miR-21及PDCD4在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的:了解miRNA-21(miR-21)和其靶基因程序性细胞死亡4(programmed cell death 4,PDCD4)在乳腺浸润性导管癌中的表达情况.方法:运用原位杂交及免疫组化技术检测128例乳腺浸润性导管癌组织中miR-21及PDCD4的表达情况,分析两者与临床病理特征之间的关系.结果:miR-21与PDCD4的表达呈负相关,相关系数rs=0.727(P＜0.01);在远处转移组中miR-21的表达高于非远处转移组(P＜ 0.001),PDCD4的表达则低于非远处转移组(P＜0.001);两者表达均与肿瘤大小及淋巴结转移情况相关(P＜0.05),而与激素受体以及绝经状况不相关(P＞0.05).结论:乳腺浸润性导管癌组织中miR-21高表达与PDCD4低表达相关,其或许均能提示该病较高的恶性程度.     

SFRP4和β-catenin在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义

目的观察分泌型卷曲相关蛋白(SFRP4)及β-连环素(β-catenin)在宫颈鳞癌组织中的表达,并分析其临床病理意义。方法应用免疫组化SP法检测62例宫颈鳞癌组织(SCC组)及23例正常宫颈组织(NC组)中SFRP4和β-catenin的表达。结果①(1)SCC组SFRP4和β-catenin的阳性表达率(66.1%、71.0%)均高于NC组(30.4%、34.8%)(P均<0.05)。②SFRP4和β-catenin在宫颈鳞癌中的表达与临床分期、分化程度、淋巴转移及浸润深度有关(P均<0.05)。③SFRP4和β-catenin的表达呈正相关(r=0.29,P<0.05)。结论 SFRP4可能与β-catenin协同作用促进Wnt/β-catenin信号通路的活化,并且与宫颈鳞癌的恶性临床病理特征相关,提示SFRP4可能成为指导宫颈鳞癌的临床治疗和判断预后的指标。     

PDCD4对高糖诱导的胰岛β细胞损伤的影响及机制研究

目的研究程序性细胞死亡4 (PDCD4)对高糖诱导的胰岛β细胞损伤的影响及机制。方法胰岛β细胞感染PDCD4 siRNA重组慢病毒,给予高糖处理,Realtime PCR和Western blot检测PDCD4表达水平。CCK8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot方法检测细胞中活化型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白水平,用黄嘌呤氧化法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测细胞中丙二醛(MDA)含量,ELISA法检测细胞分泌胰岛素水平。结果PDCD4 siRNA重组慢病毒能够有效下调高糖条件下胰岛β细胞中PDCD4的表达水平。高糖处理后的胰岛β细胞的增殖能力降低,细胞凋亡率升高,细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平升高,SOD活性降低,MDA含量升高,细胞分泌的胰岛素水平下调。敲低PDCD4可以明显提高高糖环境下胰岛β细胞增殖能力,减少细胞凋亡和细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平,提高细胞中SOD活性,降低细胞中MDA水平,促进细胞分泌胰岛素。结论敲低PDCD4能够通过减轻高糖诱导的胰岛β细胞氧化损伤减少细胞凋亡,促进胰岛β细胞分泌胰岛素。     

SOX-2和OCT-4在宫颈鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨SOX-2及OCT-4表达与宫颈鳞癌病理分级的关系及其在宫颈癌发生、发展等方面的作用和意义.方法应用免疫组织化学技术和RT-PCR方法在蛋白及核酸水平检测SOX-2及OCT-4在正常宫颈及宫颈鳞癌组织中的表达.结果(1)免疫组化染色显示,正常宫颈组织与中、低分化宫颈鳞癌组织中SOX-2的表达差异有显著性(P<0.05);OCT-4在正常宫颈和宫颈鳞癌组织表达差异有显著性(P<0.01).(2)RT-PCR示SOX-2mRNA在正常宫颈及中、低分化宫颈鳞癌组织中的表达差异有显著性(P<0.01),并且SOX-2的表达随着病理学分级的下降而表达上调;OCT-4mRNA在正常宫颈及宫颈鳞癌组织中的表达差异有显著性(P<0.01),但OCT-4的表达与病理学分级无关.结论 SOX-2和OCT-4可能在宫颈鳞癌的发生、发展中起重要作用.     

人胃癌组织中PDCD4与DNMT1表达及初步研究

目的：通过检测PDCD4和DNMTI在胃癌组织、癌旁组织、正常组织中的表达,研究其临床意义。方法选取2012年6月至2013年3月9个月间在我院进行治疗的胃癌患者,采用免疫组织化学SP法检测60例胃癌组织、60例癌旁组织、60例正常胃黏膜组织。收集三组患者PDCD4和DNMTI的表达水平、阳性率,用RT-PCR法检测PDCD4和DNMTImRNA的表达,研究其病理学参数关系,并对收集的数据进行统计学分析。结果 DNMTI在胃癌组织、癌旁组织、正常组织中阳性含量为71.67％、61.67％、36.67％,PDCD4在胃癌组织、癌旁组织、正常组织中阳性含量为30％、50％、70％,表现出相反的趋势,经表达相关性分析成负相关关系。胃癌组织与癌旁组织比较数据差异不明显,不具有统计学意义(P>0.05)。而胃癌组织、癌旁组织与正常组织相比较数据差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。 PDCD4和DNMTI的表达都与病理分型存在显著相关性(P<0.05)。结论 PDCD4和DNMTI的表达出现异常与胃癌的发生、发展存在密切联系,两者表达成负相关关系。     

宫颈鳞癌患者血清CYFRA21—1和CA125检测及临床意义的探讨

宫颈脱落细胞学检查对宫颈癌的诊断具有重要价值。但迄今为止还没有一项特异性的肿瘤标志物可以评价宫颈鳞癌的诊断和预后。所以建立一种理想的组合检测模式是十分必要的。作者使用水溶性细胞角蛋白19片段（Cyfra21—1）和CAl25组合检测，并对宫颈鳞癌的临床应用价值进行了探讨。     

MicroRNA-21在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及其意义

本研究旨在检测弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B cell lymphoma,DLBCL）细胞株中miR-21（micro RNA-21）的表达以及调控PDCD4及PTEN 2种基因对肿瘤生长、浸润及转移能力的影响,并探讨以miR-21作为靶分子对DLBCL基因治疗的可能性。首先,使用荧光定量PCR（qRT-PCR）检测3种DLBCL细胞株中miR-21的表达水平;利用转染anti-miR-21来降低miR-21的表达量,研究miR-21对DLBCL的生物行为可能产生的作用;通过荧光素酶报告基因检测,定量RT-PCR和Western blot来验证miR-21与PDCD4和PTEN的关系。结果表明：ABC-型DLBCL细胞株中miR-21的表达明显高于GCB-型DLBCL;RNA反义抑制技术特异性降低OCI-LY3和OCILY10细胞miR-21表达后,细胞增殖、侵袭能力受到明显抑制,凋亡增加;荧光素酶报告、定量RT-PCR和Western blot检测表明,PDCD4及PTEN是miR-21靶基因。结论：miR-21可能涉及DLBCL的发病机制,可能为一种新的DLBCL治疗靶分子。     

多发性骨髓瘤患者循环microRNA-21的表达与意义

摘要：目的：了解多发性骨髓瘤(MM)患者循环microRNA-21（miR-21）的表达情况。 方法：用荧光定量PCR法检测34例MM患者循环miR-21的表达水平,并与血清Ig的总量（IgG+IgA+IgM）、lambda轻链、kappa轻链、Ca²⁺、乳酸脱氢酶（LDH）、清蛋白(Alb)、β2-微球蛋白(β2-MG)、血红蛋白(Hb)作相关性分析。 结果:MM组循环miR-21的相对表达水平为2.01±0.27,显著高于意义不明的单克隆丙种球蛋白病（MGUS）组0.76±0.20(t=15.39,P<0.01)和健康人对照(NC)组0.43±0.11(t=27.74,P<0.01)。MM组Ⅰ期的miR-21水平显著低于Ⅱ期和Ⅲ期（t=-4.16,t=-4.32,P均<0.01）。MM组循环miR-21水平与血kappa轻链(r=0.532, P<0.05)、血lambda轻链(r=0.615,P<0.01)、Ig的总量（IgG+IgM+IgA）(r=0.625,P<0.05) 及血清β2-MG（r=0.491, P<0.05)均呈显著正相关,与血清Alb呈负相关(r=-0.585,P<0.01)。而与LDH（r=0.250,P>0.05)、Hb（r=-0.286,P>0.05)及Ca²⁺（r=-0.227,P>0.05)均无相关性。 结论:MM患者循环miR-21可以反映骨髓瘤细胞的负荷,监测MM病情进展。     

非小细胞肺癌患者癌组织和血浆中microRNA-21的表达及意义

目的探讨microRNA-21(miRNA-21,miR-21)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺癌组织和血浆中的表达及临床意义。方法用荧光定量PCR检测100例NSCLC患者肺癌组织及癌旁组织miR-21的相对表达量,并检测100例NSCLC患者及100例健康人血浆miR-21的相对表达量,用t检验比较其表达水平的差异,用卡方检验分析肺癌组织miR-21表达量与各临床病理资料之间的关系,ROC曲线评价miR-21对NSCLC的诊断价值。结果 miR-21在肺癌组织的表达水平高于癌旁组织(t=10.154,P0.05),且在NSCLC患者血浆中的表达水平高于健康人(t=13.444,P0.05);肺癌组织中miR-21高表达患者肺癌复发转移率明显高于低表达患者(χ2=11.335,P0.05);生存分析显示,肺癌组织或血浆中miR-21高表达患者较低表达者生存期明显缩短(χ2为6.685和5.692,P0.05);ROC曲线表明,miR-21对NSCLC诊断价值中等。结论 miR-21在NSCLC患者癌组织及血浆中均有高表达,肺癌组织miR-21高表达与NSCLC复发转移具有密切关系,可作为NSCLC诊断及评价预后的指标。     

人骨肉瘤组织中PDCD5基因的表达及临床意义

目的研究程序化死亡基因5（PDCD5）在正常骨及人骨肉瘤中的表达规律。方法45例骨肉瘤新鲜标本,按刘氏分级法分为I级（14例）,Ⅱ级（18例）,Ⅲ级（13例l免疫组织化学检测其PDCD5表达特征,并与18例良性骨瘤组织和30例正常对照骨组织进行比较。结果46．67％的骨肉瘤组织、86．67％正常对照骨组织、88．89％良性骨瘤组织中PDCD5蛋白呈强阳性表达,骨肉瘤与良性骨瘤及正常骨组织相比差异有显著性（P〈O．05）。不同刘氏分级中骨肉瘤中强阳性表达比例分别为I级85．71％,Ⅱ级50％,Ⅲ级46．15％。结论在正常骨组织、良性骨瘤、骨肉瘤组织中,PDCD5的表达出现明显差异。骨肉瘤的发生及分级可能与促凋亡某因PDCD5的表汰有美．     

microRNA-21参与调控膀胱癌细胞增殖及多柔比星敏感性的研究

目的膀胱移行细胞癌是一种常见的恶性肿瘤,且复发率很高。由于microRNA-21(miR-21)在多种类型肿瘤中参与肿瘤发生及耐药,故通过此次研究探索其在膀胱移行细胞癌中的功能。方法肿瘤组织及癌旁正常组织中的miR-21及目的蛋白PTEN表达水平分别采用实时qRT-PCR及Western blot方法进行测量。采用MTT法评估miR-21对于癌细胞增殖以及多柔比星敏感性的影响。采用流式细胞术探究T24细胞系中多柔比星引起的细胞凋亡。结果与癌旁正常膀胱组织相比,miR-21在膀胱肿瘤组织中的表达水平显著上调,而PTEN蛋白表达低水平。活体内研究发现miR-21与PTEN表达呈负相关。miR-21过表达可显著促进T24细胞系的细胞增殖与多柔比星敏感性。结论 miR-21可能是膀胱移行细胞癌的致癌因素,有望成为膀胱移行细胞癌的治疗新靶点。     

miR-421靶向PDCD4促进前列腺癌DU145细胞增殖的实验研究

目的研究MicroRNA-421(miR-421)促进前列腺癌DU145细胞增殖的作用及潜在的分子机制。方法培养前列腺癌DU145细胞,分为对照组、miR-阴性对照(NC)组、miR-421组、miR-421+pcDNA组、miR-421+pcDNA-细胞程序性死亡基因4(PDCD4),miR-NC组转染miR-NC、miR-421组转染miR-421、miR-421+pcDNA组转染miR-421及pcDNA质粒、miR-421+pcDNA-PDCD4组转染miR-421及pcDNA-PDCD4质粒,MTS法测定细胞增殖活力,荧光定量PCR测定PDCD4的mRNA表达水平,western blot测定PDCD4的蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-421与PDCD4的靶向结合。结果与对照组及miR-NC组比较,miR-421组的增殖活力增加,PDCD4的表达水平及野生型PDCD4双荧光素酶报告基因的荧光活力均降低(P<0.05);与miR-421+pcDNA组比较,miR-421+pcDNAPDCD4组的增殖活力降低,PDCD4的表达水平增加(P<0.05)。结论 miR-421对前列腺癌DU145细胞的增殖具有促进作用,靶向抑制PDCD4是miR-421发挥这一作用的潜在分子机制。     

MicroRNA-21调控口腔鳞癌细胞顺铂耐药及其作用机制

目的:探讨micro RNA-21(mi RNA-21)在人口腔鳞癌顺铂耐药细胞中的表达及其作用机制。方法 :采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测mi RNA-21在口腔鳞癌细胞株Tca8113及顺铂耐药细胞株Tca8113/DDP的表达;采用体外转染法将mi RNA-21模拟物(mimics)或抑制物(inhibitor)分别转染Tca8113和Tca8113/DDP细胞,采用RT-PCR检测转染前后细胞中mi RNA-21的表达情况;采用CCK8实验检测转染前后细胞对顺铂敏感性的变化;并用Western blot检测转染前后细胞中PTEN的表达变化。采用双荧光素酶报告基因验证mi RNA-21是否作用于PTEN基因的3’-UTR区预测靶位。结果:mi RNA-21在Tca8113/DDP细胞中的表达水平是Tca8113细胞的(8.26±1.37)倍(P<0.01)。Tca8113细胞转染mi RNA-21 mimics后,细胞中mi RNA-21表达水平是转染前的(10.51±2.18)倍(P<0.01),顺铂对Tca8113细胞增殖的抑制率较转染前明显下降(P<0.05),细胞内PTEN表达水平较转染前明显下降(P<0.05)。Tca8113/DDP细胞在转染mi RNA-21 inhibitor后,细胞中mi RNA-21表达水平是转染前的(0.32±0.14)倍(P<0.01),顺铂对Tca8113/DDP细胞增殖的抑制率与转染前比较明显增加(P<0.05),细胞内PTEN表达水平较转染前明显增高(P<0.05)。经双荧光素酶报告基因验证PTEN是mi RNA-21的靶基因。结论:mi RNA-21在口腔鳞癌顺铂耐药细胞Tca8113/DDP中异常高表达,下调其表达可部分逆转细胞耐药性,mi RNA-21可能通过作用于PTEN参与口腔鳞癌细胞顺铂耐药的发生和发展。     

MicroRNA-21的生物学功能及其与肿瘤关系的研究进展

microRNA-21( miR-21)编码基因定位于TMEM49基因编码区域内(17q23.2),通过其自身的启动区域完成转录及poly A尾的聚合,最终变成成熟的miRNA.miR-21与多种疾病相关.miR-21可作为一种肿瘤RNA,其基因簇对多种肿瘤具有促进作用,在肿瘤的发生和发展中有类似癌基因作用,参与肿瘤血...     

PDCD5和Smac在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨食管鳞癌组织中PDCD5和Smac蛋白的表达及其临床意义.方法:应用免疫组化方法检测58例食管鳞癌组织和23例癌旁组织中PDCD5和Smac的表达,分析两者的表达水平与临床病理特征的关系以及两者的相互关系.结果:PDCD5在食管鳞癌组织中的阳性率为41.4%,明显低于癌旁组织78.3%(P<0.05),其表达与TNM分期、淋巴结转移相关性均有统计学意叉(P<0.05).Smac在食管鳞癌组织中的阳性率为32.8%,明显低于癌旁组织73.9%(P<0.05),而与肿瘤的分化程度、TNM分期、淋巴结转移的相关性均有统计学意义(P<0.05).PDCD5和Smac蛋白表达呈正相关关系(r=0.416,P<0.05).结论:PDCD5和Smac蛋白在食管鳞癌中表达下调,提示PDCD5与Smac蛋白的改变可能与食管癌的发生、发展相关.从而可为食管鳞癌的诊断及预后提供参考.     

microRNA-21在胃癌患者血清中的表达及临床意义

目的 分析microRNA-21在胃癌患者血清的表达及临床意义.方法 前瞻性选取首都医科大学附属北京友谊医院消化分中心60例胃癌患者及健康体检中心年龄性别匹配的健康对照人群60例的临床资料.提取胃癌患者和健康对照人群的血清RNA,用荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法分析microRNA-21的表达.血清mic...