肺结核患者外周血NKT细胞、NK细胞、T淋巴细胞亚群的变化及意义

目的了解肺结核患者外周血NKT细胞、NK细胞和T淋巴细胞亚群的变化及其意义。方法采用流式细胞仪抗体双标法检测472例肺结核和非结核患者外周血NKT细胞（CD3＋CD16＋CD56＋）、NK细胞（CD3-CD16＋CD56＋）及T淋巴细胞亚群（CD3、CD4、CD8及CD4/CD8）的表达率,并进行分析。结果肺结核患者的NK细胞和NKT细胞的表达水平显著低于非结核患者,T细胞亚群CD4在肺结核患者中的表达显著高于非结核患者。肺结核患者不耐药组NK细胞和NKT细胞的表达率明显高于耐药组（F值分别为7.926、5.689,P〈0.001）。初治病例CD4、CD4/CD8显著高于复治病例（t值为-2.179、-2.402;P值为0.030、0.017）,初治病例CD8低于复治病例（t=3.257,P=0.001）。NKT细胞、NK细胞在初治和复治病例中的分布差异无统计学意义。NKT细胞、NK细胞和T淋巴细胞亚群在不同病灶范围分组之间分布差异无统计学意义。NK细胞、NKT细胞、CD4、CD8以及CD4/CD8在肺部有无空洞及空洞数量分组之间分布差异有统计学意义,即NK细胞、NKT细胞数、CD4/CD8、CD8随着空洞累及范围的增加而降低,CD4则随空洞累及范围的增加而升高。结论肺结核患者NKT细胞和NK细胞的表达受到了抑制,且NK细胞和NKT细胞的表达率随着耐药及耐药程度的加重而降低,随着肺结核空洞累及范围的增加机体免疫进一步失衡,提示结核病尤其是耐药结核病采用免疫调节剂辅助治疗的必要性。     

趋化因子受体CCR7在胃癌患者外周血淋巴细胞中的表达及其意义

目的研究趋化因子受体CCR7在胃癌患者外周血淋巴细胞各亚群的表达，并与健康人进行比较，探讨其与临床病理分期之间的相关性。方法分别收集健康人组、胃癌患者术前和术后外周血，进行荧光标记和红细胞裂解后，流式细胞仪检测CCR7在外周血淋巴细胞各亚群的表达，并分析其与临床病理分期之间的相关性。结果与健康人组相比，术前胃癌患者外周血T细胞各亚群中CCR7的表达明显下降，术后CCR7在外周血T细胞各亚群的表达明显升高。CCR7在胃癌患者外周血淋巴细胞中的表达与临床病理分期密切相关，Ⅰ、Ⅱ期患者外周血淋巴细胞中CCR7的表达率明显高于Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者（P＜0.05）。结论趋化因子受体CCR7在胃癌患者外周血淋巴细胞中的表达明显降低，其表达水平与胃癌的临床病理分期相关。     

活动期类风湿关节炎患者外周血树突状细胞CCR5和CCR7的检测及意义

目的 观察活动性类风湿关节炎(RA)患者不同活动期树突状细胞(DCs)表面趋化因子受体CCR5和CCR7的表达,评价其与疾病活动指标的相关关系.方法 选取28名RA患者以DAS28评分分为:低活动组、中活动组和高活动组,10名正常健康人为正常组,体外分离和培养RA患者DCs.采用流式细胞仪检测RA患者DCs表面CCR5和CCR7的表达.采用直线相关分析CCR5、CCR7和RA患者类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)与抗CCP抗体的相关关系.结果 DCs表面CCR5、CCR7在RA不同疾病活动性中有差异表达,CCR5和CCR7的表达与RF和CRP有直线相关关系,与抗CCP抗体无显著相关.结论 RA患者外周DCs表面CCR5和CCR7的表达与RA疾病活动有相关关系,可能成为监测RA疾病活动和治疗效果的指标.     

结直肠癌术后患者化疗前后外周血NKT及NK细胞表达分析

目的观察结直肠癌术后患者化疗前后外周血淋巴细胞亚群的变化,评估患者免疫功能状态变化。方法纳入浙江省肿瘤医院2016年1～12月住院的结直肠癌根治术后Ⅱ～Ⅲ期患者74例,健康对照组为25例同期我院就诊的非恶性肿瘤患者,采用流式细胞术分析辅助化疗第1、6、8周期前1 d外周血淋巴细胞亚群比例。结果结直肠癌根治术后患者外周血中CD3+(P=0.1532)、CD3+CD4+(P=0.1107)、CD3+CD8+(P=0.2576)T细胞与健康对照组比较无差异(P0.05),而CD3+CD56+NKT细胞(P=0.0210)及CD3-CD56+NK细胞(P=0.0045)较健康对照者显著升高(P0.05)。术后辅助化疗6周期前NK、NKT细胞比例均无显著变化,P0.05。8周期前NKT细胞比例无显著变化(P0.05),NK细胞比例仅轻度下降(19.10±4.63 vs 20.31±4.66,P=0.046)。结论结直肠癌根治术后患者NK及NKT细胞比例较健康人显著升高,且辅助化疗后表达率保持稳定。     

CXCR3在急性白血病患者外周血淋巴细胞的表达及其意义

目的探讨急性白血病(AL)患者外周血T淋巴细胞趋化因子受体CXCR3表达及其临床意义。方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法检测133例AL以及33例对照组外周血T淋巴细胞CXCR3表达。结果 AL患者外周血T淋巴细胞表面趋化因子受体CXCR3的表达阳性率明显高于对照组,分别为(28.24±18.14)%和(12.19±3.89)%(P<0.05)。在各型AL中,以B-ALL的表达率最高(40.14±17.56)%,而T-ALL型为(14.06±8.29)%,仅略高于正常对照(P>0.05);AL髓外浸润患者外周血T淋巴细胞CXCR3的表达为(34.54±19.87)%,明显高于非髓外浸润患者(20.44±12.15)%(P<0.01)。但AL患者外周血T淋巴细胞CXCR3的表达与白细胞总数、幼稚细胞百分率及CD3阳性率表达无关。结论 AL外周血T淋巴细胞CXCR3的表达可能与白血病的迁移、浸润密切相关。     

人脐血及外周血CIK、NKT及NK细胞含量及意义

[目的]了解人脐血(CB)及不同来源外周血(PB)CIK细胞、NKT细胞和NK细胞的分布规律.[方法]通过流式细胞术检测不同来源标本中CD3 CD56 CIK细胞、Vα24 CD161 NKT细胞和CD3-CD56 NK细胞的比例,比较上述细胞分布的差异性.[结果]CB中CIK细胞、NK细胞的比例分别为1.37%±0.51%、7.07%±3.63%,均显著低于正常学龄前儿童外周血(C阳)及成人外周血(APB)(P＜0.01);而NKT细胞在CB、CPB和APB中比例均低,且三组间无显著性差异.[结论]CB中的抗肿瘤免疫效应细胞CIK细胞、NKT细胞及NK细胞含量均低,其中CIK细胞、NK细胞比例显著低于PB.     

CCR7、CXCR4在肺癌中的表达及意义

目的探讨CC族趋化因子受体7(CCR7)和CXC族趋化因子受体4(CXCR4)在肺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学检测72例肺癌组织标本和30例良性肺疾病肺组织标本中CXCR4和CCR7的表达情况,并分析其不同临床病理特征中表达的差异。结果 CCR7和CXCR4在肺癌组织中的表达阳性率均明显高于正常肺组织,差异有统计学意义(P<0.01);CCR7和CXCR4表达与肺癌患者的TNM分期,纵膈淋巴结转移密切相关(P<0.01),与年龄、性别、病例组织学类型等均无关(P>0.05),并且Spearman相关分析显示,CXCR4表达与CCR7表达呈高度正相关(r=0.623,P<0.001)。结论 CXCR4和CCR7在肺癌纵膈淋巴转移中发挥重要作用。     

甲状腺乳头状癌组织趋化因子受体CXCR7和CCR5表达

目的研究趋化因子受体7(CXCR7)和趋化因子受体5(CCR5)在甲状腺乳头状癌(PTC)组织表达及其与PTC不同病理特征的关系。方法应用免疫组化的方法,检测70例PTC、25例甲状腺滤泡腺瘤及11例癌旁(距肿瘤2cm以上)组织中CXCR7及CCR5的表达情况。结果 PTC组织CXCR7和CCR5表达阳性率高于甲状腺滤泡腺瘤及癌旁组织,差异有显著性(χ~2=23.94、26.48,P<0.05);甲状腺滤泡腺瘤和癌旁组织中CXCR7和CCR5表达阳性率比较差异无显著性(P>0.05)。Spearman相关分析显示,PTC组织中CXCR7和CCR5表达呈正相关(r=0.73,P<0.05)。PTC组织中CXCR7和CCR5阳性表达与年龄、性别、TNM分期均无关(P>0.05),仅与淋巴结转移情况有关(χ~2=22.493、21.476,P<0.05)。结论 CXCR7及CCR5可能对PTC的发展及转移起一定的促进作用。     

鼻咽癌组织中CCR7和CXCR4的表达及其临床意义

目的探讨CXC族趋化因子受体4（CXCR4）和CC族趋化因子受体7（CCR7）在鼻咽癌（NPC）组织中的表达及其临床意义。方法随机选择2012年1月至2013年10月本院NPC患者60例,取其鼻咽癌组织（病例组）,选择同期鼻咽部炎症患者30例,取其鼻咽部组织（对照组）,采用免疫组织化学检测两组患者的CXCR4和CCR7表达情况。结果病例组CCR7和CXCR4的阳性表达分别为32例和27例,均高于对照组的6例和4例,其差异均有统计学意义（P〈0.05）,Ⅲ期＋Ⅳ期患者的CCR7和CXCR4阳性例数为22例和16例,高于Ⅰ期＋Ⅱ期的10例和11例,其差异均具有统计学意义（P〈0.05）;M1期CCR7阳性例数为24例,高于M0期的8例,差异也具有统计学意义（P〈0.05）;有淋巴结转移的患者CCR7和CXCR4阳性例数分别为23例和24例,未转移者9例和3例,其差异也具有统计学意义（P〈0.05）。结论 CCR7和CXCR4在鼻咽癌中的阳性表达率均明显高于非鼻咽癌组织,且与鼻咽癌临床分期和淋巴结转移有关,CXCR4和CCR7在鼻咽癌的发生和发展中具有重要的意义。     

外周血Th17细胞表面CCR4、CCR6、CXCR3表达量与慢性乙型肝炎患者病情的相关性

目的:研究外周血Th17细胞表面CCR4、CCR6、CXCR3表达量与慢性乙型肝炎(CHB)患者病情的相关性。方法:选择在本院诊断为慢性乙型肝炎的48例患者作为研究的CHB组,同期体检的66例健康志愿者作为对照组,采集外周血并测定Th17细胞表面CCR4、CCR6、CXCR3的表达量,采集血清并测定Th17细胞因子、肝功能指标、肝纤维化指标的含量。结果:CHB组外周血Th17细胞表面CCR4、CCR6、CXCR3的荧光强度显著高于对照组;CHB组血清中IL-17、IL-21、IL-22、ALT、AST、GLB、HA、PC-III、LN、C-IV的含量显著高于对照组且与外周血Th17细胞表面CCR4、CCR6、CXCR3的荧光强度呈正相关,血清中ALB的含量显著低于对照组且与外周血Th17细胞表面CCR4、CCR6、CXCR3的荧光强度呈负相关。结论:CHB患者外周血Th17细胞表面CCR4、CCR6、CXCR3的高表达能够造成Th17细胞因子分泌增多、肝功能损害及肝纤维化。     

CXCR4、CCR7在非小细胞肺癌中表达的差异及意义

目的 探讨非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)中CXC类趋化因子受体4(chemokine CXC motif receptor 4,CXCR4)、CC类趋化因子体7(chemokine CC motif receptor 7,CCR7)表达的差异性及其表达在局部淋巴结转移中的作用.方法 未做治疗的41例NSCLC肿瘤原发灶,以及25例移淋巴结和20例正常肺组织接SABC免疫组化法观察CXCR4、CCR7的表达.结果 NSCLC原发灶中肿瘤细胞CXCR4、CCR7阳性表达均明显高于正常肺组细胞(P＜0.05);CXCR4阳性表达率高于CCR7(分别为92.68%、68.29%;P＜0.05).原发灶中CCR7与TNM分期、淋巴结转移状况相关(P＜0.05).淋巴结移灶中CXCR4、CCR7表达阳性率差异无统计学意义(96%、84%;P＞0.05).结论 NSCLC中肿瘤细胞高表达CXCR4及CCR7可能与肿瘤细胞局部淋巴结靶性转移有关.对NSCLC而言,CCR7的作用可能更为关键.     

趋化因子受体CCR7及CXCR4在胃癌中的表达

目的 探讨趋化因子受体CCR7及CXCR4在胃癌中的表达情况以及与胃癌临床指标之间的关系，为胃癌患者预后判断提供分子标志。方法 采用RT-PCR分析CCR7及CXCR4在不同胃癌细胞株和胃癌组织标本中的mRNA水平的表达，免疫组化分析CCR7及CXCR4在胃癌组织标本中蛋白水平的表达，进一步分析CCR7及CXCR4的表达与胃癌临床各项指标之间的关系。结果 ①RT-PCR分析发现CCR7及CXCR4在5株胃癌细胞株中均有表达，其中CCR7在SNU-216中表达最强，CXCR4在SNU-620中表达最强。而CCR7在89．7％（35／39）的胃癌组织中有表达，CXCR4则在100％（39／39）的胃癌组织中均有表达。②免疫组化检测发现，CCR7蛋白胃癌组织标本中的阳性率为20．1％，CXCR4蛋白表达阳性率为41．3％。③统计学分析发现CCR7在分化型胃癌中的表达明显高于在未分化胃癌中的表达（P〈0．01），CXCR4在肠型胃癌中的表达明显高于在弥散型胃癌中的表达（P〈0．01）。且CCR7及CXCR4的表达与胃癌淋巴结的转移相关（P〈0.05）。结论 趋化因子受体CXCR4和CCR7在胃癌组织中高表达，其表达水平与胃癌的病理分化程度、临床分期等相关。     

慢性乙肝患者外周血NK细胞NKp46和NKG2A的表达

目的检测免疫清除期和免疫耐受期慢性乙肝患者外周血中NK细胞频率和NK受体NKp46和NKG2A表达情况。方法分离患者和建康对照者外周血单个核细胞,流式细胞仪检测各组NK细胞频率和受体表达。结果慢性乙肝免疫清除期患者外周血NK细胞占淋巴细胞比例（10．91％±3．93％,n=21）较免疫耐受期患者（15．65％±5．58％,n=15,P=0．024）和健康者（14．23％±7．37％,n=25,P=0．011）下降,免疫清除期患者NK细胞的NKp46表达f45．45％±14．00％,n=19）较免疫耐受期患者（23．35％±6．56％,n=8,P〈0．001）和健康者（31．69％±13．07％,n=20,P=0．001）明显上升,NKG2A表达（35．62％±13．20％,n=19）较免疫耐受期患者（25．57％±5．56％,n=8,P=0．038）和健康者（26．80％±10．49％,n=20。P=0．0471上升。结论慢性乙肝患者外周血NK细胞频率下降,NKp46和NKG2A表达上调,这些改变与免疫清除病毒有关。     

CXCR4 和CXCR7 在肾透明细胞癌 组织中的表达及其临床意义

目的 探讨趋化因子受体4（CXCR4）蛋白和趋化因子受体7（CXCR7）蛋白在肾透明细胞癌 （ccRCC）组织中的表达及其相关性。方法 采用免疫组织化SABC 法检测50 例ccRCC 及20 例癌旁正常 组织中CXCR4 和CXCR7 蛋白的表达。结果 ccRCC 组织中CXCR4 和CXCR7 表达高于癌旁正常组织 （P <0.05）;两者表达与ccRCC 组织的临床分期、病理分级及淋巴结转移关系密切（P <0.05）,与性别、年 龄及肿瘤体积无关（P >0.05）;在ccRCC 组织中,CXCR4 与CXCR7 表达呈正相关（r s=0.467,P =0.001）。 结论 CXCR4 和CXCR7 在ccRCC 组织中呈高表达,两者对ccRCC 的发生、发展及转移有协同作用。     

丙肝患者外周血T细胞亚群及mIL-2R的检测

目的：探讨丙型病毒性肝炎（ 丙肝） 患者的细胞免疫水平及其在丙肝发病机理中的作用。方法：用生物素链霉亲和素法对１１２ 例抗 Ｈ Ｃ Ｖ 阳性患者外周血单个核细胞进行 Ｔ 细胞亚群及植物血凝素（ Ｐ Ｈ Ａ） 诱导前后ｍ Ｉ Ｌ２ Ｒ 的检测。结果：急慢性丙肝患者与正常对照相比,外周血 Ｃ Ｄ３ ＋ 、 Ｃ Ｄ４ ＋ 百分率降低, Ｃ Ｄ８ ＋ 百分率增高, Ｃ Ｄ４ ＋ ／ Ｃ Ｄ８ ＋ 比值下降（ Ｐ＜ ０ ．０５ ～ Ｐ＜ ０ ．０１） 。外周血单个核细胞在静息状态和在 Ｐ Ｈ Ａ 诱导状态,其ｍ Ｉ Ｌ２ Ｒ 表达水平与正常对照组相比均低下（ Ｐ＜ ０ ．０１） ,但急慢性丙肝患者中 Ｔ 细胞亚群及ｍ Ｉ Ｌ２ Ｒ 表达水平类似（ Ｐ＞ ０ ．０５） 。结论：丙肝患者体内存在明显的细胞免疫功能紊乱, Ｔ 细胞活化障碍,并与肝病的慢性化有关。     

肝细胞癌患者外周血中调节性T细胞、NK细胞及NKT细胞的表达及意义

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞、CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞在肝细胞癌患者外周血中的表达及意义.方法 利用流式细胞仪对31例肝细胞癌患者、59例慢性肝炎、肝硬化患者及48例正常人外周血中的CD4+CD25+调节性T细胞、CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞进行定量分析.结果 肝细胞癌组外周血中CD4+CD25+T细胞较正常对照组及慢性肝炎、肝硬化组明显减少(P<0.05),肝细胞癌组外周血中CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞较正常对照组及慢性肝炎、肝硬化组明显增加(P<0.05).结论 CD4+CD25+调节性T细胞可能通过对CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞功能的抑制参与了肝癌细胞的免疫逃逸作用.     

类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞趋化因子受体CCR7的表达及其临床意义

目的 探讨CC族趋化因子受体CCR7在类风湿关节炎(RA)发病机制中的作用及其临床意义.方法 选取30例RA患者(RA组)和20例健康体检者(正常对照组).应用流式细胞检测术检测两组受检者外周血淋巴细胞表面CCR7的表达,并根据患者的触痛关节数、肿胀关节数、红细胞沉降率计算出患者的疾病活动性积分(DAS28),分析CCR7的表达与疾病活动性的关系.结果 RA组患者外周血CD+4T细胞和CD+8T细胞上CCR7的表达率[(74.5±13.7)%与(57.9±11.8)%]均显著高于正常对照组[(16.7±2.0)%与(16.6±1.6)%],差异有统计学意义(P＜0.01);且RA组患者外周血CD+4T细胞上CCR7的表达率显著高于CD+8T细胞,差异有统计学意义(P＜0.05).RA组患者外周血CD+4T细胞CCR7的表达与DAS28呈正相关(r=0.836,P＜0.01).结论 CCR7在RA患者外周血淋巴细胞上的表达异常增加,尤其是在CD+4T细胞上;CCR7在CD+4T细胞上的异常表达可能是导致RA病情活动的重要因素之一.     

趋化因子受体CCR3、CCR5和CXCR3与自然流产的相关性

目的 探讨外周血、脾脏、胸腺趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3与自然流产的关系.方法 用双标记流式细胞分析技术检测自然流产模型组小鼠(CBA/J×DBA/2,n=14)、正常妊娠模型组小鼠(CBA/J×BALB/c,n=13)和正常非孕组小鼠(CBA/J,n=11)外周血、脾脏以及胸腺中CD4+T细胞CCR3、CCR5和CXCR3这三类趋化因子受体的表达.结果 自然流产模型组外周血CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05,P<0.01);但三个指标与正常非孕组相比,差异均无统计学意义(P>0.05).自然流产模型组脾脏CD4+ T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01).高于正常非孕组(P<0.05);而CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05).自然流产模型组胸腺CD4+ T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.05),高于正常非孕组(P<0.01);而CXCR3的表达率高于正常妊娠模型组(P<0.05).但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05);CCR5与其他两组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 CD4+T细胞上CCR3、CCR5和CXCR3的表达异常可能在自然流产的发病中起作用.     

外周血CXCL9和CXCR3在大鼠肾移植急性排斥反应的表达及意义

目的 探讨大鼠肾移植手术前后趋化因子CXCL9及其受体CXCR3 mRNA的动态变化在术后急性排斥早期诊断的作用.方法 以BN和LEW大鼠作为供体,LEW大鼠作为受体,建立大鼠同种异体肾移植模型.采用ELISA法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别动态检测大鼠术前后血清CXCL9和外周血淋巴细胞CXCR3 mRNA的变化.同时检测血清肌酐水平.结果 实验组大鼠血清CXCL9、外周血淋巴细胞CXCR3 mRNA及血清肌酐表达均明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).术前实验组与对照组血清CXCL9和外周血淋巴细胞CXCR3 mRNA表达比较无统计学差异(P>0.05),术后第1、3、5、7天实验组均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).术前及术后第1天实验组和对照组血清肌酐表达比较无统计学差异,术后第3、5、7天实验组均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 血清趋化冈子CXCL9和外周血淋巴细胞CXCR3 mRNA的表达与排斥反应密切相关,可以作为早期诊断急性排斥反应的辅助敏感指标.     

趋化因子受体CCR3、CCR5和CXCR3与自然流产的相关性

目的探讨外周血、脾脏、胸腺趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3与自然流产的关系。方法用双标记流式细胞分析技术检测自然流产模型组小鼠（CBA／J&#215;DBA／2，n=14）、正常妊娠模型组小鼠（CBA／J&#215;BALB／c，n=13）和正常非孕组小鼠（CBA／J，n=11）外周血、脾脏以及胸腺中CD4^＋T细胞CCR3、CCR5和CXCR3这三类趋化因子受体的表达。结果自然流产模型组外周血CD4^＋T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组（P〈0．01），CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组（P〈0．05，P〈0．01）；但三个指标与正常非孕组相比，差异均无统计学意义（P〉0．05）。自然流产模型组脾脏CD4^＋T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组（P〈0．01），高于正常非孕组（P〈0．05）；而CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组（P〈0．05），但与正常非孕组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。自然流产模型组胸腺CD4^＋T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组（P〈0．05），高于正常非孕组（P〈0．01）；而CXCR3的表达率高于正常妊娠模型组（P〈0．05），但与正常非孕组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）；CCR5与其他两组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CD4^＋T细胞上CCR3、CCR5和CXCR3的表达异常可能在自然流产的发病中起作用。