益气除痰方对A549细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

【目的】研究益气除痰方对肺癌A549细胞凋亡的影响及其分子作用机制。【方法】应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测益气除痰方对A549细胞的生长抑制作用,流式细胞术碘化丙啶(PI)单染法测定细胞凋亡率,逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法测定用药前后调亡相关基因p53、bcl-2、bax mRNA表达的变化。【结果】益气除痰方含药血清对A549细胞具有生长抑制作用,且具有一定的时间—浓度依赖性;流式细胞术结果显示:益气除痰方含药血清对A549细胞具有显著诱导凋亡的作用,其低、中、高剂量组凋亡率分别为(8.40±1.67)%、(15.80±2.95)%、(27.4±0.96)%(P<0.05);RT-PCR结果显示:益气除痰方可显著上调p53 mRNA、bax mRNA表达,下调bcl-2 mRNA表达(P<0.05或P<0.01)。【结论】益气除痰方可促使A549细胞凋亡,其机制可能与提高p53表达,下调bcl-2/bax比例有关。     

益气除痰方对弥漫大B细胞淋巴瘤增殖及AKT表达的影响

【目的】研究益气除痰方对弥漫大B细胞淋巴瘤OCI-ly10细胞增殖的影响及其作用机制。【方法】应用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测益气除痰方对OCI-ly10细胞的生长抑制作用,以流式细胞术细胞膜磷脂酰丝氨酸异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)染色检测联合应用益气除痰方和阿霉素诱导OCI-ly10细胞凋亡的能力。以Western blot法检测益气除痰方对OCI-ly10细胞丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)及磷酸化AKT(Thr308、Ser473)表达的影响。【结果】益气除痰方含药血清对OCI-ly10细胞具有生长抑制作用,且具有一定的时间—浓度依赖性。流式细胞术检测中,联合应用益气除痰方含药血清和阿霉素组的凋亡率、阿霉素单药组凋亡率及含药血清组凋亡率均较阴性对照组显著升高,其中联合组促进肿瘤细胞凋亡的作用显著强于阿霉素单药组及含药血清组(均P0.05)。Western blot结果显示益气除痰方含药血清可显著降低总AKT和p-AKT(Thr308)的表达。【结论】益气除痰方对弥漫大B细胞淋巴瘤OCI-ly10细胞具有生长抑制及促进凋亡的作用,并对阿霉素具有一定的抗肿瘤增效作用,其作用机制可能与抑制了AKT磷酸化的信号通路相关。     

扶正抗癌方通过调控Bcl-2家族蛋白促肺癌细胞凋亡

【目的】探讨中药复方扶正抗癌方促非小细胞肺癌(NSCLC)细胞凋亡的机制。【方法】以高效液相色谱(HPLC)法检测扶正抗癌方的稳定性。以人NSCLC细胞株H1650、A549为研究对象,采用流式细胞术检测不同剂量(0、0.5、1.0、1.5 mg/mL)扶正抗癌方处理的H1650、A549细胞的凋亡情况,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测不同剂量(0、0.5、1.0、1.5 mg/mL)扶正抗癌方处理的H1650、A549细胞中抗凋亡基因Bcl-2、Mcl-1的蛋白表达水平。【结果】扶正抗癌方可明显增加H1650、A549细胞凋亡率,抑制Bcl-2、Mcl-1的蛋白表达水平,均呈剂量依赖性。【结论】扶正抗癌方可通过调控Bcl-2家族蛋白表达促进非小细胞肺癌细胞凋亡。     

益气解毒方抑瘤作用及生物信息分析

【目的】探讨益气解毒方对肺癌Lewis细胞小鼠移植瘤的抑制作用及其可能的机制。【方法】体内实验:复制Lewis细胞小鼠移植瘤模型;将20只造模小鼠分为模型组,中药低、高剂量组,顺铂组,每组5只;给药结束后,观察各组小鼠一般状况、体质量、去瘤体质量、瘤体质量、肿瘤指数、肿瘤体积及抑瘤率的变化。体外实验:采用CCK8法观察益气解毒方对A549和H1299细胞株增殖的抑制情况,采用流式细胞术观察益气解毒方对A549和H1299细胞株的促凋亡作用。生物信息分析:采用生物信息挖掘的方法探索其可能的作用途径、信号通路和作用靶点。【结果】与模型组比较,中药高剂量组、顺铂组对移植瘤的生长均具有明显的抑制作用(P0.05或P0.001)。体外实验结果显示,益气解毒方可明显抑制肺癌细胞增殖,并促进肺癌细胞凋亡。生物信息分析结果提示益气解毒方抑制肺癌作用可能涉及凋亡、细胞周期、自噬等多种途径,其中促进凋亡可能是其主要途径,促凋亡作用可能通过影响AKT、HSP90、BCL2、CASP9等靶点的表达,调节PI3K-AKT等信号通路来实现。【结论】益气解毒方可能通过调节AKT、HSP90、BCL2、CASP9等靶点,影响PI3K-AKT等信号通路来促进凋亡,抑制细胞增殖,进而抑制肺癌移植瘤的生长,发挥抑瘤作用。     

在胎儿生长受限患者胎盘组织中的表达及意义简

目的 探讨内质网应激相关蛋白CHOP/GADD153在胎儿生长受限（FGR）患者胎盘组织中的表达及意义.方法 选择2012年7月～2013年5月深圳市宝安区妇幼保健院FGR孕妇46例为FGR组,另选择孕龄正常孕妇34名为对照组.采用免疫组化法检测CHOP/GADD153在各组胎盘组织中的表达,并采用Tunnel法检测各组胎盘组织细胞凋亡率.结果 FGR组胎盘组织CHOP/GADD153免疫组化阳性表达率67.8％,明显高于对照组的14.7％,差异有高度统计学意义（x2=7.57,P＜0.01）;FGR组胎盘组织细胞凋亡率为（37.6±5.3）％,明显高于对照组的（12.3±1.5）％,差异有统计学意义（t=2.342,P＜0.05）.结论 内质网应激相关蛋白CHOP/GADD153介导的细胞凋亡与FGR的发生机制有关.     

益气除痰方对小鼠Lewis肺癌细胞凋亡形态学的影响

[目的]探讨益气除痰方对C57BL/6J小鼠Lewis肺癌细胞凋亡形态学的影响.[方法]选用C57BL/6J小鼠,随机分成中药组(益气除痰方组,剂量为27.3 g·kg-1·d-1)、顺铂组(剂量为1 mg· kg-1·d-1)、联合组(中药联合顺铂)、模型组,采用右腋部皮下接种Lewis肺癌细胞株法造模;采用流式细胞术测定各组小鼠Lewis肺癌细胞的凋亡率及通过透射电镜观察Lewis肺癌细胞超微结构的变化.[结果]中药组、顺铂组、联合组的细胞凋亡率均显著升高,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.001);中药组、顺铂组、联合组在透射电镜下均可观察到Lewis肺癌细胞呈现早期凋亡形态.[结论]益气除痰方治疗肺癌的作用与诱导肺癌细胞凋亡有关.     

清金得生片对人肺腺癌细胞(LAC)抑制与凋亡的诱导作用

【目的】观察清金得生片对人肺腺癌细胞(LAC)的抑制与凋亡的影响。【方法】以8 g/kg剂量的清金得生片,0.2 g/kg剂量的替加氟(FT-207)灌胃SD大鼠制备体积分数为10%、20%、30%的中药含药血清和体积分数为20%的FT-207含药血清,并设空白血清对照;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法观察清金得生片对LAC的抑制作用;采用硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)双染色法,以流式细胞仪检测清金得生片对LAC细胞早期凋亡的影响;采用透射电镜观察中药对LAC超微结构的影响。【结果】不同剂量中药含药血清对LAC增殖的抑制作用与药物浓度及作用时间呈一定依赖关系,其中体积分数为30%的中药含药血清作用72 h时的抑瘤率达32%;各剂量组中药含药血清均具有一定诱导LAC细胞凋亡的作用;中药含药血清高、中剂量组透射电镜下可见明显凋亡特征,低剂量组凋亡特征不明显。【结论】清金得生片的抗肿瘤机制可能与其能抑制LAC增殖、诱导细胞凋亡作用有关。     

白花蛇舌草对H22肝癌细胞热休克蛋白70表达的影响

【目的】观察H22肝癌细胞热休克蛋白70(HSP70)表达及清热解毒中药白花蛇舌草对其表达的影响。【方法】以培养的H22肝癌细胞腹腔接种于小鼠使小鼠致瘤,然后将荷瘤小鼠分为模型组、白花蛇舌草组(剂量为25 g/kg)、党参对照组(剂量为25 g/kg)及热休克处理组共4组。采用免疫组化标记法检测各组活体腹水H22肝癌细胞HSP70的表达情况。【结果】白花蛇舌草组及热休克处理组H22肝癌细胞HSP70的表达显著性高于模型组(P<0.05或P<0.01);党参对照组H22肝癌细胞的HSP70表达与模型组比较无显著性差异(P>0.05)。【结论】白花蛇舌草可能通过诱导H22肝癌细胞HSP70表达,增强其免疫原性而发挥抗肿瘤作用。     

益发复方对毛乳头细胞生长的影响

【目的】探讨中药益发复方含药血清对体外毛乳头细胞生长的影响。【方法】体外培养毛乳头细胞,将传4~6代的细胞用于实验;制备不同剂量的中药益发复方含药血清(低、中、高剂量分别为1.25、2.5、5 g/L),作用于对数生长期细胞,并设空白血清对照,采用噻唑兰(MTT)法绘制各组毛乳头细胞增殖曲线,扫描电镜观察各组毛乳头细胞生长情况,评价益发复方对毛乳头细胞生长的影响。【结果】高剂量组含药血清在对数生长期的吸光度(D)值明显高于空白血清组,而在生长停滞期低于空白血清组。中、高剂量含药血清可促进毛乳头细胞的凝集型及放射状生长。【结论】中药益发复方含药血清可促进毛乳头细胞的增殖,其治疗脂溢性脱发的疗效可能与之有关。     

破血逐瘀中药虻虫对荷H22肝癌小鼠内皮生长因子及MMP-9蛋白表达的影响

【目的】观察破血逐瘀中药虻虫对荷H22小鼠肝癌组织血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达的影响。【方法】选用雄性昆明种(KM)小鼠50只随机分为模型组,化疗组,虻虫高、中、低剂量组。腋下注射H22细胞建立荷H22肝癌小鼠模型。虻虫治疗组以0.045、0.09、0.18 g·kg-1·d-1剂量灌胃给药,化疗组以5-氟尿嘧啶(5-FU)25 mg·kg-1·d-1剂量腹腔注射给药,隔日1次;模型组予以等容积生理盐水灌胃给药,2周后处死小鼠,称体质量及瘤体质量,采用苏木精—伊红(HE)染色观察肝癌组织形态变化,免疫组织化学法检测VEGF及MMP-9蛋白的表达。【结果】高、中剂量虻虫组均可使肝癌组织呈大片坏死;虻虫高、中剂量组及化疗组瘤体质量、瘤指数显著减小,虻虫高剂量组VEGF及MMP-9蛋白表达显著减小,与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.01)。【结论】破血逐瘀中药虻虫能显著抑制荷H22小鼠肝癌细胞增殖,其机理可能与减少VEGF、MMP-9蛋白表达有关。     

扶正透毒祛毒复方对髓系MRD-L患者CD34~+细胞源DC诱导过程中IL-2、sIL-2R的影响

【目的】研究扶正透毒祛毒复方(加味青蒿鳖甲汤)中药含药血清对髓系微小残留白血病(minimal residual disease in leukemia,MRD-L)患者CD34+细胞源树突状细胞(DC)诱导培养的不同阶段血清中白细胞介素-2(IL-2)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)的含量变化,探讨扶正透毒祛毒复方影响MRD-L患者CD34+细胞源DC诱导及生物学效应的机制。【方法】将急性髓系白血病缓解期(AML-CR)患者骨髓经Ficoll密度梯度离心获得骨髓单个核细胞(BMNC)后,用免疫磁珠阳性选择法提取CD34+细胞,培养扩增后用不同浓度中药含药血清与细胞因子进行体外培养诱导DC,培养过程中观察细胞的形态,流式细胞仪检测DC表面CD83、CD80、CD86、CD1a、人白细胞DR抗原(HLA-DR)的表达。在培养的第0天、第6天和第9天采用酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测、比较各组血清中IL-2、sIL-2R的含量。【结果】(1)各中药含药血清联合细胞因子组能促进CD34+细胞分化为形态特征典型的DC,并高表达CD83、CD80、CD86、HLA-DR等DC的表面标志,与胎牛血清及空白兔血清组比较差异有统计学意义(P0.01),中药中剂量及低剂量含药血清组能促进CD1a的表达提高,与中药高剂量组、细胞因子组比较差异有统计学意义(P0.01)。(2)IL-2含量:含药血清制成后(第0天),各中药含药血清组均高于空白兔血清组;各中药含药血清联合细胞因子组第9天、第6天均高于第0天,中药中剂量联合细胞因子组第9天显著高于第6天(P0.01),中药高剂量联合细胞因子组第9天高于第6天(P0.05);在同一时间内,各中药含药血清联合细胞因子组均高于空白兔血清组。(3)sIL-2R含量:含药血清制成后(第0天),各中药含药血清组均低于空白兔血清组;各中药含药血清联合细胞因子组第9天均显著低于第0天、第6天(P0.01),中药高剂量联合细胞因子组第6天低于第0天(P0.05),其余各组第6天与第0天比较差异无统计学意义(P0.05);在同一时间内,各中药含药血清联合细胞因子组均低于空白兔血清组(P0.05或P0.01)。【结论】扶正透毒祛毒复方能增加血清IL-2的含量和降低sIL-2R的水平,随着DC的不断成熟,其含量变化更加明显,可能对CD34+细胞向DC转化发挥了积极作用。     

益气除痰方抑制p-AKT活性诱导A549细胞失巢凋亡的研究

目的：观察益气除痰方含药血清对肺腺癌A549细胞失巢凋亡的诱导作用以及对P—akt、P—p38蛋白以及下游凋亡相关基因表达的影响。方法：采用软琼脂集落培养实验和poly—HEMA培养检测含药血清对锚定不依赖性增殖和失巢凋亡影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率;Westernblot检测含药血清对P-akt、P—p38蛋白的影响,RT-PCR测定用药前后调亡相关基因mRNA表达的变化。结果：培养10d左右,A549细胞在软琼脂可形成明显集落,低、中、高剂量含药血清及阳性组细胞集落形成数较阴性组明显减少（P〈0．05）;流式细胞仪检测显示,阴性对照组,低、中、高剂量药物组,阳性对照组凋亡率分别为0．57±0．40％,10．23±1．46％、16．30±0．96％、27．10±1．22％,45．80±1．45％,差异有统计学意义（P〈0．05）;Westernblot结果显示：与阴性组相比较,低、中、高剂量组,P—p38蛋白相对表达量分别为1．04、1．11、1．09,未见明显变化;而P—akt蛋白相对表达量分别为0．81、0．58、0．53,明显降低;RT-PCR显示益气除痰方可显著上调p53mRNA、baxmRNA表达,下调bel-2mRNA表达。结论：益气除痰方含药血清可诱导A549失巢凋亡,其作用机制可能与降低A549细胞P-akt蛋白表达,进而调控其信号传导通路下游的凋亡相关基因p53、bel-2、bax的表达有关,而与P—p38蛋白的调控无明显相关。     

鹤蟾片含药血清对人肺腺癌细胞株增殖和凋亡的影响

【目的】探讨中药复方鹤蟾片含药血清对人肺腺癌细胞株(LAC)增殖和凋亡的影响。【方法】制备中药复方鹤蟾片含药血清,按常规进行人肺腺癌LAC细胞培养。加入体积分数为30%浓度的含药血清培养液5 mL(含药血清组),另设相同浓度的无含药血清组(空白血清组)和RPMI-1640培养液组(空白对照组)。于倒置相差显微镜下观察细胞生长状态,荧光显微镜下观察细胞核凋亡的形态学改变,并分别采用DNA含量分析法和TUNEL法进行细胞凋亡的流式细胞仪检测。【结果】LAC细胞经鹤蟾片含药血清处理后发生了凋亡特征改变;流式细胞仪DNA含量分析法分析含药血清组凋亡率为5.6%,空白血清组和空白对照组分别为0.9%和0.1%;细胞周期分析结果显示,经体积分数为30%含药血清作用72 h后,LAC细胞S期和G2-M期细胞数减少,低于空白血清组和空白对照组,含药血清组细胞增殖指数低于其他2组;进一步采用TUNEL法检测细胞凋亡的发生情况,发现含药血清作用72 h后,细胞凋亡发生率为12.3%,空白血清组为5.7%,空白对照组为1.2%。【结论】鹤蟾片含药血清对LAC肿瘤细胞增殖具有一定的抑制作用,其机理可能与抑制LAC细胞DNA的合成和分裂,将细胞周期阻滞于G0-G1期,促进LAC肿瘤细胞的凋亡有关。     

化痰消瘤方含药血清对肺腺癌A549细胞增殖的影响

目的:探讨化痰消瘤方含药血清对肺腺癌A549细胞增殖的影响。方法:体外培养肺腺癌A549细胞,分为化痰消瘤方低剂量组、中剂量组、高剂量组,环磷酰胺组,空白组。分别于含药血清中培养24 h、48 h、72 h后,进行观察和检测,独立重复实验3次。采用MTT法检测细胞增殖情况,显微镜下观察细胞形态学变化。结果:各药物干预组吸光度在同一时段内与空白组比较,差异均有统计学意义(P0.05);化痰消瘤方各剂量组吸光度同一时段内与环磷酰胺组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。化痰消瘤方含药血清对A549细胞增殖的抑制率随药物浓度的增加不断提高。除化痰消瘤方低剂量组外,其余各组随着时间的延长,对A549细胞增殖的抑制率不断提高。显微镜下可见化痰消瘤方各剂量组肺腺癌A549细胞出现胞膜皱缩内陷的细胞凋亡征象。结论:化痰消瘤方含药血清可抑制A549细胞增殖,且具有一定的浓度及时间依赖性,同时可诱导细胞凋亡。     

补肾健脾方体外抗乙型肝炎病毒作用的血清药理学研究

【目的】采用血清药理学方法探讨补肾健脾方体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。【方法】补肾健脾方低、中、高剂量(分别为30.2、60.4、120.8 g.kg-1)灌胃正常大鼠制备血清,将含药血清直接添加于体外培养的2.2.15细胞中,培养10 d,观察含药血清对2.2.15细胞HBV表面抗原(HBsAg)、HBV e抗原(HBeAg)分泌的影响。【结果】补肾健脾方经体内代谢后能抑制2.2.15细胞HBsAg、HBeAg的分泌,并呈一定的量效与时效关系。低剂量组服药后3 h 1:4稀释度含药血清的HBeAg抑制率最高,为97.91%;而中剂量组服药后3 h 1:2稀释度的含药血清则达到抑制HBsAg的饱和量,其抑制率为86.84%。【结论】补肾健脾方具有一定的体外抗HBV作用。     

益气健脾抗癌法对大肠癌组织微血管密度及细胞凋亡影响的实验研究

目的观察益气健脾抗癌法对大肠癌组织瘤体微血管密度(MVD)和细胞凋亡的作用。方法建立人大肠癌细胞HT-29裸鼠皮下移植瘤模型后,随机分为模型组、益气健脾组、益气健脾抗癌组。模型组予生理盐水灌胃,益气健脾组给予益气健脾中药汤剂(由太子参、茯苓、白术、甘草、半夏、陈皮组成),益气健脾抗癌组给予益气健脾抗癌中药(补脾中药加山慈菇、土茯苓、浙贝母、白花蛇舌草组成),各组不间断服药2周,各组的给药剂量根据人和鼠给药剂量换算公式计算。给药14 d后,应用末端转移酶标记法(TUNNEL法)检测肿瘤组织细胞凋亡情况,应用免疫组化法检测MVD的标记物CD34表达水平,测定单位面积阳性细胞表达的平均光密度值作为其表达情况。结果各组细胞凋亡率,模型组为(3.8±1.2)%,而益气健脾组比模型组明显增加,为(13.8±2.6)%,二者比较差异有统计学意义(P0.01)。与只服用益气健脾药物相比,益气健脾中药与抗癌药共同服用后更能加快大肠癌细胞凋亡的进度,益气健脾抗癌组细胞凋亡率增加至(36.2±6.6)%,二者比较差异有统计学意义(P0.01)。模型组、益气健脾组、益气健脾抗癌组MVD分别为0.227±0.012、0.218±0.010、0.189±0.011,益气健脾中药联合抗癌药后对肿瘤血管生成的抑制作用较单用益气健脾和模型组更明显,差异有统计学意义(P0.01)。结论益气健脾法及益气健脾抗癌法对大肠癌均具有治疗作用,控制大肠癌血管形成及促进细胞凋亡进度就是其功效原理,益气健脾法与抗癌法联合应用后疗效得到进一步的提高。     

益气解毒方对SGC-7901荷瘤裸鼠的抑瘤作用及对肿瘤细胞VEGF表达的影响

目的 观察益气解毒方对SGC-7901荷瘤裸鼠的抑瘤作用及对瘤组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VECF)的影响.方法 建立裸鼠皮下移植人胃癌细胞SGG-7901荷瘤裸鼠模型.对照组灌胃生理盐水10 mL/kg,5-Fu组肌肉注射30 mg/kg,复方益气解毒方大剂量(1 500 mg/mL)、中剂量(750 mg/mL)、小剂量(375 mg/mL)组分别灌胃10mL/kg的药液,各组连续给药14 d,各鼠脱臼处死,计算瘤质量系数,肿瘤组织用于免疫组织化学染色检测肿瘤组织VEGF表达.结果 对照组的瘤质量系数为3.060±2.426,显著高于5-FU组(0.273±0.146,P<0.01),和复方益气解毒方大、中剂量组(0.696±0.585),P<0.01;(1.197±1.271),P<0.05,与复方益气解毒方小剂量组相比差异无统计学意义(1.727±1.721),P>0.05.免疫组织化学结果 显示,复方益气解毒方大、中量组和5-FU组对肿瘤VEGF表达率分别为(31.3±15.8)%、(41.1±4.4)%和(29.5±8.5)%,均显著低于模型荷瘤对照组(52.4±15.1)%,P<0.05.小剂量组的肿瘤VEGF表达率(57.0±13.5)%高于模型荷瘤对照组,但无统计学差异,P>0.05.结论 益气解毒方对胃癌细胞增殖和VEGF表达具有较好的抑制作用.     

复方土茯苓颗粒对大鼠滑膜细胞炎症因子及mi-RNA的影响

【目的】观察复方土茯苓颗粒含药血清对大鼠滑膜细胞痛风模型的影响以及与白细胞介素-1β/白细胞介素-6(IL-1β/IL-6)、小片段RNA miR-146a的关系。【方法】从SD大鼠身上摘取膝关节滑膜组织进行原代培养并传代,将滑膜细胞分成空白对照组,空白血清组,模型组,中药血清低、中、高剂量组6组;分别制备复方土茯苓颗粒中药血清和尿酸盐晶体混悬液,并进行细胞活性试验后,按组进行相应的干预,然后收集细胞培养液采用酶联免疫吸附反应(ELISA)法检测IL-1β/IL-6水平;提取滑膜细胞总RNA并进行逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-146a表达,并分析它们的关系。【结果】模型组滑膜细胞培养液中IL-1β/IL-6的含量显著升高(P0.05),滑膜细胞miR-146a表达显著下调(P0.05);中药血清各剂量组IL-1β/IL-6的含量显著降低(P0.05),miR-146a则显著上调(P0.05);IL-1β/IL-6与miR-146a表达呈反比关系。【结论】复方土茯苓颗粒含药血清可能是通过上调大鼠滑膜细胞miR-146a的表达,抑制IL-1β/IL-6,从而缓解炎症反应。     

益气除痰方联合化疗干预下弥漫性大B细胞淋巴瘤患者血清轻链的检测

【目的】评价益气除痰方联合一线化疗治疗弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的疗效,并对DLBCL患者进行血清总轻链(sTLC)检测。【方法】选取广州中医药大学第一附属医院及中山大学肿瘤防治中心2014年3月至2015年5月期间收治的经病理学确诊并行一线化疗的DLBCL患者46例。其中,广州中医药大学第一附属医院收治的25例为试验组,中山大学肿瘤防治中心收治的21例为对照组。试验组患者接受益气除痰方联合CHOP±R方案治疗,对照组患者仅接受CHOP±R方案治疗。收集上述46例DLBCL患者在化疗前、1程化疗后、2程化疗后、3程化疗后及4程化疗后共5次血标本,采用散射比浊法测定血清sTLC(κ或λ)、IgG、IgA、IgM水平,比较2组治疗效果及血清学指标变化情况。【结果】(1)试验组25例患者中以痰瘀互结型为最多,占64.0%。(2)试验组和对照组在客观有效率、总体生存(OS)和无进展生存(PFS)方面无明显差异(P0.05)。(3)与对照组相比,试验组白细胞下降等骨髓抑制的毒副反应较轻(P0.05)。(4)试验组和对照组的血清sTLC检测发现κ、λ曲线总体均呈逐渐下降趋势(P0.001),在4程化疗后达到最低点。与对照组相比,试验组对λ轻链曲线下降的影响更为显著(P=0.041)。【结论】初治的DLBCL患者在CHOP±R方案化疗的基础上加用益气除痰方,可以减轻骨髓抑制的毒副反应,并且其肿瘤负荷的下降可能更加明显。     

苦参碱联合5-FU抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长作用及机制

【目的】研究苦参碱(matrine,Ma)与5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人胃腺癌SGC-7901裸鼠移植瘤的抑制作用及可能机制。【方法】将人胃腺癌SGC-7901细胞株接种于BALB／cA裸鼠皮下,形成移植瘤后传3代;取生长旺盛期的瘤组织约1．5 mm3,无菌接种于裸鼠右侧腋窝皮下,待肿瘤生长至100-300mm3后将动物随机分为6组,即模型组、5-FU组(50 mg/kg)、Ma低剂量组(50 mg/kg)、Ma高剂量组(100 mg/kg)、Ma低剂量 5-FU组、Ma高剂量 5-FU组;各组分别按设计剂量腹腔给药,35 d后测量各组裸鼠瘤径和肿瘤体积,计算相对肿瘤体积(VR)和相对肿瘤抑制率(pinhibitory);采用免疫组化法检测荷瘤组织中凋亡相关蛋白bcl-2、bax活性和caspase-3的表达情况。【结果】Ma高剂量 5-FU组抑瘤作用与模型组、 Ma高剂量组、5-FU组比较均显著增强(P<0．05或P<0．01),Ma低剂量 5-FU组抑瘤作用也见增强,但与其他组比较无显著性差异;各给药组均可不同程度下调bcl-2表达,上调bax表达,提高活性caspase-3表达,与模型组比较具有显著性差异(P<0．05或P<0．01);Ma高、低剂量分别与5-FU合用后,该调节作用较单独使用显著增强(P<0．05或P<0．01), 并呈现剂量依赖关系。【结论】苦参碱与5-FU联合应用具有一定的协同增效作用,其机制可能与调节凋亡相关蛋白的表达, 诱导胃癌细胞凋亡有关。