三氧化二砷对人脑胶质瘤SHG44细胞放射增敏作用的研究

目的研究三氧化二砷(As2O3)对人脑胶质瘤SHG44细胞的放射增敏作用。方法以SHG44细胞为实验对象,3 H-TdR掺入法检测SHG44细胞DNA的合成率;流式细胞法检测细胞的周期分布。结果 As2O3与照射联合作用于SHG44细胞,表现为剂量-生存曲线左移,2Gy剂量照射下的存活分数(SF2)下降,平均致死剂量(D0)减低,准阈剂量(Dq)变小,细胞的放射敏感性明显增强;As2O3影响细胞周期再分布,对射线敏感的G2/M期细胞比例增加,对射线抗拒的S期细胞比例减少。结论 As2O3能增加SHG44细胞的放射敏感性,其机制可能与诱导细胞凋亡、影响细胞周期再分布有关。     

CDK7抑制剂THZ1对人胶质瘤细胞U251放疗的增敏性

目的 探讨细胞周期蛋白酶抑制剂7(CDK7)THZ1对人胶质瘤细胞U251的体外放射增敏性.方法 体外培养人胶质瘤细胞U251.MTT检测THZ1对U251的毒性作用,绘制不同浓度(0、8、16、32、64、128、256、512 noml/L)THZ1处理下的细胞存活曲线,并计算其IC50及IC20,将IC20作为后...     

吉西他滨对鼻咽癌HNE2细胞株的放射增敏作用及其机制研究

目的研究低浓度吉西他滨对人鼻咽癌HNE2细胞系的放射增敏作用及其机制,并探讨用药后最佳放射时间。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定吉西他滨24h IC10值。以该浓度吉西他滨处理HNE2细胞4、8、12、24h,弃药后立即给予6MV X线单次照射0、2、4、6、8Gy,用克隆形成实验计算各组的放射增敏比,流式细胞仪法分别检测、比较各组的细胞凋亡率及细胞周期变化。Western blot法测定各组细胞凋亡相关基因bcl-2、bax的表达水平。结果吉西他滨的24h IC10值为0.21μg/mL,吉西他滨处理4、8、12、24h后的放射增敏比分别为1.09、1.18、1.23和1.37。流式细胞仪检测显示吉西他滨联合射线主要诱导S期阻滞,且S期细胞比例及细胞凋亡率随吉西他滨作用时间延长而增加。4组中bcl-2的表达随作用时间延长逐步下降,而bax的表达则逐步上升。结论低浓度吉西他滨对HNE2细胞有放射增敏作用,其增敏比随作用时间的延长而延长,以作用24h后增敏作用最强。增敏机制可能与诱导S期阻滞及促进凋亡有关。     

Ⅰ型γ分泌酶抑制剂抗恶性胶质瘤的体外/体内实验研究

目的 明确γ-分泌酶抑制剂(γ-secretase inhibtor,GSI)对恶性胶质瘤细胞体外、体内的抗瘤作用,并初步探讨其机制。方法 通过MTT法观察GSI-Ⅰ对胶质瘤细胞株U87及U251生长曲线的抑制作用;以DAPI染色法观察GSI-Ⅰ作用后是否导致细胞凋亡;用荧光定量RT-PCR法检测GSI-Ⅰ对胶质瘤细胞中Notch信号的阻断作用,并通过Western-blot检测GSI-Ⅰ对胶质瘤细胞内抗凋亡蛋白Akt的表达及磷酸化水平的影响;最后,采用裸鼠成瘤实验验证GSI-Ⅰ对胶质瘤细胞体内增殖的抑制作用,以及GSI-Ⅰ对瘤组织的毒性作用。结果 GSI-Ⅰ可显著抑制U87及U251细胞的生长曲线,并直接诱导细胞凋亡。GSI-Ⅰ可有效阻断细胞内Notch信号通路转导,并下调抗凋亡蛋白Akt的活性。动物实验结果显示,GSI-Ⅰ预处理可降低U251细胞的体内成瘤能力,而瘤周注射GSI-Ⅰ可导致瘤组织大面积坏死。结论 GSI-Ⅰ有明确的体外、体内抗恶性胶质瘤效应,其可能机制为下调细胞内Notch信号通路及抗凋亡通路,但具体分子机制仍需进一步研究。     

多西紫杉醇对大肠癌细胞放射增敏的作用研究

目的观察多西紫杉醇对大肠癌细胞株SW480的放射增敏作用及其机制。方法采用MTr法检测多西紫杉醇对SW480增殖的影响;克隆形成实验检测多西紫杉醇对SW480细胞的放射敏感性,并绘制存活曲线;流式细胞仪测定多西紫杉醇对SW480细胞周期的影响和细胞凋亡的变化。结果多西紫杉醇对SW480细胞株具有抑制增殖作用,随剂量增加和时间的延长而增强。多西紫杉醇＋放疗组的SF2、D0、Dq较单纯放疗组均有所下降,多西紫杉醇的放射增益比（SER）为1．73。多西紫杉醇使SW480细胞发生GeM期阻滞,并抑制S期的比例;与放疗联合时SW480细胞GJM期阻滞更明显。多西紫杉醇增加放疗引起的细胞凋亡。结论多西紫杉醇能诱导肠癌细胞SW480凋亡增加,同时细胞周期再分布,从而增加其放射敏感性。     

复方苦参注射液对人宫颈癌细胞株 Hela 的体外放射增敏作用

目的 观察复方苦参注射液对Hela细胞的毒性和体外放射增敏作用.方法 MTT法观察复方苦参注射液对Hela细胞的抑制效应,绘制量效曲线测IC10浓度.用此药物浓度分别作用细胞24 h和48 h,置于6MV的X线下单次照射.克隆形成法计算细胞存活率,单靶多击数学模型拟合细胞存活曲线,求出各组的D0值和Dq值,计算放射增敏...     

己酮可可碱对人肝癌细胞株Hep3b的放射增敏作用

目的观察己酮可可碱(PTX)对人肝癌细胞株Hep3b的放射增敏作用。方法以Hep3b人肝癌细胞株为研究对象,应用MTT法检测PTX的药物毒性;应用克隆形成实验(colony forming assay)观察PTX对Hep3b细胞株的放射敏感性的影响;流式细胞仪(FCM)技术测定照射后Hep3b细胞株细胞周期的再分布并观察PTX能否去除放射引起的细胞周期阻滞。结果不同浓度的PTX作用于人肝癌Hep3b细胞株48 h后,其细胞毒性呈剂量依赖性,最适浓度为2 mmol/L。PTX能明显降低放射后Hep3b细胞的克隆形成率,其放射增敏比为2.68±0.24(P>0.05)。FCM实验结果显示,照射明显导致Hep3b细胞株G2期阻滞,Hep3b细胞在照射后20 h G2/M期比例分别为86.8%和14.8%(P<0.05),PTX能够去除放射引起的Hep3b细胞G2期阻滞。结论PTX对Hep3b细胞株有放射增敏作用,其作用机制可能与PTX去除放射引起的G2期阻滞有关。     

冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞的放射增敏作用

目的:观察冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞的放射增敏作用,并探讨其可能机制。方法:用克隆形成实验计算药物的放射增敏比,流式细胞仪法分别检测、比较单纯药物组、单纯照射组、联合治疗组各组的细胞周期变化。结果:冬凌草甲素的放射增敏比为1.227,流式细胞仪法分析显示,联合治疗组的细胞周期变化以G2/M期阻滞为主(45.2%),与单纯药物组、单纯照射组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞具有一定的放射增敏作用,其机制可能与改变细胞周期有关。     

中药对恶性肿瘤的放射增敏作用研究

大量的临床和实验研究显示,许多中药可起到放疗增敏作用,并且具有疗效确切、毒性相对较低的特点.中药与放射疗法合用治疗恶性肿瘤,能显著提高原发灶和浅表转移灶的消退,改善患者临床症状,延长患者生存期.     

AKT抑制剂对鼻咽癌细胞株CNE1的放疗增敏作用

【目的】 探讨Akt抑制剂124005对人鼻咽癌细胞CNE1放射增敏效应及其潜在机制。【方法】 CCK8法检测不同浓度124005对人鼻咽癌CNE1细胞的抑制作用,计算IC50值,选择低于IC50的药物浓度作为增敏浓度,集落形成实验检测放射线加或不加124005以及124005+放射线组联合或不联合自噬抑制剂3-MA对CNE1细胞生存曲线的影响,间接免疫荧光法检测γ-H2AX观察DNA损伤修复和GFP-LC3转染CNE1中自噬标志物LC3的聚集,流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡、免疫印迹法(Western blot)检测Caspase-3、PARP、Beclin 1和LC3-Ⅱ的表达,并检测AKT及下游信号通路的表达,探索Akt抑制剂124005放射增敏效应及其潜在机制。【结果】 124005对CNE1 IC50值为30.5 μmol/L。集落形成实验显示,DEF值放疗+8 μmol/L 124005持续用药组为1.92,放疗+12.5 μmol/L 124005用药72 h组为1.12,共聚焦显微镜观察显示124005联合放疗显著增加了CNE1细胞照射后细胞核内γ-H2AX焦点的聚集和转染GFP-LC3质粒的CNE1细胞内LC3的点状聚集、流式检测124005可以明显提高放射线诱导的CNE1细胞凋亡,凋亡率最高达52.9%。Western blot显示124005可以显著抑制放射后p-AKT及下游p-GSK-3?茁和p-PRAS40的表达,增加放射引起的cleaved caspase-3和cleaved PARP以及Beclin 1和LC3-Ⅱ的表达,应用3-MA可降低124005处理后LC3-Ⅱ的表达水平?放射+124005再联用3 mmol/L 3-MA组的DEF值为1.69,明显低于单纯放射+124005组(DEF=1.97)。 【结论】 124005通过对AKT以及下游通路的抑制,抑制DNA损伤修复,同时增加凋亡和自噬来起到对CNE1细胞株放射增敏的效应。     

塞来昔布对结肠癌细胞株HT-29的放射增敏研究

目的研究塞来昔布对结肠癌细胞株HT-29的放射增敏效应,并初步探讨其作用机制。方法体外培养结肠癌细胞株HT-29,用不同浓度的塞来昔布作用于HT-29细胞,以成克隆实验检测细胞辐射敏感性;建立结肠癌荷瘤裸鼠模型,不同实验条件下观察肿瘤体积变化并绘制肿瘤生长曲线;采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果克隆形成实验结果显示,塞来昔布30μmol/L和50μmol/L作用后的放射增敏比分别为1.304和1.475;肿瘤生长曲线表明,联合治疗组的肿瘤增长最缓慢;塞来昔布组可致肿瘤组织中VEGF表达下降（P〈0.05）。结论塞来昔布在体内和体外实验中均可增强结肠癌细胞HT-29细胞的放射敏感性,其机制可能与其抑制肿瘤新生血管形成相关。     

薏苡仁酯对人鼻咽癌细胞的放射增敏作用

目的：探讨薏苡仁酯（ＣＸＬ）对人鼻咽癌细胞ＣＮＥ－２Ｚ辐射效应的影响。方法：以＾６０Ｃｏ为放射源,采用微量细胞克隆形成法检测ＣＮＥ－２Ｚ对γ射线的敏感性。结果ＣＸＬ使ＣＮＥ－２Ｚ的放射－存活曲线左移,Ｄｏ和Ｄｑ值下降。不同浓度的ＣＸＬ（１０＾－７－１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）使辐射剂量减少７．４５％－１７．３１％（在Ｄ３７水平）,其增敏比（ＳＥＲ）：Ｄｏ比值１．１１－１．４６,Ｄｑ比值１．０２－１．１１     

塞来昔布放射增敏作用及其机制的研究进展

塞来昔布是环氧化酶-2(COX-2)抑制剂。因发现其在肿瘤发生发展过程中具有一定的作用受到关注。近年来报道,塞来昔布既具有抗肿瘤作用,又可以增强肿瘤对放射治疗的敏感性。它能够通过调控细胞周期、抑制COX-2、VEGFmRNA、MMPs的表达、阻断PI3K/Akt信号通路、下调Bcl-2蛋白的表达等方式增加放射线对肿瘤细胞的杀伤能力。其作用还具有药物浓度及放射剂量的依赖性,因此具有较强的放疗增敏作用。本文将对塞来昔布的放射增敏作用及其机制进行综述。     

中药安迪注射剂对人食管癌细胞的放射增敏作用

目的 :观察安迪注射剂 (Andi)对电离辐射生物学效应的影响。方法 :人食管癌细胞株 (ECA 10 9)在富氧 (空气 )和缺氧 (通 99 99%的高纯氮气 5 0min)条件下分别观察对照组、Andi组、60 Co γ线辐射和Andi +60 Co γ线辐射 4组细胞形态 (光镜 )、细胞倍增时间 (TD)、存活率 (SR)及集落存活分数 (SF)。结果 :光镜下可见Andi组、辐射组、Andi+辐射组癌细胞变性、坏死、凋亡 ,以Andi +辐射组为最显著。MTT法测定对照组、Andi组、60 Co γ线辐射和Andi+60 Co γ线辐射四组缺氧细胞的TD(% )分别为 4 6 12 ,118 72 ,6 2 81,171 0 2h ,SR分别为 10 0 % ,4 2 % ,86 % ,30 % ;各治疗组与对照组比较TD 和SR均相差显著 (P <0 0 5 )。方差分析显示 ,辐射在富氧 (F =90 19,P =0 0 0 0 1)和缺氧 (F =37 0 9,P =0 0 0 0 3)时均为SF的影响因素 ;Andi仅在缺氧时对SF是有意义的影响因素 (F =2 9 0 4 ,P =0 0 0 0 7) ,与60 Co γ线辐射合用对缺氧细胞SF的影响具有协同作用 (F =11 37,P =0 0 0 98)。用单靶多击模型拟合数据分析 ,Andi的放射增敏比 (SER)为 1 5 ,相对敏化效应 (RSE)为 5 5 %。结论 :Andi对缺氧ECA 10 9细胞具有明显的细胞毒和放射增敏作用。     

MTT法研究三种放射增敏剂对视网膜母细胞瘤的毒性作用

采用离体培养的视网膜母细胞瘤（Ｒｂ）细胞株Ｙ－７９和Ｓｏ－Ｒｂ５０研究ＭＴＴ法及用ＭＴＴ法观察了三种放射增敏药物对Ｒｂ细胞的毒性作用。结果显示：ＭＴＴ法用于Ｒｂ体外药物筛选，具有客观，方便，迅速，重复性好和不需特殊设备等优点。三种放射增敏药物对Ｒｂ细胞的毒性作用则与细胞特性，药物浓度及作用时间有关。     

γ-分泌酶抑制剂对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用

目的γ-分泌酶抑制剂(DAPT)是Notch信号通路特异性阻断剂,本实验将研究DAPT对SD大鼠离体心脏缺血再灌注损伤(I/RI)的影响,为探明Notch信号通路在心肌I/RI中的作用提供理论依据。方法采用离体大鼠心脏Langendorff逆行灌注模型,缺血50 min,再灌注60 min。实验分为4组,分别为正常对照组(Control)、I/RI组、DAPT(1μM)+I/RI组,DAPT(1μM)组。监测缺血前后血流动力学各项指标,包括:心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、左心室内压最大变化速率(+dp/dtmax)、冠脉流量(CF)、计算出心率压力指数(DP,LVDP×HR/1000);氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定各组心肌梗死(MI)的面积;专用试剂盒测定冠脉流出液(CF)中乳酸脱氢酶含量(LDH)。结果与Control组比较,I/R组缺血后各时间点的收缩及舒张功能均显著降低(P<0.01),MI面积显著增加(P<0.01),冠脉流出液中LDH含量显著升高(P<0.01);与I/RI组比较,DAPT+I/RI组可以加重上述指标进一步恶化(P<0.01);与Control组比较,DAPT各项指标无统计学差异(P>0.05)。结论DAPT有加重心肌缺血再灌注损伤的作用,Notch信号通路可能在心肌缺血再灌注损伤中发挥重要的调控作用。     

Celecoxib对SHG-44细胞株的放射增敏作用

目的评价Celecoxib联合放射作用对SHG-44细胞周期时相分布的影响,探讨Celecoxib调控细胞周期可能的信号通路机制。方法体外培养胶质瘤SHG-44细胞,以不同浓度Celecoxib（0μmol/L、30μmol/L、50μmol/L、100μmol/L）设立药物组（D组）,不同剂量（0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy）6MV-X线照射设立放射组（R组）,二者交互设立药物＋放射组（D＋R组）,流式细胞术（FCM）检测细胞周期时相分布,逆转录PCR及实时PCR检测Cy-clinB1mRNA表达及水平。结果 FCM周期分析显示,细胞周期各时相分布在D组、R组及D＋R组中均有差异。其中D＋R组50μmol/LCelecoxib时,各照射剂量下与R组比较,G2/M期阻滞均进一步增强（P〈0.05）,但30μmol/L时各照射剂量下的G2/M期阻滞较R组均无明显增加（P〉0.05）。逆转录PCR显示各实验组Cyclin B1均表达;实时定量PCR进一步检测发现,D组30、50、100μmol/L时Cyclin B1表达均较空白对照（0μmol/L）明显降低（P〈0.05）,其中50μmol/L较0和30μmol/L下降明显（P〈0.05）,但50μmol/L和100μmol/L之间差异无统计学意义（P〉0.05）;D＋R组仅在100μmol/L时Cyclin B1表达较D组明显下降,其余浓度（0、30、50μmol/L）D＋R组较D组无明显下降（P〉0.05）。结论 Celecoxib在一定浓度下使SHG-44细胞发生G2/M期阻滞,并可进一步增强放射作用后的G2/M期阻滞,其放射增敏效应可能与下调细胞周期信号传导通路中的下游靶基因Cyclin B1有关。     

吉非替尼对鼻咽癌细胞株CNE2放疗增敏作用

目的应用吉非替尼作用于鼻咽癌细胞株CNE2,观察其放疗增敏作用。方法体外培养鼻咽癌细胞株CNE2,以MTT实验检测细胞增殖抑制情况及吉非替尼对细胞放射敏感性的影响;用克隆形成法绘制细胞存活曲线,获得不同处理条件下的放射增敏比。以流式细胞术(FCM)分析细胞周期变化和凋亡情况。结果 MTT显示与单纯照射组比较,联合吉非替尼照射组细胞生存率显著降低(0.582±0.012vs0.398±0.016,P=0.0020);FCM显示吉非替尼联合放射组S期细胞显著下降(P=0.000),而G2/M期细胞比值显著增加(P=0.000),吉非替尼和放射线可协同作用,使CNE2细胞的周期再分布显著变化。结论吉非替尼可增强鼻咽癌细胞株CNE2放射敏感性,其机制可能与改变细胞周期的分布相关。