姜黄素对正常人表皮黑素细胞黑素生成的影响

目的研究姜黄素对体外培养的正常人表皮黑素细胞黑素生成及酪氨酸酶活性的影响。方法采用MTT法测定姜黄素对人表皮黑素细胞的活力的影响,体外氧化DOPA反应方法测定酪氨酸酶活性,NaOH法测定黑素生成量。结果姜黄素在浓度小于或等于10μmol/L时无明显细胞毒性。姜黄素在浓度大于或等于2.5μmol/L时呈剂量依赖性抑制酪氨酸酶活性,减少黑素生成,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论姜黄素抑制培养的人表皮黑素细胞的黑素生成,可能具有开发成为美白产品的前景。     

欧前胡素抑制人表皮黑素细胞黑素生成

目的：评价欧前胡素对培养人表皮黑素细胞黑素生成的作用。方法：体外分离、纯化培养人表皮黑素细胞。随机分为空白组、熊果苷组和欧前胡素组（12．5μM,25μM和50μM）,作用48h,观察黑素细胞形态．检测黑素细胞活力、酪氨酸酶活性和黑素含量,免疫荧光显微镜观察欧前胡素对黑素细胞酪氨酸酶的影响。结果：不同浓度（0、12．5μM、25μM和50μM）欧前胡素作用于黑素细胞48h后,细胞活力分别为100％、107．8％、87．5％和59．7％。低浓度欧前胡素不影响黑素细胞形态,高浓度（50μM）对黑素细胞活力、酪氨酸酶活性、黑素含量有抑制作用,呈剂量依赖性。欧前胡素对酪氨酸酶蛋白在细胞内定位未见明显影响,但酪氨酸酶荧光强度降低。结论：欧前胡素抑制体外培养人表皮黑素细胞酪氨酸酶活性而降低黑素生成。     

与表皮黑素细胞增殖和黑素生成有关的信号转导

本文简要介绍了与黑素细胞增殖和黑素生成有关４条信号转导途径,如二脂酰甘油／蛋白激酶Ｃ（ＤＡＧ／ＰＫＣ）途径,一氧化氮／环磷酸鸟苷／蛋白激酶Ｇ（ＮＯ／ｃＧＭＰ／ＰＫＧ）途径,丝裂原激活的蛋白激酶（ＭＡＰＫ）级联途径和环磷酸腺苷／蛋白激酶Ａ（ｃＡＭＰ／ＰＫＡ）途径。随着对信号依赖性黑素细胞增殖动力学和黑素代谢的研究将有助于阐明色素障碍性皮肤的发病机制。同时主号转导环节而设计的增（减）色素性药物对色素障     

山奈素对melan-a黑素细胞株黑素生成的影响

目的:观察山奈素对melan-a黑素细胞株黑素生成的影响。方法:山奈素干预melan-a后,观察对黑素细胞增殖率的影响并测定各组酪氨酸酶活性大小及黑素量。结果:山奈素表现出轻度的促melan-a增殖作用(P<0.01),当山奈素浓度在0.001mmol/L至0.1mmol/L之间时,细胞增殖率和浓度呈指数关系,而浓度高于0.1mmol/L后进入平台期。山奈素在1mmol/L浓度时,促黑素合成的作用与同浓度8-MOP类似(P>0.05)。Fontana-Masson染色后与空白对照比较,经山奈素干预的细胞内,黑素颗粒染成黑色,融合成片,明显多于空白对照。结论:山奈素能够激活melan-a黑素细胞酪氨酸酶的活性,并具有促进黑素细胞增殖、使黑素合成量增加的作用。     

黑素细胞的生物学和黑素生成的新进展

近年来，已有少数新药用于治疗色素性皮肤病，已列出药理学干预黑素细胞和黑素生成的一些靶位。弄清皮肤生理性自然光防护、黑素细胞和黑素作用以及黑素生成的调控机理，以便采取新的 安全措施来纠正异常肤色，增强皮肤预防长期过度日晒后的有害作用。     

苦参碱及肉桂酸对体外培养小鼠黑素细胞黑素生成的影响

目的:观察苦参碱和肉桂酸对melan-a小鼠黑素细胞黑素生成的影响。方法:用药物干预melan-a小鼠,观察黑素细胞的形态并测定各组黑素量及酪氨酸酶的活性。结果:肉桂酸干预melan-a小鼠黑素细胞2d后就表现出明显的促进树突生成的作用。肉桂酸和苦参碱在高、中、低浓度(1.00、0.10、0.01mmol/L)有抑制melan-a小鼠黑素细胞酪氨酸酶活性的作用(除外0.01mmol/L苦参碱),其抑制作用均弱于对照药氢醌(P<0.01)。苦参碱(0.001～1.000mmol/L)和肉桂酸(0.001～1.000mmol/L)均能使melan-a小鼠黑素细胞黑素量减少,但其抑制黑素合成的作用明显低于同浓度氢醌。Fontana-Masson染色表明,经苦参碱干预后的melan-a小鼠黑素细胞内黑素颗粒少于空白对照组。结论:苦参碱和肉桂酸均有抑制melan-a小鼠黑素细胞酪氨酸酶活性的作用及使黑素合成量减少的作用,且苦参碱作用强于肉桂酸,而肉桂酸有促进黑素细胞树突形成的作用。     

与表皮黑素细胞增殖和黑素生成有关的信号转导

本文简要介绍了与黑素细胞增殖和黑素生成有关4条信号转导途径,如二脂酰甘油/蛋白激酶C(DAG/PKC)途径,一氧化氮/环磷酸鸟苷/蛋白激酶G(NO/cGMP/PKG)途径,丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)级联途径和环磷酸腺苷/蛋白激酶A(cAMP/PKA)途径。随着对信号依赖性黑素细胞增殖动力学和黑素代谢的研究将有助于阐明色素障碍性皮肤病的发病机制。同时针对信号转导环节而设计的增(减)色素性药物对色素障碍性皮肤病的临床治疗有着极其广阔的前景。     

黑素细胞的生物学和黑素生成的新进展

近年来 ,已有少数新药用于治疗色素性皮肤病 ,已列出药理学干预黑素细胞和黑素生成的一些靶位。弄清皮肤生理性自然光防护、黑素细胞和黑素作用以及黑素生成的调控机理 ,以便采取新的安全措施来纠正异常肤色 ,增强皮肤预防长期过度日晒后的有害作用     

迷迭香酸对人表皮黑素细胞黑素生成的影响

目的探讨迷迭香酸(rosmarinic acid)对体外培养的人表皮黑素细胞黑素生成的影响。方法取对数生长期的人表皮黑素细胞,分别加入不同浓度的迷迭香酸进行实验。MTT法测定体外培养的人黑素细胞活力,NaOH裂解法测定黑素含量,体外氧化多巴反应方法测定酪氨酸酶活性。结果与对照组相比,10～80μmol/L迷迭香酸对黑素细胞活力无明显影响,而100μmol/L迷迭香酸抑制黑素细胞活力(P0.01);10～80μmol/L迷迭香酸呈浓度依赖性促进黑素细胞黑素合成;10～80μmol/L迷迭香酸对蘑菇酪氨酸酶活性无明显影响(P0.05);20～80μmol/L迷迭香酸对黑素细胞酪氨酸酶活性有促进作用(P0.01)。结论迷迭香酸具有促进人表皮黑素细胞黑素生成的作用。     

皮肤创伤修复过程中表皮生长因子与黑素细胞及黑素生成关系的研究进展

创伤修复是一个复杂的过程,包括炎症反应、细胞增殖、基质沉积以及组织重塑过程.多种细胞及细胞因子共同参与促进创伤愈合.表皮生长因子被认为是其中的关键因素.表皮生长因子在创伤愈合中的积极作用已在动物实验及临床应用上得以证实,而在创伤修复过程中,表皮生长因子与黑素细胞及黑素生成的关系并不明确.近年来,研究发现,表皮生长因子可以抑制激光术后黑素细胞表达黑素,从而改善炎症后色素沉着.     

葛根素促进黑素细胞黑素合成及其机制的初步探讨

目的 探讨葛根素对正常人黑素细胞黑素合成的影响和可能机制。 方法 用噻唑蓝（MTT）法、NaOH裂解法观察葛根素对黑素细胞增殖及黑素合成作用,RT-PCR及Western印迹法检测葛根素对黑素细胞小眼畸形相关转录因子（MITF）、酪氨酸酶（TYR）、酪氨酸酶相关蛋白1（TRP-1）基因转录和蛋白表达水平的影响。 结果 1 ~ 40 μmol/L浓度范围内葛根素对体外培养的黑素细胞增殖影响与正常对照组相比,差异无统计学意义（P > 0.05）。与正常对照组相比,40 μmol/L葛根素可显著促进黑素细胞的黑素合成（P < 0.05）,并可显著增加MITF、TYR、TRP-1 mRNA及蛋白的表达（P < 0.05）。40 μmol/L葛根素使MITF、TYR、TRP-1的蛋白表达量分别比正常对照组增加8.69%,10.28%和10.58%（P < 0.05）;并使MITF、TYR、TRP-1的mRNA表达量分别比正常对照组增加2.48倍,1.91倍和1.63倍（P < 0.05）。 结论 葛根素能增加MITF、TYR、TRP-1 mRNA及蛋白的表达水平,促进黑素合成。     

白癜风表皮黑素细胞超微结构及小眼畸形相关转录因子转录调控研究

目的 研究白癜风黑素细胞超微结构和小眼畸形相关转录因子 （MITF）及其转录调控的酪氨酸酶相关蛋白（TRP）与白癜风临床类型与病程的相关性。方法 选择不同病程的寻常型白癜风（VV）12例和节段型白癜风（SV）8例,分别取白斑区、白斑边缘正常肤色区和远离白斑正常肤色区的表皮片,经组织学确定其表皮的完整性。透射电镜观察10例患者（VV 6例,SV 4例）不同区表皮黑素细胞的超微结构特点。对所有20例远离白斑正常肤色区的表皮片黑素细胞进行培养,应用免疫印迹方法检测 MITF及其转录调控的酪氨酸酶（TYR）、酪氨酸酶相关蛋白1（TYRP1）和酪氨酸酶相关蛋白2（TYRP2）的表达水平。结果 白癜风表皮黑素细胞超微结构病理改变：10例中7例白斑区表皮内未见黑素细胞,1例短病程和2例长病程VV分别可见少量黑素体显著减少或缺失的黑素细胞;白斑边缘正常肤色区,6例VV中,3例病程小于15个月者可见黑素细胞超微结构异常,而4例SV中仅1例异常;远离白斑正常肤色区,10例黑素细胞超微结构均正常。白癜风表皮黑素细胞MITF及其转录调控TRP的表达：VV的MITF表达下调与TYR、TYRP1、TYRP2的表达下调一致;SV存在MITF显著表达下调,而TYR、TYRP1、TYRP2几均正常表达。结论 VV和SV可能存在不同的表皮黑素细胞超微结构病理改变和MITF转录调控机制。     

芪白合剂对培养的人黑素细胞生长及酪氨酸酶、MITF基因表达的影响

目的 研究芪白合剂对黑素细胞生长及黑素细胞酪氨酸酶、小眼相关转录因子（MITF）基因表达的影响。方法 芪白合剂组方黄芪、党参、白芷、白蒺藜、鸡血藤，水煎煮浓缩成3 g/mL，取青紫蓝兔，按12 mL&;#8226;kg-1&;#8226;d-1连续灌胃3天后于末次给药1 h，2 h和5 h无菌采血，收集血清；采用体外培养正常人黑素细胞，观察不同采血时间的芪白合剂含药血清对黑素细胞生长、酪氨酸酶的活性、黑素合成以及用RT-PCR的方法测定其对酪氨酸酶、MITF基因表达的影响。结果 含药血清与对照血清比较，能明显促进黑素细胞生长，上调酪氨酸酶的活性和黑素合成（P < 0.05），以1 h和2 h所采血清作用明显。并可以促进酪氨酸酶和 MITF的基因表达。结论 芪白合剂可以通过直接作用于黑素细胞和酪氨酸酶通道来促进黑素合成     

甘草黄酮对黑素细胞生物学作用的比较

目的 研究甘草黄酮对体外培养的鼠黑素瘤B16细胞及人表皮黑素细胞的生物学作用。方法 建立正常人表皮黑素细胞培养体系和培养黑素瘤B16细胞,添加甘草黄酮后,测定黑素细胞活力、酪氨酸酶活性以及黑素含量的变化,并与氢醌的作用结果进行比较。结果 两种黑素细胞对药物的反应有所不同。与氢醌比较,甘草黄酮具有较强的浓度依赖性黑素合成抑制作用,且对黑素细胞的细胞毒性较小。结论 用体外培养的人黑素细胞作为研究对象与鼠黑素瘤B16细胞比较具有一定的差异;甘草黄酮可作为一种安全有效的皮肤美白物质。     

卡泊三醇对黑素细胞黑素合成的影响

目的 探讨卡泊三醇对黑素细胞黑素合成的影响及其作用的可能机制.方法 用噻唑蓝比色法(MTT法)、酶学方法及NaOH法,观察卡泊三醇对黑素细胞增殖及色素合成的作用;RT-PCR和蛋白印迹分别检测卡泊三醇对黑素细胞酪氨酸酶基因转录和蛋白表达水平的影响.结果 10~(-9)～10~(-5) mol/L浓度范围的卡泊三醇对体外培养的黑素细胞增殖的影响与空白对照组比较差异无统计意义(P＞0.05).同样浓度范围下,10~(-9)、10~(-8)mol/L浓度的卡泊三醇能明显增强黑素细胞的酪氨酸酶活性和促进黑素细胞的黑素含量,与空白对照组比较,酪氨酸酶活性可分别升高137%、123%(P＜0.05),黑素含量分别增加40.63%、18.75%(P＜0.05).其中10~(-9) mol/L浓度的卡泊三醇增强黑素细胞的酪氨酸酶活性及促进黑素细胞的黑素含量最明显.与高浓度组、空白对照组比较,10~(-9) mol/L浓度的卡泊三醇使酪氨酸酶蛋白表达增高也最明显.较空白对照组增高270.4%(P＜0.05).结论 卡泊三醇对黑素细胞增殖无影响,可增加黑素细胞酪氨酸酶蛋白表达水平,提高酪氨酸酶活性,从而促进黑素细胞的黑素合成.     

人皮肤黑素生成调控机制的研究进展

人皮肤黑素在黑素细胞的黑素小体内合成,受多重因素的复杂调控,包括转录调节、细胞内信号传导通路调节、产物的反馈调节,以及核受体、细胞因子等对黑素生成的正向（刺激）和负向（抑制）调节。在正常黑素生成过程中,小眼畸形相关转录因子是转录调控酪氨酸酶及其相关蛋白的最重要分子;环磷酸腺苷,蛋白激酶A通路、丝裂原激活的蛋白激酶通路、一氧化氮／环磷酸鸟苷,蛋白激酶G通路、二酯酰甘油／蛋白激酶c通路是参与黑素生成的最主要4条细胞内信号传导通路。对黑素生成有正向（刺激）作用的分子及其受体主要有G蛋白耦联受体及其配体、干细胞生长因子及其受体、核受体及其配体。对黑素生成有负向（抑制）作用的分子及其受体主要有Agouti信号蛋白及其受体、G蛋白耦联受体及其配体、细胞因子和生长因子及其受体。     

18味中药乙醇提取物对小鼠B16黑素瘤细胞增殖及黑素生成的影响

目的研究中药乙醇提取物对小鼠B16黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响。方法以MTT法测定培养的B16黑素瘤细胞的增殖活性:NaOH法测定黑素生成量;体外氧化多巴反应方法测定酪氨酸酶活性。结果与空白对照组相比,18种中药乙醇提取物中,有9种提取物对1种以上指标有显著性作用(P<0.05或P<0.01)。沙苑子、甘草、山慈姑、薄荷、苦参、夏枯草、黄芩、黑芝麻、墨旱莲可明显促进B16黑素瘤细胞增殖,甘草、山慈姑、薄荷、苦参、夏枯草、何首乌、黑芝麻、墨旱莲明显增加黑素含量,山慈姑、薄荷、苦参、夏枯草、黑芝麻、墨旱莲明显增加酪氨酸酶活性,山慈姑、薄荷、苦参、夏枯草、黑芝麻和墨旱莲的提取物对3种指标均有显著性作用(P<0.05或P<0.01)。结论山慈姑等6种中药的乙醇提取物具有促进黑素细胞增殖和合成黑素的作用。     

热处理对体外培养正常人黑素细胞活性的影响

目的 探讨热处理对体外培养的正常人黑素细胞的增殖活性、黑素合成及其酪氨酸酶活性的影响。方法 无菌操作获取正常人包皮环切术后的包皮,按照皮肤表皮细胞培养法获取黑素细胞,利用碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）为主要有丝分裂原建立正常人表皮黑素细胞培养系,采用Masson-Fontana染色法对培养细胞进行鉴定,确定细胞种系,噻唑蓝（MTT）比色法测定不同温度条件（39、41、42、43、45 ℃）处理对黑素细胞活力的影响并选择最佳的温度条件,以左旋多巴为底物测定酪氨酸酶活性,比色法测定黑素含量,并将实验组与对照组结果进行比较。结果 体外培养的正常人黑素细胞在5个不同的温度条件作用后,以42 ℃作用后的细胞增殖活性最佳。酪氨酸酶活性和黑素含量测定结果显示,42 ℃每天1 h连续干预3 d后,体外培养的正常人黑素细胞的酪氨酸酶活性增长率为36.4%,黑素合成增长率为78%,均明显高于对照组（P值均 < 0.01）。结论 热处理可以增强体外培养的人黑素细胞的增殖活性,促进其黑素合成,并且可提高其酪氨酸酶的活性。     

N-乙酰氨基葡萄糖对酪氨酸酶活性及小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的 探讨N-乙酰氨基葡萄糖对体外酪氨酸酶活性、小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶和黑素合成的影响。方法 取对数生长期小鼠B16黑素瘤细胞,分别加入不同浓度N-乙酰氨基葡萄糖（1.5、3、6.25、25、50和100 mmol/L）共孵育,MTT法测定培养的小鼠B16黑素瘤细胞的增殖活性,NaOH法测定黑素生成量,体外氧化多巴反应方法测定酪氨酸酶活性;免疫细胞化学测定小鼠B16黑素瘤细胞中酪氨酸酶的表达。结果 与阴性对照（0.8183 ± 0.0326）相比,1.5、3、6.25、25和50 mmol/L N-乙酰氨基葡萄糖显著抑制蘑菇酪氨酸酶活性（分别为0.7380 ± 0.0254、0.7293 ± 0.0382、0.7247 ± 0.0389、0.7233 ± 0.0186、0.7043 ± 0.0166）（P < 0.05或P < 0.01）;25、50和100 mmol/L N-乙酰氨基葡萄糖显著抑制小鼠B16黑素瘤细胞增殖（分别为0.5410 ± 0.0496、0.4480 ± 0.0246、0.1273 ± 0.0137）和黑素生成（0.0070 ± 0.0008、0.0049 ± 0.0012、0.0015 ± 0.0014）,50和100 mmol/L N-乙酰氨基葡萄糖显著抑制B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性（分别为0.1003 ± 0.0404、0.0130 ± 0.0053）及酪氨酸酶蛋白的表达（13.2700 ± 0.9741、8.5667 ± 2.0345,P < 0.05或P < 0.01）。结论 N-乙酰氨基葡萄糖抑制培养的小鼠B16黑素瘤细胞的酪氨酸酶活性和黑素合成。