TLR2、TLR9及T细胞亚群在传染性单核细胞增多症患儿中的变化及意义

目的本研究旨在探讨Toll样受体（TLR）2、TLR9及T细胞亚群在传染性单核细胞增多症（IM）患儿中的变化及意义。方法研究对象为2010年4月-2011年1月我院儿科初治急性期IM患儿35例（IM急性期组）,IM恢复期组35例以及健康对照儿童35例（对照组）。采用SYBRGreenI实时荧光定量PCR方法检测外周血单个核细胞TLR2mRNA、TLR9mRNA的表达,运用流式细胞术检测外周血中CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD4＋CD25＋T细胞的阳性表达率。结果（1）IM急性期组TLR2mRNA（4．03±0．56）、TLR9mRNA（8．88±1．56）相对表达水平显著高于对照组TLR2mRNA（2．22±0．57）,TLR9mRNA（3．63±1．30）及恢复期组TLR2rnRNA（2．76±0．83）,TLR9mRNA（5．34±1．60）（P〈0．01）。（2）IM急性期组CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD4＋／CD8＋、CD4＋CD25＋细胞百分比分别为（80．66±4．88）％、（16．53±5．55）％、（62．71±8．76）％、0．26±0．12、（2．38±1．32）％,对照组分别为（63．04±5．51）％、（37．98±4．20）％、（27．71±6．52）％、1．37±0．45、（7．85±1．97）％,二者之间差异有显著性（P〈0．01）;IM恢复期组儿童CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD4＋／CD8＋、CD4＋CD25＋细胞百分比分别为（74．25±7．33）％、（29．89±6．03）％、（42．25±7．33）％、0．71±0．19、（6．81±1．84）％,与IM急性期组比较差异有显著性（P〈0．01）,IM恢复期组CD4＋CD25＋细胞百分比与对照组[（7．85±1．97）％]比较差异无显著性（P〉0．05）。结论（1）IM急性期TLR2mRNA、TLR9mRNA表达相对上调,而IM恢复期二者表达相对下调;（2）IM急性期存在明显的免疫失衡,即CD3＋CD8＋明显增高,CD3＋CD4＋、CD4＋／CD8＋及CD4＋CD25＋Treg明显降低。提示在IM病程不同时期TLR2与TLR9的改变可能通过对T细胞的调节参与了IM发病。     

新生儿缺氧缺血性脑病细胞因子与细胞免疫的变化

目的 研究新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患儿白介素（IL）-1β、IL-10水平及外周血T细胞亚群的变化。探讨免疫学变化在HIE发病中的意义。方法应用ELISA法动态检测HIE患儿及足月正常新生儿出生后第1、3、7天血清IL-1β、IL-10水平。以Ficoll常规分离外周血单个核细胞，用免疫组化法检测HIE患儿及足月正常新生儿生后第1、3、7天CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋毒细胞百分率。结果HIE患儿血清IL-1β、IL-10水平均显著高于正常对照组（P〈0．05，P〈0．01）且与HIE严重程度有关，HIE患儿外周血CD3^＋,CD4^＋、CD8^＋细胞数量与对照组相比差异有显著性（P〈0．01），在不同程度HIE患儿中,以重度HIE患儿细胞免疫功能异常最明显。结论HIE患儿存在一定程度的细胞免疫功能紊乱。IL-1β、IL-10和T细胞亚群参与HIE的病理生理过程。     

烟碱样乙酰胆碱受体α7在支气管哮喘患儿CD4+T淋巴细胞上的表达

目的探讨哮喘患儿血CD4＋T淋巴细胞表达烟碱样乙酰胆碱受体α7（nAChRα7）与相应的细胞培养液IL-4、干扰素-γ（IFN-γ）水平的关系,分析nAChRα7在哮喘发病过程中的临床意义。方法哮喘患儿30例（哮喘组）与健康儿童20例（健康对照组）,分别抽取静脉血8mL,分离外周血淋巴细胞,并分别加入100μmol/L烟碱、1.0mg/Lα-银环蛇毒（α-BTX）,另设空白对照,恒温孵育24h后提取其淋巴细胞,并收取培养液置-20℃冰箱保存。用三色流式细胞仪检测各组淋巴细胞CD3^＋/CD4^＋/nAChRα7表达。ELISA法检测其淋巴细胞培养液中IFN-γ、IL-4水平。结果哮喘组患儿血CD3^＋/CD4^＋/nAChRα7表达较健康对照组儿童明显增高（P〈0.05）。烟碱刺激24h后哮喘组、健康对照组外周血CD3^＋/CD4^＋/nAChRα7的表达均较空白对照明显增加（Pa〈0.01）;且烟碱刺激24h后哮喘组较健康对照组表达显著增加（P〈0.05）。α-BTX刺激24h后外周血CD3^＋/CD4^＋/nAChRα7表达降低,但无统计学意义（Pa〉0.05）。哮喘组培养液中IL-4水平较健康对照组增加,IFN-γ水平较健康对照组减低。烟碱刺激24h后IL-4水平较空白对照增高（P〈0.01）,IFN-γ水平较空白对照明显减低（P〈0.05）。α-BTX刺激24h后IL-4、IFN-γ水平均无明显变化（Pa〉0.05）。外周血CD4＋T淋巴细胞nAChRα7表达与淋巴细胞培养液IL-4水平呈正相关（r=0.517P〈0.05）,与IFN-γ水平呈负相关（r=-0.288P〈0.05）。结论哮喘患儿血CD4＋T淋巴细胞表面的nAChRα7表达增加,nAChRα7表达影响培养液IL-4、IFN-γ水平和Th1/Th2平衡,是影响哮喘的发病的重要因子。     

咳嗽变异型哮喘患儿与 Tc1／Tc2免疫平衡的关系

目的：从免疫平衡（ Tc1/Tc2）角度探索CD8^＋T细胞在咳嗽变异型哮喘（ CVA）患儿发病机制的作用。方法收集CVA患儿及健康儿童各32例作为观察对象,采用流式细胞术检测两组外周血CD8^＋CD28^＋及CD8^＋CD28^-T细胞及其胞内细胞因子TNF-α及IFN-γ的频率。结果与健康组儿童比较,CVA患儿 CD8^＋CD28^-T 细胞频率明显降低,而 CD8^＋CD28^＋T 细胞频率及 CD8^＋CD28^＋/CD8^＋CD28^-T细胞比值明显升高（ P＜0.05）;CVA患儿IFN-γ明显降低而TNF-α明显升高（ P＜0.05）。结论 CD8^＋CD28^＋/CD8^＋CD28^-T细胞平衡及其细胞因子失调是儿童CVA的一个重要免疫学特征。     

肺炎患儿血CD16+CD56+、CD16+自然杀伤细胞占淋巴细胞比例的变化

目的探讨肺炎患儿CD16^＋CD56^＋、CD16^＋自然杀伤细胞（NK细胞）占淋巴细胞比例的动态变化及其意义。方法采用流式细胞术动态测定急性肺炎患儿32例治疗第2．5、10天及30例健康对照组儿童外周血NK细胞CD16^＋CD56^＋、CD16^＋占淋巴细胞比例的变化。结果肺炎患儿CD16^＋CD56^＋、CD16^＋NK细胞占淋巴细胞的比例在肺炎急性期、恢复期和康复期均显著低于健康对照组（Pa〈0．01），急性期、恢复期和康复期3组比较，杀伤活性强的NK细胞逐渐升高，各组比较有显著差异（Pa〈0．01）。结论动态监测肺炎患儿血CD16^＋CD56^＋、CD16^＋NK细胞占淋巴细胞比例对预测其病程及预后有重要意义。     

CD4^＋T淋巴细胞表面CD4^＋CD45RA和CD4^＋CD45RO在支气管哮喘患儿外周血中的表达

目的探讨CD4^＋CD45RA和CD4^＋CD45RO分子在支气管哮喘患儿中的表达及其意义。方法分别收集支气管哮喘发作期28例、支气管哮喘缓解期27例、健康对照儿童20例抗凝静脉血100μL，采用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的抗CIM单抗、藻红蛋白（PE）标记的抗CD45RA单抗和PE-菁蓝色素荧光素（PE—Cy5）标记的抗CD45RO单抗，流式细胞仪检测各组儿童外周血CD4^＋T淋巴细胞表面CD45RA和CD45RO的表达。采用SPSS13．0软件进行统计学分析。结果与健康对照和支气管哮喘缓解组患儿比较，支气管哮喘发作组患儿CD4^＋CD45RA^＋T细胞明显减少（q=12．47，8，39Pa〈0．05），CD4^＋CD45RO^＋T细胞显著升高（q=9．50，8．30Pa〈0．05），CD4^＋CD45RA^＋／CD4^＋CD45RO^＋细胞比值显著降低（q=8．96，6．21P。〈0．05）；支气管哮喘缓解组患儿CD4^＋CD45RA^＋T细胞较健康对照组明显升高（q=3．08P〈0．05），CD4^＋CD45RO^＋T细胞及CD4^＋CD45RA^＋／CD4^＋CD45RO^＋细胞比值与健康对照组比较差异无显著性（q=0．45，2．02Pa〉0．05）。结论外周血CD4^＋CD45RA^＋和CD4^＋CD45RO^＋T淋巴细胞平衡失调可能参与支气管哮喘的发病。     

传染性单核细胞增多症患儿外周血T细胞亚群与细胞因子动态变化

目的 观察传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)患儿细胞免疫功能动态变化.方法 采用ELISA法和流式细胞仪分别检测30例IM患儿急性期和恢复期外周血T细胞亚群和血清IFN-γ、IL-2,并与32例同龄健康儿童组进行比较.结果 急性期IM患儿IFN-γ、IL-2、CD3、CD8水平显著高于对照组及恢复期(P＜0.01),CD4、CD4/CD8比值显著低于对照组及恢复期(P＜0.01),恢复期患儿外周血CD4升高,细胞因子IFN-γ 、IL-2及外周血CD3、CD8降低,与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),恢复期CD4/CD8值仍低于对照组(P＜0.05),但高于急性期(P＜0.01).结论 IM患儿急性期外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子有明显变化,检测其变化规律对评估IM患儿的细胞免疫功能状况,辅助诊断和指导治疗具有重要临床意义.     

系统性红斑狼疮患儿PD-1分子的表达

目的 研究PD-1分子的表达与系统性红斑狼疮（SLE）的发病机制及病情的关系。方法 应用流式细胞仪检测各期SLE患儿（活动期、缓解期）外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T细胞上PD-1分子的表达。结果 在各期SLE患儿中外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋淋巴细胞上PD-1分子的表达均明显高于正常对照（P〈0.05）。结论 在系统性红斑狼疮患儿外周血淋巴细胞上PD-1分子表达明显高于正常,各组SLE患儿存在B淋巴细胞的异常增殖,推测 PD-1通路在SLE的免疫病理中发挥重要作用。     

肺炎支原体肺炎婴幼儿不同病期免疫功能、细胞因子、血小板活化因子乙酰水解酶基因多态性变化

目的探讨婴幼儿肺炎支原体肺炎（MPP）急性期与恢复期免疫功能、细胞因子、血小板活化因子乙酰水解酶（PAF-AH）基因多态性的动态变化。方法MPP组235例,年龄5个月-3岁;急性期为病程d1-9,恢复期为愈后8-20周。对照组为正常健康儿童90例,6个月-3岁。以酶联免疫吸附试验（ELISA）测定IgA、IgM、IL-2与IL-2受体（IL-2R）、IL-4、IL-8、干扰素-γ（IFN-γ）;速率散射法测定IgG及其亚群;单相琼脂扩散法测定补体C3、C4;PGE法测定循环免疫复合物（CIC）;APAAP法测定T细胞亚群;特异性聚合酶链式反应（AS-PCR）法与PAF-AH试剂盒测定PAF-AH基因多态性与酶活性。对婴幼儿MPP急性期、恢复期与对照组的结果进行比较分析。结果MPP组急性期IgA、IgM、补体C4、CIC、CD8＋、IL-2R、IL-6、IL-8、INF-γ、INF-γ/IL-4均高于恢复期与对照组（Pa〈0.05）,补体C3、CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋、IL-2均低于恢复期与对照组（Pa〈0.05）,IgG及亚群各组间差别无统计学意义（Pa〉0.05）。PAF-AH突变基因型频率、突变等位基因频率、PAF-AH酶活性各组差别无统计学意义（Pa〉0.05）。结论婴幼儿MPP免疫功能变化的主要表现为Th1免疫应答增强,Th2免疫应答减弱,细胞因子改变,但多数免疫学指标及细胞因子恢复较快。婴幼儿MPP发病与PAF-AH基因型无关,但急性期PAF-AH酶活性有下降趋势。     

支气管哮喘患儿细胞因子抑制因子1/细胞因子抑制因子3调控失衡与单核/巨噬细胞异常活化

目的探讨哮喘患儿急性发作期细胞因子抑制因子(SOCS)1/SOCS3调控失衡与单核/巨噬细胞(MC)异常活化的关系,进一步了解哮喘呼吸道慢性炎症发生发展的分子机制。方法观察哮喘患儿及同龄对照组各20例。用流式细胞术检测其外周血CD14 细胞表面CD80、CD86;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和荧光定量PCR检测MC中SOCS1、SOCS3mRNA表达。结果哮喘患儿CD14 细胞表面共刺激分子CD80、CD86明显高于同龄对照组(P<0.01)。MC中SOCS1mRNA表达显著降低(P<0.001),而SOCS3mRNA表达显著升高(P<0.001)。结论MC过度活化参与哮喘患儿呼吸道慢性炎症发生发展过程,SOCS1/SOCS3调控失衡可能是哮喘MC异常活化的分子机制之一。     

Foxp3表达与CD+4CD+25调节性T细胞在儿童哮喘发病中的作用

目的研究Foxp3基因表达与CD+4CD+25调节性T细胞在哮喘发病中的作用.方法以确诊哮喘的患儿为研究对象,急性发作期15例、缓解期15例,同期选10例正常儿童作对照,提取外周血单个核细胞(PBMC)进行CD4、CD25表面标志及血浆、培养上清液IL-4、IFN-γ、IL-10和TGF-β等细胞因子的ELISA检测,同时收集哮喘患儿和正常儿童的诱导痰,用RT-PCR方法检测PBMC及诱导痰中转录因子Foxp3-mRNA的表达.结果 PBMC CD+4CD+25T细胞百分率在哮喘急性发作期、缓解期分别为(10.1±2.1)%、(11.7±2.5)%,低于对照组的(15.5±2.7)%(P分别<0.01、<0.05);对照组PBMC在体外培养后CD+4CD+25细胞百分率显著升高,同培养前比较差异有统计学意义(P<0.01).PBMC Foxp3-mRNA表达水平(Foxp3/β-actin) 在哮喘急性发作期、缓解期分别为0.46±0.14 、0.50±0.19,低于对照组0.77±0.22,诱导痰Foxp3-mRNA表达水平哮喘患儿也低于对照组;PBMC在体外培养后对照组Foxp3-mRNA表达水平较培养前升高(P<0.05),而哮喘患儿培养前后Foxp3-mRNA表达水平无显著变化.血浆及培养上清液IFN-γ、TGF-β在哮喘急性发作期、缓解期低于对照组 (P<0.05),且IFN-γ、TGF-β与PBMC Foxp3-mRNA水平、CD+4CD+25细胞百分率呈正相关. 哮喘患儿血浆及培养上清液IL-4显著高于对照组,急性发作期血浆IL-10显著高于对照组,而缓解期与正常组无显著性差异;IL-4、IL-10与PBMC Foxp3-mRNA水平、CD+4CD+25细胞百分率无相关性.结论哮喘患儿的TGF-β分泌不足、Foxp3基因表达降低、CD+4CD+25调节性T细胞数量减少及分化发育障碍可能在儿童哮喘的发病中起重要作用.     

支原体肺炎患儿辅助性T淋巴细胞亚群TH1、TH2细胞状况

目的　探讨肺炎支原体肺炎急性期患儿外周血淋巴细胞亚群以及辅助性T淋巴细胞亚群TH1、TH2细胞的改变 ,为免疫治疗的可能性提供依据。方法　采用流式细胞仪技术 (FACS)检测了3 5例支原体肺炎急性期患儿外周血T淋巴细胞亚群以及NK细胞和B细胞 ,同时通过检测分泌细胞因子γ干扰素 (IFN γ)、白细胞介素 4(IL 4)的CD+ 4细胞方法 ,测出相应TH1、TH2细胞的百分比 ,并与2 8例正常儿童进行比较。同时对 3 5例支原体肺炎患儿中的 3 0例进行了血清免疫球蛋白及精制结核菌素 (PPD)皮肤试验。全部患儿均系在我院住院的患儿 ,男 15例 ,女 2 0例 ,年龄 3～ 13岁 ,平均 9岁。对照组男 14例 ,女 14例 ,年龄 3～ 12岁 ,平均 7岁。结果　支原体肺炎患儿急性期外周血CD+ 3 、CD+ 4T细胞百分率为 68 0 0± 6 66及 3 7 86± 5 84,较对照组 63 71± 7 92及 3 4 54± 6 2 3高 ,(P <0 0 5) ;患儿外周血TH1细胞百分率为 14 13± 8 46,对照组为 2 0 77± 6 89,两者差异有非常显著意义 (P =0 0 0 1)。NK细胞及TH1/TH2比值在患儿组降低 (P分别为 <0 0 1和 <0 0 5)。两组间CD8、TH2、B细胞百分率及CD4/CD8比值差异无显著意义。 3 0例患儿之血清免疫球蛋白与同龄正常儿童比较 ,IgG全部正常 ;IgA升高 7例 ;IgM升高 4例。皮肤P     

哮喘患儿单个核细胞表面CD86分子表达和TH源细胞因子水平及之间相关性研究

目的探讨哮喘急性发作患儿T细胞协同刺激途径和T细胞亚群激活状况.方法随机选择哮喘急性发作期患儿35例,对照组31例.用直接免疫荧光流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中白细胞分化抗原14阳性(CD+14)细胞表达CD86的平均荧光强度;经脂多糖刺激后PBMC中CD+19细胞百分率及CD+19CD+86双阳性细胞百分率;ELISA检测植物血凝素刺激后PBMC培养上清白细胞介素(IL)-4、IL-13、IFN-γ水平及血浆总IgE水平,并分析它们之间的相关性.结果 (1)哮喘组CD+14细胞表达CD86的平均荧光强度(31.8±9.2)、CD+19细胞百分率[(13.5±4.0)%]、CD+19CD+86细胞百分率[(4.6±2.0)%]及血浆总IgE水平[186.6(64.3～723.6) kIU/L]与对照组[(23.5±6.4)、(8.2±3.0)%、(2.3±1.4)%、42.0(0.9～115.2)]比较差异有显著性;(2)哮喘组IL-4和IL-13水平均增高,IFN-γ水平降低,与对照组比较差异有显著性;(3)哮喘组CD+14细胞的CD86平均荧光强度与CD+19CD+86细胞百分率、CD+19CD+86百分率与血浆总IgE水平及CD+19、CD+19CD+86百分率与IL-4、IL-13水平均呈显著正相关.结论哮喘急性发作患儿PBMC中抗原递呈细胞表达CD86的强度或数量增高;B细胞和TH2细胞对丝裂原的活化作用应答增强.这提示CD86及TH亚群失衡在哮喘发病机制中起重要作用.     

Responses of CD4(+) CD25(+) Foxp3(+) and IL-10-secreting type I T regulatory cells to cluster-specific immunotherapy for allergic rhinitis in children

We investigated the effects of cluster specific immunotherapy (SIT) with Dermatophagoides pteronyssinus (Der p) on CD4(+) CD25(+) Foxp3(+) Treg cells and IL-10-secreting type I T regulatory (Tr1) cells in Der p-sensitized children with allergic rhinitis (AR). We performed a prospective randomized study involving 46 children (aged 8-13 yr), of whom 25 children received Der p-SIT + pharmacotherapy and 21 received only pharmacotherapy, over a period of 1 yr. Prior to and at end of treatment, CD4(+) CD25(+) Foxp3(+) Treg cells and allergen-specific IL-10(+) IL-4(-) , IFN-γ(+) IL-4(-) , and IL-4(+) IFN-γ-CD4(+) T cells were measured by flow cytometry. Similarly, IL-4, IFN-γ, and IL-10 in supernatants from allergen-stimulated peripheral blood mononuclear cell (PBMC) cultures were measured by ELISA, and the suppressive effect of CD4(+) CD25(high) T cells on cell proliferation and cytokine release was estimated from both groups. Allergen-specific serum IgE and IgG4 were also assessed at the beginning and end of treatment by RAST and ELISA, respectively. The levels of allergen-specific Tr1 cells, IgG4, and allergen-induced IL-10 synthesis from PBMC cultures were significantly increased after SIT for 1 yr compared with baseline levels (p < 0.001 for all), with significant correlation between increased levels of Tr1 cells and improvements in nasal symptoms (r = 0.48, p < 0.05). In contrast, the levels of CD4(+) CD25(+) Foxp3(+) T cells, allergen-specific Th1 and Th2 cells, the production of IL-4 and IFN-γ, and the function of CD4(+) CD25(high) T cells were not altered in either group at the end of treatment. These data suggest that the up-regulation of Tr1 cells may play an important role in SIT and be a useful marker of successful SIT in AR patients.     

Staphylococcus aureus skin colonization in atopic dermatitis children is associated with decreased IFN-gamma production by peripheral blood CD4+ and CD8+ T cells.

Atopic dermatitis (AD) is a chronic inflammatory skin disorder, which is associated with an increased expression of Th2 cytokines with concomitant decrease in IFN-gamma production by circulating CD4+ and CD8+ T cells. The skin of patients with AD is often colonized by Staphylococcus aureus, which may reflect in changes in immunological parameters. The aim of the study was flow cytometric measurement of some peripheral blood lymphocyte subsets expressing naive/memory marker (RA/RO) and activation marker (CD25) as well as intracellular production of IFN-gamma by peripheral blood CD4+ and CD8+ T cells from varied severity AD children and determine the impact of S. aureus skin colonization on cytokines profiles. There was a significant increase in the percentage of CD4+ and CD8+ T cells producing IL-4 and IL-13 and decrease in the percentage of CD4+ and CD8+ T cells producing IFN-gamma upon in vitro stimulation with phorbol 12-myristate 13-acetate and ionomycin in children with AD compared to healthy ones. The absolute number of CD4+ and CD8+ T cells expressing memory marker CD45RO was elevated as compared with controls. The severity of AD was positively correlated with the percentage of lymphocyte subsets: CD45RO+, CD4+CD45RO+, and the percentage of CD3+ and CD4+ expressing CD25 as well as the number of S. aureus on the skin. In conclusion, both CD4+ and CD8+ memory T cells are involved in the immunopathogenesis of AD. S. aureus skin colonization is related with disease severity and changes in expression of CD45RO and CD25 on T cells. A decrease in the percentage of CD4+ and CD8+ T cells producing IFN-gamma in AD children may explain propensity for skin infection.     

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目的 观察原发性肾病综合征(PNS)患儿泼尼松治疗前后CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr)的变化,阐明肾上腺糖皮质激素治疗儿童PNS的免疫机制.方法 选择2004-2007年在深圳市儿童医院住院治疗的初发PNS患)L42例,其中激素敏感型32例,激素耐药型10例.同期25例健康体检儿童作为对照组.流式细胞术检测泼尼松治疗前后外周血CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+、CD4+CD25+Tr的比例,荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测泼尼松治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)叉头型基因P3(Foxp3)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTL-4)和糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)基因mRNA的表达.结果 与对照组比较,PNS患儿外周血CD3+CD4+CD8-T细胞、CD3+CD4-CD8+T细胞、CD4+CD25+Tr比例无明显改变(P>0.05).激素敏感型PNS患儿CD4+CD25+Tr比例在泼尼松治疗后明显增高,差异有统计学意义(P<0.01);激素耐药型PNS患儿CD4+CD25+Tr比例在泼尼松治疗前后无明显改变(P>0.05).激素敏感型PNS患儿在泼尼松治疗后PBMC细胞Foxp3、CTLA-4和GITR基因mRNA的表达明显增高;而激素耐药型PNS患儿泼尼松治疗前后Foxp3、CTLA-4基因表达无明显改变,仅GITR表达明显增高.结论 泼尼松等肾上腺糖皮质激素类药物可通过上调激素敏感型PNS患儿CD4+CD25+调节性T细胞的表达发挥免疫治疗作用.     

Treatment-resistant expansion of CD8+CD28-cells in pediatric HIV infection

There is a disease stage-dependent loss of CD28 expression on T cells in HIV-infected children. In this study, T cell recovery, in particular CD28 expression on T cells, was analyzed after initiation of highly active antiretroviral therapy in a group of eight mostly treatment-naive HIV-infected children. Plasma HIV-RNA levels were recorded, and numbers of CD4, CD8, CD4+CD28+, and CD8+CD28+ cells were determined by two-color flow cytometry. Values after 12 mo of therapy were compared with age-matched, seronegative control subjects. CD4 recovery to subnormal values was observed in all children. CD8+CD28+ cells recovered and were within the normal range after 12 mo of therapy (patients, 703 +/- 250 cells/microL; controls, 789 +/- 269 cells/microL), whereas CD8+CD28- cells (546 +/- 269 cells/microL) remained significantly expanded compared with age-matched controls (140 +/- 35 cells/microL). Expansions of CD8+CD28- cells persisted even in cases with long-term suppression of viral replication. Highly active antiretroviral therapy in HIV-infected children induces substantial but incomplete T cell recovery.     

CD69和CD25及HLA-DR在川崎病患儿外周血T淋巴细胞中表达的研究

目的研究急性期川崎病(Kawasaki disease,KD)患者外周血CD3+T淋巴细胞中CD69、CD25及HLA-DR的表达水平.方法采用多色流式细胞仪对31例KD急性期、8例KD急性期和恢复期的外周血CD3+T淋巴细胞及其活化标志进行了分析,并以17名正常儿童外周血作为对照.KD组男16例,女15例;年龄4～60个月,平均(26±18)个月.确诊后给予大剂量丙种球蛋白及阿司匹林治疗,丙种球蛋白剂量1g/(kg·d),连续2 d,阿司匹林剂量30～50 mg/(kg·d).丙种球蛋白不反应者(1)重复使用大剂量丙种球蛋白;(2)加用甲泼尼龙20mg/(kg·d),连续3 d.对照组男9名,女8名;年龄3～84个月,平均(25±18)个月.川崎病自身对照组8例,其中男5例,女3例;年龄21～42个月,平均(30±7)个月.结果KD急性期CD3+T淋巴细胞百分数明显低于恢复期及正常对照组,早期(CD69+)、中期(CD25+)活化率明显高于恢复期及正常对照组,丙种球蛋白治疗后,这些活化标志的百分率明显降低(P＜0.01).KD组中冠状动脉改变与冠状动脉正常两组外周血CD3+T淋巴细胞及其活化标志的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论CD3+T淋巴细胞早、中期活化是KD时心血管组织损伤的重要机制.     

Regulation of CD31 expression and interleukin-4 production by human cord blood CD4+ T cells with interleukin-4 and interleukin-7

BACKGROUND: T helper 2 cell type cytokines, such as interleukin (IL)-4 and IL-5, play pivotal roles in the development of allergic diseases. However, the mechanism by which naive CD4+ T cells acquire the ability to produce these cytokines remains unclear. Recently, it was reported that IL-7 induces the ability to produce IL-4 as well as interferon (IFN)-gamma and IL-5 in naive CD4+ T cells without TCR stimulation. To further analyze the mechanism of acquiring IL-4-producing ability by naive CD4+ T cells, the effects of IL-7 on human cord blood CD4+ T cells were compared with those of IL-4, which induced the ability to produce IFN-gamma but not IL-4. RESULTS: Interleukin-7 preserved the population of CD4+CD31- T cells in cord blood and induced their IL-4-producing ability without T cell receptor (TCR) stimulation, while IL-4 induced CD31 on CD31- T cells and could not induce their IL-4-producing ability. Both the CD31-inducing effect and the inhibitory priming effect for IL-4-production by IL-4 were also observed after cord blood CD4+ T cells had been primed with IL-7 and acquired the IL-4-producing ability. CONCLUSIONS: Interleukin-7 induced the IL-4-producing ability in naive CD4+CD31- T cells without TCR stimulation, suggesting that the signal transduction via CD31 may have an inhibitory effect on the acquisition of the IL-4-producing ability by cord blood CD4+ T cells in the absence of TCR stimulation.     

川崎病患儿CD4+T淋巴细胞表面CD40L表达及其与冠状动脉损伤的关系

目的通过检测川崎病(KD)患儿静脉输注入血丙种球蛋白(丙球)治疗前后外周血T细胞表面CD40L(CD154)表达,探讨KD冠状动脉损伤的发病机制。方法采用流式细胞仪检测26例KD患儿静脉输注丙球治疗前后、16例其他发热性疾病患儿、15例正常儿童外局血T细胞表面的CD40L表达。采用酶联免疫吸附试验检测相应血清中E-选择素。结果KD患儿CD4 T细胞表面CD40L表达及血清E-选择素显著高于其他发热性疾病组及正常对照组(P<0.01),KD患儿静脉输注丙球治疗后明显下降(P<0.01)。CD4 T细胞表面CD40L表达及E-选择素与KD冠状动脉损伤有关,而CD8 T细胞表面CD40L的表达与冠状动脉损伤无关。KD患儿CD4 T细胞表面CD40L表达与E-选择素水平正相关(r=0.626P<0.05)。结论CD40L异常表达及血清E-选择素在KD发病机制中起重要作用。静脉输注丙球能下调CD40L表达及血清E-选择索,有利于血管炎治疗。