原发性肝细胞癌中细胞周期G1期相关基因CyclinD1的表达及其临床？…

目的 研究原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）中ＣｙｃｌｉｎＤ１基因的表达及其与ｐ５３基因、肝癌细胞增殖活性的关系，探讨其在ＨＣＣ的发生，发展中可能的作用。方法 应用免疫组织化学及定量ＤＮＡ图像分析的方法，检测ＣｙｃｌｉｎＤ１，Ｐ５３基因在３２例ＨＣＣ和６例正常肝组织中的表达，并分析ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白的表达与肝癌细胞增殖活性的关系。结果 肝癌组织中ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白的过表达率明显高于癌旁肝组织（７１．８％     

CyclinD1基因扩增及其蛋白表达在乳腺癌中的意义

目的 探讨乳腺癌中ＣｙｃｌｉｎＤ１基因扩增和其蛋白表达的相关性及其临床意义。方法应用半定量ＰＣＲ和免疫组化技术,检测和分析了乳腺癌及其癌旁组织、乳腺良性组织及正常朱标本中ＣｙｃｌｉｎＤ１基因扩增占２２．６％（１４／６２）,蛋白过度表达占４８．４％（３０／６２）,二者有一定相关性,而其它各种乳腺组织的ＣｙｃｌｉｎＤ１基因扩增及蛋白过度表达与之相比差异有显著性意义（Ｐ〈０．０５）。ＣｙｃｌｉｎＤ１基因     

原发性肝细胞癌中WAF1/CIP1基因的表达及其临床病理意义

目的　探讨原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）中ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ 基因ｍＲＮＡ 的表达与临床病理学指标的关系和意义。方法　采用半定量ＲＴＰＣＲ方法,检测ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ 基因在３０ 例ＨＣＣ及其癌旁肝组织中的表达。结果　肝癌组织ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ｍＲＮＡ 表达相对值低于其相应癌旁肝组织［（１ ．１０±０ ．４３）Ｕ 对（１．３１±０．４１）Ｕ,Ｐ＜０ ．０５］ ,有卫星灶形成的肝癌低于无卫星灶形成的肝癌［（０．８６ ±０．２９）Ｕ 对（１ ．３２ ±０．４４）Ｕ,Ｐ＜ ０．０１］ ,但其在ＨＣＣ的其他病理学指标中差异无显著性（ Ｐ＞０ ．０５） 。结论　ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ 基因的表达异常可能参与ＨＣＣ的发生、发展,并与肝癌细胞的浸润和转移分子机制有关。     

p53、p16、Cyclin D1表达与胃癌增殖细胞核抗原的关系

目的 探讨ｐ５３、ｐ１６、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达与胃癌细胞增生状况的关系。方法 采用免疫组化ＡＢＣ法检测５８例胃癌中ｐ５３、ｐ１６、ＣｙｃｌｉｎＤ１和ＰＣＮＡ的表达状况,并对ＰＣＮＡ免疫阳性细胞作半定量分析。结果 ｐ５３、ｐ１６、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１阳性表达率分别为５１．７％（３０／５８）、４８．３％（２８／５８）、５３．４％（３１／５８）;ｐ５３、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１阳性组织中,单位面积ＰＣＮＡ阳性     

p16和cyclin D1在膀胱癌中的表达及其相关性研究

目的研究ｐ１６和ｃｙｃｌｉｎＤ１在膀胱癌组织中的表达,探讨其与膀胱癌生物学行为的关系。方法应用免疫组化法观察５０例膀胱癌ｐ１６和ｃｙｃｌｉｎＤ１的表达情况。结果（１）膀胱癌组织中ｐ１６阳性率为４４％,明显低于正常膀胱粘膜（Ｐ＜０．０１）;ｃｙｃｌｉｎＤ１阳性率为６２％,明显高于正常膀胱粘膜（Ｐ＜０．０１）。随着肿瘤恶性程度的增高和临床分期的进展,ｐ１６阳性率下降,ｃｙｃｌｉｎＤ１阳性率升高。ｐ１６在未复发组、存活组的表达率显著高于复发组、死亡组（Ｐ＜０．０１）。ｃｙｃｌｉｎＤ１在存活组的表达率显著低于死亡组（Ｐ＜０．０５）。（２）ｐ１６与ｃｙｃｌｉｎＤ１的表达呈负相关。（３）有１５％的病例存在ｐ１６和ｃｙｃｌｉｎＤ１同时表达或失表达。结论ｐ１６与ｃｙｃｌｉｎＤ１异常表达在膀胱癌的发生、发展过程中起重要作用。     

nm23H1和P53蛋白在人肝细胞癌及其肝内转移灶癌栓中的表达

应用ＬＳＡＢ免疫组化方法对５２例肝细胞癌（ＨＣＣ）及其肝内转移灶、癌栓中ｎｍ２３Ｈ１和Ｐ５３蛋白表达进行前瞻性研究，探讨两者表达与ＨＣＣ浸润转移及预后的相互关系。结果表明：在原发癌、转移癌和癌栓中，ｎｍ２３Ｈ１和Ｐ５３表达呈显著负相关。原发癌较肝内转移灶和癌栓，ｎｍ２３Ｈ１显著高表达（Ｐ〈０．００２）；而Ｐ５３表达无差异（Ｐ〉０．５）。Ｐ５３在分化较差和包膜浸润的癌组织呈高表达（Ｐ〈０．０２５，Ｐ     

细胞周期蛋白D1在膀胱移行细胞癌中表达的意义

目的　探讨细胞周期蛋白Ｄ１（ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１） 与膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ） 生物学行为的关系。　方法　应用免疫组化法检测７１ 例膀胱ＴＣＣ 组织中ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ 的表达。　结果　３９ 例（５４ ．９％ ）ＴＣＣ 中ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ 呈阳性表达,其中Ｇ１ １１ 例（６８－８ ％ ）、Ｇ２ ２３ 例（６０－５ ％ ）、Ｇ３ ５ 例（２９－４ ％ ） 。３２ 例为胞核阳性,７ 例为胞浆阳性,其中Ｇ２ ３ 例,Ｇ３ ４ 例。６０ 例初发者阳性３５ 例（５８－３ ％ ） ,１１ 例再发者阳性４ 例（３６－４％ ） 。　结论　膀胱ＴＣＣ 是ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ 高表达的肿瘤类型之一,ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ 的过表达是膀胱癌发生过程中的早期事件,其与肿瘤病理分级显著相关,再发性ＴＣＣ 中表达有减少趋势,胞浆阳性代表着更高的恶性潜能     

p16、Cyclin D1和CDK4基因在胰腺癌中的表达及其意义

为探讨抑癌基因Ｐ１６、癌基因ＣｙｃｌｉｎＤ１和ＣＤＫ４在胰腺癌中的作用及其相互关系,应用免疫组织化学方法检测了ｐ１６、ＣｙｃｌｉｎＤ１和ＣＤＫ４基因在胰腺癌中的表达。结果：Ｐ１６在胰腺癌中为低表达,Ｃｙｃｌｉｎ,Ｄ１和ＣＤＫ４呈过度表达在胰腺癌发生中起协同作用。     

肝细胞癌DNA异倍体及nm23-H1、C-erb B-2和p53癌基因蛋白表达的临床意义

目的 探讨肝细胞癌ＤＮＡ异倍体、ｎｍ２３－Ｈ１、Ｃ－ｅｒｂＢ－２和Ｐ５３癌基因蛋白表达与肝细胞癌侵袭性的关系及其临床意义。方法采用ＤＮＡ图像分析系统定量测定５２例肝癌２的肝癌细胞的ＤＮＡ含量,用免疫组化方法检测癌基因蛋白在肝癌中的表达。结果ＤＮＡ异倍体在≤５ｃｍ肝癌组为５０．０％,在〉５ｃｍ肝癌为８２．１％;ＤＮＡ异倍体与肝癌肝内转移及合并癌栓有关。肝癌伴有肝内转移者的ｎｍ２３－Ｈ１阳性率是明显     

胰腺良性和恶性病变组织中cyclinD1,CDK4,p16和Rb的？…

目的 研究胰腺良性和恶性病变组织中ｃｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ４、ｐ１６和Ｒｂ的表达及意义。方法 对５３例胰腺癌、１７例慢性胰腺炎石蜡包埋切片行ＡＢＣ免疫组织化学法染色。结果 慢性胰腺炎和癌旁上皮组织的ｃｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ４、Ｒｂ阳性率明显低于胰腺癌，而ｐ１６则相反；ｃｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ４和Ｒｂ阳性及ｐ１６阴性的慢性胰腺炎和癌旁上皮多为上皮中度至重度不典型增生；高分化和未转移胰腺癌阳性及ｐ１６     

髓母细胞瘤周期蛋白基因D1、p16的表达及其与临床病理特点的关系

目的　通过检测髓母细胞瘤周期蛋白基因 (cyclin)D1和 p16的表达 ,探讨它们与传统临床病理特点之间以及cyclinD1和 p16之间的相互关系。 方法　应用免疫组织化学方法并用图像分析系统测定染色的积分吸光度 (IOD)检测cyclinD1和p16在髓母细胞瘤和正常小脑组织中的表达情况 ;应用统计学方法分析它们与临床病理特点的相互关系 ,以及cyclinD1和 p16之间的相互关系。结果　 (1)正常小脑组织cyclinD1表达较低 ,髓母细胞瘤表达较高 (IOD值分别为 0 .2 93 1、1.0 712 ) ;p16在正常小脑组织中则呈现高表达 ,而髓母细胞瘤出现降低 (IOD值分别为 1.6815、1.0 10 9) ;(2 )髓母细胞瘤cyclinD1和 p16表达情况与肿瘤年龄、部位、病理类型、是否伴坏死、分化程度及分化方向有关 ;(3 )在纤维增生型髓母细胞瘤中cyclinD1和p16呈正相关关系 (r =0 .5 3 4,P <0 .0 5 ) ,而在经典型髓母细胞瘤中呈负相关关系 (r =-0 .40 7,P <0 .0 1)。结论　髓母细胞瘤临床病理特点的不同更深层次的原因之一是肿瘤细胞cyclinD1和 p16发生了不同变化从而导致肿瘤细胞形成各自不同的细胞周期改变     

肝细胞癌DNA损伤修复基因APE1的表达及与p53的关系

目的 探讨肝细胞癌(HCC)中脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)的表达特点及APE1与突变型p53表达的关系.方法 收集1991年至2004年第三军医大学大坪医院野战外科研究所病理科10例正常肝组织、40例结节性肝硬化组织和103例HCC组织标本,应用免疫组织化学SP二步法分别检测APE1和p53的表达情况.采用X~2检验、相关分析及K Independent-Samples Tests检验分析所得结果.结果 APE1在正常肝组织、肝硬化和HCC组织中均有不同程度的表达,阳性率分别为40.0%、82.5%、100.0%,三者比较差异有统计学意义(χ~2=47.852,P<0.01).正常肝组织APE1仅表达于细胞核;肝硬化和HCC组织中APE1出现异位表达,异位表达率分别为20.0%和53.4%(χ~2=20.757,P<0.01).不同APE1/p53表达模式的HCC临床分期及病理学分级比较差异有统计学意义(χ~2=12.910,14.481,P<0.01),APE1异位表达/p53阳性的HCC恶性程度高.结论 APE1过表达及异位表达与HCC的发生、发展密切相关;APE1异位表达和053突变可能在肿瘤的发生、发展过程中具有协同促进作用.     

p73蛋白在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的　探讨p73蛋白在肝细胞性肝癌中的表达及其临床病理意义。方法　采用免疫组 织化学SABC法检测p73蛋白在肝癌和癌旁组织中的表达水平,并分析其与肝癌临床病理特征的关 系。结果　38例肝癌组织中有22例p73蛋白呈阳性表达,阳性表达率为57.9%,而癌旁组织无1例 呈阳性表达,低分化、有转移的肝癌组织中p73蛋白水平明显高于高分化、无转移的肝癌组织。结论 p73蛋白在肝癌组织中表达上调,可能在肝癌的发生、发展过程中起着重要的作用。     

肝细胞癌微卫星不稳定和杂合性缺失分析

目的 通过检测肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)微卫星不稳定（microsatellite instability,MSI)和杂合性缺失（loss of heterozygosity,LOH)发生频率,探讨上述遗传学改变与HCC临床病理的关系。方法 选择5个微卫星多态性标记对32例HCC进行了MSI与LOH分析。结果 32例HCC中有14例出现MSI,其中有6例出现2个位点MSI,后者癌肿转移率明显低于其他的组（P＝0．001）,在所检5个位点中D1S484和TP53 MSI发生频率最高,而D9S1604昨D8S555遗传学改变多为LOH且发生频率较低。结论 MSI是部分HCC发生、发展进程中一个重要的遗传改变,尤其在在无癌肿转移的肿瘤中。D1S484和TP53是HCC中对MSI敏感的检测位点。     

RASSF1A mRNA在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的 应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析RASSF1 A在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义.方法 提取65例外科手术切除的肝细胞癌组织(其中右肝癌41例,左肝癌的24例)及其相对应的癌旁正常组织和6株肝癌细胞株及1株正常肝细胞株的总RNA,逆转录成cDNA,应用实时荧光定量RT-PCR方法检测RASSF1 A mRNA的表达水平.结果 癌旁正常组织RASSF1A mRNA表达量为癌组织的3.32倍,两者差异有统计学意义(癌旁正常组织△CT=4.64±2-44,癌组织中△CT=6.30±1.92,P<0.01),其中38例(58.5%)肝癌组织中的RASSF1A mRNA表达水平比癌旁正常组织显著下调:下调8倍以上的有17例,下调4倍以上的有8例,下调2倍以上的有13例,另外有5例(7.7%)在肝癌组织中的RASSF1A表达水平比癌旁正常组织较高,其余22例(33.8%)则差异无统计学意义(P>0.05);3株(QGY-7701、PLC、Hep3B,50.0%)肝癌细胞株中的RASSF1A mRNA表达水平比正常肝脏细胞株(HL-7702)显著下调;在肝癌组织中RASSF1A的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小等无明显相关(P>0,05),但和门脉癌栓与否(P<0.05)、临床分期(P<0.05)及血清HbsAg明显相关(P<0.01).结论 RASSF1A基因的缺失或低表达可能在肝细胞癌发生、发展过程中起一定作用.     

磷酸化蛋白p27在肝细胞肝癌中表达及其意义

目的 探讨人肝细胞肝癌组织中磷酸化蛋白p27的表达及其与临床病理特征的关系.方法 利用Ti4+-IMAC富集和LC-MS2-MS3检测磷酸化蛋白的方法鉴定人肝细胞肝癌组织磷酸化蛋白,进一步利用Western blot检测40例肝细胞肝癌、相应癌旁组织和12例正常肝组织中T187、S10磷酸化p27蛋白(P-p27T187、P-p27S10)的表达.结果在肝癌组织磷酸化蛋白的筛选中鉴定到磷酸化蛋白p27,并确定IPI、磷酸化位点、蛋白激酶等信息,Western blot检测提示P-p27T187与P-p27S10在肝细胞肝癌组织表达明显高于癌旁、正常肝组织,其相对表达量分别为0.635±0.108、0.306±0.078和0.149±0.031,差异有统计学意义(P<0.05).且P-p27T187和P-p27S10与肝癌病理分级、临床分期及转移相关,而与发病年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤数目等无明显相关(P>0.05).结论 磷酸化蛋白p27在肝细胞肝癌中表达水平明显升高,与肝癌的发生发展及转移相关.     

nm23及E-钙黏连素蛋白表达与原发性肝癌肝移植术后肿瘤复发转移的关系

目的探讨nm23及E-钙黏连素（E—cadherin）蛋白表达与原发性肝癌（肝癌）肝移植术后肿瘤复发转移的关系。方法选取2003年10月至2005年5月在中山大学附属第三医院行肝癌肝移植术的92例患者临床资料和术后病理标本。根据有否发生肿瘤复发（包括肝内复发和肝外转移）分为复发组（37例）和未复发组（55例）。病理标本为两组患者手术切除的肿瘤组织和癌旁肝组织。采用免疫组织化学（免疫组化）方法对组织标本进行检测。比较92例患者的肝癌组织和癌旁肝组织中nm23和E—cadherin的蛋白表达差异;分析nm23和E—cadherin蛋白表达与肝癌患者临床病理特征的关系;比较复发组和未复发组患者的肝癌组织中nm23和E—cadherin蛋白表达的差异。结果92例患者中,肝癌组织nm23蛋白阳性表达49例（53％）,癌旁肝组织则全部表达阳性（100％）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）;肝癌组织E—cadherin蛋白表达缺失39例（42％）,而癌旁肝组织中有4例（4％）表达缺失,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。肝癌组织中,nm23蛋白表达阴性与肿瘤分化程度、有否门静脉癌栓显著相关（均为P〈0．05）;E—cadherin蛋白表达缺失与术前血清甲胎蛋白（AFP）水平、肿瘤大小及有否门静脉癌栓显著相关（均为P〈0．05）。复发组和未复发组的rim23蛋白表达阳性率分别为32％（12／37）和67％（37／55）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。复发组和未复发组的E—cadherin蛋白表达缺失率分别为62％（23／37）和29％（16／55）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论肝癌组织中nm23和E—cadherin蛋白的表达对预测肝癌肝移植术后肿瘤复发转移具有重要意义。     

bcl-2、cyclinD1、P27~(kip1)在肾癌中的表达及相关性

目的探讨bcl-2、cyclinD1、p27kip1 mRNA水平在肾细胞癌(RCC)中的表达及其意义。方法采用RT-PCR半定量方法检测42例肾癌患者(透明细胞癌33例,非透明细胞癌9例)癌组织和10例正常肾组织中bcl-2、cyclinD1、p27kip1 mRNA的表达情况。结果 42例肾癌标本中bcl-2 mRNA、cyclinD1 mRNA表达的中位值(分别为0.56、0.65),均显著高于正常肾组织(分别为0.13、0.15)(P0.05);而p27kip1mRNA在肾癌中表达的中位值0.46,显著低于正常组织(0.86)(P0.05)。在肾癌临床分期中bcl-2在Ⅰ+Ⅱ期肾癌组织中表达高于Ⅲ+Ⅳ期(P0.05),cyclinD1在Ⅰ+Ⅱ期肾癌组织中表达低于Ⅲ+Ⅳ期(P0.05),p27kip1 mRNA表达量随着临床分期的升高而降低(P0.05);bcl-2、cyclinD1在非透明细胞癌组中表达量分别为0.39±0.18、0.55±0.08,低于透明细胞癌组的0.58±0.19、0.66±0.08(P0.05),p27kip1在透明细胞癌组和非透明细胞癌组中表达量(P0.05)无差异。偏相关分析示P27kip1与cyclinD1之间相关系数为-0.57(P0.01),p27kip1与bcl-2之间相关系数为0.44(P0.01);而cyclinD1与bcl-2之间相关系数为-0.06,无相关性(P0.05)。结论 bcl-2、cyclinD1高表达和p27kip1低表达与肾癌的发生、发展有密切关系;检测bcl-2、cyclinD1、p27kip1 mRNA可作为诊断肾癌的参考指标;p27kip1与cyclinD1负相关、与bcl-2正相关,而cyclinD1与bcl-2之间无相关性。