18只,随机分为对照组和模型组,每组9只,模型组以雷公藤多苷40mg/kg剂量灌胃,对照组以等量的蒸馏水灌胃,灌胃第8周始行阴道脱落细胞检查观察大鼠性周期变化,当模型组所有大鼠出现动情周期延长甚至紊乱时,称重、采血后处死大鼠,摘取双侧卵巢。观察大鼠体重、卵巢湿重、卵巢指数、动情周期、血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平、大鼠卵巢组织形态学以及大鼠卵巢组织p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K表达的变化。结果:模型组大鼠动情周期较对照组明显延长,体重,卵巢湿重,卵巢指数,血清E2、P水平均明显低于对照组;模型组次级卵泡、窦状卵泡占总卵泡百分比均明显低于对照组,闭锁卵泡占总卵泡百分比明显高于对照组,始基卵泡占总卵泡百分比无明显变化;模型组大鼠卵巢组织p-AKT、p-mTOR、pp70S6K表达水平明显低于对照组。结论:雷公藤多苷可能通过调控PI3K/AKT信号通路抑制大鼠卵泡发育。     

滋肾育胎丸对DOR大鼠内分泌的影响

目的研究滋肾育胎丸(党参、续断、巴戟天等)对卵巢储备功能低下(DOR)大鼠内分泌的影响。方法灌胃55 mg/(kg·d)雷公藤多苷诱导正常动情周期雌性SD大鼠14 d以建立DOR模型,再分为滋肾育胎丸高、低剂量组,补佳乐组,模型对照组,阴性对照组。给药35 d后,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕酮(P)水平,免疫组化法检测卵巢组织雌激素受体(ER)、卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)表达。结果与阴性对照组比较,模型对照组E2、FSH、LH、P水平,ER、FSHR、LHR表达有显著变化(P0.05),但两组体质量、卵巢指数、子宫指数、血清FSH/LH水平无显著性差异(P0.05)。与模型对照组比较,滋肾育胎丸高、低剂量组,补佳乐组E2水平升高,FSH、LH水平降低,并且它们也促进ER表达,抑制FSHR、LHR过度表达,差异有统计学意义(P0.05)。不同剂量组P水平显著升高(P0.05),高剂量组FSH/LH显著下降(P0.05),各干预组体质量、卵巢指数和子宫指数无显著性差异(P0.05)。结论滋肾育胎丸可通过影响卵巢组织激素受体表达、调节内分泌功能来改善DOR大鼠卵巢储备功能。     

针刺联合护卵汤对雷公藤多甙致卵巢储备功能受损大鼠卵巢形态及雌激素受体表达的影响

目的观察针刺联合护卵汤对雷公藤多甙致卵巢储备功能受损大鼠卵巢形态及雌激素受体表达的影响,研究其作用机理。方法 SPF级4~6月龄SD雌性大鼠随机分为正常对照组、模型组、针刺组、中药组、针药组(针刺加中药)以及西药组。除正常对照组不参与造模外,其余各组大鼠均以雷公藤多甙片50mg/kg灌胃,建立与人类相似的生理性卵巢储备功能下降模型。每日9:00时,正常对照组予等量生理盐水灌胃,造模大鼠灌服雷公藤多苷药液;15:00时,中药组、针药组予护卵汤药液灌胃,西药组予克龄蒙药液灌胃,针刺组、模型组和正常对照组予等量生理盐水灌胃,针刺组、针药组灌胃同时予以针刺,连续16d。采用HE染色后观察子宫、卵巢组织形态学变化,免疫组织化学法观察卵巢ER-蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组卵巢指数、子宫指数明显缩小,原始卵泡与初级卵泡数目明显减少;卵巢ER-表达明显减少(0.05);各给药组卵巢、子宫指数增大,原始卵泡与初级卵泡数目增多,ER-表达明显增加(0.05,0.01),针药组尤为明显。结论针刺联合护卵汤可能通过上调卵巢ER-蛋白表达,改善卵巢功能。     

定坤丹对雷公藤多苷诱导卵巢储备功能低下小鼠性激素和卵泡计数的影响

目的:建立雷公藤多苷诱导卵巢储备功能低下(DOR)小鼠模型,探讨定坤丹对DOR的治疗作用,为其临床应用提供科学依据。方法:将60只动情周期规律的雌性小鼠随机分为空白组、模型组、定坤丹低、中、高剂量组和戊酸雌二醇组,每组10只。除空白组外,其余各组予40 mg·kg~(-1)雷公藤多苷混悬液灌胃;同时定坤丹低、中、高剂量组分别予1. 64,3. 28,6. 56 g·kg~(-1)定坤丹混悬液灌胃,戊酸雌二醇组予0. 15 mg·kg~(-1)戊酸雌二醇混悬液灌胃,1次/d,连续30 d。观察小鼠的一般状况、体质量、性腺指数和动情周期变化,采用放射免疫法检测血清促卵泡生成素(FSH),促黄体生成素(LH)和雌激素(E_2)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢形态和卵泡计数。结果:与空白组比较,模型组小鼠动情周期处于紊乱状态,子宫和卵巢指数明显下降(P0. 05),血清FSH水平明显上升(P0. 05),LH呈上升趋势,E_2呈下降趋势,各级生长卵泡和黄体数减少、闭锁卵泡明显增加(P0. 05)。与模型组比较,定坤丹组半数小鼠恢复规律动情周期,戊酸雌二醇组小鼠动情周期停滞在动情期;定坤丹中、高剂量组和戊酸雌二醇组小鼠子宫和卵巢指数增加,血清FSH值明显下降(P0. 05),LH呈下降趋势;定坤丹高剂量组和戊酸雌二醇组血清E_2值明显上升(P0. 05);定坤丹能增加各级生长卵泡和黄体数、减少闭锁卵泡数,其中以中剂量效果更佳(P0. 05),戊酸雌二醇组能明显增加原始卵泡、窦状卵泡和黄体数(P0. 05),但不能减少闭锁卵泡数。结论:定坤丹能够通过改善血清性激素,促进卵泡发育、减少卵泡闭锁从而对DOR起到治疗作用。     

针刺对卵巢储备功能减退模型大鼠血清炎性因子及卵巢组织Nrf2/HO-1/NLRP3信号通路的影响

目的探讨针刺对卵巢储备功能减退模型大鼠动情周期的影响及可能作用机制。方法将40只动情周期正常的SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、激素组,每组10只。除空白组外,其余3组大鼠予雷公藤多苷片混悬液按50mg/(kg·d)连续灌胃14天建立卵巢储备功能减退大鼠模型。针刺组在每日雷公藤多苷灌胃1h后进行针刺干预,选取"肾俞""关元""中脘"穴,每次行针10s,共留针10min。同时激素组进行雌激素、孕激素序贯疗法。实验第8天起观察大鼠动情周期,第15天采用HE染色法观察各组大鼠卵巢中卵泡、黄体发育情况;检测大鼠血清激素[包括抗苗勒管激素(AMH)、雌二醇(E_2)、卵泡刺激素(FSH)]及炎性因子[包括肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素21(IL-21)、白细胞介素10(IL-10)]水平;检测卵巢组织中转录因子核因子E_2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达及Nrf2、HO-1、核苷酸结合寡聚化结构域受体3(NLRP3)mRNA相对表达量。结果与空白组比较,模型组大鼠的动情周期延长或紊乱,生长卵泡颗粒细胞层减少,黄体萎缩,闭锁卵泡和炎性浸润增多;血清AMH、E_2、IL-10水平降低,FSH、TNF-α、IL-21水平升高,卵巢组织中Nrf2、HO-1蛋白和mRNA表达降低,NLRP3 mRNA升高(P0.01)。与模型组比较,针刺组及激素组生长卵泡颗粒细胞层增多,闭锁卵泡和炎性浸润减少;血清AMH、E_2、IL-10升高,FSH、IL-21下降;卵巢组织中Nrf2、HO-1蛋白和mRNA增高,NLRP3 mRNA降低(P0.05或P0.01)。针刺组和激素组各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论针刺能够恢复卵巢储备功能减退模型大鼠的动情周期,有效调节大鼠性激素水平,可能通过Nrf2/HO-1信号通路抑制NLRP3 mRNA表达,从而抑制炎症反应。     

雷公藤多苷对大鼠卵巢血管生成及血供的影响

目的：观察雷公藤多苷对卵巢血管生成及血供的影响,探索其致卵巢功能损伤的机理,为建立卵巢功能低下动物模型奠定基础。方法：选12周龄SD雌性大鼠20只,随机分为正常组和模型组,模型组采用雷公藤多苷40mg/（kg.d）灌胃,连续10周,正常组不给药。给药结束后处死动物;免疫组化法检测Endostatin、VEGF/Flk-1;HE染色后在光镜下分析卵巢血管形态。结果：予雷公藤多苷40mg/kg/d连续灌胃10周,可造成大鼠动情周期紊乱或消失,卵巢血管中Endostatin表达显著升高,VEGF及Flk-1的表达显著降低;卵巢血管横截面积变小而血管壁厚度面积比增大。结论：雷公藤多苷可造成大鼠卵巢血管生成障碍,血液供应减少,导致卵泡发育障碍,从而影响卵巢功能。     

探索建立雷公藤多苷致早发性卵巢功能不全肾虚血瘀证的小鼠模型

为研究补肾促卵方治疗早发性卵巢功能不全的作用机制,采用雷公藤多苷灌胃建立早发性卵巢功能不全肾虚血瘀证小鼠模型并进行卵巢功能和生育力评价。60只SPF级动情周期规则的雌性Blab/c小鼠随机分为空白1组、空白2组、空白生育组、模型组、模型恢复组、模型生育组,每组10只。模型组予40 mg·kg-1雷公藤多苷混悬液灌胃,空白组予等量生理盐水灌胃,每日2次,连续14 d。第15天空白1组和模型组解剖取材;其余4组终止雷公藤灌胃恢复正常喂养,空白2组和模型恢复组连续观察动情周期变化14 d后解剖取材,观察各组一般表征、动情周期、血清性激素、性腺指数、卵巢形态及卵泡计数、卵巢血管内皮生长因子(VEFG)和内皮抑制素(ES)的变化。空白生育组和模型生育组以雌雄2∶1进行合笼,记录雌鼠受孕率、产仔数、仔鼠存活数及雌雄比例。造模期间模型组和模型生育组小鼠体质量下降(P0. 05)。与空白1组相比,模型组小鼠动情周期紊乱,卵巢及子宫指数下降,原始及生长卵泡数量减少、闭锁卵泡数量增多,VEGF表达下降、ES表达升高(P0. 05)。与空白2组相比,模型恢复组小鼠动情周期仍紊乱,血清卵泡刺激素(FSH)升高,卵巢指数未恢复,原始及生长卵泡数量仍减少、闭锁卵泡数量仍增加,VEGF表达仍下降(P0. 05)。与空白生育组相比,模型生育组小鼠产仔数和仔鼠存活数下降(P0. 05)。40 mg·kg-1雷公藤多苷每日2次,连续灌胃14 d可成功建立早发性卵巢功能不全肾虚血瘀证小鼠模型,停药14 d后模型小鼠卵巢功能尚未恢复,为后续补肾促卵方的干预性实验治疗时间提供证据。     

菟丝子总提物对雷公藤多苷POF大鼠模型影响的探讨

目的:探讨菟丝子总提物对雷公藤多苷POF大鼠模型卵巢功能修复作用,为临床治疗POF提供药效学依据,并初步探讨其作用机制。方法:采用雷公藤多苷75mg/(kg·30d)建立POF大鼠模型,共44只,随机分成4组:对照组、模型组、补佳乐组及菟丝子总提物组(TSZ组)。30d造模成功后,TSZ组以菟丝子总提物水溶液、补佳乐组予补佳乐水溶液灌胃;对照组及模型组予同等量纯净水灌胃,日一次,连续30d。灌胃期间每日观察大鼠动情周期的变化;实验结束后选择非动情期大鼠处死,检测血清E2、FSH、LH、AMH以及观察卵泡计数、卵巢病理切片。结果:造模至10d开始除对照组外各组开始出现动情周期紊乱、延长。与模型组,两治疗组E2水平升高,FSH、LH、AMH升高(P0.01或0.05);两治疗组生长卵泡及黄体增多(P0.01或0.05),闭锁卵泡减少(P0.05);两治疗组组间比较无显著性差异(P0.05);治疗组大鼠卵巢镜下各级卵泡较模型组明显增多,可见成熟卵泡,黄体数量增加,可见少量闭锁卵泡,间质未见明显纤维组织增生。结论:菟丝子总提物可显著提高卵巢储备能力,修复卵巢组织损伤。     

雷公藤多苷片对Ⅱ型胶原诱导性关节炎雌性大鼠生殖毒性的影响

为研究雷公藤多苷片对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)雌性大鼠生殖系统的影响作用,将50只SD大鼠随机分为正常对照组(Con),模型组(CIA)及雷公藤多苷片临床等效剂量1,2,4倍剂量组(9,18,36 mg·kg-1·d-1),每组10只,首次免疫后当天开始灌胃给药,每天1次,给药42 d。分别于第21,42天取材,计算子宫和卵巢脏器指数;光镜下观察子宫和卵巢组织病理形态学改变; ELISA法检测血清中雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、17α-羟化酶(CYP17A1)及细胞色素P450 19A1(CYP19A1)的含量变化;免疫组织化学法观察子宫、卵巢凋亡通路相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果表明,与Con组比较,CIA组能降低大鼠子宫腺体数(P0.05),其他未见明显变化;与CIA组比较,雷公藤多苷片各给药组未改变大鼠子宫和卵巢的脏器指数,对子宫腺体数、卵巢内总卵泡数、成熟卵泡数和黄体数、血管及线粒体分布等有一定的抑制趋势,也有轻度增高闭锁卵泡数的作用,但各组织病理学量化指标均无统计学差异;除了2倍临床剂量的雷公藤多苷片给药42 d后能明显降低血清CYP19A1含量(P0.05),各给药组对血清性激素E2、FSH、LH及雌激素合成关键酶CYP17A1等均无显著变化;中、高剂量雷公藤多苷片能提高子宫和卵巢组织促凋亡蛋白Bax的表达(P0.05,P0.01),所有给药组均能下调凋亡抑制蛋白Bcl-2表达(P0.05,P0.01,P0.001),其中42 d给药比21 d明显。综上表明,4倍和4倍以下临床等效剂量的雷公藤多苷片口服42 d未引起CIA大鼠生殖器官明显的毒性反应,但能不同程度降低血清雌激素合成关键酶CYP19A1水平并影响子宫和卵巢组织中凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的含量变化,相关机制有待进一步的研究阐明。     

蒙药五根油剂对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的抗衰老作用研究

目的:研究蒙药五根油剂的抗衰老作用。方法:将60只昆明小鼠(雌雄各半)随机分为5组,即正常组、模型组、蒙药五根油剂低剂量组和高剂量组、维生素E组,除正常对照组外,其余各组均采用颈背部皮下注射D-半乳糖,150 mg/(kg·d),建立亚急性衰老模型,同时分别灌胃给药蒙药五根油剂低剂量[0.8 g/(kg·d)]、高剂量[3.2 g/(kg·d)]和维生素E[0.86 mg/(kg·d)]。连续给药7周后处死动物,测定血清和脑组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)及丙二醛(MDA)含量变化;检测脾脏和胸腺指数变化。结果:蒙药五根油剂各给药组可显著提高衰老小鼠血清及脑组织中的SOD、GSH-px含量,降低MDA含量;降低脾脏指数和胸腺指数,其中高剂量组的作用优于低剂量组。结论:蒙药五根油剂可明显提高衰老小鼠抗氧化能力,具有抗衰老作用。     

乌鳖颗粒拮抗D半乳糖致小鼠卵巢早衰的实验研究

目的:探讨D半乳糖致雌性小鼠卵巢早衰动物模型的可行性和乌鳖颗粒的作用机理。方法:选取有正常动情周期的雌性小鼠,随机分为7组,每组10只,分别为正常组、模型组、己烯雌酚组、六味地黄丸组、乌鳖颗粒大、中、小剂量组。除正常组外,其余各组按每天0.5mL/只的剂量颈背部皮下注射5%D半乳糖溶液。第11天开始,灌胃给予治疗药,连续给药32天。每天定时观察阴道细胞,确定动情周期变化。实验末取血清测E2血清水平,取子宫和卵巢称湿重,计算子宫指数和卵巢指数,卵巢、子宫作组织形态学观察。结果:模型组小鼠动情周期紊乱,动情间期延长,乌鳖颗粒各剂量组小鼠在给药2周左右出现动情期延长。乌鳖颗粒各剂量组的卵巢指数、子宫指数与模型组小鼠比较具有显著性差异(P<0.01)。模型组小鼠的血清E2水平明显下降,与正常组比较具有显著性差异(P<0.01)。乌鳖颗粒大、中剂量组血清E2水平比模型组有明显的升高,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。乌鳖颗粒各剂量组的卵巢、子宫组织形态学明显改善。结论:乌鳖颗粒能促进子宫、卵巢的生长发育,改善卵巢、子宫的组织形态,调节卵巢内分泌的激素水平。     

顺铂诱导大鼠卵巢早衰的实验研究

目的腹腔注射不同剂量的顺铂制备卵巢早衰(POF)大鼠动物模型,摸索成模的最佳致病剂量。方法成熟雌性Wistar大鼠分5组腹腔注射不同剂量的顺铂,A组3 mg/kg×7 d,B组2.5 mg/kg×7 d,C组2.0 mg/kg×7 d,D组2.5 mg/kg×5 d,E组予生理盐水,建立大鼠卵巢早衰模型。观察大鼠体质量、动情周期、血清性激素水平、脏器系数及形态学改变。结果腹腔注射顺铂后,A、B、C、D、E组大鼠病死率分别为70%,50%,30%,0,0。顺铂组体质量均明显下降,大鼠动情周期延长。C组血清FSH水平显著高于E组(P<0.05),D组与E组无显著性差异(P>0.05)。血清E2水平C、D 2组均显著低于E组(P<0.05)。卵巢及子宫指数C组显著低于E组(P<0.05),肾上腺指数C组显著高于E组(P<0.05)。顺铂组大鼠卵巢原始卵泡数和初级卵泡数均明显降低,而闭锁卵泡数均明显增加。结论 2.0 mg/(kg.7 d)模型组是最理想的卵巢早衰动物模型。此化疗损伤性卵巢早衰大鼠模型血FSH明显升高,卵巢组织学衰退性改变与人类化疗损伤性卵巢早衰病变过程相似。     

班氏促卵助孕汤对雷公藤多苷致大鼠卵巢功能低下模型影响的实验研究

目的建立稳定可靠的雷公藤多苷致大鼠卵巢功能低下模型,探讨国医大师班秀文补肾方剂——班氏促卵助孕汤对雷公藤多苷致卵巢功能低下大鼠的治疗作用,为今后用中药治疗卵巢功能低下提供实验基础。方法选择有正常动情周期的7～8周的育龄期SD大鼠,连续雷公藤多苷片以40mg/kg·d灌胃10周造模成功后,将45只大鼠按随机数字表法随机分为模型对照组、西药对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组5组,加上正常对照组,共6组。中药治疗组:分别给予给班氏促卵助孕汤中药原液1.02g/100g·d、0.507g/100g·d、0.254g/100g·d,每次0.5m L/100g,连续2周进行治疗。西药对照组:先给予戌酸雌二醇0.028mg/m L浓度,每次以0.5m L/100g灌胃,连续4天;然后给予醋酸甲羟孕酮片0.172mg/m L浓度,每次以0.5m L/100g灌胃,在第4天灌胃一次,停1天后,继续按以上序贯方法用药,连续两周。阴性对照组和模型组:造模后按每天0.5m L/100g纯净水灌胃,共2周。观察大鼠的一般情况、体重、计算卵巢指数、石蜡切片,观察卵巢的形态学变化,运用放射免疫法检测血清性激素六项水平。结果连续中药给药和西药序贯治疗2周后,模型组和正常对照组相比,造模停止后一般情况有所改善,但恢复速度比中药治疗组和西药治疗组慢。模型组的动情周期、卵巢指数、E2和P分泌仍低于正常对照组(P0.01)。给药治疗后,与模型组相比,中药高剂量治疗组和西药组的动情周期恢复至正常水平(P0.05),卵巢指数提高(P0.05),E2和P分泌增加(P0.05),生长卵泡数和黄体数数量增加(P0.05)。但中药中剂量组和中药低剂量组在动情周期和卵巢指数、E_2和P的分泌以及生长卵泡、黄体数上差异均不明显(P均0.05)。结论连续雷公藤多苷40mg/kg·d灌胃10周后,对雌性大鼠有一定的生殖毒性,可降低卵巢功能;班氏促卵助孕汤能明显改善卵巢功能低下状况,调节卵巢功能。