1B5单抗抑制白念珠菌对上皮细胞、内皮细胞的粘附

目的 探讨抗白念珠菌保护性单抗1B5的保护机制。方法 分离人颊粘膜上皮细胞并对胎儿脐静脉内皮细胞进行原代培养，在此基础上对白念珠菌进行粘附抑制实验。结果 1B5单抗能显著减少人口腔颊粘膜上皮细胞和胎儿脐静脉内皮细胞表面粘附的白念珠菌孢子数目，这种抑制作用与1B5单抗浓度成正比关系。结论 我们认为1B5单抗抗白念珠菌感染的保护性作用机制是抗体抑制白念珠菌对粘膜上皮、血管内皮细胞的粘附，降低了白念珠菌的侵袭能力。     

抗白念珠菌胞壁外膜单克隆抗体的制备

目的：为进一步研究白念珠菌保护性抗体免疫以及系统性念珠菌病早期诊断奠定基础。方法运用细胞融合、间接ＥＬＩＳＡ、ⅡＦ等技术,制备抗白念珠菌胞壁外膜单克隆抗体。结果建立了三株分泌抗白念珠菌壁外膜成分单克隆抗体杂交瘤细胞株－ＩＢ５、３Ｅ８、４Ｃ７;单抗亚类分析显示１Ｂ５为ＩｇＭ,３Ｅ８,４Ｃ７为ＩｇＧ１;这三株单抗不仅能使白念珠菌表面染上荧光,也能使芽管表面带上荧光。结论制备成功三株抗白念珠菌胞壁外膜成     

单克隆天然抗角蛋白抗体IgM 3B4体外抑制白念珠菌芽管形成及粘附作用

目的:观察单克隆天然抗角蛋白抗体IgM 3B4在体外抑制白念珠菌芽管形成及抑制白念珠菌与宿主细胞粘附的作用.方法:将不同浓度的单克隆天然抗角蛋白抗体IgM 3B4分别与白念珠菌酵母相悬液在有利于芽管形成的条件下共同孵育,倒置显微镜下计数白念珠菌总数以及白念珠菌芽管数;将不同浓度的单克隆天然抗角蛋白抗体IgM 3B4与白念珠菌酵母相和人角质形成细胞混悬液、白念珠菌酵母相和人口腔黏膜上皮细胞混悬液、白念珠菌酵母相和胎儿脐静脉内皮细胞混悬液共同孵育,分别计数人角质形成细胞、人口腔黏膜上皮细胞、胎儿脐静脉内皮细胞上粘附的白念珠菌数.结果:与对照组比较,不同浓度的单克隆天然抗角蛋白抗体IgM 3B4均能抑制白念珠菌芽管生成,并且抗体浓度越高,抑制白念珠菌芽管形成的作用越明显;同时单克隆天然抗角蛋白抗体IgM 3B4能够显著减少白念珠菌与角质形成细胞、上皮细胞、内皮细胞的粘附,其抑制作用与单克隆天然抗角蛋白抗体IgM 3B4的浓度呈正相关.结论:单克隆天然抗角蛋白抗体IgM 3B4在体外能够抑制白念珠菌芽管形成,能够抑制白念珠菌与人角质形成细胞、人口腔黏膜上皮细胞、胎儿脐静脉内皮细胞的粘附,从而降低白念珠菌的侵袭力,提示天然抗体IgM在机体抗真菌感染的天然免疫中可能具有积极的作用.     

抗白念珠菌鸡卵黄抗体的制备及温度对其效价的影响

目的:制备抗白念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)并检测其生物学性能.方法:白念珠菌标准菌株10231灭活后作为抗原免疫25周龄产蛋海蓝鸡,从水溶法提取鸡卵黄IgY抗体.用考马斯亮蓝染色法测定IgY抗体提取液的蛋白浓度.用Tris-tricine电泳测定提取蛋白的相对分子质量、纯度,Western blot确定蛋白来源.以免疫组织化学检验抗白念珠菌IgY抗体与白念珠菌结合的特异性.ELISA测定抗白念珠菌IgY抗体的抗菌效价.结果:IgY抗体液中蛋白浓度为7.9 g/L,IgY抗体的纯度达到91.5%.提取的IgY抗体与鸡血清和正常鸡IgY抗体具有同源性.提取的IgY抗体可与白念珠菌发生特异性结合. ELISA测定抗白念珠菌IgY抗体的效价达到1:12 000.结论:研究得到的IgY,产量和纯度高,效价好,体温条件下48 h效价没有降低.在体外能够特异性地与白念珠菌结合.     

三株抗白念珠菌单克隆抗体的制备与鉴定

目的 :为进一步研究白念珠菌保护性抗体以及系统性念珠菌病早期诊断奠定基础。方法 :运用细胞融合、间接ELISA、IIF、SDS PAGE及免疫印迹等技术 ,制备并鉴定抗白色念珠菌单克隆抗体。结果 :建立了3株分泌抗白念珠菌胞壁单克隆抗体杂交瘤细胞株1B5、3E8、4C7 ,亚类分析显示1B5为IgM ,3E8和4C7为IgG1,3株单抗皆能使白念珠菌孢子和芽管染上荧光 ,1B5单抗能识别白念珠菌胞壁外膜上分子量约为32×103u抗原成分。结论 :制备成功3株抗白念珠菌胞壁外膜成分单克隆抗体 ,其中1B5单抗是抗白念珠菌胞壁外膜上分子量约为32×103u抗原成分的单克隆抗体。     

抗白念珠菌IgY的动物实验研究

目的:制备抗白念珠菌特异性IgY,并对其活性及应用进行研究。方法:自烧伤继发感染白念珠菌病人的创面分离出的白念珠菌免疫蛋鸡,并对从该鸡产的蛋白中分离提取出的特异性IgY进行纯化及活性测定,同时用于烧伤大鼠感染白念珠菌的预防。结果:本实验制备的IgY有与白念珠菌特异性结合的能力,并能明显抑制烧伤鼠创面(痂下组织)继发感染白念珠菌。结论:抗白念珠菌特异性IgY有助于烧伤鼠预防白念珠菌的继发感染     

抗白念菌IgY的动物实验研究

目的：制备抗白念珠菌特异性IgY,并对其尖性及应用进行研究。方法：自烧伤继发感染白念珠菌病人的创面分离出的白念珠菌免疫蛋鸡,并对从该鸡产的蛋白中分离提取出的特异性IgY进行纯化及活性测定,同时用于烧伤大鼠感染白念珠菌的预防。结果：本实验制备的IgY有与白念珠菌特异性结合的能力,并能明显抑制烧伤鼠创面（痂下组织）继发感染白念珠菌。结论：抗白念球菌特异性IgY有助于烧伤鼠预防白念珠菌的继发感染。     

特异性抗体在系统性念珠菌感染中作用的研究

目的:探讨特异性抗体在抗念珠菌感染中的作用.方法:动物试验分三组,即A、B两组均为昆明鼠组,C组为裸鼠组,各组均行气管内接种念珠菌悬液,A、B组在接种前腹腔注射免疫抑制剂,B组在接种的同时静注特异性抗体,分批处死后行组化检查.结果:B组血白细胞数较A组升高,肺内中性粒细胞(PMN)渗出增加,真菌生长不良,死亡率下降;C组肺内大量PMN渗出,真菌发育差,死亡率为零.结论:特异性抗体有抗念珠菌感染的作用;PMN在抗念珠菌感染中起重要作用.     

单抗Mab03.2C1C2影响白念珠菌芽管形成及粘附作用的实验研究

目的观察抗白念珠菌芽管单抗Mab03.2C1C2在体外对白念珠菌感染的保护性作用.方法将不同浓度的Mab03.2C1C2分别与白念珠菌孢子悬液、白念珠菌孢子和人口腔粘膜上皮细胞混合液、白念珠菌孢子和胎儿脐静脉内皮细胞混合液共同孵育,观察Mab03.2C1C2对白念珠菌芽管生成的抑制作用及其对白念珠菌对上皮细胞、内皮细胞粘附的抑制作用.结果Mab03.2C1C2能显著降低白念珠菌芽管生成率及在芽管形成条件下对上皮细胞、内皮细胞的粘附,其抑制作用与该单抗的浓度成正比.结论Mab03.2C1C2在体外能抑制白念珠菌芽管的形成,通过抑制白念珠菌芽管的形成而抑制白念珠菌对上皮细胞、内皮细胞的粘附,降低白念珠菌的侵袭力.     

树突状细胞与白念珠菌感染的研究进展

白念珠菌是一种机会性致病菌,宿主对白念珠菌的识别和免疫应答是其免疫系统与白念珠菌相互作用的结果。树突状细胞在抗白念珠菌感染免疫中起重要作用,可以通过产生不同的细胞因子诱导CD4+T细胞向不同类型的Th细胞分化,从而产生不同的免疫应答,最终影响白念珠菌感染的结局。本文对白色念珠菌的易感性、免疫应答机制及树突状细胞与白念珠菌的联系进行了综述,为进一步研究白念珠菌等感染性疾病的发病机制和治疗提供了新思路。     

分泌抗体的杂交瘤细胞株的制备

目的应用杂交瘤技术制备出分泌抗肺癌抗体杂交瘤细胞株,为肺癌的早期诊断和免疫治疗提供可能靶点．方法用肺癌细胞株作免疫原免疫健康BALB／C小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,获得分泌高滴度抗肺癌抗体的杂交瘤细胞株,用间接ELISA和检测单抗体的特异性,双抗体夹心法测定免疫球蛋白同种型．结果通过细胞融合,筛选出2株持续分泌抗肺癌抗体的杂交瘤细胞株C5、B8,其分泌的抗体为IgM亚类,κ亚型,并和肺癌细胞发生特异性反应．结论成功完成细胞融合,制备了分泌抗体的杂交瘤细胞株．     

抗伏马菌素B1单克隆抗体的制备及鉴定

目的建立抗伏马菌素B1(FB1)的单克隆杂交瘤细胞株,制备抗FB1的单克隆抗体(McAb)。方法采用FB1-KLH偶联物小剂量长周期免疫BALB/c小鼠后,采用细胞融合方法获得分泌抗FB1的杂交瘤细胞株,采用多次亚克隆的方法建立了4株稳定分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株。腹水诱生法获得大量McAb,采用抗体亚类测定试剂盒鉴定抗体的亚类,SDS-PAGE测定抗体分子量,McAb的特异性和灵敏度用间接竞争抑制ELISA。结果免疫小鼠血清检测结果显示经过5次免疫后血清的效价稳定在1×10-6,经过4次亚克隆后建立4株稳定分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株,获得腹水,纯化抗体,抗体亚类属于IgG2a类,轻链为κ,轻链和重链的相对分子质量分别是55000和32000,ELISA检测抗体特异性显示可与FB1发生特异性反应,采用此抗体建立间接竞争抑制ELISA方法的线性范围在2～500ng/ml。结论制备了特异性和灵敏度较高的抗FB1单克隆抗体,为建立伏马菌素免疫学检测方法打下良好基础。     

抗hnRNP B1单克隆抗体的制备与鉴定

目的　建立分泌抗不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein,hn RNP) B1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并对分泌的单克隆抗体进行免疫学鉴定。方法　用人工合成的19肽hn RNP B1作为免疫原,采用皮下多点注射及腹腔注射方法免疫BAL B/ c小鼠,取其脾细胞与SP2 / 0小鼠骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞采用间接EL ISA法筛选。结果　获得稳定分泌抗hn RNP B1单克隆抗体的杂交瘤细胞2株。EL ISA法检测腹水效价为1∶1.8×10 5,免疫组织化学染色法显示该单克隆抗体特异性强。结论　成功构建hn RNP B1单克隆抗体抗体杂交瘤细胞株,其分泌的单克隆抗体对肺癌的诊断具有较好的特异性。     

单克隆抗体E4B7D5对钩端螺旋体粘附抑制作用的扫描电镜观察

作者采用黄疸出血群赖型017株钩端螺旋体(钩体)外膜免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合等技术,获得单克隆抗体(McAb)E4B7D5,亚类鉴定为IgG_1,凝集效价为1:25600。经被动免疫保护试验证明,对同型017株钩体具有免疫保护作用。作者采用扫描电镜观察E4B7D5 McAb对钩体粘附于正常人胚肺成纤维细胞的影响,发现不同凝集效价的E4B7D5 McAb组,其钩体粘附明显少于对照组。作者认为,E4B7D5 McAb的免疫保护作用可能与其抑制钩体的粘附有关。     

Observation of monoclonal antibody E4B7D5 inhibitory effect on leptospiral adherence using scanning electron microscope]

BALB/c mice were immunized intraperitoneally with outer envelopes of serogroup icterohaemorrhagiae lai serovar strain 017 leptospires. Monoclonal antibody (McAb) E4B7D5 against outer envelopes (IgG1, agglutinating titre 1:25,600) was produced by hybridoma technique. Passive immunoprotection experiments have demonstrated the immunoprotection of McAb E4B7D5 against strain 017 leptospires. Effect of McAb E4B7D5 on leptospiral adherence to the surface of normal human pulmonary embryonic fibroblasts was observed by using scanning electron microscope. The results indicated that the leptospiral adherence noted in various agglutinating titre McAb E4B7D5 groups was less frequent than that in the three control groups. It was concluded that the inhibitory effect of McAb E4B7D5 on leptospiral adherence may play a role in the immunoprotection.     

抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备及筛选

目的获得稳定、高效分泌抗氯霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法以CAP-HS-BSA免疫BALB/c小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞,体内诱生腹水法大量制备单抗。捕获ELISA法测定小鼠免疫球蛋白亚型,间接ELISA法测定腹水效价;用两步硫酸铵法和G蛋白亲和层析法来纯化腹水。结果成功建立了一株分泌抗CAP单克隆抗体（McAb）的杂交瘤细胞4D10。经检测,其分泌的抗体亚类为IgG1,杂交瘤染色体数目90-110条,间接ELISA检测诱生小鼠腹水的抗体效价达1∶2.56×105,纯度达95%,该细胞连续培养生物学性状稳定。结论成功制备的抗氯霉素单克隆抗体4D10效价高、纯度高,为利用该单抗研制检测氯霉素残留试剂盒提供原材料。     

甲型肝炎病毒单克隆抗体细胞株的建立及鉴定

目的 探讨建立和鉴定甲型肝炎(HAV)病毒单克隆抗体(McAb)细胞株的方法,为临床提供抗体来源.方法 通过McAb杂交瘤细胞培养方法进行甲型肝炎病毒单克隆抗体细胞株的培养后,选取实验培养的具有稳定性的McAb杂交瘤细胞后编号,对各细胞株进行特异性、效价的测定,并进行比对.结果 McAb杂交瘤细胞与甲肝病毒抗原的结合特...     

分离小鼠腹水中抗HBs/a单克隆抗体杂交瘤细胞制备小鼠腹水

探讨利用从小鼠腹水中分离获得的单克隆抗体杂交瘤细胞,大量制备小鼠单克隆抗体腹水的方法收集已接种单克隆抗体杂交瘤细胞的小鼠腹水,用淋巴细胞分离液离心分离腹水中的杂交瘤细胞;再将此分离出的杂交瘤细胞,注入其他小鼠腹腔又制得腹水。每只小鼠分离得到的杂交瘤细胞可供5只小鼠腹腔注射,平均每只小鼠产腹水3.97ml。此法可规模制备大量高效价的单克隆抗体腹水。