整合素α5及其配体纤粘连蛋白抗体对胚泡着床的影响

目的：研究整合素α5及其配体纤粘连蛋白对小鼠胚泡着床的影响。方法：在小鼠子宫角注射整合素α5抗体、纤粘连蛋白抗体及正常抗鼠IgG。结果：整合素α5及纤粘连蛋白抗体有显著抑制小发 鼠胚泡着床的效应,而正常抗鼠IgG对小鼠胚泡着床的影响不明显。结论：整合素α5及其配体纤粘连蛋白参与了小鼠胚泡的着床。     

小鼠肾小管发育过程中纤维粘连蛋白与整合素α_5的表达

背景：纤维粘连蛋白-整合素α5相互作用影响肾小管发育的体内研究较少。目的：观察小鼠肾小管发育过程中纤维粘连蛋白及其受体整合素α5的表达。方法：选取胚龄（E）12,14,16,18d和生后日龄（P）1,3,7,14,21,28,40d的小鼠。结果与结论：免疫组织化学染色结果显示纤维粘连蛋白于E12d时即表达于输尿管芽的基底膜处,随后表达于发育各个时期的肾小管基膜;整合素α5于E12d时开始表达,表达部位是肾小管的上皮细胞。体视学测量结果显示纤维粘连蛋白表达的面密度值和整合素α5表达的体密度值都随肾脏的发育逐渐增大。Westernblot结果显示纤维粘连蛋白和整合素α5蛋白的水平都随肾脏的发育逐渐增加。可见纤维粘连蛋白和整合素α5在小鼠肾小管的发育和成熟过程中的表达具有一定的时空性,对肾小管的发育起一定的作用。     

小鼠肾小管发育过程中纤维粘连蛋白与整合素α5的表达

背景:纤维粘连蛋白-整合素α5 相互作用影响肾小管发育的体内研究较少.目的:观察小鼠肾小管发育过程中纤维粘连蛋白及其受体整合素α5 的表达.方法:选取胚龄(E)12,14,16,18 d 和生后日龄(P)1,3,7,14,21,28,40 d 的小鼠.结果与结论:免疫组织化学染色结果显示纤维粘连蛋白于E12 d时即表达于输尿管芽的基底膜处,随后表达于发育各个时期的肾小管基膜;整合素α5 于E12 d 时开始表达,表达部位是肾小管的上皮细胞.体视学测量结果显示纤维粘连蛋白表达的面密度值和整合素α5 表达的体密度值都随肾脏的发育逐渐增大.Western blot 结果显示纤维粘连蛋白和整合素α5 蛋白的水平都随肾脏的发育逐渐增加.可见纤维粘连蛋白和整合素α5 在小鼠肾小管的发育和成熟过程中的表达具有一定的时空性,对肾小管的发育起一定的作用.     

血清整合素β1、纤维粘连蛋白和层粘连蛋白在子宫内膜异位症中的临床价值

目的 探讨血清整合素β1(ITGb1)、纤维粘连蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)在子宫内膜异位症(EMT)中的临床价值.方法 选择2019年1月至2020年12月在该院就诊的EMT患者96例为EMT组,另选择同期体检健康者52例为对照组.采用酶联免疫吸附试验检测各组血清ITGb1、FN和LN水平.比较两组血清ITGb1...     

整合素α6β_1与肝癌侵袭转移的关系

原发性肝细胞癌(hepatocellularcarcinom a,H CC)是人类常见肿瘤,预后远较其它癌症差,其原因是多方面的,但早期侵袭转移是重要因素之一,导致其5年生存率极低。对于H CC侵袭转移的分子机制尚不十分明确。在肿瘤侵袭进程中,必须成功地完成3个过程:降解细胞外基质(extracellular,EC...     

细胞间黏附分子-1与胚泡着床的关系

黏附分子参与生殖调节,在排卵、胚胎发育、胚泡着床、胚胎干细胞的分化方面起着重要作用,其在胚泡着床中的作用日渐引起人们的重视。细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）属于黏附分子,在生理条件下广泛表达于多种组织细胞和细胞间质表面,但表达水平较低;当受到炎性细胞因子[如白细胞介素1（IL-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和干扰素γ（IFN-γ）等]刺激后ICAM-1表达明显增多^[1]。     

沉默穴位局部缝隙连接蛋白43的表达对针刺促大鼠胚泡着床效应的影响

目的观察穴位局部沉默缝隙连接蛋白(Cx43)的表达对针刺促大鼠胚泡着床效应的影响,探讨Cx43与针刺效应之间的相关性。 方法将孕鼠随机分为正常对照组、模型组、针刺组、干扰对照组和干扰组。除正常对照组外,其余4组以米非司酮造成大鼠胚泡着床障碍模型。干扰组在各针刺穴位局部注射P-Cx43-shRNA(1)干扰质粒;干扰对照组以同样方法注射P-con-shRNA对照质粒。针刺组、干扰对照组和干扰组予以7 d针刺治疗。妊娠第8天观察各组大鼠着床胚泡质量及其发育、妊娠率和平均着床胚泡数的差异。 结果①干扰组“足三里”穴位处Cx43 mRNA及蛋白水平均低于针刺组,差异均有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;干扰对照组与针刺组相比,差异无统计学意义（P&rt;0.05）;②与正常对照组相比,模型组和干扰组中子宫着床胚泡数较少,着床胚泡质量差,胚泡明显较小,且大小不均一,分布不均匀,血供较差。针刺组和干扰对照组大鼠胚泡着床情况较模型组明显改善;③正常对照组、模型组、针刺组、干扰对照组和干扰组的妊娠率分别为100%, 50%, 75%, 75%, 50%,但各组间的差异无统计学意义;④模型组、干扰组平均着床胚泡数均较正常对照组低,差异具有统计学意义（P<0.01）;与针刺组相比,干扰组平均着床胚泡数较少,差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论针刺能明显改善胚泡着床障碍大鼠的胚泡着床质量及其发育,并有提高其妊娠率和平均着床胚泡数的趋势。穴位局部注射Cx43特异性shRNA真核表达载体有效地沉默穴位局部Cx43的表达,并显著影响针刺促胚泡着床效应,说明Cx43在针刺效应中发挥着重要的作用。     

放免法测定层粘连蛋白加入第二抗体后反应时间对结果的影响

目的：探讨放免法测定层粘连蛋白加入第二抗体后，反应时间对结果的影响。方法：取20份日常血清标本，另加两份质控血清，在相同条件下同时做四组，加入第二抗体后分别反应15min、30min、45min、60min后离心测量。结果：反应15min和30min组质控结果在控制范围内，反应45min和60min组质控结果明显偏高。结论：放免法测定层粘连蛋白加入第二抗体后在室温25℃左右反应时间不能太长，应在30min左右，否则对测定结果影响很大。     

放免法测定层粘连蛋白加第二抗体后温度对结果的影响

实际工作中发现放射免疫法测定层粘连蛋白时,加入第二抗体后,反应温度和反应时间对测定结果影响较大。有关结果报道如下。1材料与方法1.1试剂与仪器上海海研医学生物技术公司提供的层粘连蛋白放免试剂;质控值为90~130 ng/m l。西安262厂生产的FJ2008/200PS全自动γ放射免疫计数     

高糖对血管内皮细胞层粘连蛋白α1的表达影响

目的 分析高糖对视网膜血管内皮细胞中层粘连蛋白α1(LAMA1)的影响。方法 体外培育视网膜血管内皮细胞（RF/6A）,设置4种糖浓度培养液（5、15、25、35 mmol/L）,其中5 mmol/L作为对照组,15、25、35 mmol/L作为高糖组。观察不同糖浓度培养液处理后的细胞生长情况,LAMA1的表达情况、检测细胞的迁移、增殖能力变化。结果 随着观察时间的延长,高糖环境下细胞的生长速度增加,糖浓度越高,相对应生长速度越快。免疫荧光法检测发现,在处理24、48 h后,LAMA1在细胞质中表达,在高糖组（25、35 mmol/L）中表达量较对照组减少。处理24 h时,高糖组（25、35 mmol/L）中LAMA1蛋白表达量低于对照组（t分别=4.40、5.20,P均<0.05）;处理48 h时,高糖组（35 mmol/L）LAMA1蛋白表达量和m RNA表达均低于对照组（t分别=6.80、4.23,P均<0.05）。在处理48、72 h后,高糖组（15、25、35 mmol/L）细胞的迁移能力较对照组明显增加（t分别=6.78、10.47、10.00、10.78、10...     

超声对小鼠胚泡和子宫内膜细胞及假孕鼠再孕的影响

观察子宫内膜上皮细胞和胚泡的生长发育情况并对治疗声强超声作用于两种不同来源组织细胞的影响进行比较研究。同时，也观察治疗强超声辐照假孕鼠后对其再次妊娠是否有影响，实际结果显示：强度为１２Ｗ／ｃｍ＾２超声辐照小鼠妊娠第４天的子宫９０ｓ后，离体培养胚泡的死亡率为８１．９３％，而培养的子宫内膜上皮细胞生长良好，培养第３天的上皮细胞内ＤＮＡ组化测定与假照组在统计学上无差异。用该剂量辐照孕第４天小鼠子宫后对该     

整合素α5β1及其配体纤维连接蛋白与慢性乙型肝炎肝纤维化的关系

肝纤维化是以肝脏细胞外基质（extra cellular matrix,ECM）合成增多、降解相对不足而过量沉积为特征,其形成涉及多种细胞、细胞因子及ECM的变化。整合素为介导细胞与ECM间黏附作用的黏附分子之一,是ECM的主要受体。     

层粘连蛋白受体、尿激酶型纤溶酶原激活物在乳腺浸润性导管癌中的表达及其相关性

目的：探讨乳腺浸润性导管癌组织中层粘连蛋白受体（LN-R）和尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）蛋白的表达及其相关性。方法：应用免疫组织化学法检测60例乳腺浸润性导管癌组织及30例癌旁组织中LN-R、uPA蛋白的表达情况。结果：乳腺浸润性导管癌组织中LN-R和uPA蛋白的阳性表达率分别为68.3%和61.7%,与癌旁组相比较差异有统计学意义（P〈0.01）;LN-R与uPA蛋白的表达显著正相关（r=0.348,P〈0.01）。结论：乳腺癌的发生、浸润和转移可能和LN-R和uPA蛋白表达上调密切相关,LN-R表达的上调可能通过激活细胞内某些重要的信号转导通路,影响u-PA的表达,促进细胞外基质的降解,从而促进乳腺癌细胞的侵袭和转移。     

胆宁片对胆汁33.5kDa泡蛋白含量和结构的影响

目的：探讨胆宁片对胆石症患者胆汁中33.5kDa泡蛋白含量及其结构的影响。方法：2008年1月—2010年3月对60例胆囊切除病例和40例胆总管探查病例进行前瞻性临床研究,其中60例胆囊切除病例随机分为3组：胆固醇结石胆宁片组（n=20）、胆固醇结石对照组（n=20）、胆色素性结石组（n=20）,另外设立正常对照组（n=20）。通过酶联免疫吸附法检测每份胆汁中33.5kDa泡蛋白含量,比较各组之间的差异。40例胆总管探查病例分为研究组和对照组（n=20）,通过蔓陀螺凝集素探针（DSA）介导的蛋白印迹法检测胆汁中33.5kDa泡蛋白糖链条带DSA结合率,比较2组糖链结构的变化。结果：胆固醇结石组胆汁中33.5kDa泡蛋白含量显著高于胆色素结石组和正常对照组,胆固醇结石胆宁片治疗组胆汁33.5kDa泡蛋白含量较对照组显著降低（P〈0.01）。胆固醇结石治疗组泡蛋白糖链条带DSA结合率较对照组显著下降（P〈0.05）。结论：胆宁片能降低胆固醇结石患者胆汁中33.5kDa泡蛋白含量,并通过改变糖链结构而使其促成核活性发生变化。     

携抗αvβ3-整合素单抗靶向微泡对肿瘤新生血管靶向效应的研究

目的 探讨携抗αvβ3-整合素单抗靶向微泡对肿瘤新生血管的靶向效应.方法 通过生物素桥接法制成携抗αvβ3-整合素单抗的靶向脂质微泡(MBa)、对照微泡携同型抗体脂质微泡(MBc);选取12只HepG2皮下移植瘤裸鼠模型(肿瘤组)和正常对照裸鼠(对照组),经尾静脉随机注射MBa、MBc和RGDfvV封闭10 min后再注射MBa(Blocking+MBa),并行对比超声检查,测量声强度(VI).分别取肿瘤组肿瘤组织和对照组正常骨骼肌组织行病理学和免疫组化检查.结果 肿瘤组中MBa的VI值(17.43±3.30)U,较MBc的VI值(5.88±1.04)U增大近3倍,差异有统计学意义(P <0.01),应用RGDfvV封闭αvβ3-整合素后MBa的VI值降至(6.14±2.25)U,与MBc及对照组的各VI值比较差异均无统计学意义.免疫组化检查显示:肿瘤组织的新生血管内皮有大量αvβ3-整合素显色,可被RGDfvV封闭;而骨骼肌中仅有少量αvβ3-整合素显色.结论 携抗αvβ3-整合素单抗的靶向微泡对肿瘤新生血管具有明显的靶向效应,有望用于肿瘤的诊断和疗效评估.     

重组人骨形成蛋白2对下颌骨牵引成骨中整合素β_1表达的影响

背景:骨组织中整合素表达水平可影响细胞功能,调控成骨和骨吸收,但整合索只有被其他因于激活后才能发挥强大的黏附作用,重组人骨形成蛋白2具有此作用吗?目的:观察不同质量重组人骨形成蛋白2对兔下颌骨牵引成骨区整合素B_1的表达影响.设计、时间及地点:随机分组动物实验,组织学观察,于2006-05/2007-05在辽宁医学院动物实验中心和免疫组化中心完成.材料:日本成年大耳白兔45只.重组人骨形成蛋白2由北京军事医学科学院三所八室提供.方法:选用日本成年大耳白兔45只建立下颌骨牵引模型,造模后采用随机数表法将分为3组:空白对照组、1.5,3.0 mg重组人骨形成蛋白2胶原海绵载体组,15只/组.分别将不含重组人骨形成蛋白2胶原海绵载体、含1.5,3.0 mg重组人骨形成蛋白胶原复合物植入3组兔下颌骨切开处,固定、牵引0.4 mm/次,2次/d,共计5 d,总延长下颌骨4 mm.主要观察指标:牵引后稳定期第1,3,7,14,28天取牵引区新生骨痂行免疫组织化学染色观察骨组织中整合素β_1的表达.结果:45只日本大耳白兔均建模成功,进入结果分析.整合素β_1在牵引区表达主要反映在牵引7 d后.在同一时间内,随着重组人骨形成蛋白2质量的增加,整合素β_1阳性细胞表达率、阳性面积百分比逐渐增多(P<0.05):在同一质量下,随着时间的延长,整合素β_1阳性细胞阳性表达率、阳性面积百分比逐渐上升(P<0.05).结论:局部应用外源性重组人骨形成蛋白2在牵引成骨中晚期对整合素β_1的表达有促进作用,并且整合素β_1的表达对重组人骨形成蛋白2呈质量依赖性.     

药流对人绒毛和蜕膜内层粘连蛋白表达的影响

目的:观察应用米非司酮配伍米索前列醇终止妊娠的早孕者,分析不同结局的绒毛和蜕膜内层粘连蛋白(laminin,LN)表达情况,探讨米非司酮对人绒毛和蜕膜内LN表达的影响。方法:收集来我院因宫内早孕要求终止妊娠且孕龄小于49 d者,其中药物完全流产者30例,药物不全流产者30例,另选取30例手术流产者作为对照组。取2组应用药物流产者服药第3天排出的绒毛和蜕膜及对照组当天负压吸引吸出的绒毛、蜕膜组织,应用免疫组化法测定3组绒毛、蜕膜组织中LN的表达情况。结果:3组间的年龄、孕囊直径大小、流产前血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、β特异性绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平均无统计学差异。手术流产组绒毛、蜕膜中的LN阳性表达率及强阳性表达率最高,明显高于应用药物流产的2组,而药物完全流产组中LN的阳性表达率及强阳性表达率最低,3组间绒毛、蜕膜中LN的表达水平均有统计学差异(P<0.05)。结论:米非司酮通过降低早孕绒毛、蜕膜中LN的表达,从而改变胚胎着床需要的宫内发育内环境,以起到抗早孕作用,可在细胞外基质水平解释药物流产不同结局的病理机制。     

聚焦超声联合微泡开放血脑屏障对小鼠紧密连接蛋白的影响

摘要 目的：探讨聚焦超声（focused ultrasound， FUS）联合微泡开放血脑屏障（blood-brain barrier， BBB）的安全性，并通过对FUS辐照后紧密连接蛋白的检测探究FUS开放BBB的可能机制。 方法：健康昆明小鼠70只，随机分为对照组、FUS联合微泡开放BBB组，并进一步分为FUS开放BBB1h、4h、24h组。采用Garcia量表评估小鼠的神经行为学变化；HE染色观察超声辐照脑区的出血情况；ELISA动态检测炎性因子：肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha，TNF-α）、白细胞介素1β（interleukin 1 beta，IL-1β）、白细胞介素6（interleukin 6，IL-6）的表达水平。经尾静脉注射伊文思蓝（evans blue， EB）动态观察不同分组小鼠脑内EB的渗透情况。Western Blot检测水通道蛋白4（aquaporin-4，AQP4）表达量的变化分析脑组织的水肿情况；分别检测不同时段紧密连接蛋白occludin、claudin-5、紧密连接蛋白1（zonula occludens-1，ZO-1）的表达水平评估超声对紧密连接蛋白的影响。 结果：FUS诱导BBB开放后，小鼠不同时段的神经行为学评分均与对照组无明显差异（P>0.05）；HE染色显示FUS辐照后小鼠脑实质内无明显的红细胞渗出，炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达水平在BBB开放后的1h、4h、24h均与对照组无明显差异（P>0.05）。在EB渗透实验中，1h组小鼠脑实质内有EB渗透，而其他分组均未观察到EB。不同时段AQP4蛋白表达量与对照组相比无显著性差异（P>0.05）。FUS辐照后1h，occludin（P=0.034）、claudin-5（P<0.001）、ZO-1（P=0.002）蛋白表达水平显著降低；4h后ZO-1、occludin蛋白水平逐渐上升至对照组水平（P>0.05）。而claudin-5蛋白表达量在24h仍低于对照组(P=0.002)。 结论：FUS可以安全有效的开放BBB，其机制可能是通过作用于紧密连接蛋白ZO-1、occludin、claudin-5实现的。     

许旺细胞增殖能力与基膜粘连蛋白和Ⅳ型胶原影响的关系

背景许旺细胞对周围神经的再生起着非常重要的作用,细胞外基质对许旺细胞生长也起着重要的作用.目的了解基膜粘连蛋白和Ⅳ型胶原对体外培养条件下许旺细胞的贴壁及增殖作用的影响.设计以细胞为研究对象,分组对照重复观察测量.单位解放军第四军医大学医院整形外科实验室.对象实验于1995-01/04在第四军医大学西京医院整形外科实验室完成.许旺细胞由新生日本大耳白兔制备获得.方法用基膜粘连蛋白和Ⅳ型胶原包被培养板,以结合了相应抗体的培养板及包被Ⅰ型胶原和多聚赖氨酸的培养板为对照,将培养的许旺细胞以相同浓度加入各组培养板内.测定2,6,24 h细胞贴壁率,培养72 h进行3H-TdR掺入试验,双道液体闪烁计数器测定各组的放射性计数.主要观察指标①细胞贴壁率计算结果.②3H-TdR计数结果.结果培养2 h基膜粘连蛋白和Ⅳ型胶原组早期贴壁率分别为66%和59%,较Ⅰ型胶原组(45%)和多聚赖氨酸组(43%)高,抗基膜粘连蛋白和抗Ⅳ型胶原组贴壁率较低.基膜粘连蛋白组、抗基膜粘连蛋白组、Ⅳ型胶原组、抗Ⅳ型胶原组、Ⅰ型胶原组、多聚赖氨酸组3H-TdR掺入试验计数分别为(10.0±2 7)×103,(1.3±0.3)×103,(10.4±2.4)×103,(1.4±0.5)×103,(5.8±2.7)×103,(3.3±1.0)×103 min-1.基膜粘连蛋白和Ⅳ型胶原组3H-TdR掺入量高于其他组.结论基膜粘连蛋白和Ⅳ型胶原对体外培养条件下的许旺细胞贴壁及增殖有促进作用,为发挥许旺细胞在神经组织工程中的作用奠定了实验学基础.     

辛伐他汀对大鼠肾间质成纤维细胞增殖及α5整合素表达的影响

目的研究辛伐他汀对培养的大鼠肾间质成纤维细胞TGF-β1激活后细胞增殖及表面α5整合素表达的影响。方法不同浓度辛伐他汀加入到含有TGF-β1培养液培养的大鼠肾间质成纤维细胞,分别采用MTT法及细胞流式仪检测细胞的增殖,RT-PCR法检测大鼠肾间质成纤维细胞表面α5整合素的表达。结果辛伐他汀能抑制由TGF-β1所引起的大鼠肾间质成纤维细胞的增殖,阻止细胞由G1期进入S期。辛伐他汀能显著抑制TGF-β1对大鼠肾间质成纤维细胞表面α5整合素的表达促进作用,同时随着辛伐他汀浓度的增加,抑制作用明显增强。结论辛伐他汀能抑制由TGF-β1所引起的大鼠肾间质成纤维细胞的增殖及细胞表面α5整合素的表达。