HP在胃镜常规清洗消毒方法中清除效果的临床观察

目的：了解目前常规清洗消毒胃镜方法－三步法对幽门螺杆菌（ＨＰ）清除效果。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）及ＨＰ培养法对４２例患者胃镜检查后,清洗消毒前后的胃镜活检测通道冲洗液进行了检测。结果：３１例（７３．８％）为ＨＰ感染者,ＰＣＲ检测清洗消毒前冲洗液有２６份（８３．９％）为阳性,清洗消毒后仍有９份（３４．６％）为阳性;而培养在清洗消毒前有１２份（３８．７％）为阳性,清洗消毒后均为阴性。另有２例患     

常规胃镜清洗消毒方法对HP的清除效果

为了解目前常规清洗消毒胃镜方法－－三步法对幽门螺杆杆菌（ＨＰ）清除效果,采用聚合酶锭反应（ＰＣＲ）及ＨＰ增减法对４２例患者胃镜检查完,清洗消毒前后在胃镜活检通道冲洗液进行了检测,结果３１例（７３．８％）为ＨＰ感染者,ＰＣＲ检查清洗消毒前冲洗液有２６份（８３．９％）为阳性,清洗消毒后仍有９份（３４．６％）为阳性;而增减清洗消毒前有１２份（３８．７％）为阳性清洗消毒后均为阴性。另有２例２胃窦膜组织Ｗａ     

聚合酶链反应结合探针杂交检测幽门螺杆菌

目的建立特异、灵敏的聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合长臂光敏生物素探针杂交检测幽门螺杆菌（ＨＰ）的方法。方法用ＰＣＲ产物直接克隆并测序，以含ＨＰＤＮＡ序列的重组质粒外源片段为探针。用细菌培养、单纯ＰＣＲ和ＰＣＲ结合杂交（ＰＣＲ－Ｓｂ）检测经胃镜诊断为慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠球部炎症、十二指肠溃疡的胃活检组织、唾液和粪便标本中的ＨＰ。结果检测胃活检标本７９份，ＰＣＲ－Ｓｂ阳性率为９９％，单纯ＰＣＲ及细菌培养的阳性率分别为９５％和６５％，ＰＣＲ－Ｓｂ的灵敏度达到１ｆｇ。唾液标本的检测阳性率为３５％，粪便标本的检测结果均为阴性。结论测序证实了ＰＣＲ扩增的正确性。ＰＣＲ结合长臂光敏生物素探针杂交是特异、灵敏、简便和对人体无害的检测ＨＰ的方法。     

聚合酶链反应检测解脲脲原体的临床应用

２３８例非淋菌性尿道炎的阴道分泌物作解脲脲原体ＰＣＲ检测与培养法比较，结果ＰＣＲ检出率为４９．６％（１１８／２３８），培养检出率为３９％（９３／２３８）。通过６０例治疗追踪，四环素－周疗程后，培养均转阴，而ＰＣＲ尚有９例阳性，二周疗程后ＰＣＲ仍有３例最性，三周疗程后才全部转阴性。     

喉鳞癌中HPV的免疫组化,原位杂交,PCR和间接原位PCR检测

目的 探讨ＨＰＶ与喉癌发生的关系。方法 采用免疫组化,原位杂交,ＰＣＲ和间接原位ＰＣＲ技术检测５０例喉鳞状细胞癌中的ＨＰＶ感染情况。结果 免疫组化衣壳抗原阳性６２例（１２％）,原位杂交阳性１３例（２６％）,ＰＣＲ阳性１０例（２０％）,原位ＰＣＲ阳性１７例（３４％）,综合上述方法阳性率为４２％（阳性２１例）。结论 ＨＰＶ感染与喉癌有着明显的关系,间接原位ＰＣＲ在检测ＨＰＶ感染时具有较高的敏感性,特异     

聚合酶链反应对活动性肺结核病的诊断价值探讨

目的：探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）对结核病的临床诊断价值。方法：本文对１２６例活动性肺结核病人的痰标本进行了检测。结果：发现ＰＣＲ检出率为６０．３％,高于痰培养的４９．２％和痰涂片的３８．１％。但涂阳病人中有２２．９％ＰＣＲ阴性,８２例非结核疾患有２８．１％ＰＣＲ阳性。结论：提示ＰＣＲ阳性结果并非活动性结核病所特有     

胶囊采样法检测幽门螺杆菌

目的：介绍一种胶囊采集胃粘液标本用脲素酶试验和多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测Ｈｐ的方法。方法：对照检测６４例胃镜检查者的１２８份胃粘液（胶囊采集）和胃组织（胃镜采样头采集）标本的Ｈｐ,同时用ＰＣＲ法检测了唾注保Ｈｐ的存在情况。结果：建立胶囊采取胃粘液标本的脲素酶、ＰＣＲ检测阳性性分别为６７．２％,７５．３％,与相应的胃组织标本相同方法检测结果（阳性率７０．３％,７９．７％）具有良好的相关性（均Ｐ〈０．     

双带PCR提高检测血清HBV-DNA质量的意义

应用双带ＰＣＲ方法（ＤＢ－ＰＣＲ）检测了２４０份血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，该方法能直接观察和判断假阴性和假阳性结果，提高了检测的准确性。与国内其它ＰＣＲ试剂比较，符合率分别为９４．０５％（ＤＢ－ＰＣＲ／华美产品），和９５．２８％（ＤＢ－ＰＣＲ／长城产品）。ＨＢｅＡｇ阳性的血清，经ＤＢ－ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者达９３．５５％（２９／３１）。ＰＣＲ产物Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ后能与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针杂交，证明了该方法的特异性。     

聚合酶链反应凝胶呈像技术检测乙型肝炎病毒

目的建立聚合酶链反应（ＰＣＲ）凝胶呈像（ｇｅｌｄｏｃｕｍｅｎｔａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓ，ＧＤＳ）技术，并应用于临床检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）核酸ＤＮＡ。方法用凝胶呈像技术对血清ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ扩增产物的电泳凝胶进行摄像、分析，并与紫外灯下的肉眼观察结果相比较，对肉眼未判断出阳性而凝胶呈像分析出阳性的血清标本，用定量ＰＣＲ（ＱＰＣＲ）方法检测ＨＢＶＤＮＡ。结果通过３８份血清标本的检测，发现用凝胶呈像技术判断的结果比单纯肉眼观察的阳性率高。前者１９份阳性（５０％），后者１６份阳性（４２．１％），符合率为９２．１％。经χ２检验（χ２＝０．４７７，Ｐ＞０．０５），说明两种方法有很好的一致性。凝胶呈像分析为阳性，而肉眼观察阴性的３份血清标本，经定量ＰＣＲ检测为阳性。结论应用凝胶呈像技术比ＰＣＲ产物电泳后紫外灯下肉眼观察的灵敏度高、客观性强，能避免与紫外线接触，并可长期保留检测结果。     

PCR和巢式PCR直接检测血清中HIV核酸序列

采用ＰＣＲ和巢式ＰＣＲ方法对５３例ＨＩＶ抗体阳性和阴性标本进行了检测，以扩增ＨＩＶ特异性ＤＮＡ序列，结果美国ＡｂｂｏｔｔＨＩＶ阳性血清２份，新加坡阳性血清２份，国内阳性血清２份及ＨＩＶ－１病毒培养物１份，两套ＰＣＲ扩增反应物均为阳性，对其中一套ＰＣＲ扩增的ｇａｇ基因序列进行巢式ＰＣＲ也为阳性。采自西南边境地区的２３份ＥＬＩＳＡ和ＷＢ阳性血清，各种ＰＣＲ反应均为阳性；１１份ＥＬＩＳＡ可疑阳性、ＷＢ阴性标本中，有两例血清呈ＰＣＲ阳性，探针杂交亦为阳性。而１２例ＳＩＶ、ＳＲＶ及猴血清标本ＰＣＲ反应均为阴性。上述结果表明，采用ＰＣＲ方法检测血清中ＨＩＶ核酸序列是一种很有前途的ＨＩＶ感染诊断方法。     

聚合酶链反应检测幽门螺杆菌

本文应用与幽门螺杆菌染色体ＤＮＡ高保守区序列互补的引物对，建立聚合链反应检测技术，对２８种非ＨＰ菌及１６株ＨＰ进行检测，特异性１００％，敏感性达到能检出１ｐｇ染色体ＤＮＡ（相当于１００个菌细胞）水平，对３６例接受胃镜检查病人的胃活检组织进行检测，ＨＰ阳性率４７．２％（１７／３６），而对照方法中细菌培养ＨＰ阳性率３３．３％（１２／３６），快速尿素酶试验ＨＰ阳性４１．６％（１５／３６）。结果提示ＰＣＲ     

幽门螺旋杆菌感染的胃外表现

目的研究幽门螺旋杆菌感染的胃外表现。方法７４例患者均行胃镜检查和Ｈｐ诊断实验,Ｈｐ感染由胃粘膜组织病理（Ｇｉｅｍｓａ染色）和组织ＰＣＲ共同确定,ＣａｇＡ表达由ＰＣＲ法测定。观察数据包括全血细胞计数、肝功能、肾功能等生化指标检测。结果７４例病人中,５２例（７０．３％）确定有Ｈｐ感染,其中３１例（４１．８％）表现为ＣａｇＡ阳性。相对于Ｈｐ阴性组,Ｈｐ阳性组患者外周血中白细胞总数和中性粒细胞计数明显升高,有显著性差异（６．４９±０．３ＶＳ５．０８±０．３,Ｐ＜０．０１;３．９２±０．２ＶＳ２．８７±０．１,Ｐ＜０．０１）。ＣａｇＡ阳性组血清ＡＳＴ水平明显高于ＣａｇＡ阴性组,差别有显著性（２８．２６±１．４ＶＳ１９．７５±０．９,Ｐ＜０．０１）。结论本研究证实Ｈｐ感染与外周血白细胞总数和中性粒细胞数的异常有关,ＣａｇＡ阳性则与血清ＡＳＴ水平的升高有关。     

聚合酶链反应与细胞培养法诊断泌尿生殖道沙眼衣原体感染的比较研究

为评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）在诊断泌尿生殖道沙眼衣原体感染中的实用性，对５７６份来自不同感染率人群的尿道、宫颈拭子标本进行ＰＣＲ和细胞培养检测衣原体的比较，参照“扩大的金标准”，ＰＣＲ和培养法的敏感性分别为１００％、９７．０％和８６．４％、８７．９％，特异性分别为９８．５％、９９．７％和１００％，ＰＣＲ的阳性预测值（ＰＰＶ）和阴性预测值（ＮＰＶ）分别为９５．７％、９７．０％和１００％、９９．７％。表明在沙眼衣原体检测中，ＰＣＲ具有极好的敏感性和特异性，可替代培养法。     

套式聚合酶链反应单管法检测单纯疱疹病毒

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法、套式ＰＣＲ双管法及套式ＰＣＲ单管法分别检测１３０份散发性脑炎患者脑脊液（ＣＳＦ）中单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）的ＤＮＡ，阳性率依次为１８．５％（２４／１３０）、２９．２％（３８／１３０）、２９．２％（３８／１３０）；６０份非中枢神经系统感染者ＣＳＦ标本的检测阳性率分别为０、３．３％（２／６０）、０。结果显示：套式ＰＣＲ虽然提高了检测的敏感性，但假阳性也大大增加。改良的套式ＰＣＲ单管法则大大减少了污染机会，使操作更方便、省时，适于临床推广应用。     

套式聚合酶链反应结合直接荧光法检测女性生殖道沙眼衣原体

目的建立一种敏感、特异、快速诊断女性生殖道沙眼衣原体（ＣＴ）感染的方法。方法应用套式聚合酶链反应（ＮＰＣＲ）技术和直接荧光（ＤＦＡ）法检测女性生殖道沙眼衣原体。对两者结果不符的标本用细胞培养法验证。结果３００份受检标本，ＤＦＡ法阳性７１份，阴性２２９份，ＮＰＣＲ法阳性９０份，阴性２１０份；其中ＮＰＣＲ和ＤＦＡ均为阳性者６８份，另有２２份ＮＰＣＲ阳性，而ＤＦＡ为阴性，再经细胞培养证实系阳性。但另有３份ＤＦＡ阳性，ＮＰＣＲ却为阴性，再经细胞培养证实亦属阳性。综合ＮＰＣＲ与ＤＦＡ并对照细胞培养，结果显示ＮＰＣＲ的敏感性为９６７％（９０／９３），特异性为１００％（２０７／２０７），ＤＦＡ的敏感性为７６３％（７１／９３），特异性为１００％（２０７／２０７）。结论ＮＰＣＲ技术与ＤＦＡ法检测ＣＴ感染，均具有高度特异性、操作简便等优势；ＮＰＣＲ的敏感性优于ＤＦＡ法；ＤＦＡ法具有费用低、重复好的特点。两法结合起来检测ＣＴ，将获得理想的检测效果。     

PCR和探针杂交技术检测口腔粘膜疾病中人乳头瘤病毒的核酸

联合应用ＰＣＲ和核酸杂交的方法对１５份口腔粘膜疾病患者样品进行了分析。用ＰＣＲ技术测ＨＰＶ－１６为３份阳性，ＨＰＶ－１８为７份阳性；然后用探针杂交检测ＰＣＲ产物其ＨＰＶ－１６，３份阳性，ＨＰＶ－１８，１０份阳性。以上结果表明ＨＰＶ与口腔粘膜疾病有一定的关系；用ＰＣＲ扩增法和探针杂交法联合检测可提高检测率。     

多重聚合酶链反应检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的应用一种敏感快速的多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）,检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）和凝固酶阴性葡萄球菌（ＭＲＣＮＳ）。方法临床分离的北京地区金黄色葡萄球菌１２３株,ＭＲＣＮＳ１２２株,用溶壁素和蛋白酶Ｋ制备模板ＤＮＡ,设计葡萄球菌甲氧西林耐药的决定基因,金黄色葡萄球菌独有的一个辅助基因和细菌中均有的１６ＳｒＲＮＡ基因引物,通过多重ＰＣＲ技术对标本进行扩增。结果１２３株金黄色葡萄球菌的ｆｅｍＡ基因１００％（１２３／１２３）阳性,ｍｅｃＡ基因阳性的占１８．７％（２３／１２３）,１２２株ＭＲＣＮＳ的ｆｅｍＡ１００％（１２２／１２２）阴性,ｍｅｃＡ阳性的占２４．６％（３０／１２２）。１６ＳｒＲＮＡ基因片断在多重ＰＣＲ中作为内部参照避免了假阴性结果的出现。结论建立的多重ＰＣＲ技术检测ＭＲＳＡ和ＭＲＣＮＳ具有敏感、快速、特异的特点,是一种可靠的实验诊断手段。     

人乳头瘤病毒PCR产物酶标-微孔板杂交分型

目的建立聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物直接酶标记微孔板反向分子杂交法用于人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）型别鉴定。方法利用ＨＰＶ通用引物介导ＰＣＲ（ＧＰＰＣＲ）扩增靶ＤＮＡ，然后对产物直接标记辣根过氧化物酶复合物（ＨＲＰＰＥＩＱＩ），与预先包被在微孔板上的ＨＰＶ寡核苷酸探针杂交后酶显色法检测。结果ＨＰＶ各型之间无交叉杂交；杂交灵敏度可达１３～７６个病毒ＤＮＡ拷贝，比ＰＣＲ琼脂糖凝胶电泳检测高１０倍；该法重复性好，阳性孔批内ＣＶ为６．３４％，批间ＣＶ为１０．５３％，阴性孔批内ＣＶ为１％，批间ＣＶ为５．７９％；而且杂交影响因素较少。结论该法特异性强、灵敏度高、操作简便，无放射性和ＥＢ染料污染，杂交时间短、仪器读取结果，便于大量常规临床样本定性或定量检测。     

幽门螺杆菌血清抗体检测的临床应用

本文应用于上海长征医学科学有限公司生产的幽门螺杆菌（ＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒＰｙｌｏｒｉ，ＨＰ）抗体酶联免疫试剂盒对５９例胃镜检查患者的血清ＨＰ抗体进行了测定，同时与胃粘膜ＨＰ细菌学检测比较，其敏感性为９５％，特异性为８２．３％，阳性检测值和阴性检测值分别为９３％和８７．５％，它的检出率在慢性浅表性胃炎，胃溃疡和十二指肠溃疡患者分别为６５．５％，７６．９％，８７．６％，对５０例体检者和３０例随机献     

用通用引物建立的RT-PCR诊断肠道病毒性脑炎及脑膜炎

目的　用通用引物建立逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），达到广谱、特异及快速诊断肠道病毒（ＥＶ）性脑炎及脑膜炎。方法　用针对ＥＶ基因组５’端非编码区保守区的１对通用引物建立的ＲＴ－ＰＣＲ检测多种ＥＶ标准血清型，同时检测病毒性脑膜炎和脑炎患儿的脑脊液。结果　此种ＲＴ－ＰＣＲ可检测４２种ＥＶ的标准血清型，所用毒株在１０－１ＴＣＩＤ５０时仍可见到１９４ｂｐ的阳性条带。检测了３２例病毒性脑膜炎和脑炎患儿的脑脊液中ＥＶ－ＲＮＡ，１８例为阳性（５６．３％）。ＥＶ－ＲＮＡ阳性患儿的昏迷、瘫痪、抽搐、ＣＳＦ－蛋白质及低密度灶数（ＣＴ）分别为４（２２．２％）、８（４４．４％）、１２（６６．７％）、４６２ｍｇ／Ｌ（ｘ）及４（２２．２％）；ＥＶ－ＲＮＡ阴性患儿的昏迷、瘫痪、抽搐、ＣＳＦ－蛋白质、及低密度灶数（ＣＴ）分别为１０（７１．４％）、６（４２．９％）、１２（８５．７％）、３８６ｍｇ／Ｌ（ｘ）及４（２８．８％），仅昏迷发生率有极显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论　用通用引物建立的ＲＴ－ＰＣＲ诊断ＥＶ性脑膜炎和脑炎，具有广谱性、特异性、敏感性及简洁、快速的特点，诊断ＥＶ性脑膜炎和脑炎主要依靠病原学检查。