四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡相关分子Caspase3及Caspase8表达的影响

目的观察四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡相关分子Caspase3及Caspase8表达的影响。方法 24只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、给药组。以腹腔注射环磷酰胺建立血虚证模型,采用全自动血液分析仪检测外周血象,TUNEL法检测肝细胞凋亡百分率,荧光定量PCR法检测Caspase3及Caspase8 mRNA表达。Western blot检测Caspase3及Caspase8蛋白表达。结果与模型组相比,给药组小鼠外周血红细胞数及血红蛋白含量升高(P0.01),肝细胞凋亡百分率下降(P0.01),Caspase3及Caspase8 mRNA及蛋白表达水平下降(P0.05,P0.01)。结论四物汤可改善血虚证模型小鼠外周血象,下调凋亡相关分子Caspase3及Caspase8表达,减少肝细胞凋亡。提示四物汤减少血虚证模型肝细胞凋亡的作用机制可能与其抑制Caspase3及Caspase8激活。     

四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡相关分子Caspase 8 mRNA表达的影响

目的:观察四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡执行分子Caspase 8 mRNA表达的影响。方法:24只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、给药组。以腹腔注射环磷酰胺建立血虚证模型,采用全自动血液分析仪检测外周血象,TUNEL法检测肝细胞凋亡百分率,荧光定量PCR法检测Caspase 8 mRNA表达。结果:与模型组相比,给药组小鼠外周血红细胞数及血红蛋白含量升高(P0.05),肝细胞凋亡百分率下降(P0.05),Caspase 8 mRNA表达水平下降(P0.05)。结论:四物汤可改善血虚证模型小鼠外周血象,下调凋亡执行分子Caspase 8 mRNA表达,减少肝细胞凋亡。提示四物汤减少血虚证模型肝细胞凋亡的作用机制可能与其抑制Caspase 8激活有关。     

四物汤对环磷酰胺所致贫血小鼠红细胞免疫功能的影响

目的:研究四物汤对环磷酰胺致小鼠"贫血"模型红细胞免疫功能的影响.方法:腹腔注射环磷酰胺建立小鼠"贫血"动物模型,同时给小鼠灌服不同剂量四物汤,采用酵母菌花环法,测定四物汤对小鼠红细胞免疫粘附功能指标的影响.结果:四物汤能明显提高"贫血"小鼠的红细胞C3b受体(RBC-C3bR)花环率,降低红细胞免疫复合物(RBC-IC)花环率,与模型对照组比较差异有显著性(P<0.01).结论:①"贫血"小鼠的红细胞免疫功能呈明显低下状态.②古方四物汤具有恢复红细胞免疫功能的作用.     

四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡以及Bax表达的影响

目的:观察四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡及促凋亡基因Bax表达的影响。方法:30只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、四物汤组。以腹腔注射环磷酰胺建立血虚证模型,采用TUNEL法检测肝细胞凋亡,荧光定量PCR法检测Bax mRNA表达。结果:四物汤可升高血虚证模型小鼠外周血红细胞计数、白细胞计数以及血红蛋白含量,降低肝细胞凋亡百分率,下调促凋亡基因Bax mRNA表达。结论:四物汤补益肝血作用机理可能与其减少肝细胞凋亡有关。     

虫草素对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠CenpB表达的影响

目的 探讨虫草素对腹腔注射环磷酰胺所致的小鼠骨髓抑制的治疗作用。方法 将30只小鼠随机分为空白对照组(A组)、环磷酰胺骨髓抑制组(B组)和虫草素干预骨髓抑制组(C组), 每组10只。以5 mL/kg剂量向A组小鼠腹腔注射生理盐水12 d;以50 mg/kg剂量向B组小鼠腹腔注射环磷酰胺7 d后, 腹腔注射生理盐水5 d;以50 mg/kg剂量向C组小鼠腹腔注射环磷酰胺7 d后, 以25 mg/kg剂量腹腔注射虫草素5 d。对各组小鼠的外周血细胞以及股骨中的骨髓有核细胞进行计数, 采用Western blotting检测白细胞中的着丝粒蛋白CenpB的蛋白表达水平, 采用RT-PCR检测CenpB的mRNA表达水平。结果 与A组相比, B组小鼠外周血白细胞、红细胞、血小板, 股骨中骨髓有核细胞数量, CenpB蛋白相对含量及其表达水平均明显降低(P<0.05);与B组相比, C组中除红细胞数量外, 其他5项指标均明显增加(P<0.05)。结论 虫草素对环磷酰胺所致的骨髓抑制有一定治疗作用。     

清开颗粒对急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡和Caspase-3表达的影响

目的:研究急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡和Caspase-3表达的变化及清开颗粒对其影响,探讨清开颗粒防治急性肝衰竭的作用机制。方法:以Ga1N LPS染毒昆明小鼠造成急性肝衰竭动物模型。分别以大、中、小剂量清开颗粒进行干预,并以大、中、小剂量促肝细胞生长颗粒(HGF)作为阳性对照,采用TUNEL染色观察肝细胞凋亡,RT-PCR检测Caspase-3 mRNA表达,采用免疫印迹方法(Western Blot)检测Caspase3表达。结果:清开颗粒各组凋亡细胞数均较HGF各组明显减少(P<0.05);清开颗粒中、高剂量组Caspase-3 mRNA表达明显低于HGF低、中剂量组(P<0.05);清开颗粒各组活化的Caspase3表达较HGF低、中剂量组显著降低(P<0.05)。结论:清开颗粒能减少内毒素肝损伤小鼠肝细胞凋亡、下调肝细胞Caspase-3的表达,提示其抑制肝细胞凋亡可能是其防治急性肝衰竭的机制之一。     

柴胡及甘草酸对小鼠肝细胞凋亡的影响

目的：研究柴胡（ＲＢ）及甘草酸（ＧＬ）对小鼠肝细胞凋亡的影响。方法：以肝／体重比，肝组织ＤＮＡ含量，组织学改变及原位凋亡细胞ＴＵＮＥＬ反应为指标，观察ＲＢ（１２．０ｇ／ｋｇ）及ＧＬ（５０ｍｇ／ｋｇ）ｉｐ，１次／８ｈ，对撇除苯巴比胺钠（ＰＢ）后引起的小鼠肝细胞凋亡的影响。结果：与对照组Ｃ相比，ＲＢ组小鼠肝／体重比及肝ＤＮＡ含量无明显回落，组织学检查未见明显凋亡改变，ＴＵＮＥＬ反应阴性，ＧＬ组小鼠肝／     

移植胎肝细胞对环磷酰胺处理小鼠存活率的影响

本文复制了小鼠免疫/造血功能抑制(IHS)模型,观察了移植胎肝细胞对IHS小鼠存活率的影响。结果发现,经静脉或脾内移植胎肝细胞(FLC)可延长IHS小鼠存活率,其效果以后一种移植途径为佳;同种FLC移植(C_(57)→ICR)和同系FLC移植(ICR→ICR)对IHS小鼠生存率延长效果类似。实验提示,移植FLC可能会改善IHS小鼠免疫和造血功能。     

环磷酰胺对小鼠肝细胞色素P450含量的影响

目的　了解环磷酰胺 (CP)对小鼠肝细胞色素P4 5 0含量的影响。方法　小鼠腹腔注射CP 2 0mg·kg-1·d-1和CP 4 0mg·kg-1·d-1,连续 4天。以聚乙二醇法制备微粒体 ,测定肝微粒体中P4 5 0的含量。结果　CP 2 0mg·kg-1和CP 4 0mg·kg-1两组动物肝微粒体P4 5 0含量与对照组相比明显下降 (P <0 .0 5 )。结论　CP具有抑制P4 5 0的作用     

鹿胶原对环磷酰胺所致小鼠白细胞减少的影响

阿胶,是驴皮经煎熬、浓缩而成的固体胶。具有滋阴补血、抗衰老等功效。近年对牛、猪皮的阿胶制剂多有报道,但对鹿皮阿胶制剂未见报道。本实验所用鹿胶原是在低温条件下提取、冻干的鹿皮胶原物质。为深入研究其对造血系统的作用影响,采用环磷酰胺造成白细胞减少的动物模型,观察鹿胶原对小鼠白细胞及骨髓有核细胞的药理作用。     

复方黄芪多糖对环磷酰胺所致小鼠毒副作用的影响

[目的]观察不同途径给予复方黄芪多糖对环磷酰胺所致小鼠毒副作用的影响.[方法]通过灌胃及腹腔注射给予小鼠相应剂量的复方黄芪多糖,并行大剂量环磷酰胺腹腔注射,观察小鼠外周血象、免疫器官指数及肝组织丙二醛的含量变化.[结果]复方黄芪多糖腹腔注射组小鼠白细胞及淋巴细胞数明显高于环磷酰胺组,脾脏指数明显升高,肝组织丙二醛含量明显降低.复方黄芪多糖灌胃大剂量组小鼠脾脏指数明显高于环磷酰胺组.[结论]复方黄芪多糖具有拮抗环磷酰胺所致小鼠毒副作用的功能,给药途径以腹腔注射为宜.     

低剂量辐射对环磷酰胺所致小鼠DNA及遗传物质损伤的影响

目的研究低剂量γ射线预照射对大剂量环磷酰胺化疗所致外周血淋巴细胞DNA及遗传物质损伤的影响。方法昆明种雄性小鼠55只,随机分为空白对照组、荷瘤对照组（假照组）、荷瘤低剂量照射组（LDR组）、荷瘤环磷酰胺化疗组（CTX组）和荷瘤低剂量照射联合化疗组（LDR＋CTX组）。小鼠常规饲养7 d后于左腹股沟皮下各接种S180肉瘤细胞（空白对照组除外）,接种后第8、11天LDR组和LDR＋CTX组小鼠给予75 mGyγ射线全身照射,照射30 h后分别给予CTX组和LDR＋CTX组小鼠腹腔注射环磷酰胺3.0 mg,第13天处死所有小鼠,分别取血,采用单细胞凝胶电泳法检测外周血淋巴细胞DNA损伤情况;采用骨髓嗜多染红细胞微核率（MNF）检测遗传物质损伤情况。结果环磷酰胺化疗后DNA损伤程度较空白对照及假照组均显著增加;环磷酰胺化疗前给予75 mGyγ射线照射则可显著降低大剂量环磷酰胺化疗所致的DNA损伤。大剂量环磷酰胺化疗后小鼠骨髓MNF较空白对照组及单纯荷瘤组有显著增加（t=3.63-5.46,P〈0.05）;环磷酰胺化疗前给予75 mGyγ射线照射则可降低环磷酰胺所致微核率的增加,但差别无统计学意义（P〉0.05）。结论大剂量环磷酰胺化疗可引起外周血淋巴细胞DNA损伤;化疗前给予75 mGyγ射线照射对DNA损伤可能产生一定的保护作用。环磷酰胺有强大的致突变作用,可导致骨髓MNF显著增加,75 mGyγ射线预照射对大剂量环磷酰胺化疗的遗传学毒性未表现出明显的保护作用。     

氧化苦参碱及甘草甜素对小鼠肝细胞凋亡的影响

目的：探讨氧化苦参碱(OM)及甘草甜素(GL)对撤除苯巴比妥钠(PB)诱导的小鼠肝细胞凋亡的影响。方法：选用昆明种小鼠,测定肝/体质量比、肝组织DNA含量,观察组织学改变及原位凋亡细胞TUNEL标记等指标,观察腹腔内注射OM 150mg/kg及GL 50mg/kg,3次/d,于36h后,对撤除PB后引起的小鼠肝细胞凋亡的影响。结果：阳性对照组肝/体质量比及肝DNA含量分别回落16.3％及32.4％;GL组分别回落16.1％及28.9％;OM组无明显回落。组织学检查及凋亡细胞TUNEL标记显示：阳性对照组及GL组小鼠肝细胞出现典型凋亡改变,TUNEL标记阳性;阴性对照组及OM组小鼠肝细胞未见明显凋亡改变。结论：OM可阻断撤除PB诱导的小鼠肝细胞凋亡,GL对其无影响。     

刺五加对环磷酰胺所致小鼠微核率影响的研究

目的　研究刺五加对环磷酰胺所致小鼠微核率的影响 ,以探讨其对突变的拮抗作用。方法　 6 0只小鼠随机分为 6组 ,连续用刺五加或蒸馏水灌胃 17d ,并在第 13d一次性腹腔注射环磷酰胺 ,之后连续用尾血涂片 5次 ,荧光显微镜观察计数微核 (MN)。结果　①刺五加无增加微核率作用 ;②环磷酰胺致微核率上升作用明显 ;③刺五加可以降低微核发生率 ,随剂量升高作用更加明显。结论　刺五加有比较明显抗突变作用 ,可开发利用到肿瘤治疗和延缓衰老等方面     

凋亡基因Caspase3在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨乳腺癌进展中Caspase3基因表达的临床意义.方法用免疫组织化学和Western Blot技术检测21例乳腺腺病、21例乳腺纤维腺瘤、96例原发性乳腺癌病灶中Caspase3蛋白表达情况.结果 乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤、乳腺癌中Caspase3蛋白表达阳性率分别为85.72%(18/21)、61.90%(13/21)、23.96%(23/96),乳腺癌Caspase3蛋白表达阳性率明显低于乳腺良性病变(P=0.000).乳腺癌Caspase3蛋白表达阳性率越低,淋巴结转移个数越多,临床分期越高(P=0.010).结论 Caspase3对判断乳腺良恶性疾病及乳腺癌的发展程度具有参考价值.     

胃溃疡愈合与Caspase3的表达及细胞凋亡的关系研究

目的:探讨胃溃疡愈合与Caspase3及凋亡的关系.方法:采用原位末端标记(TUNEL)法和免疫组化SABC法,检测溃疡愈合前后胃黏膜组织中细胞凋亡和Caspase3的表达.结果:溃疡愈合后胃黏膜组织中Caspase3的表达减弱,与愈合前相比较差异有统计学意义(P＜0.01);与此同时,溃疡愈合后胃黏膜上皮细胞凋亡指数明显下降,与愈合前相比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:Caspase3过表达促进胃黏膜上皮细胞凋亡,导致胃溃疡发生,并影响其愈合.     

蟾蜍灵对EAhy926细胞增殖、凋亡及Caspase3,Bcl-2表达的影响

[目的]探讨蟾蜍灵对血管内皮细胞EAhy926的增殖抑制作用及其机制.[方法]体外培养血管内皮细胞EAhy926,用不同浓度蟾蜍灵进行干预.通过四甲基偶氮唑盐(MTI)法检测细胞增殖抑制率;用倒置光显微镜观察细胞形态变化;用Hoechst33342/PI双荧光染色,荧光显微镜观察细胞核形态变化;以流式细胞术检测细胞凋亡的比率;应用半定量逆转录PCR检测EAhy926细胞中Caspase3和Bcl-2的mRNA表达.[结果]蟾蜍灵对EAhy926细胞生长具有抑制作用;且在0.0625-1μmol/L范围内呈时间、剂量依赖性;荧光显微镜下可见0.1μmol/L的蟾蜍灵作用24 h可诱导EAhy926细胞凋亡,作用48h可引起细胞部分坏死;流式细胞术检测出典型的“凋亡峰”,凋亡率8.2％～36.5％,且呈时间依赖性.半定量RT-PCR显示Caspase3 mRNA表达较对照组明显增强,Bcl-2 mRNA表达较对照组明显减弱,且二者均呈剂量依赖性.[结论]蟾蜍灵抑制EAhy926细胞增殖、诱导其凋亡,其机制可能与上调Caspase3和下调Bcl-2基因表达有关.     

高压氧后处理对神经病理性疼痛大鼠脊髓组织细胞凋亡及 Caspase -3 mRNA 表达的影响

目的：探讨高压氧后处理对神经病理性疼痛大鼠脊髓组织细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）表达的影响。方法成年雄性SD大鼠18只,采用随机数字表法,将其分为S、NP、H组3组（n＝6）。 NP组和H组采用坐骨神经慢性压迫损伤法建立神经病理性痛模型,S组仅行假手术。 H组于术后1 d开始给予高压氧后处理,1次／d连续5次,S组和NP组单纯放入氧舱100 min而不接受后处理。于术后3、5、7、14 d测定机测定各组大鼠机械缩足反射阈值（ MWT）和热缩足反射潜伏期（ TWL）。于术后14 d测定痛阈后处死大鼠,采用流式细胞仪测定细胞凋亡情况,采用RT-PCR法测定Caspase-3 mRNA的表达,以及脊髓组织的超微结构。结果与S组比较,NP组术后各时点均MWT降低、TWL缩短,且脊髓组织细胞凋亡率增高、Caspase-3 mRNA表达上调（ P＜0.05）。与NP组相比,H组术后各时点均MWT升高、TWL延长,且H组脊髓组织细胞凋亡率降低、Caspase-3 mRNA表达下调（ P＜0.05）。 S组神经元超微结构完整,各细胞器形态正常。与S组相比,NP组神经细胞核膜模糊,核内异染色质凝聚、边集。 H组神经元细胞核近圆形,核膜较清楚,核内异染色质凝聚、边集少见,微环境较好。结论高压氧后处理可减轻大鼠神经病理性痛并抑制神经细胞的凋亡,其机制可能与其抑制Caspase-3 mRNA表达有关。     

肝细胞刺激因子对环磷酰胺致小鼠肝细胞损伤的保护作用

目的 研究环磷酰胺(CTX)对肝细胞的损伤及肝细胞刺激因子(HSS)对该损伤的保护作用。方法 应用原代小鼠肝细胞混悬培养，检测肝细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和肝细胞谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量变化。结果 CTX可使LDH漏出增多，同时肝细胞GSH含量减少，MDA含量增加，HSS可部分逆转上述变化。结论 CTX可致肝细胞损伤，HSS降低肝细胞MDA含量可能是其保肝机制之一。