微波技术在快速病理诊断中的应用

我院利用微波开展快速石蜡制作 ,整个固定 ,脱水 ,浸蜡过程在 9.5～ 13.5分钟内完成 ,制作质量和速度完全能满足手术中快速病理诊断的需要。1　材料和方法1.1　设备 :国产 L G家用微波炉一台 ,型号 MS—2 5 2 9ST,功率 80 0 W,分 5挡 ,实验采用中高档 (输出功率 80 % )。1.2　标本 :实验标本有消化道、乳腺、子宫、甲状腺、淋巴结等组织。1.3　试剂 :固定剂 :15 %福尔马林 ;脱水剂 :丙酮 ;浸蜡剂 :硬脂酸石蜡 (融态 ) ;浸蜡剂 :石蜡 (融态 )。1.4　方法 :把组织切成 1cm× 1cm,厚 0 .2 cm的组织块 ,分为固定组、脱水组和浸蜡组分别进行…     

石蜡切片的标本固定与石蜡精练对制片的影响

含有组织块的蜡块 (简称蜡块 )是ＨＥ石蜡切片和用作免疫组化标记、原位分子杂交的原材料。蜡块的质量不仅影响日常病理检验诊断工作 ,而且关系到用于科研的第一手材料是否可靠。本文通过石蜡切片制片过程中标本加强固定以及将制作蜡块的石蜡进行精练 ,从而对提高蜡块的质量进行探讨。1　材料和方法1.1　材料　收集 1999～ 2 0 0 0年我院外检组织 ,所有标本均用我院配制的固定液固定。固定液配制方法 :福尔马林原液(4 0 %甲醛 ) 12 0ｍｌ,蒸馏水 880ｍｌ,磷酸二氢钠 (ＮａＨ2 ＰＯ4 ·Ｈ2 Ｏ) 4 ｇ ,磷酸氢二钠 (Ｎａ2 ＨＰＯ4 ) 13ｇ ,使 …     

GS组织标本制备及切片染色技术的应用体会

目的探讨GS组织标本制备及切片染色技术替代传统二甲苯透明、脱蜡制片技术的效果.方法应用GS组织标本制备及切片染色技术替代传统技术制作组织蜡块及切片染片技术.结果用此方法制作的组织蜡块,切片形成连续蜡带,制作常规HE切片,细胞核、质染色结构对比清晰结论GS组织标本制备及切片染色技术能够替代传统制片技术,并符合环保要求.     

石蜡切片用于TUNEL法标记细胞凋亡的体会

TUNEL法检测细胞凋亡是目前国内外学者所广泛采用的一种先进方法 [1,2 ] 。我们在应用这一方法过程中有一些体会 ,现报告如下。1　材料与方法1 .1　试剂　 TUNEL药盒 :由北京中山生物技术公司提供。1 .2　标本　生后 7天小鼠肾脏石蜡标本。1 .3　方法　标本经石蜡切片后脱蜡 ,经各级酒精逐渐入双蒸水 ,PBS洗 2次 ,后续过程均在湿盒内进行。加蛋白酶 K,室温孵育 1 5～ 3 0分钟 ,入 PBS洗 2次 ,每次 5分钟 ;入阻断液 (3 %过氧化氢 )阻断内源性过氧化物酶 3 0分钟 ,经 PBS洗 2次 ,每次 5分钟 ;入通透液常温下孵育 1 0分钟后入 TUNEL …     

幽门螺杆菌染色改良

我院病理科在幽门螺杆菌 (ＨＰ)检验实践中 ,借鉴文献〔1～ 2〕配制了硼砂美兰 (ＢＲＭＢ)染液 ,并与传统的硝酸银 (Ｗ -Ｓ)染液进行染色比较。现报道如下。一、材料和方法1.材料 :选自我院各种胃炎的胃粘膜蜡块标本 30 0个。2 .方法 :将各个蜡块标本制成厚为 4μｍ的切片 2张 ,经二甲苯、酒精脱蜡后 ,再分别进行ＢＲＭＢ和Ｗ -Ｓ染色。ＢＲＭＢ染色法 :染色液的配制 ,取美兰 1ｇ加蒸馏水 10 0ｍｌ和硼砂 0 .8ｇ ,搅拌均匀直至溶解。将脱蜡洁净的切片浸入染液 30秒 ,取出 ,流水快速冲洗约 1分钟 ,切片风干、树胶封片。Ｗ -Ｓ染色法先配制酸…     

血浆-凝血酶法制备液基细胞学剩余标本细胞蜡块在恶性肿瘤病理诊断中的应用

目的 探讨血浆-凝血酶法制备液基细胞学剩余标本细胞蜡块的优缺点,及其在恶性肿瘤患者标本量少等极端情况下制备细胞蜡块的可行性。方法 收集液基细胞学制片后剩余标本87例,离心后采用血浆-凝血酶法制备细胞蜡块。细胞蜡块诊断为阳性或可疑阳性的病例进一步行免疫细胞化学染色以明确诊断。以活检病理结果为金标准,评价血浆-凝血酶法制备液基细胞学剩余标本细胞蜡块诊断结果的准确性。结果 87例标本中成功制备细胞蜡块83例,其中有活检病理结果75例。采用配对四格表χ²检验对细胞蜡块与活检诊断结果对比分析后显示差异无统计学意义(P>0.05)。细胞蜡块诊断正确率为92.0%(69/75)。结论 在标本量少的极端情况下,采用血浆-凝血酶法制备细胞蜡块,可以充分利用肿瘤患者液基细胞学剩余标本。     

肾小球诊断样品由光镜的冰冻切片补做电镜制样的方法

现代肾脏病学已普遍将光镜、电镜诊断作为肾小球疾病诊断的常规 ,尤其电镜检查配合临床以明确诊断十分重要。然而 ,有时因为各种原因在电镜制备的肾组织穿刺 (肾穿 )标本中找不到肾小球 ,但临床又非常需要电镜的观察结果。目前普遍采用光镜常规石蜡包埋的肾小球组织经脱蜡后改做电镜制样进行补救 ,但标本因固定和脱蜡等因素 ,效果并不太理想。我们通过摸索和比较几种补救措施 ,现介绍一种用冰冻切片的肾小球经光镜检测后再进行电镜制样的方法。1　材料和方法标本取自临床肾穿活体组织。先取一块干净纱布 ,用0 .9%生理盐水浸湿 ,穿刺的肾脏样…     

石蜡切片用于免疫组化SPTM实验的体会

免疫组化方法已越来越广泛的应用于科研和临床工作。我们在应用这一方法的过程中有一些体会 ,现报告如下。1　材料与方法1 1　试剂　ＳＰＴＭ 药盒北京中山生物技术公司提供。1 2　标本　胃癌患者胃部石蜡切片。1 3　方法　标本经石蜡切片脱蜡 ,经各级酒精后水洗 ,3%过氧化氢孵育 5～ 1 0分钟 ,以消除内源性过氧化物酶的活性。蒸馏水冲洗 ,ＰＢＳ浸泡 5分钟 ,加胰酶 37℃孵育 1 0～ 40分钟。 5%～ 1 0 %正常山羊血清室温 1 0分钟 ,倾去血清 ,滴加适当比例稀释的一抗 ,37℃孵育 60分钟或 4℃过夜。ＰＢＳ洗 3次 ,每次 5分钟。滴加生物素标…     

骨组织石蜡包埋后脱钙不理想快速补充脱钙法

在工作中常会碰到有的骨组织脱钙至包埋后 ,在修蜡块时 ,发现有的骨组织部分脱钙不理想 ,无法将蜡块的组织面修平 ,而且会损坏切片刀。因此必须再次进行脱钙。1　材料与方法1 1　材料　脱钙液氯化钠 10ｇ溶于 10 0ｍｌ蒸馏水中 ,再加甲酸 ( 95 % ) 10ｍｌ和盐酸 ( 3 7% ) 10ｍｌ混合均匀。1 2　方法　我们把脱钙不理想或组织中有钙化的块组织暴露出来 ,将组织面朝下浸放在脱钙液中 ,脱钙时间一般 3小时 ,针刺无阻挡时说明脱钙已彻底。取出水洗后即可切出完整的切片 ,对染色没有影响。染色时 ,在脱蜡后入饱和碳酸锂水溶液 2分钟 ,再染苏木素 …     

快速石蜡切片与抗酸染色在细胞蜡块结核杆菌检测中应用

目的 探究快速石蜡切片技术结合传统抗酸染色方法在细胞蜡块结核分枝杆菌检测中的应用价值。方法 分析2019年1月至2021年10月湖北省中西医结合医院病理检查确诊或临床怀疑结核性炎症病例的细胞蜡块标本103例,细胞蜡块均是通过超声快速组织处理系统制作,结合传统抗酸染色方法,通过改进制片及染色的过程,分析快速石蜡切片与抗酸染色在细胞蜡块结核杆菌检测中的应用价值。结果103例细胞蜡块标本中,结核分枝杆菌检测阳性41例,阳性率为39.8%(41/103),其中20例为结核杆菌簇状阳性。胸腔积液、腹腔积液标本88例,结核杆菌检测阳性34例。肺泡灌洗液标本10例,阳性3例。髋关节和体表包块细针穿刺抽吸脓液标本5例,阳性4例。多数病例通过重复送检或者同时送检活体组织,检测结果均保持一致。结论 快速石蜡切片技术结合传统抗酸染色在细胞蜡块中检测结核分枝杆菌具有阳性率高,耗时短,操作简便,成本低廉等优势,非常具有临床诊断价值。     

乳房外Paget病、 Bowen病皮损中细胞凋亡的观察

近年来发现细胞凋亡与肿瘤的发生、发展有密切关系。我科采用原位特异性ＤＮＡ片断标记法 (ＴＵＮＥＬ) ,观察了乳房外Ｐａｇｅｔ病及Ｂｏｗｅｎ病皮损中的细胞凋亡情况 ,现将结果报告如下。方法与结果组织标本　收集我科门诊 1996～ 1997年组织蜡块 10例 ,其中乳房外Ｐａｇｅｔ病 5例 (阴囊 3例 ,肛周 2例 ) ,Ｂｏｗｅｎ病 5例 (阴囊 2例 ,女阴 3例 ) ,同时取 5例正常人右前臂内侧皮肤组织进行对照。组织蜡块作 4～ 5 μｍ连续切片 ,经ＨＥ染色 ,组织病理确诊。方法　切片常规脱蜡、ＰＢＳ洗 ,0 .2ｍｏｌ/ＬＨＣｌ消化 10分钟 ,ＰＢＳ洗 ,1…     

快速制作常规石蜡切片

常规石蜡切片是临床病理诊断的重要手段。如何在较短的时间内制作出薄而清晰的常规石蜡切片 ,对病理医师作出正确的病理诊断 ,提高诊疗质量具有重要意义。笔者在临床病理实践中 ,吸收前辈的技术经验并结合工作实际 ,将常规的 3ｄ时间出片改为 1ｄ ,并在常规固定、浸蜡、染色、透明中对时间及方法进行适当的调整和改造 ,制作的切片薄、平整 ,染色清晰。1　方法(1 )取材 :每日上午 8点取材 ,组织块厚 0 .1～0 .3 μｍ为宜 ,大块组织取材大小不超过盖玻片 (2 .5ｃｍ) ,小块组织能肉眼观察到即可 ;(2 )固定 :将取好的组织块放入固定液 (2 0 %甲…     

微波修复温度、时间对乳腺癌雌激素受体表达的影响

微波抗原修复已成为免疫组化染色中常用的一种抗原修复方法,我们用不同微波修复温度、时间观察对乳腺癌雌激素受体(ER)阳性检出率的影响,报告如下. 　　1.材料与方法 　　1.1 标本我院手术切除标本,病理诊断为乳腺癌的组织蜡块32例.每例选有代表性蜡块一个,4μm连续切片. 　　1.2 试剂 ER单克隆抗体,S-P试剂盒,柠檬酸缓冲液,DAB显色剂.试剂均购自福州迈新生物技术开发公司. 　　1.3 方法每例取两张切片分A、B两组.两组均常规脱蜡至水化,两组分别置于柠檬酸缓冲液中(PH值:6.0).A组:微波修复温度95℃,持续时间15分钟.B组:微波修复温度100℃,持续时间10分钟.A、B两组均室温自然冷却后,按常规S-P法免疫组化染色,DAB显色,苏木素复染,中性树胶封片. 　　1.4 统计学处理卡方检验.……     

牛皮癣食疗药膳方

正1.芹菜煮豆腐配方:芹菜、豆腐各250克,盐、味精各3克,香油3毫升。制作:芹菜洗净,切成3厘米长的段;豆腐洗净,切成3厘米见方的块。豆腐、芹菜同放锅内,加水适量,武火烧沸,再用文火煮25分钟,加入盐、味精、香油即成。食法:每日1次,每次吃豆腐、芹菜100克。功效:清热,祛风,降压,止     

乙型肝炎病毒在非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织中的表达及意义

目的 探讨血清HBsAg和HBcAb阳性的非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者骨髓或淋巴结乙型肝炎病毒(HBV)表达水平,乙型肝炎病毒是否侵犯其骨髓及淋巴组织。方法 将血清HBsAg和HBcAb阳性的骨髓或淋巴结标本分4组:133例NHL新鲜骨髓标本;233例NHL相应新鲜淋巴结活检标本;315例NHL淋巴结蜡块标本;412例缺铁性贫血患者新鲜骨髓标本作为对照组。应用免疫组化法检测骨髓和淋巴标本的乙型肝炎病毒表达水平。结果 乙型肝炎病毒在NHL的新鲜骨髓、NHL的新鲜淋巴结、NHL的淋巴结蜡块及对照组缺铁性贫血患者新鲜骨髓标本中的阳性表达率,分别为69.7%(23/33)、12.1%(4/33)、0%(0/15)和0%(0/12)。乙型肝炎病毒在NHL新鲜骨髓组织表达水平高于NHL的新鲜淋巴结、NHL的淋巴结蜡块及对照组缺铁性贫血患者新鲜骨髓标本,差异有统计学意义(χ2=22.627,P<0.000;χ2=20.073,P<0.000;χ2=17.107,P<0.000)。乙型肝炎病毒在NHL的新鲜淋巴结与淋巴结蜡块组织表达水平相比较,差异无统计学意义(χ2=0.714,P=0.398>0.05)。结论在血清HBsAg和HBcAb阳性的非霍奇金淋巴瘤患者乙型肝炎病毒在骨髓组织表达水平高于淋巴结组织,乙型肝炎病毒主要侵犯骨髓组织,淋巴组织侵犯较少。     

透射电镜在病理疑难病例诊断中的意义(附4例报告)

<正> 利用透射电子显微镜(TEM)对肿瘤的诊断在国外只是十余年的事,国内仅少数单位开展。本文仅就作者在病理诊断工作中所遇4例疑难病例说明电镜在临床病理诊断中的意义。临床资料本组4例均为活检及手术切除新鲜标本,取材后立即固定于2.5%戊二醛中,置4℃冰箱2小时,再用1%锇酸后固定,PBS洗三次,经丙酮逐级脱水,用环氧树酯812包埋,半薄切片厚0.8～1μ,用苯胺蓝染色,光镜下定位,LKB-NOVA超薄切片机切片,厚约500(?),用醋酸铀,枸椽酸铅染色后置H-500透射电镜观     

浆膜腔积液的细胞块及免疫组化应用价值

目的:探讨将浆膜腔积液制作细胞块并进行免疫组化染色进一步诊断的方法。方法:对84例浆膜腔积液标本分别制作细胞涂片、细胞块,并对细胞块切片进行免疫组化染色。结果:细胞块行免疫组化染色效果明显优于传统离心涂片。结论:浆膜腔积液细胞块的应用不仅能提高细胞学诊断的阳性率及准确率,而且细胞蜡块能长期保存并反复切片,进行后续各种检查,包括免疫组化、特殊染色及FISH及PCR等多种分子病理检查,拓展了体液细胞学的应用价值     

细胞蜡块在恶性浆膜腔积液中的应用

目的:探讨细胞蜡块及免疫组化方法在浆膜腔积液诊断中的作用。方法:收集334例浆膜腔积液标本,制作液基细胞学及细胞蜡块,HE及免疫组化染色。结果:CR,Vim,CK5/6及D2-40在间皮瘤中有重要价值,CK7,CK20,Villin,TTF-1,NapsinA,CDX-2,MUC-2,CA125,ER,PR,GCDFP-15及mammaglobin在判断肿瘤来源有特异性作用。结论:细胞蜡块在恶性浆膜腔积液诊断中有重要价值,值得推广。     

硝酸银耳蜗光镜制片改做透射电镜样品的方法

耳蜗标本的电镜制备难度较大 ,很难做出理想的标本。有关显示和制作耳蜗电镜标本方面的文章虽有很多 ,但大部分资料是描述如何修正耳蜗螺旋器方向的定向、定位。本文介绍了对同一份耳蜗标本 ,光镜观察与电镜观察相结合的样品制备方法。1　材料和方法选用耳廓反射正常的健康豚鼠 ,活杀断头 ,取颞骨打开听泡 ,暴露骨性耳蜗 ,在蜗尖钻孔的同时开放蜗窗和前庭窗 ,用 0 .5 %的硝酸银染液缓慢灌入蜗尖小孔 ,反复 1 0次左右 ,而后将标本浸入染液中 ,置 4℃冰箱 1 5～ 2 0min ,再用 2 .5 %的戊二醛固定液灌注标本 ,并将标本浸入固定液中 ,然后用微波…     

浅谈病理教学切片制作技术

目的以同一慢性肾盂肾炎组织进行病理教学切片取材、切片制作和常规医检取材,并进行切片制作比较,以探讨病理教学切片取材、切片制作技术的可行性和可靠性。方法昆明医学院第二附属医院病理科提供医检肾脏组织,分2组取材进行切片制作：（1）教学组：病理教学切片要求每个蜡块连续切片150-200片;取材范围为2cm×1cm,组织块厚0．4cm;切片制作全部手工操作,要求组织块固定、冲洗、脱水、透明、浸蜡、切片均与常规医检制片不同。（2）医检组：主要用于病理诊断,取材范围为1cm×1cm,组织块厚0．2cm;切片制作快而好,可用全自动脱水机固定、脱水、浸蜡;切片数量HE染色3～5片,特殊染色和免疫组化10～20片。结果病理教学切片与常规医检切片效果均符合中华医学会切片制作要求。结论病理教学切片制作技术可行、可靠。