Toll样受体7、9及其调控分子MyD88、NF-κB在白癜风患者外周血单个核细胞中的表达

目的：探讨Toll样受体7、9（TLR7、TLR9）及调控分子MyD88、NF?κB在白癜风患者以及健康个体外周血单个核细胞（PBMC）中的表达差异及意义。方法用流式细胞仪检测36例白癜风患者及22例健康对照PBMC中TLR7、TLR9的表达,并用反转录聚合酶链反应（RT?PCR）检测上述样本中MyD88、NF?κB mRNA的表达。结果白癜风患者TLR7的表达高于健康对照组,但差异无统计学意义（t=1.477,P=0.145）;TLR9的表达低于健康对照组,差异无统计学意义（t=-1.761, P=0.084）。白癜风患者外周血PBMC中MyD88 mRNA的表达稍高于对照组,但差异无统计学意义（t=0.058,P=0.954）;NF?κB mRNA的表达明显高于对照组,差异有统计学意义（t=2.814, P=0.008）。结论 TLR7、TLR9的调控通路中的关键信号分子NF?κB表达升高,提示NF?κB可能参与白癜风的发病机制。     

尖锐湿疣复发患者外周血单核细胞Toll样受体3、4、9的表达及意义

目的：观察尖锐湿疣复发患者外周血单核细胞（PBMC）3种Toll样受体TLR3、TLR4和TLR9的表达情况。方法：采用双色免疫荧光抗体染色流式细胞术检测26例复发CA患者PBMC上TLR3、TLR4和TLR9的表达水平,并以30例正常人作为对照组。结果：复发尖锐湿疣患者PBMC上TLR4和TLR9的表达水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;而TLR3的表达水平,两组间无统计学意义（P〉0．05）。结论：人乳头瘤病毒（HPV）的反复感染可上调PBMC TLR4和TLR9的表达,TLR4和TLR9在尖锐湿疣的复发机制中可能起着重要作用。     

孢子丝菌病患者皮损中Toll样受体2、4及髓样分化因子88的表达

【摘要】 目的 通过观察孢子丝菌病患者皮损中Toll样受体2、4（TLR2、TLR4）以及髓样分化因子88（MyD88）的表达情况,探讨其在孢子丝菌病免疫识别及免疫介导中的作用。 方法 选择孢子丝菌病患者19例及健康人对照12例,应用免疫组化法分别检测患者组皮损及对照组皮肤组织中TLR4及MyD88的表达情况,同时应用实时荧光定量PCR技术检测TLR2及MyD88 mRNA的表达情况。所有结果数据以■ ± s表示,采用SPSS17.0统计软件进行数据分析,两组间比较采用独立样本t检验,P ＜ 0.05认为差异有统计学意义。 结果 免疫组化分析：孢子丝菌病患者皮损中TLR4、MyD88的表达部位主要是除角质层外的表皮全层和真皮及皮下组织中的浆细胞和淋巴细胞。对照组皮肤几乎不表达TLR4,MyD88于真皮及皮下组织呈弱表达。孢子丝菌病组TLR4表达水平（63.767 ± 3.829）高于对照组（5.167 ± 3.246）,差异有统计学意义（t = 4.82,P ＜ 0.05）;MyD88表达水平（57.236 ± 4.744）亦高于对照组（10.588 ± 1.640）,差异有统计学意义（t = 3.30,P ＜ 0.05）。实时荧光定量PCR分析：孢子丝菌病患者皮损TLR2 mRNA和MyD88 mRNA的相对表达水平分别为1.974 ± 1.452和2.028 ± 2.061,均显著高于对照组（分别为1.430 ± 1.073和0.688 ± 0.422）,均P ＜ 0.05。 结论 孢子丝菌病发病可能与真菌通过Toll样受体途径作用于机体免疫系统有关。     

TLR4和TLR9 mRNA在麻风患者外周血单核细胞中的表达

目的观察TLR4和TLR9mRNA在麻风患者外周血单核细胞中的表达情况。方法运用SYBRGreen荧光定量RT-PCR技术检测麻风现症患者(30例)与已痊愈患者(30例)外周血单核细胞中TLR4和TLR9mRNA的表达水平,并与正常人作比较。结果 TLR9mRNA在麻风患者外周血单核细胞中的表达明显高于已痊愈组和正常对照组(P均<0.01),但痊愈组和正常对照组的差异不显著;且TLR4mRNA在麻风现症患者外周血单核细胞中的表达与痊愈组和正常对照组的差异也无统计学意义(P均>0.05)。结论 TLR9mRNA在麻风患者外周血单核细胞的表达明显升高,提示TLR9mRNA可能是麻风杆菌的特异识别受体,TLR9可能参与了机体感染麻风分枝杆菌后的免疫反应。TLR4是否参与了机体感染麻风分枝杆菌后的免疫反应尚有待于进一步论证。     

色素障碍性皮肤病

20121673白癜风患者外周血单核细胞Toll样受体7、9mRNA表达的初步研究/唐亚平(广州市皮防所皮肤科),李振洁,林春生…∥中华皮肤科杂志.-2012,45(4).-249～251采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测50例白癜风患者及25例正常人外周血单核细胞(PBMC)中TLR7,TLR9mRNA的表达。结果:白癜风患者PBMC中TLR7及TLR9mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05);稳定期与进展期、局限型与泛发型TLR7,TLR9mRNA表达水平差异均无统     

TLR7及TLR9在SLE患者外周血单个核细胞内的表达

目的:检测Toll样受体7(TLR7)mRNA及TLR9 mRNA在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞内的表达.方法:运用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量方法检测40例SLE患者(活动期25例,稳定期15例)和30名健康对照者外周血单个核细胞TLR7和TLR9 mRNA表达水平.结果:活动期SLE患者外周血单个核细胞TLR7 mRNA表达显著高于稳定期患者和正常人(Ps<0.01);活动期TLR9 mRNA表达与稳定期无统计学差异(P>0.05),但高于正常人(P<0.01).两者表达量与SLEDAI积分均呈正相关.结论:TLR7及TLR9在SLE的发病中可能起一定作用.     

黄褐斑患者皮损及血液中Toll样受体2和4的表达北大核心CSCD

目的 探讨Toll样受体（TLR）2和4与黄褐斑发病的相关性.方法 黄褐斑患者和健康对照各40例,采集外周血,并收集其中10例黄褐斑及10例健康对照者皮损,用RT-PCR方法检测血样及皮损中TLR2和4mRNA的表达,免疫组化观察TLR2和4在皮损中的表达及分布,并进行统计分析.结果 黄褐斑皮损中TLR2和TLR4在mRNA水平表达（分别为9.72±2.93,9.52±2.88）明显高于健康对照（分别为5.10±2.69,4.77±1.90）,差异有统计学意义（分别t=3.67、4.36,均P＜0.01）.40例黄褐斑患者及40例健康对照外周血中TLR2和TLR4的表达,差异无统计学意义（P＞0.05）.免疫组化显示：10例正常皮肤中6例表皮及血管内皮细胞均无TLR2表达,4例表皮基底层有TLR2弱阳性表达,血管内皮细胞未见表达.10例黄褐斑皮损中有3例表皮全层均有TLR2阳性表达,7例基底细胞层及棘层有TLR2阳性表达,真皮浅层血管内皮细胞未见TLR2表达.10例健康对照皮肤表皮及血管内皮细胞均未见TLR4表达.10例黄褐斑皮损基底细胞层均有TLR4强阳性表达,棘层弱阳性表达,其中3例真皮浅层血管内皮细胞可见阳性TLR-4表达.结论 黄褐斑发病可能与局部皮肤TLR介导的炎症反应有关.     

尖锐湿疣患者皮损Toll样受体4、9和C型凝集素受体的表达

目的 探讨初发和复发尖锐湿疣（CA）患者皮损中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达及意义。方法 采用免疫组化SP法检测30例初发CA皮损、30例复发CA皮损和20例正常人皮肤（包皮）中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达及分布。结果 初发CA皮损和复发CA皮损中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达水平均显著高于正常包皮组织（P < 0.001）,且集中分布于基底层和棘层细胞。TLR4、TLR9和DC-SIGN三者在初发CA皮损和复发CA皮损中的表达差异均无统计学意义（三者均P > 0.05）。TLR4、TLR9与DC-SIGN的表达均呈正相关性关系。结论 TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达增强可能在CA的发病和复发过程中起到一定作用。     

Toll样受体2 mRNA在梅毒患者外周血单一核细胞的表达

目的研究一期梅毒、二期梅毒、早期潜伏梅毒患者驱梅治疗前、后外周血单一核细胞(PBMCs)Toll样受体2(TLR2)mRNA的表达情况。方法采用实时定量PCR方法检测一期梅毒、二期梅毒、早期潜伏梅毒患者各15例驱梅治疗前和驱梅治疗结束后3个月PBMCs中TLR2mRNA的表达水平,并与20例正常人作对照。结果驱梅治疗前一期梅毒、二期梅毒及早期潜伏梅毒患者与正常对照组TLR2mRNA表达水平比较差异有统计学意义(P<0.001);一期梅毒、二期梅毒及早期潜伏梅毒组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05);经驱梅治疗后,一期梅毒、二期梅毒及早期潜伏梅毒患者PBMCs中TLR2mRNA的表达水平显著下降,与驱梅治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.001);与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);TLR2mRNA的表达水平与血清RPR滴度不存在相关关系(P>0.05)。结论TLR2可能参与了免疫细胞对梅毒螺旋体的识别和信号转导,并在梅毒的发生、发展过程中可能起重要作用。     

Toll样受体2mRNA在梅毒血清固定患者外周血单核细胞中的表达

目的研究梅毒血清固定患者外周血单核细胞(PBMCs)中Toll样受体2(TLR2)mRNA的表达情况,并探讨其与梅毒血清固定的发病关系。方法采用实时定量PCR方法检测TLR2 mRNA在观察组中40例梅毒血清固定患者PBMCs的表达水平,并以30例驱梅治疗后TRUST阴转者和30例正常人分别作为对照组。结果观察组PBMCs中TLR2 mRNA的表达水平(1.54±0.51)明显低于两对照组(2.49±0.86)和(2.45±0.74),差异有统计学意义(P均<0.05);两对照组PBMCs中TLR2mRNA的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论梅毒血清固定患者PBMCs中TLR2mRNA的表达水平较驱梅治疗阴转者及正常人低,表明天然免疫异常可能导致梅毒血清固定的发生。     

Toll样受体2、4在麻风患者外周血单一核细胞中的表达

目的 探讨Toll样受体2、4 mRNA在麻风患者外周血单一核细胞中的表达.方法 运用SYBR Green荧光定量RT-PCR技术检测麻风现症患者与已痊愈患者各30例外周血单一核细胞中Toll样受体2、4 mRNA的表达水平,并用正常人作对照.结果 Toll样受体2 mRNA在麻风患者外周血单一核细胞中表达明显高于痊愈组和正常人对照组(P＜0.01).Toll样受体4 mRNA在麻风现症患者外周血单一核细胞中的表达与痊愈组和正常人对照组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Toll样受体2 mRNA在麻风患者外周血单一核细胞的表达明显升高,提示Toll样受体2 mRNA可能是麻风杆菌的特异识别受体.     

寻常型白癜风患者外周血单一核细胞、血清及皮肤组织液中巨噬细胞游走抑制因子检测

目的 检测巨噬细胞游走抑制因子（MIF）在寻常型白癜风患者外周血单一核细胞（PBMC）、血清及皮肤组织液中的表达,探讨其临床意义。方法 应用实时逆转录PCR及酶联免疫吸附试验检测39例寻常型白癜风患者与31例性别、年龄相匹配的正常人对照者PBMC中MIF mRNA的表达水平及血清、皮肤组织液中MIF的含量。结果 寻常型白癜风患者PBMC中MIF mRNA的表达水平及血清、皮肤组织液中MIF的含量分别为6.70（2.64 ~ 8.65）、32.76（10.67 ~ 40.98） μg/L、167.80（107.40 ~ 219.60） μg/L,显著高于正常人对照组（Z值分别为5.895、5.936、4.715,P值均 < 0.05）;进展期白癜风患者分别为7.89（3.89 ~ 9.12）、37.80（29.50 ~ 45.70） μg/L、211.50（131.70 ~ 248.75） μg/L,显著高于稳定期患者（Z值分别为2.213、2.141、2.100,P值均 < 0.05）。白癜风患者PBMC中MIF mRNA的表达水平及血清中MIF的含量与疾病严重程度评分呈正相关（r值分别为0.486、0.453,P值均 < 0.05）。结论 MIF可能在寻常型白癜风的发病过程中发挥一定作用。     

Toll样受体2、4 和9在皮肤结核皮损中的表达

目的 研究Toll样受体2、4和9 （TLR-2、TLR-4、TLR-9）在寻常狼疮和疣状皮肤结核皮损中的表达,探讨其在皮肤结核发病中的作用。方法 经临床与病理确诊的皮肤结核（包括寻常狼疮和疣状皮肤结核）患者皮损标本18份,斑块状银屑病皮损15份为阳性对照,色素痣边缘正常皮肤10份为阴性对照。用免疫组化法观察TLR-2、TLR-4、TLR-9的表达情况。采用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析,组间比较行t检验。结果 TLR-2在正常皮肤表达于除基底层外的表皮全层,而在皮肤结核和银屑病皮损表达于表皮的中上层,3组的表达强度均为高表达（A值分别为0.28 ± 0.03、0.25 ± 0.04和0.25 ± 0.05）,3组差异无统计学意义（P > 0.05）。TLR-4在正常皮肤和银屑病呈低或无表达（A值分别为0.07 ± 0.09和0.02 ± 0.05）,而皮肤结核（0.16 ± 0.07）呈低表达,其表达强度高于正常皮肤（t = 2.58,P ＜ 0.05）和银屑病皮损（t = 6.24,P ＜ 0.01）。TLR-9在正常皮肤和皮肤结核表达于表皮全层、附属器及血管壁,而皮肤结核的表达强度（A值为0.25 ± 0.05）高于正常皮肤（0.19 ± 0.05）,两组比较,t = 2.88,P ＜ 0.05。结论 TLR-2、TLR-4和TLR-9在皮肤结核皮损中均存在表达,其中TLR-4和TLR-9的表达高于正常皮肤,提示其在皮肤结核的免疫应答中可能起一定的作用。     

谷氨酸信号通路在人外周血淋巴细胞活化及白癜风免疫发病机制中的作用

目的 探讨谷氨酸信号通路在人外周血淋巴细胞活化及白癜风免疫发病机制中的作用。方法 流式细胞仪测定离子型谷氨酸受体NMDAR的非竞争性拮抗剂MK801对健康对照外周血淋巴细胞CD25表达及IFN-γ水平的影响;NMDAR的激动剂NMDA和拮抗剂MK801对淋巴细胞内活性氧簇水平的影响。实时定量PCR和流式细胞仪测定白癜风患者和健康对照外周血淋巴细胞中NMDAR亚型NMDAR1和NMDAR2A表达差异。免疫组化方法观察白癜风患者皮损和健康对照皮肤组织中NMDAR1和NMDAR2A的表达。结果 MK801组外周血淋巴细胞CD25表达（7.28 ± 0.18）%较阴性对照组（16.02 ± 0.42）%明显下降（P < 0.01）;MK801组淋巴细胞中CD25+ IFN-γ+ 比例（1.79 ± 0.09）%较阴性对照组（0.78 ± 0.06）%明显增高（P < 0.01）。NMDA组淋巴细胞内ROS水平（101.1 ± 3.50）明显高于阴性对照组（69.80 ± 2.08）（P < 0.01）。白癜风患者外周血淋巴细胞NMDAR1的表达（3.85 ± 2.17）较健康组（0.97 ± 0.55）明显增高（P < 0.05）。结论 谷氨酸信号通路对活化淋巴细胞的IFN-γ分泌及ROS水平的影响有可能是白癜风的免疫发病机制之一。     

尖锐湿疣患者外周血单一核细胞中干扰素调节因子7和Toll样受体9 mRNA的表达

目的 探讨干扰素调节因子7、Toll样受体9在尖锐湿疣发病中的作用及临床意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应检测25例尖锐湿疣患者外周血单一核细胞中干扰素调节因子7、Toll样受体9 mRNA的水平,20例正常人作对照。结果 尖锐湿疣患者外周血单一核细胞中干扰素调节因子7与Toll样受体9 mRNA表达水平均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P值均 < 0.01）。结论 尖锐湿疣患者外周血中干扰素调节因子7、Toll样受体9表达升高。     

特应性皮炎患者外周血调节性T细胞与Th17细胞平衡状态分析

目的 探讨调节性T细胞（Treg 细胞）与Th17细胞失平衡在特应性皮炎（AD）发病机制中的作用。方法 采用流式细胞仪检测41例AD患者外周血Treg细胞与Th17细胞的比例,实时定量逆转录聚合酶链反应检测Treg细胞与Th17细胞转录因子Foxp3、RORγt mRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验检测血清中转化生长因子β（TGF-β）、白介素17（IL-17）和白介素23（IL-23）的含量;同时以38例性别、年龄匹配的健康儿童作为对照组。采用独立样本t检验和线性相关进行统计学分析。结果 AD患者组外周血Treg细胞（CD4+CD25+Foxp3+T细胞）比例为2.01% ± 0.57%,Foxp3 mRNA的表达量为0.65 ± 0.19;健康对照组分别为5.04% ± 1.44%和1.71 ± 0.69,AD患者组均明显低于健康对照组（两组比较,t值分别为12.47和9.47,P值均 ＜ 0.01）。AD患者组外周血Th17细胞（CD4+IL-17+T细胞）比例为1.77% ± 0.55%,RORγt mRNA表达量为5.97 ± 1.45;健康对照组分别为0.39% ± 0.15%和1.49 ± 0.57,AD患者组均显著高于健康对照组（两组比较,t值分别为14.82和17.78,P值均＜ 0.01。AD患者组Treg/Th17细胞比值（1.26 ± 0.61）较健康对照组（14.53 ± 5.77）明显降低（t = 14.11,P ＜ 0.01）。急性期AD患者Treg/Th17细胞比值为0.88 ± 0.04,与亚急性期（1.29 ± 0.11,t = 4.02,P ＜ 0.01）和慢性期（2.05 ± 0.24,t = 4.83,P ＜ 0.01）AD患者比较,差异均有统计学意义;AD患者亚急性期与慢性期比较,差异亦有统计学意义（t = 2.89,P ＜ 0.05）。AD患者血清中IL-17和IL-23含量均高于健康对照组（P值均 ＜ 0.01）,而TGF-β含量比较,差异无统计学意义（t = 1.96,P ＞ 0.05）。中、重度AD患者疾病严重程度评分与外周血Treg细胞比例呈负相关（r = -0.40,P ＜ 0.05）,与Th17细胞比例呈正相关（r = 0.42,P ＜ 0.05）。结论 AD患者外周血Treg和Th17细胞比例、特异性转录因子Foxp3、RORγt mRNA表达水平及血清中相应细胞因子含量发生变化,Treg/Th17细胞失平衡可能参与了AD的发病。     

白癜风患者焦虑状态与血清中血管紧张素Ⅱ水平的研究

目的 探讨白癜风患者焦虑情绪与血清中血管紧张素Ⅱ水平的关系。方法 选择60例进展期白癜风患者和健康体检者30例,采用焦虑自评量表 （SAS）对两组进行情绪评分,并比较分析两组之间及焦虑与无焦虑患者血清中血管紧张素Ⅱ水平。结果 白癜风患者组SAS评分（46.13 ± 11.72）明显高于正常对照组（36.73 ± 12.59）,t = 3.50,P ＜ 0.01。白癜风患者焦虑情绪发生率为48.3%。女性患者SAS评分和焦虑发生率比男性患者显著增高（t = 2.47,χ2 = 4.58,P值均 ＜ 0.05）。未婚白癜风患者SAS评分和焦虑发生率比已婚患者显著增高（t = 2.59,P ＜ 0.01;χ2 = 6.17,P ＜ 0.05）。暴露部位白癜风患者SAS评分和焦虑发生率比非暴露部位患者显著增高（t = 3.60,P ＜ 0.01;χ2 = 5.84,P ＜ 0.05）。白癜风患者中具有焦虑情绪者血清中血管紧张素Ⅱ水平为（63.83 ± 10.92） ng/L,明显高于无焦虑情绪者（40.74 ± 8.70） ng/L,t =9.09,P < 0.01。结论 白癜风患者存在明显的焦虑情绪,且患者血清中血管紧张素Ⅱ水平与白癜风发病及焦虑状态关系密切,可能影响白癜风的发生与发展。     

带状疱疹患者单一核细胞Toll样受体3和9的表达

目的　探讨Toll样受体TLR3和TLR9在带状疱疹发病机制中的作用。方法　采用流式细胞仪检测40例带状疱疹患者外周血单一核细胞（PBMC）上TLR3和TLR9的表达水平。16例正常人群为对照组。结果 带状疱疹患者PBMC上TLR3和TLR9的表达水平均明显高于正常人对照组（ P < 0. 01）。带状疱疹患者PBMC上TLR3和TLR9的表达水平与发病时间存在负相关关系（ r值分别为- 6.23,- 5.88, P值均 < 0. 01） ,但与性别、年龄无相关性。带状疱疹患者PBMC上TLR3和TLR9表达在各年龄组间（< 40岁, 40 ~ 50岁, > 50岁）,差异具有统计学意义（F = 3.410,P < 0. 01）,且< 40岁年龄组TLR3和TLR9的表达明显高于其他两组。结论　TLR3和TLR9可能参与带状疱疹发病。