白介素-11对小鼠异基因骨髓移植后aGVHD的预防作用

目的 评估白介素-11(Interleukin-11,IL-11)对小鼠异基因骨髓移植(allo-BMT) 后急性移植物抗宿主病(aGVHD) 的预防作用. 方法 用主要组织相容性抗原(MHC) 完全不合的纯种近交系SPF级小鼠,雄C57BL/6(H-2b)为供鼠,雌性BALB/C(H-2d)为受鼠,建立allo-BMT/aGVHD 动物模型,随机分3组:模型对照组、IL-11组(剂量为500μg/(kg·d)、环孢菌素A(CsA)组(剂量为10mg/(kg·d),观察其对aGVHD 的预防作用. 结果 IL-11组、CsA组受鼠生存时间均长于模型对照组(P<0.01);IL-11组、CsA组受鼠aGVHD临床表现和病理改变均较模型对照组明显轻.IL-11组、CsA组之间平均生存时间比较无统计学差异(P=0.901). 结论 IL-11可有效预防小鼠allo-BMT后aGVHD,减轻其症状和病理损害程度,显著延长平均生存时间.     

雷帕霉素抑制小鼠骨髓移植后移植物抗宿主病作用的初步研究

目的：探讨新型免疫抑制药物雷帕霉素（RAPA）对小鼠异基因骨髓移植（allo-BMT）后急性移植物抗宿主病（aGVHD）的抑制作用，并与传统免疫抑制药物比较作用效果。方法：用主要组织相容性抗原（MHC）完全不合的纯种近交系小鼠[供鼠为雄性c57BL／6J（H-2“）鼠，受鼠为雌性BALB／c（H-2^d）鼠]建立allo-BMT／aGVHD动物模型，随机分5组，第1、2和3组分别给予RAPA、环孢菌素A（CsA）加甲氨蝶呤（MTX）、RAPA加CsA加MTX联合用药作为aGVHD抑制方案，第4组为空白对照，第5组为未移植组。观察各组小鼠骨髓移植后aGVHD的出现情况。结果：移植小鼠出现典型的aGVHD症状，未用aGVHD预防方案的移植小鼠（第4组）死亡高峰在移植后第5～7天，死亡率达100％。用不同aGVHD预防方案的第1～3组小鼠aGVHD症状明显减轻，平均生存时间（MST）较第4组显著延长（分别延长3．5、1．9和6．0d，P〈0．05）。不同aGVHD预防方案的移植小鼠之间，移植后外周血常规变化差异无显著性。经用各预防方案后，移植小鼠aGVHD病理表现减轻，且RAPA、CsA和MTX联合用药组的病理分级轻于RAPA单药组或CsA加MTX标准方案组。结论：RAPA可以显著抑制体外T淋巴细胞增殖效应，增强小鼠对骨髓移植的免疫耐受，对小鼠骨髓移植后移植物抗宿主病（GVHD）有明显抑制作用，可减轻GVHD症状和病理损害程度，延长平均生存时间。     

雷帕霉素抑制小鼠骨髓移植后移植物抗宿主病作用的初步研究

目的:探讨新型免疫抑制药物雷帕霉素(RAPA)对小鼠异基因骨髓移植(allo-BMT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的抑制作用,并与传统免疫抑制药物比较作用效果。方法:用主要组织相容性抗原(MHC)完全不合的纯种近交系小鼠[供鼠为雄性C57BL/6 J(H-2b)鼠,受鼠为雌性BALB/c(H-2d)鼠]建立allo-BMT/aGVHD动物模型,随机分5组,第1、2和3组分别给予RAPA、环孢菌素A(CsA)加甲氨蝶呤(MTX)、RAPA加CsA加MTX联合用药作为aGVHD抑制方案,第4组为空白对照,第5组为未移植组。观察各组小鼠骨髓移植后aGVHD的出现情况。结果:移植小鼠出现典型的aGVHD症状,未用aGVHD预防方案的移植小鼠(第4组)死亡高峰在移植后第5~7天,死亡率达100%。用不同aGVHD预防方案的第1~3组小鼠aGVHD症状明显减轻,平均生存时间(MST)较第4组显著延长(分别延长3.5、1.9和6.0 d,P<0.05)。不同aGVHD预防方案的移植小鼠之间,移植后外周血常规变化差异无显著性。经用各预防方案后,移植小鼠aGVHD病理表现减轻,且RAPA、CsA和MTX联合用药组的病理分级轻于RAPA单药组或CsA加MTX标准方案组。结论:RAPA可以显著抑制体外T淋巴细胞增殖效应,增强小鼠对骨髓移植的免疫耐受,对小鼠骨髓移植后移植物抗宿主病(GVHD)有明显抑制作用,可减轻GVHD症状和病理损害程度,延长平均生存时间。     

阿扎胞苷和CsA＋MTX对小鼠Allo—PBSCT后急性GVHD的预防效果比较

摘要：目的比较阿扎胞苷（AzaC）和环孢素A＋甲氨蝶呤（CsA＋MTx）对小鼠异基因外周血干细胞移植（A110～PBSCT）后发生急性移植物抗宿主病（aGVHD）的预防效果并初步分析其原因。方法雄性SPF级BAI。B／c（H-2d）小鼠为供鼠，雌性C57BI。／6（H-2b）小鼠为受鼠，随机选20只雌性C57BL／6（H-2b）受鼠为预处理组。另将供、受鼠随机分为PBS组、AzaC组和CsA＋MTX组各40只（每组含雄性供鼠、雌性受鼠各20只）。给PBS组、AzaC组和CsA＋MTX组的受鼠全身放疗（TBI）后输注供鼠T细胞去除（TCD）的外周血单个核细胞（PBMNC）和T细胞，再皮下注射PBS、AzaC和CsA＋MTX。检测受鼠的嵌合状态、生存天数、aGVHD观察及平均体重变化百分率和外周血CD4＋CD25＋FOXP3＋Tregs百分率。结果PBS组、AzaC组和csA＋MTx组受鼠外周血白细胞中均检测到雄性供鼠的sRY基因，未移植组＋20d内相继死亡，PBS组较早出现较严重的aGVHD，CsA＋MTX组随后也出现了aGVHD，而AzaC组未出现aGVHD。AzaC组的平均体重变化百分率、生存天数和外周血CD4＋CD25＋FOXP3＋Tregs百分率均与CsA＋MTX组和PBS组差异有统计学意义（P〈O．01）。结论AzaC预防小鼠A110—PBSCT后aGVHD的效果优于CsA＋MTX，可能与其增加了移植后外周血cD4＋CD25＋FOXP3＋Tregs数量有关。     

小鼠同种异基因骨髓移植aGVHD动物模型的建立

目的：建立一个德定可靠的异基因骨髓移植（allogeneic bone marrow transplantation,Allo-BMT）急性移植物抗宿主病（acute graft-vetsus-host disease,aGVHD）动物模型,为Allo-BMT中aGVHD研究提供理想的实验平台。方法：以雄性C57BL／6（H-2b）为供鼠,雌性BALB／C（H-2d）为受鼠,受鼠致死性全身照射（total body irradiation,TBI）（8.0Gy）预处理后,在移植物中混合不同比例的供鼠骨髓细胞和脾细胞以引起不同程度的aGVHD。根据存活期、外周血白细胞计数、临床表现及病理检查等判断aGVHD程度。结果：单纯异基因骨髓组只有部分小鼠出现aGVHD,75％的小鼠长期存活（〉30d）。混合不同比例的供鼠骨髓细胞和脾细胞的Allo-BMT小鼠出现aGVHD的时间和程度均有差异,其中骨髓与脾细胞1.5：1或1：1混合组小鼠,均可在相对集中的时间内（8-15d）观察到典型的aGVHD临床和病理改变。结论：建立Allo-BMT aGVHD模型需要加入一定比例的脾细胞,供鼠骨髓与脾细胞1.5：1或1：1混合进行的Allo-BMT,可作为理想的aGVHD动物模型。     

肾上腺素与rhG—CSF协同动员小鼠造血干祖细胞的研究

目的通过比较肾上腺素和重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）单独或联合应用动员小鼠外周血造血干祖细胞（HSPC）的效果,以了解肾上腺素对HSPC的动员作用,为临床制定更为优良的动员方案奠定实验方面的基础。方法BALB／c小鼠48只,随机分成4组,每组12只。A组作为对照组,皮下注射生理盐水（NS）100μl·d^-1;B组皮下注射rhG—CSF250μg·kg^-1·d^-1;C组腹腔注射肾上腺素2．5mg·kg^-1·d^-1;D组皮下注射rhG—CSF250μg·kg^-1·d^-1＋腹腔注射肾上腺素2．5mg·kg^-1·d^-1（rhG—CSF后3h）,各组均连续用药5天。动态观察各组小鼠外周血中自细胞数（WBC）、Lin^-c—kit^＋（KL）、Lin^-c—kit^＋Sca-1^＋（KSL）细胞比例的变化。结果D组外周血WBC数及KL、KSL细胞比例明显高于B组（P〈0．05）或C组及A组（P〈0．01）;B组外周血WBC数及KL、KSL细胞比例明显高于C组及A组（P〈0．01）;C组外周血WBC数明显高于A组（P〈0．01）,但KL、KSL细胞比例与A组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论肾上腺素可协同rhG—CSF参与HSPC的动员。     

骨化三醇及复方丹参对大鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病的影响

目的 观察骨化三醇及丹参对异基因骨髓移植(Allo-BMT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响.方法 以雄性SD大鼠为供鼠,雌性Wistar大鼠为受鼠,受体大鼠随机分成A、B、C、D组,移植当天所有受鼠均接受8.5Gy的全身照射(TBI),于照射后4～6h,A组,为骨髓细胞与脾细胞1:1.5联合输注组:输注供鼠的骨髓细胞2×108个/kg+脾细胞3×108个/kg,即GVHD模型组.B、C、D组除建立GVHD模型外,B组为骨化三醇组;C组为中药制剂复方丹参组;D组为骨化三醇和中药制剂复方丹参联合组.观察各组大鼠生存期及有无aGVHD的临床及病理表现.结果 A、B、C、D组大鼠均于50d观察期内死亡,并有aGVHD的临床及病理表现,但是B、C、D组大鼠aGVHD的发病时间较A纽延迟,临床aGVHD评分亦较A组大鼠低(P<0.05),平均生存时间较A组大鼠明显延长(P<0.05),病理表现较A组大鼠轻.结论 骨髓细胞与脾细胞混合榆注可以引起明显的aGVHD,骨化三醇及丹参能够减轻Allo-BMT后aGVHD的发生.     

FTY720对小鼠异基因骨髓移植后急性GVHD的预防作用

目的 评估FTY720对小鼠异基因骨髓移植诱发急性移植物抗宿主病（aGVHD）的预防作用。方法36只受体BALB／c小鼠,接受直线加速器一次性全身照射后4～6h内,经尾静脉注射供体小鼠骨髓和脾脏细胞。受体小鼠分为移植方式对照组（A组）和异基因移植治疗组（B组）;同时A组分未移植组（A1）、同基因移植组（A2）和异基因移植对照组（A3）,B组分CsA5mg／kg组（B1）,FTY7200．3mg／kg组（B2）和FTY7201mg／kg组（B3）。移植后受体小鼠,根据生存时间、体重变化和病理组织学检查,评估各组aGVHD严重程度。结果 异基因移植各组在移植后第7d造血开始恢复,第14d流式细胞仪检测显示异基因骨髓细胞已植入,病理组织学检查A3组发生重度aGVHD;与B1和B2组比较,B3组aGVHD严重程度最低。结论小鼠异基因骨髓移植后给予FTY720具有预防aGVHD作用．以剂量为1mg／kg时作用显著。     

痛泻要方对肠易激综合征模型大鼠血清5-HT和NO影响的实验研究

目的探讨肠易激综合征的发病机理以及痛泻要方煎剂对肠易激综合征内脏高敏感性模型大鼠的治疗作用。方法选用清洁级新生SD大鼠,采用结肠慢性刺激法加夹尾刺激法造模。造模成功后,将实验动物分为空白对照组（A组）、模型对照组（B组）、中药低剂量组（C组）、中药中剂量组（D组）、中药高剂量组（E组）、西药奥替溴铵（F组）。A组和B组以生理盐水按4mL／100g（40g·kg^-1·d^-1）灌胃,C、D、E组分别以痛泻要方煎剂0．4mL／100g（4g·kg^-1·d^-1）、1．2mL／100g（12g·kg^-1·d^-1）、4mL／100g（40g·kg^-1·d^-1）灌胃,F组按4mL／100g（150g·kg^-1·d^-1）灌胃,各组2次／d,连续30d？结果经中药痛泻要方及西药治疗的模型大鼠血清5-HT含量均明显降低,而血清NO含量明显升高。结论痛泻要方煎剂能降低模型大鼠血清5-HT含量,降低肠道敏感性。     

金纳多片对糖尿病小鼠血糖的影响

目的研究金纳多片对糖尿病小鼠血糖的影响。方法采用链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病小鼠模型,造模成功小鼠随机分为模型组、金纳多片高剂量（200 mg·kg^-1·d^-1）、中剂量（100 mg·kg^-1·d^-1）和小剂量组（50 mg·kg^-1·d^-1）,优降糖组（60 mg·kg^-1·d^-1）,连续给药30 d后,观察血糖的变化。结果金纳多片可明显降低糖尿病小鼠的血糖。结论金纳多片有明显的降糖作用,为临床上防治糖尿病提供了理论依据。     

昆明山海棠提取物预防急性移植物抗宿主病的实验研究

目的观察昆明山海棠（THH）提取物在急性移植物抗宿主病（aGVHD）中的作用及其可能的作用机制。方法建立aGVHD模型,BALB/c受鼠清髓性预处理后分别用生理盐水、环孢素A（CsA）、THH及CsA＋THH混合物灌胃。观察移植后受鼠aGVHD、生存时间、CD4^＋/CD8^＋比率、CD4^＋CD25^＋T细胞比率及脾细胞Foxp3 mRNA水平。结果生理盐水组出现典型aGVHD,20天内全部死亡。其余3组aGVHD临床、病理表现及生存时间均改善,组间无差异;CD4^＋/CD8^＋比率、受鼠CD4^＋CD25^＋T细胞比率及脾Foxp3 mRNA表达较生理盐水组升高,以联用组明显。结论THH可减轻小鼠aGVHD,延长其生存时间。机制可能与增加CD4^＋CD25^＋T细胞比率,上调Foxp3 mRNA表达,调节CD4^＋/CD8^＋比率有关。THH和小剂量CsA联合有协同作用。     

Graft-versus-leukemia effects from donor lymphocyte infusion after nonmyeloablative allogeneic bone marrow transplantation in mice

Background Nonmyeloablative allogeneic bone marrow transplantation has been used since the 1990s as a new hematological stem cell transplantation strategy for treating hematological diseases. The purpose of this study was to explore the graft-versus-leukemia (GVL) effects of donor lymphocyte infusions (DLIs) after nonmyeloablative allogeneic bone marrow transplantations, while assessing the declines in treatment-associated morbidity, mortality, and graft-versus-host disease (GVHD).Methods A total of 615 (H-2k) mice were injected with L615 tumor cells and received 500 cGy (60Coγ-ray) irradiation three days later, followed by an allogeneic bone marrow transplantation (allo-BMT). The allo-grafts consisted of 3×10（7） bone marrow cells and 1×10（7） spleen cells from BALB/C (H-2d) donor mice. Two days after the allo-BMT, the recipient mice were given 200 mg/kg of cyclophosphamide. Subsequently, recipient mice were infused with either donor spleen cells ［2×10（7）］ on day 14 or 21, or donor spleen cells ［5×10（7）］ pretreated with hydrocortisone and cyclosporin A (CsA) in vitro on day 14 post-BMT.Results The median survival time of mice that received DLI on day 21 and pretreated DLI on day 14 post-BMT was longer than that of controls and the day 14 DLI group (P&lt;0.01). No evidence of severe GVHD was observed in the day 21 DLI group nor in the day 14 treated DLI group. Mixed chimerism was confirmed in the day 14 DLI group, the day 14 treated DLI group, and the day 21 DLI group on the thirteenth day post-transplantation; full donor chimerism was observed two weeks after DLI.Conclusion Donor lymphocyte infusion after nonmyeloablative bone marrow transplantation may reduce transplantation-associated morbidity and mortality while strengthening graft-versus-leukemia effects.     

异基因造血干细胞移植治疗重症再生障碍性贫血的评价

目的评价以环磷酰胺（CTX）为预处理方案行异基因造血干细胞移植（Allo—HSCT）治疗重症再生障碍性贫血（SAA）的疗效。方法对1例SAA患者行同胞供者Allo—HSCT治疗。预处理方案为CTX 50mg／kg^-1·d^-1×4d;干细胞来源采用外周血＋骨髓;输注单个核细胞数（MNC）为10．41×10^8／kg,CD34^＋细胞计数为6．86×10^6／kg。预防移植物抗宿主病（GVHD）采用环孢素A（CsA）加短程甲氨蝶呤（MTX）加霉酚酸酯（MMF）。结果患者获得造血重建,第14天中性粒细胞数（ANC）≥0．5×10^9／L、血小板计数（PLT）≥20×10^9／L,第96天血型转变为供者型（B→O）。患者出现Ⅳ度急性GVHD（aGVHD）,经积极治疗后控制。150d内患者出现急性化脓性扁桃体炎、口腔溃疡、急性支气管炎、带状疱疹病毒感染、巨细胞病毒血症、肺炎,经积极治疗后均好转。随访24个月,患者无病存活。结论以CTX为预处理方案allo-HSCT是治愈SAA的一种有效方法。     

淫羊藿总黄酮对心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响

目的研究淫羊藿总黄酮(TFE)对异丙肾上腺素(ISO)所致收缩性心力衰竭大鼠心功能的保护作用。方法取SD雄性大鼠,采用皮下注射ISO方法建立心力衰竭模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组(n=15),美托洛尔组(n=12,8 mg·kg~(-1)·d~(-1)),TFE小剂量组(n=11,50 mg·kg~(-1)·d~(-1)),TFE中剂量组(n=10,100 mg·kg~(-1)·d~(-1)),TFE大剂量组(n=12,200 mg·kg~(-1)·d~(-1)),另取皮下注射生理盐水的正常大鼠作为对照组(n=10)。给药8周后观察各组动物血流动力学变化,进行心肌纤维化相关指标测定。结果与对照组比较,TFE可呈剂量依赖性逆转左心室质量指数和血流动力学参数(P<0.05,P<0.01)。减轻组织学的改变,包括心肌细胞肥厚、心肌细胞变性、炎性细胞浸润和心脏纤维组织增生(P<0.05,P<0.01),降低左心室病理积分(P<0.05,P<0.01);降低心肌组织中羟脯氨酸的含量(P<0.05);此外,TFE可明显抑制心力衰竭大鼠血清TNF-α、NE、AngⅡ和BNP水平(P<0.05,P<0.01)。结论TFE可抑制ISO所致心力衰竭大鼠心肌纤维化。     

丙烯酰胺对小鼠海马神经胶质酸性蛋白表达的影响

目的研究丙烯酰胺对小鼠海马神经胶质酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法健康雄性昆明小鼠40只,随机分为对照组和5 mg.kg-1.d-1、30 mg.kg-1.d-1、60 mg.kg-1.d-13个剂量实验组,每组10只。对照组小鼠腹腔注射生理盐水;实验组小鼠分别代以5 mg.kg-1.d-1、30 mg.kg-1.d-1、60 mg.kg-1.d-1丙烯酰胺水溶液腹腔注射。5 d时分别处死各组小鼠,取出大脑,Zambon i固定液固定,常规冰冻制片,免疫组织化学染色,光镜观察。结果5 mg.kg-1.d-1、30 mg.kg-1.d-1、60 mg.kg-1.d-13个剂量实验组小鼠海马中GFAP阳性表达比对照组增强(P<0.05),但5 mg.kg-1.d-1、30 mg.kg-1.d-1剂量组间未见明显差异(P>0.05);60 mg.kg-1.d-1实验组强于5 mg.kg-1.d-1、30 mg.kg-1.d-1剂量组(P<0.05)。结论丙烯酰胺染毒后小鼠海马神经胶质酸性蛋白表达增高,提示其对小鼠海马有一定的损伤作用。     

复方护肝汤对刀豆蛋白A诱导小鼠肝损伤的保护作用

目的: 探讨复方护肝汤对刀豆蛋白A (ConA)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及其可能作用机制。方法: 将BALb/c小鼠随机分为正常对照组、ConA诱导肝损伤组、联苯双酯治疗组(1.5 mg·kg-1 ·d-1)及复方护肝汤低、中、高剂量(7、14、28 g·kg-1·d-1)组,每组10只。尾静脉注射ConA 12.5 mg/kg,每周1次;对照组尾静脉注射250 μl PBS溶液,每周1次。均连用7周。除对照组外,其余各组均诱导小鼠急性肝损伤模型。分别检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)、透明质酸酶(HA)和肝组织匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的水平。结果: 经复方护肝汤治疗后,ConA诱导肝损伤小鼠的血清ALT、AST、ALP、GGT、HA和肝组织匀浆MDA、NO的水平均比模型组减低(P < 0.05~P < 0.01);中、高剂量组血清SOD水平均较模型组显著增高(P < 0.01)。结论: 复方护肝汤对ConA诱导小鼠急性肝损伤具有较好的防治功能,其作用机制可能与其抗氧化活性有关。     

芦荟凝胶对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜变态反应的影响

目的 观察芦荟凝胶（AL）对变应性鼻炎（AR）大鼠的治疗作用.方法 选取60只SD大鼠,随机分为5组（每组n=12）：正常对照组（NC组）,AR组,AL 100 mg·kg^1·d^-1组（AL1组）,AL 200 mg·kg^-1·d^-1组（AL2组）,AL 400 mg·kg^-1·d^-1组（AL4组）.以卵清蛋白造模为变应性鼻炎大鼠后分别给予不同剂量的药物干预,NC组药物以生理盐水替代.记录卵清蛋白攻击后30 min内大鼠抓鼻、喷嚏、流涕等变态反应症状的次数,计算大鼠行为学得分,并用组织病理学方法观察各组大鼠鼻黏膜改变.结果 与NC组相比,其他各组炎性反应增高,变态反应症状显著增多（P〈0.01）;与AR组相比,AL2组、AL4组炎性反应减轻,变态反应症状显著减少（P〈0.01）,AL1组无明显统计学差异（P＞0.05）.结论 当AL剂量为200～400 mg·kg^-1·d^-1时,可有效减轻AR大鼠变态反应症状及鼻黏膜炎性反应.