miRNA分子在肺结核患者单核细胞中的表达及意义

目的分析肺结核患者(TB)外周血单核细胞中miR-34a-5p和miR-708-5p的表达水平,并探讨其临床诊断价值。方法选取TB患者和健康对照(HD)各25例,应用Taq Man q PCR技术测定两组人群外周血单核细胞中miR-34a-5p和miR-708-5p表达水平,以U6 sn RNA作为内参。应用ROC曲线评价miR-34a-5p和miR-708-5p诊断TB的临床意义。结果 miR-34a-5p在TB患者中的表达水平为(10.08±0.68),显著高于HD的(7.67±0.36),差异有统计学意义(P<0.01);miR-708-5p在TB患者中的表达水平显著高于HD的(13.52±0.98 Vs 7.71±0.57),差异有统计学意义(P<0.01)。ROC曲线分析表明在肺结核诊断中,miR-34a-5p的敏感性、特异性分别为72%、76%;miR-708-5p的敏感性、特异性为76%、76%。结论 miR-34a-5p和miR-708-5p分子在TB患者外周血单核细胞中异常表达,对TB辅助诊断具有一定参考价值。     

循环miRNA21在肝细胞癌早期诊断中的价值

目的 探讨血浆中miRNA21作为肝细胞癌早期生物标志物的诊断价值.方法采用定量RT-PCR（quantitative RT-PCR）检测55例肝细胞癌患者、60例慢性肝炎患者、50例健康对照者血浆中miRNA21的表达水平.结果 血浆miRNA21在肝细胞癌组中水平显著高于慢性乙肝组（P〈0.01）和健康对照组（P〈0.01）.通过绘制受试者工作曲线（receiver-operator characteristic curve,ROC curve）分析,miRNA21作为肝细胞癌和慢性乙肝的诊断标志物,其诊断价值分别为：灵敏度（65%）,特异度（85%）,受试者工作曲线下面积（AUC）为0.771,而miRNA21作为肝细胞癌和健康对照者的诊断标志物,其诊断价值分别为：灵敏度（89%）,特异度（95%）,AUC为0.956.结论 miRNA21是肝细胞癌潜在的早期诊断标志物.     

缺血性脑卒中患者外周血miRNA生物信息学分析研究

目的 应用生物信息学技术分析缺血性脑卒中患者外周血中微小RNA(miRNA)的靶基因及其功能、在疾病中的作用.方法 在GEO数据库中检索缺血性脑卒中基因芯片数据,并利用生物信息学工具筛选差异表达的miRNA,对差异表达的miRNA进行靶基因预测分析,对miRNA靶基因进行生物学功能分析及信号通路分析,最后构建miRNA调控网络和miRNA靶基因调控网络.结果 检索到芯片数据GSE55937,筛选得到50个差异表达的miRNA.筛选出的miRNA的靶基因的合集共7 557个.这些靶基因的功能主要为DNA依赖转录、DNA依赖转录调节等,主要分布在丝裂原活化蛋白激酶信号通路、肿瘤信号通路等信号通路miRNA功能的调控分析及miRNA靶基因调控网络图提示,人类miRNA(hsa-miR)-15a-5p、hsa-miR-106b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7 i-5p、hsa-let-7 g-5p中心度最高.结论 缺血性脑卒中患者外周血中存在差异性表达的miRNA,hsa-miR-15a-5p、hsa-miR-106b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7i-5p、hsa-let-7g-5p与缺血性脑卒中的发病密切相关.     

结核病患者外周血和胸水T细胞中CD161表达差异的研究

目的 检测结核病患者外周血（PBMC）和胸水（PFMC）T细胞CD161水平,比较PBMC和PFMC T细胞 CD161表达水平的差异,明确结核病人外周及感染部位T细胞CD161表达的差异。方法 以流式细胞仪检测51例健康对照者、41例潜伏性结核感染患者、57例肺结核患者PBMC CD3⁺CD161⁺、CD4⁺CD161⁺和CD8⁺CD161⁺ 细胞的表达水平,比较其在不同人群中的差异;检测21例结核性胸膜炎患者PBMC和PFMC CD3⁺CD161⁺、CD4⁺CD161⁺和CD8⁺CD161⁺ 细胞的表达水平和差异,比较CD161在外周和感染局部的表达差异。结果 利用流式细胞仪检测CD161在PBMC和PFMC中表达,并且分别在T细胞（CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺细胞）中表达;结核患者PBMC CD3⁺CD161⁺、CD4⁺CD161⁺和CD8⁺CD161⁺ 细胞表达均低于健康对照和潜伏感染者; 结核性胸膜炎患者PFMC中CD3⁺CD161⁺和CD4⁺CD161⁺细胞表达均高于PBMC（P<0.01）,但在PFMC中CD8⁺CD161⁺细胞则高于在PBMC中的表达（P<0.01）。结论 CD161均在PBMC和PFMC 中表达,并且CD161能区分结核患者、潜伏感染者以及健康人。另外CD3⁺CD161⁺和CD4⁺CD161⁺细胞表达在结核病感染局部增加,结果提示CD161可作为早期诊断结核患者的分子标识。     

miRNA在鼻咽癌诊断和治疗中的应用研究进展

鼻咽癌是一种起源于鼻咽黏膜的上皮性癌,在我国主要高发于南方地区。miRNA是一类非编码的小RNA分子,在组织、血清、血浆和其他体液中稳定性表达,通过与互补的靶mRNA结合,导致mRNA翻译抑制或mRNA降解,在细胞增殖、分化过程中发挥核心作用,并在恶性肿瘤的发生、发展中发挥着促癌或抑癌作用。miRNA异常表达可通过改变癌基因和抑癌基因的表达来参与鼻咽癌的发生、转移和耐药性,在鼻咽癌的诊断和治疗中具有重要作用。研究异常表达的miRNA及其作用机制,进一步阐明鼻咽癌的发病机制,可为鼻咽癌的诊断和治疗提供新的研究方向。本文对近年来miRNA在鼻咽癌的发生、发展、诊断、治疗和预后评估中的作用进行综述,以期为miRNA调控鼻咽癌的基础研究及其转化应用提供科学依据和新思路。     

中药骨康治疗绝经后骨质疏松症后全基因组miRNA表达谱研究

目的研究绝经后骨质疏松症(PMOP)及中药骨康治疗后全基因组微小RNA(miRNA),探讨miRNA表达紊乱与中药治疗PMOP之间的关系。方法提取血浆样本总RNA,应用Illumina高通量测序技术对假手术组、PMOP模型组、骨康方治疗组SD大鼠血浆样本中的miRNA表达水平进行检测,分别比较其miRNA表达的差异。结果 PMOP样本与假手术对照样本之间差异表达的miRNA共829种,其中383种miRNA在PMOP组呈表达上调(17种显著上调),446种呈表达下调(37种显著下调);骨康方治疗组与PMOP对照样本之间差异表达的miRNA共617种,其中192种miRNA在骨康治疗PMOP组呈表达上调(41种显著上调),425种呈表达下调(31种显著下调)。结论多种miRNAs在PMOP以及中药治疗后的血浆样本中异常表达,提示它们可能在PMOP发生发展以及中药治疗中起重要的调控作用。     

尿沉渣miRNA甲基化状态诊断膀胱癌价值的临床研究

目的 检测尿沉渣中尿路上皮细胞miR-193a、miR-3189、miR-22、miR-34a、miR-124-1甲基化状态,评估用于诊断膀胱癌的临床意义.方法 收集2014年6月至2016年6月安徽省立医院泌尿外科96例术前膀胱癌和62例正常对照组患者中段晨尿50~100 mL并提取尿沉渣尿路上皮细胞DNA,利用甲基化特异性PCR(MSP)检测尿沉渣尿路上皮细胞DNA中miR-193a、miR-3189、miR-22、miR-34a、miR-124-1甲基化状态,对比膀胱癌患者和正常对照组尿成渣miRNA甲基化状态差异.结果 miR-193a、miR-3189、miR-22、miR-34a、miR-124-1在膀胱癌患者尿沉渣中甲基化阳性率分别为88.54%、80.21%、60.42%、36.46%、42.71%,正常对照组分别为9.68%、14.52%、29.03%、22.58%、27.42%;miR-193a诊断膀胱癌敏感性和特异性分别为88.54%、90.32%,联合miR-3189、miR-22、miR-34a、miR-124-1敏感性和特异性分别达到97.92%、74.19%.结论 联合检测miR-193a、miR-3189、miR-22、miR-34a、miR-124-1在膀胱癌患者尿沉渣中的甲基化状态能提高膀胱癌诊断的敏感性,可能成为膀胱癌无创诊断的潜在方法.     

外泌体miRNA在卵巢早衰中的研究进展

<正>卵巢早衰（premature ovarian failure,POF）是指各种原因导致的女性40岁以前卵巢功能病理性下降,并伴有闭经、性腺功能减退和不孕症等疾病,严重影响女性生殖健康。据统计[1],POF在30岁以下女性中的发病率约为0.1%,在40岁以下女性中的发病率为1%,其病因包括染色体异常、自身免疫因素、环境因素、心理因素和医源性因素等。目前治疗POF的方法主要包括激素治疗、卵母细胞和胚胎冷冻保存、卵巢组织移植和干细胞移植等     

miRNA在肿瘤研究中的进展

微小RNA(miRNA)最早在线虫中被发现[1-2],结构上主要有3个特点:(1)本身不具有开放阅读框架(ORF)及蛋白质编码基因的特点;(2)通常的长度约为22个核苷酸;(3)有独特的特征序列.很多学者认为miRNA对其靶基因主要为抑制作用,但是,2007年,美国哈佛医学研究所在研究ARE的调控作用中发现,miRNA有活化翻译的作用,即在细胞周期的调控中上调靶mRNA的翻译[3].     

miR-24-3p在肺结核病患者血清中的表达及其临床意义

目的 探讨miR-24-3p在肺结核病患者血清中的表达及其作为分子标志物的诊断价值.方法 选取在新疆喀什地区第一人民医院就诊的肺结核病患者50例为病例组(肺结核病组),其中活动性肺结核30例,非活动性肺结核20例;其他肺部疾病患者30例及健康体检者30例为健康对照组,采用qRT-PCR法测定血清中miR-24-3p的相...     

氯吡格雷低反应冠心病患者血小板miRNA表达谱差异

目的：探讨氯吡格雷低反应（clopidogrel low response,CLR）与正常反应的冠心病（coronary artery disease,CAD）患者血小板miRNA表达谱的差异。方法：连续入选78例接受氯吡格雷治疗（负荷剂量300 mg,维持剂量75 mg/d）至少5 d的冠心病患者,通过光学血小板聚集仪检测所有患者二磷酸腺苷诱导的血小板聚集率（platelet aggregation induced by adenosine diphosphate,PLADP）,PLADP大于上四分位数的19例患者为CLR组,小于下四分位数的19例患者为对照组。提取所有入选患者纯化血小板中的总RNA,将上述两组患者的总RNA分别混为2个总RNA池,通过RNA变性电泳质检后,采用高通量测序筛选两组患者血小板miRNA的差异表达谱。通过靶基因预测软件TargetScan、miRanda、PITA和miRWalk对差异miRNA的功能进行预测。结果：两组患者临床基线资料无统计学意义。CLR组PLADP显著高于对照组（P < 0.000 1）。通过RNA变性电泳检测两组总RNA未见明显降解。高通量测序发现95种血小板miRNA表达上存在显著差异,其中显著性下调且差异倍数>2的拷贝数前20 位miRNA依次是hsa?miR?300、hsa?miR?151b、hsa?miR?1299等。通过至少2个靶基因预测软件印证8个miRNA（hsa?miR?188?5p、hsa?miR?6874?3p、hsa?miR?218?5p、hsa?miR?3150b?3p、hsa?miR?1288?3p、hsa?miR?1299、hsa?miR?6862?5p、hsa?miR?4421）对血小板聚集关键蛋白有调控作用。结论：CLR患者中存在血小板miRNA的显著下调,本研究筛选出8个对血小板聚集关键蛋白可能有调控作用的miRNA,可能成为个体化抗血小板治疗提供新的干预手段。     

纤维支气管镜检查在不典型肺结核诊断中的价值

作者报道７４例经临床确诊的不典型肺结核的纤支镜检查结果。纤支镜下表现以粘膜充血、水肿、糜烂为主，少部分病人有支气管腔狭窄，管腔内肉芽肿形式。直观对诊断支气管内膜结核缺乏特异性，因此要侧重镜下刷检和活检。本组７４例纤支镜下刷检结核菌阳性率为４３．９％，活检结核阳性使诊断率提高到５１．６％。     

应用微阵列芯片分析人髓母细胞瘤及瘤旁组织miRNA表达谱差异

目的检测人髓母细胞瘤(medulloblastomas,MB)与非肿瘤脑组织中微小RNA(miRNA)的表达差异情况,探讨异常表达miRNA参与MB发生的可能分子机制。方法选取经手术切除的MB组织标本及瘤旁正常小脑组织,分别提取总RNA和小分子RNA,在miRNA微阵列芯片中杂交检测,通过芯片扫描和数据分析,并通过实时荧光定量RT-PCR验证,获得该病异常miRNAs表达谱。结果筛选出9个MB的相关miRNAs,其中表达上调4个,表达下调5个。其中miR-17、miR-100、miR-106b和miR-218的差异表达情况得到定量RT-PCR的证实。结论miRNA微阵列分析技术是一种快速、高效的研究生物信息的分子生物学技术;筛选出的差异表达miRNAs可能参与MB发病,为此病诊治提供了新的思路,值得进一步研究。     

唐氏综合征患儿外周血全基因组miRNA表达谱及染色体分布研究

目的：分析唐氏综合征（Down syndrome,DS）患儿与健康儿童外周血单个核细胞miRNA表达谱及其染色体分布特征。方法：采用Illumina测序技术分别对6例DS患儿（DS组）和6例健康儿童（对照组）外周血单个核细胞全基因组miRNA表达谱进行差异表达和染色体分布特征分析,并用Stem-loop qRT-PCR对差异表达miRNA的测序结果进行验证。结果：两样本共表达911个miRNA,编码于738个miRNA基因,在两样本中的染色体分布趋于一致,但表达丰度染色体分布却不同,DS组主要分布于7、13和21号染色体,而对照组主要分布于7和13号染色体。此外,911个miRNA中有114个miRNA在两样本中差异表达显著（差异倍数≥2且P≤0.001）,其中DS组有103种高表达,包括21号染色体编码的5个miRNA（miR-99a、let-7c、miR-125b、miR-155和miR-802）;11种低表达。结论：DS患儿外周血单个核细胞具有其特定的miRNA表达谱和染色体分布特征,两样本表达丰度差异分布染色体编码miRNA的差异表达可能与DS患者免疫缺陷等相关临床症状的形成有关。     

应用微阵列芯片分析人不同分化鼻咽癌细胞株miRNA的表达

目的 探讨分化角化型鼻咽癌(NPC)细胞系CNE1和未分化非角化型NPC细胞系C666-1中微小RNA(miRNA)的差异性表达,预测异常表达miRNA的靶基因.方法 常规培养NPC细胞株CNE1和C666-1,分别提取总RNA并进行质检;miRNA芯片技术检测miRNAs的表达并对其表达谱进行差异性分析;采用荧光定量RT-PCR进行验证;运用MIRanda、TargetScan、PicTar、Diana-microT软件预测可能调控的靶基因.结果 通过对NPC中has-miRNA表达谱的差异分析,在CNE1,677个miRNA中上调27个、下调25个.miRNA-323-3p和miRNA-574-5p分别是2个最显著差异表达的miRNA.实时定量PCR证实miRNA-323-3p在CNE1中高表达,而miRNA-574-5p低表达.对上述2个miRNA进行靶基因预测,分别筛选出28和18个靶基因.结论 获得了分化角化型和未分化非角化型NPC细胞miRNA的差异表达谱,部分miRNA可能通过调控其靶基因而参与NPC的发病机制.     

血清miRNA液体活检在早期卵巢癌诊断中的临床价值

目的 探讨血清微RNA（microRNA,miRNA）液体活检在早期卵巢癌诊断中的临床价值。方法 选取2021—2023年湖州市妇幼保健院的22个新鲜冷冻Ⅰ期卵巢癌组织和9个相邻正常卵巢组织用于本研究。使用R软件中的limma软件包分析肿瘤和邻近正常组织之间miRNA的差异表达。利用公开的回顾性血清miRNA测序数据集GSE106817使用Ⅰ期卵巢癌中高表达的miRNA训练Logistic回归模型,使用GSE113486和GSE31568验证模型的准确性。结果 Ⅰ期卵巢癌组织中共筛选出8种高表达miRNA,即miR-182、miR-183、miR-202、miR-205、miR-508、miR-509-3、miR-513B和miR-513C。在训练队列GSE106817中用于诊断卵巢癌的曲线下面积（area under the curve,AUC）为0.89。在验证队列GSE31568和GSE113486中诊断卵巢癌的AUC分别为0.85和0.86。结论 血清miRNA液体活检对早期卵巢癌的诊断有较高的临床价值。     

急性单核细胞白血病全基因组微小RNA的表达谱分析

目的研究急性单核细胞白血病（AMoL）全基因组的微小RNA（miRNA）表达谱。方法应用Illumina高通量测序技术对10 例AMoL 患者和10 例非恶性血液病患者骨髓样本的miRNA 表达水平进行检测,分析两者的表达差异,并通过茎环引物实时荧光定量PCR（Stem-loop qPCR）技术对部分Illumina 测序结果进行验证。结果两组样本共发现差异表达的miRNA 285个,其中,199 个miRNA 在AMoL组呈表达上调,86 个miRNA呈表达下调。6 个miRNA 的Stem-loop qPCR 验证结果与其测序结果具有相同的变化趋势。结论miR-126-3p 和miR-29b-3p 可作为潜在的分子靶点用于AMoL发病机制的进一步研究。     

外泌体源性miRNA在糖尿病中的研究进展

外泌体是直径为40～100 nm细胞内的多囊泡体,通过与靶细胞的细胞膜融合、胞吞作用等方式将其携带的蛋白质、微小RNA(miRNA)传递至靶细胞中.通过转运蛋白和核酸介导细胞间通讯,介导细胞间的信息交流并调控细胞的生理功能.近年来外泌体已成为研究热点,它可以通过增加胰岛β-细胞凋亡及调节细胞因子而影响胰岛β-细胞的功能...     

EB病毒miR-BART4*和miR-BART18-3p在鼻咽癌中的表达及意义

目的 分析EB病毒( EBV) miRNAs在鼻咽癌组织中的表达,探索EBV诱发鼻咽癌的分子机制,寻找鼻咽癌防治和诊断的生物分子标志物. 方法 采用实时荧光定量PCR分析 EBV miRNAs ebv-miR-BART4?和 ebv-miR-BART18-3p在36例鼻咽低分化鳞癌组织和32例慢性鼻咽黏膜炎症组织中的表达水平. 结果 ebv-miR-BART4? 和 ebv-miR-BART18-3p的表达水平( Ct 值)在鼻咽癌组织中分别为(26. 97 ± 2. 67)和(27. 02 ± 2. 32),在鼻咽黏膜炎症组织中的表达水平分别为( 38. 49 ± 3. 05 )和( 39. 39 ± 2. 16 ) ,两种EBV miRNAs在鼻咽癌组织中的表达明显高于鼻咽黏膜炎症组织,差异有统计学意义( P<0. 01 ). 结论 EBV可能通过ebv-miR-BART4?和ebv-miR-BART18-3p高表达诱发鼻咽癌,它们是鼻咽癌诊断和防治的潜在生物分子标志物.