水蛭宣痹化纤汤对博莱霉素大鼠特发性肺纤维化Ⅰ Ⅲ型胶原表达的影响

目的:探讨水蛭宣痹化纤汤对博莱霉素大鼠特发性肺纤维化Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法:采用暴露气管注射博莱霉素法建立大鼠特发性肺纤维化模型,采用日本Olympus型光学显微镜进行扫描,并应用JD-801型号图象分析系统对I、Ⅲ型胶原蛋白表达进行定量分析。结果:水蛭宣痹化纤汤可以显著减少大鼠肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结论:水蛭宣痹化纤汤通过抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白细胞外基质的合成,从而起到抑制肺间质纤维化发展的作用。     

RT-PCR检测大鼠低顺应性膀胱组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白和弹性蛋白基因的表达

目的检测大鼠低顺应性膀胱组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白和弹性蛋白基因的表达.方法用RT-PCR的方法检测大鼠梗阻性低顺应性膀胱组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白和弹性蛋白基因表达的改变.结果与正常对照组相比,低顺应性膀胱组织逼尿肌层中Ⅲ型胶原蛋白基因的表达被明显上调,Ⅰ型胶原蛋白基因的表达被上调,而弹性蛋白基因的表达被明显下调.结论在大鼠的梗阻性低顺应性膀胱中,发现膀胱组织肌层内Ⅲ型、Ⅰ型胶原蛋白基因表达被上调,弹性蛋白基因的表达被明显下调,而这两种基因表达的改变与梗阻后低顺应性膀胱的形成存在一定的关系.     

经支气管肺活检结合免疫组织化学方法对肺间质纤维化的诊断价值

目的　评价经支气管肺活检 (Transbronchiallungbiopsy ,TBLB)结合免疫组织化学方法对不同原因肺间质纤维化诊断价值。方法　在X线透视下 ,对 2 0例不同原因导致的肺纤维化患者 ,包括 9例特发性肺纤维化 (IPF)和 11例COPD继发肺纤维化 (PF COPD) ,行纤维支气管镜肺活检取得肺组织 ,切片行HE染色 ,Masson三色染色及免疫组化检测I型、Ⅲ型胶原蛋白的表达 ,比较IPF与PF COPD之间在病理形态学、胶原纤维增生程度、类型及分布特点方面的区别。结果　IPF胶原纤维增生程度明显高于PF COPD(P <0 .0 1) ,IPF以较粗大的Ⅰ型胶原纤维增生为主 ;而PF COPD则以较纤细的Ⅲ型胶原纤维为主。结论　IPF与PF COPD在临床特点、病理表现、纤维增生程度及胶原纤维类型等方面均有很大的区别 ;TBLB结合免疫组化方法对肺间质纤维化具有一定的诊断价值。     

干扰素α-2b局部治疗对增生性瘢痕Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及前胶原蛋白基因原位表达作用的研究

目的探讨干扰素α-2b在活体上对增生性瘢痕Ⅰ、Ⅲ型胶原的作用及作用环节.方法对局部注射干扰素α-2b后3天及7天的6例增生性瘢痕应用免疫组织化学和原位杂交技术,进行了Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白和Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的原位表达的测定. 结果①干扰素α-2b在局部注射后7天,Ⅰ型胶原蛋白量减少(P＜0.05),但Ⅲ型胶原蛋白量无明显减少(P＞0.05);②干扰素α-2b在局部注射后3天,Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达明显抑制 ,至注射后7天,Ⅰ型前胶原mRNA被进一步抑制,而对Ⅲ型前胶原mRNA抑制缓解.③干扰素α-2b对Ⅰ型前胶原mRNA表达的抑制要比Ⅲ型前胶原mRNA强. 结论干扰素α-2b通过抑制前胶原基因的表达从而抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的合成.     

干扰素α-2b局部治疗对增生性瘢痕Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及前胶原蛋白基因原位表达作用的研究

目的探讨干扰素α-2b在活体上对增生性瘢痕Ⅰ、Ⅲ型胶原的作用及作用环节.方法对局部注射干扰素α-2b后3天及7天的6例增生性瘢痕应用免疫组织化学和原位杂交技术, 进行了Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白和Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的原位表达的测定. 结果①干扰素α-2b在局部注射后7天,Ⅰ型胶原蛋白量减少(P＜0.05),但Ⅲ型胶原蛋白量无明显减少(P＞0.05);②干扰素α-2b在局部注射后3天,Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达明显抑制 ,至注射后7天,Ⅰ型前胶原mRNA被进一步抑制,而对Ⅲ型前胶原mRNA抑制缓解.③干扰素α-2b对Ⅰ型前胶原mRNA表达的抑制要比Ⅲ型前胶原mRNA强. 结论干扰素α-2b通过抑制前胶原基因的表达从而抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的合成.     

美洲大蠊提取液对慢性难愈合创面Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白调控研究

目的观察美洲大蠊提取液对大鼠慢性难愈合创面组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白的表达,探讨其促愈机制。方法将48只SPF大鼠随机分为急性创面对照组,慢性创面模型组、贝复济阳性组及美洲大蠊实验组,药物干预5、7、11 d后分批留取创面组织并处死,运用PCR方法测定创面组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白m RNA的表达。结果Ⅰ、Ⅲ型胶原在各组中的表达趋势曲线一致,第5天,对照组表达最高,模型组最低,从第5天开始,美洲大蠊实验组中Ⅰ、Ⅲ型胶原中表达呈上升趋势并高于阳性组,第7天达到高峰后逐渐稳定下降,第11天略低于阳性组(P0.01)。结论美洲大蠊提取液能有效提高大鼠难愈合创面前中期Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白的表达从而促进创面愈合,并在后期能有效降低胶原蛋白的过度表达而减少瘢痕形成。     

苦参碱?γ干扰素对大鼠肺纤维化干预作用

目的:探讨苦参碱、γ干扰素(IFN-γ)对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用及其可能的机制.方法:SD雄性大鼠60只,分为健康对照组、肺纤维化模型组、苦参碱干预组、IFN-γ干预组,各组分别于7 d、14 d、28 d处死5只,行HE染色及Masson 染色半定量判断肺组织肺泡炎及肺纤维化程度.免疫组化测肺组织TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的蛋白水平表达.结果:苦参碱干预组、IFN-γ干预组大鼠肺泡炎、肺纤维化程度均较模型组好转.与模型组相比,苦参碱、IFN-γ都能够抑制肺组织中的TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的表达(P<0.05).结论:苦参碱及IFN-γ对大鼠肺纤维化模型均有一定的疗效,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1和CTGF的表达来减少Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的生成.     

干扰素α-2b局部治疗对增生性瘢痕Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及前胶原蛋白基因原位表达作用的研究

目的　探讨干扰素α 2b在活体上对增生性瘢痕Ⅰ、Ⅲ型胶原的作用及作用环节。方法　对局部注射干扰素α 2b后 3天及 7天的 6例增生性瘢痕应用免疫组织化学和原位杂交技术 ,进行了Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白和Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的原位表达的测定。结果　①干扰素α 2b在局部注射后 7天 ,Ⅰ型胶原蛋白量减少 (P <0 .0 5 ) ,但Ⅲ型胶原蛋白量无明显减少 (P >0 .0 5 ) ;②干扰素α 2b在局部注射后 3天 ,Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达明显抑制 ,至注射后 7天 ,Ⅰ型前胶原mRNA被进一步抑制 ,而对Ⅲ型前胶原mRNA抑制缓解。③干扰素α 2b对Ⅰ型前胶原mRNA表达的抑制要比Ⅲ型前胶原mRNA强。结论　干扰素α 2b通过抑制前胶原基因的表达从而抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的合成     

特发性肺纤维化肺组织胶原分型测定的临床意义

探讨特发性肺纤维化（ＩＰＦ）经支气管肺活检（ＴＢＬＢ）组织胶原分型测定的临床意义。方法对２５例ＩＰＦ患者ＴＢＬＢ标本和１０例正常肺组织应用免疫组化染色法，进行Ⅰ型和Ⅲ型胶原（ＣｏｌⅠ和ＣｏｌⅢ）的半定量测定；并检测１３例的支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）的细胞成分，随访１７例激素疗效，结合病程和病变程度进行综合分析。结果ＩＰＦ肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积量较正常肺组织不同程度增多；病程短（≤３月）、病变程度轻（Ⅰ、Ⅱ级）者，肺组织中ＣｏｌⅢ占优势，病程长（＞２４月）、病变较重（Ⅲ、Ⅳ级）者，则以ＣｏｌⅠ为主；治疗有效组，ＣｏｌⅢ／ＣｏｌⅠ≥１，无效组ＣｏｌⅢ／ＣｏｌⅠ＜１（Ｐ＜０．０１）；ＣｏｌⅢ／ＣｏｌⅠ≥１者，ＢＡＬＦ中性粒细胞百分比明显增高（Ｐ＜０．０５）。结论多部位取材ＴＢＬＢ标本进行胶原分型测定和比例分析，可以较好地辅助判断ＩＰＦ病变程度和活动性。     

大鼠低顺应性膀胱中Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的基因表达

目的 检测低顺应性膀胱组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白基因表达。方法 用原位杂交的方法检测大鼠梗阻性低顺应性膀胱组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达的改变。结果 与正常对照组相比，低顺应性膀胱组肌层内Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白基因表达被上调，且Ⅲ型胶原蛋白基因表达被上调的程度更为显著。结论 在大鼠的梗阻性低顺应性膀胱中，发现膀胱组织肌层内Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白基因表达被上调，而这两种基因表达的上调与梗阻后低顺应性膀胱的形成存在一定的关系。     

肺纤维化过程中不同种类胶原异常沉积及分布规律的实验研究

目的 研究博莱霉素致大鼠肺纤维化过程中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型胶原在肺组织中的异常沉积和分布规律.方法 气管内滴入博莱霉素建立大鼠肺纤维化模型.免疫组织化学染色显示Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型胶原表达,并应用图像分析方法进行相对定量.结果 Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型胶原在肺间质中重叠分布,随着纤维化的进展,其相对含量不断增加.Ⅰ型胶原增加最突出,Ⅲ型胶原也呈现逐渐增加态势,Ⅴ型胶原虽然相对含量较低,但也呈现缓慢增多趋势.分布于肺泡上皮细胞和毛细血管内皮细胞基底膜的Ⅳ型胶原在给药3 d出现明显的断裂、缺失,28 d时在纤维化灶内有少许零星分布.结论 肺纤维化与胶原Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型的过度沉积密切相关,观察Ⅳ型胶原在肺泡壁的分布变化对于发现早期肺损伤具有重要价值.     

肺间质纤维化中去整合素金属蛋白酶17的表达及作用机制

目的 观察去整合素金属蛋白酶17(ADAM17)在肺结节病、肺结核、非小细胞肺癌等肺间质纤维化疾病中差异表达情况,并探讨其作用机制.方法 实时RT-PCR分别检测肺结节病、肺结核、肺癌和正常人的肺组织中ADAM17基因表达,采用Western blot方法检测相互作用因子-Ⅲ型胶原蛋白、整合素6的蛋白表达.结果 肺组织中ADAM17 mRNA、Ⅲ型胶原蛋白、整合素6的蛋白在肺结节病组、肺结核组、非小细胞肺癌中的表达水平均明显高于正常对照组(P＜0.05);肺癌组中以上指标的表达水平与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),与肺结节病组、肺结核组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论 肺纤维化疾病的机制可能与ADAM17导致细胞外基质成员Ⅲ型胶原蛋白、整合素6的高表达有关.     

FGF-21、MIP-2在特发性肺纤维化中的变化及临床意义*

目的 研究成纤维细胞生长因子21（FGF-21）、巨噬细胞炎性蛋白2（MIP-2）在特发性肺纤维化中的变化及其临床意义。方法 选取2013年12月—2018年12月海南省人民医院确诊的特发性肺纤维化患者80例，取患者肺纤维化组织为研究对象，取肺旁正常组织作为对照，Western blotting检测FGF-21和MIP-2蛋白的相对表达量，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测FGF-21 mRNA和MIP-2 mRNA的表达水平。比较两组FGF-21和MIP-2蛋白和mRNA的表达水平及其与临床病理特征的关系。利用条件Logistic回归 分析特发性肺纤维化的相关因素，利用Cox回归分析特发性肺纤维化患者临床预后的相关因素。结果 特发性 肺纤维化组织FGF-21mRNA、MIP-2 mRNA及其蛋白的表达均较正常组织升高（P?<0.05）；FGF-21 mRNA 和MIP-2 mRNA的表达与患者年龄、性别、吸烟、BMI和病程无关（P?>0.05）。条件Logistic回归分析模型结果表明，特发性肺纤维化的发生与FGF-21 mRNA、MIP-2 mRNA呈正相关（P?<0.05）；Cox回归分析结果显示， FGF-21 mRNA、MIP-2 mRNA的高表达是影响特发性肺纤维化患者临床预后的独立危险因素。结论 FGF-21 mRNA、MIP-2 mRNA的高表达是特发性肺纤维化发生的相关因素，并与临床预后相关。     

内质网应激相关蛋白与CXCL12蛋白在特发性肺纤维化中的表达及意义

目的 探讨内质网应激相关蛋白及CXCL12在特发性肺纤维化中的表达及意义.方法 收集荆州市中心医院2004～2014年诊断为特发性肺纤维化且存有活检或手术标本的患者共18例,并收集正常肺组织20例作为对照,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测内质网应激相关蛋白(GRP78、CHOP)及CXCL12蛋白(SDF-1)的表达,通过逆转录PCR(RT-PCR)检测肺组织中GRP78 mRNA及CXCL12 mRNA的表达.结果 与对照相比,肺纤维化患者肺泡上皮中GRP78、CHOP、CXCL12蛋白表达均上调,且GRP78 mRNA及CXCL12 mRNA也表达上调.结论 内质网应激相关蛋白及CXCL12在特发性肺纤维化的发病过程中起重要作用,可能参与了特发性肺纤维化的发生与发展.     

川芎嗪对阿霉素诱导的大鼠心肌重塑中TGF-β1表达的影响

目的:研究川芎嗪对阿霉素(ADM)诱导的大鼠心肌重塑的影响及是否通过改变TGF-β1的表达产生作用。方法:SD大鼠随机分为正常对照组(NC组,n=8;生理盐水2 m L/kg腹腔注射)、模型组(ADM组,n=9;ADM 2mg/kg腹腔注射)、川芎嗪治疗组(Lig组,n=11;ADM 2 mg/kg+磷酸川芎嗪20 mg/kg腹腔注射)3组。测定各组SD大鼠心重指数(CWI)、左室心脏重量指数(LVWI),光镜下观察心肌病理学变化,免疫组化方法检测各组大鼠心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型心肌胶原的表达,Western blot方法检测各组大鼠心肌组织中TGF-β1蛋白的表达。结果:3组大鼠间的心肌纤维化病理改变不同,CWI、LVWI、心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型心肌胶原蛋白、Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值及TGF-β1蛋白的表达差异有统计学意义(F=5.971、5.556、51.740、57.281、28.934和61.263,P<0.05)。与ADM组相比,Lig组大鼠的心肌纤维化病理改变明显减轻,CWI、LVWI、心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型心肌胶原蛋白、Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值及TGF-β1蛋白表达明显下降(P<0.05);Lig组大鼠的心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型心肌胶原蛋白、Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值及TGF-β1蛋白的表达仍高于NC组(P<0.05)。结论:川芎嗪能改善阿霉素诱导的大鼠心肌重塑,其机制可能与影响TGF-β1的表达有关。     

苦杏仁甙对博莱霉素大鼠肺纤维化Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响

目的探讨苦杏仁甙对博莱霉素大鼠肺纤维化Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法采用气管暴露法建立大鼠博莱霉素肺纤维化模型,制作石蜡切片,HE染色光镜观察,天狼猩红染色结合偏振光显微镜观察肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,图像分析系统对胶原定量分析。结果建模后第7天、第14天和第28天时,博莱霉素组大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原面积百分比均高于对照组（P〈0．01）;与博莱霉素组大鼠比较,第28天时苦杏仁甙组大鼠肺组织Ⅰ型胶原面积百分比降低（P〈O．01）;3个时间点苦杏仁甙组大鼠Ⅲ型胶原面积百分比均低于博莱霉素组（P〈0．01）。结论苦杏仁甙通过抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原的形成,可有效地减缓博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化形成,提示该药有可能用于人类肺纤维化的防治。     

高糖状态下心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达变化的观察

目的探讨高糖对大鼠心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法采用胰酶消化法和差速贴壁分离法获取心肌成纤维细胞,采用正常糖(5.5mmol/L,对照组)和高糖(25mmol/L,高糖组)干预。用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)观察Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白水平的变化。结果与对照组比较,高糖刺激12h可使心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达增加,Ⅰ、Ⅲ前胶原mRNA表达在12h升高,在24h达高峰,Ⅰ型前胶原mRNA升高幅度高于Ⅲ型前胶原mRNA;高糖刺激48h可使Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达增加,Ⅰ型胶原蛋白升高幅度高于Ⅲ型胶原。结论高糖可促进大鼠心肌成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原。     

重症病毒性肝炎肝组织胶原蛋白和血小板衍生生长因子-1的表达

目的 了解重症病毒性肝炎患者肝组织Ⅰ型前胶原mRNA、血小板衍生生长因子-1(PDGF-1)mRNA及Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白的表达情况，探讨重症病毒性肝炎纤维化发生的分子机制。方法 将重症病毒性肝炎肝组织标本20例，非肝病患者肝组织6例，用原位杂交法检测肝组织Ⅰ型前胶原和PDGF-1 mRNA的表达，用免疫组化法观察肝组织Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白的沉积、分布和含量，用天狼红染色观察肝组织总的胶原含量。结果 与正常肝组织相比，重症病毒性肝炎患者的肝组织Ⅰ型前胶原和PDGF-1 mRNA的表达显著增加，Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白大量沉积。PDGF-1 mRNA的表达与Ⅰ型前胶原mRNA的表达呈显著正相关，和总的胶原含量，Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白的表达也呈显著正相关，Ⅰ型前胶原mRNA的表达和Ⅰ型胶原蛋白的表达呈显著正相关。结论 PDGF-1 mRNA与Ⅰ型前胶原mRNA表达的增加是导致肝组织胶原蛋白合成增加，重症病毒性肝炎发展成肝纤维化乃至肝硬化的原因之一。     

风湿性心脏病合并慢性心房纤颤患者心房Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达

目的:探讨风湿性心脏病合并慢性心房纤颤患者心房胶原的组织学分布和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的变化.方法:应用Masson和sP免疫组化染色方法,结合数字图像分析方法,观测4例正常人和6例风湿性心脏病合并慢性心房纤颤患者心房胶原的组织学分布和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达.结果:Masson染色显示,风湿性心脏病合并慢性心房纤颤患者心房的部分区域心肌细胞间隙增大,胶原松散、断裂或大量聚集.正常心房Ⅰ、Ⅲ型胶原广泛分布,均可分为粗、细不等的条状纤维.风湿性心脏病合并慢性心房纤颤患者心房Ⅰ、Ⅲ型胶原表达大多区域正常,部分区域发生极度重排.数字图像分析显示:正常心房Ⅰ型胶原禽量较Ⅲ型胶原多,风湿性心脏病合并慢性心房纤颤组Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量明显增多.结论:风湿性心脏病合并慢性心房纤颤患者心肌的问质松散.胶原增多.Ⅰ和Ⅲ型胶原纤维形态上出现重构,含量增加.这可能是风湿性心脏病合并慢性心房纤颤时心功能异常的形态学改变之一.     

特发性肺纤维化患者Ⅲ型前胶原和层粘连蛋白水平变化及其临床意义

目的:分析特发性肺纤维化患者血清Ⅲ型前胶原和层粘连蛋白水平变化和病情严重程度的相关性。方法:选择32例特发性肺纤维化患者,采用CRP评分,测定患者Ⅲ型前胶原和层粘连蛋白水平,同时选择同期进行体检健康患者32例作为对照。结果:特发性肺纤维化患者血清Ⅲ型前胶原和层粘连蛋白水平明显高于对照组(P<0.05),CRP评分和血清Ⅲ型前胶原和层粘连蛋白水平呈正相关(r=0.920,r=0.924,P<0.05)。结论:特发性肺纤维化患者CRP评分显著升高,Ⅲ型前胶原和层粘连蛋白水平也呈明显增高趋势,可以作为临床评价肺间质病变活动性的无创性重要指标。