白藜芦醇对HERG钾通道电生理功能的影响

目的探讨白藜芦醇对稳定转染HERG基因的HEK293细胞上HERG钾通道的影响,进一步了解其抗心律失常的作用机制。方法传代得到单个HERG-HEK细胞,应用全细胞膜片钳技术记录HERG-HEK细胞上的HERG钾电流和动力学曲线(激活、失活、复活和去活化)。结果白藜芦醇(1、10、100μmol·L-1)浓度依赖性的抑制HERG步阶电流(IHERG)及其尾电流(IHERGtail),0mV电压下1μmol·L-1白藜芦醇抑制IHERG25.3%±9.4%,IHERGtail23.6%±11%;10μmol·L-1白藜芦醇抑制IHERG28%±8.4%,IHERGtail28.8%±9.1%;100μmol.L-1白藜芦醇抑制IHERG43.7%±1.5%,IHERGtail47.9%±11%(P<0.05,n=12)。100μmol·L-1白藜芦醇作用后失活时间常数减小,失活速率变快;去活化时间常数明显减小(P<0.05,n=12)。激活、瞬时失活和复活动力学没有明显变化。结论白藜芦醇通过影响通道的开放状态和失活状态抑制HERG钾电流,从而使得心肌细胞复极时间延长,改善快速性心律失常。     

卡维地洛对HERG钾通道电生理功能及蛋白表达的影响

目的探讨卡维地洛对稳定转染HERG基因的HEK(human embryonic kidney)293细胞上的HERG钾通道的影响。方法应用全细胞膜片钳技术记录在HEK293细胞上稳定表达的HERG钾通道的电流和动力学曲线(激活、失活、复活和去激活),研究不同浓度卡维地洛对HERG电流及动力学的影响;用Western blot技术定量的观察不同浓度卡维地洛对定位于HERG-HEK细胞膜上的HERG钾通道蛋白表达的影响。结果卡维地洛(10、100nmol.L-1,1、10μmol.L-1)浓度依赖性的抑制HERG步阶电流(Istep)及其尾电流(Itail)。由Hill方程得出IC50为539.6nmol.L-1,Hillslope为-0.64。1μmol.L-1卡维地洛作用后瞬时失活、去激活时间常数明显降低(P<0.05,n=10),而激活、失活、复活动力学无明显改变;Western blot检测结果显示卡维地洛组与无加药对照组HERG蛋白的表达无差别。结论卡维地洛通过影响通道的开放状态抑制HERG钾电流,加速瞬时失活和去激活动力学,对HERG蛋白的表达及成熟无影响。     

不同提取方法对苦豆子中氧化槐果碱与槐果碱含量的影响

目的研究不同提取方法对氧化槐果碱与槐果碱含量变化的影响。方法采用 HPLC法测定不同产地、不同提取条件的苦豆子样品中氧化槐果碱和槐果碱的含量。结果饱和氢氧化钠溶液能使氧化槐果碱转化,对槐果碱无影响。结论为苦豆子及制剂的质量控制以及氧化槐果碱的综合利用提供依据。     

槐果碱和氧化槐果碱抗肿瘤药理作用的研究进展

经体外实验发现,槐果碱能浓度相关地抑制肝癌细胞(HepG2、9711、SMMC-7721、HCC-LM3、MHCC-97H)、大肠癌(SW480、LS174t、SW620、HCT-116)以及食管癌EC109、胃癌BGC823、白血病(K562、HL-60)、淋巴瘤U937、肺癌A549、神经胶质瘤C6、卵巢癌(SKOV3、PM-2)等细胞的增殖。氧化槐果碱可抑制HepG2、SW480、LS174t、BGC823、C6、乳腺癌MCF-7等细胞的增殖。整体实验结果发现,槐果碱能抑制HCC-LM3、肉瘤W256、S37、S180、EAC、Lio 1、白血病615(L615)、宫颈癌14(U14)等细胞移植瘤在小鼠或大鼠体内的生长。临床上槐果碱还可用于治疗恶性葡萄胎。文中综述槐果碱和氧化槐果碱抗肿瘤细胞作用的文献,并对其研究进展做了分析。     

槐果碱和氧化槐果碱的药动学研究进展

槐果碱和氧化槐果碱属苦参碱类生物碱。苦参碱类生物碱具有广泛的生物活性,如保护心、肝、肺、肾、脑、血管作用,对心脏有正性肌力、负性频率、抗心律失常作用,还有升高白细胞、平喘、抗溃疡、抗肝纤维化以及镇静、催眠、镇痛等中枢神经药理作用,也具有抗肿瘤、免疫调节、抗菌、抗病毒、抗炎等药理作用。文中综述槐果碱和氧化槐果碱的药动学参数及其体内过程文献,并对其药动学的研究进展做了分析,为合理用药提供参考。     

氟康唑对HERG钾通道电生理功能的影响

目的：观察咪唑类抗真菌药氟康唑（fluconazole）对HERG钾通道电生理功能的影响。方法：采用磷酸钙瞬时转染的方法,将质粒cgi—GFP,HERG转染到人胚肾细胞（HEK一293）中进行表达,随后应用全细胞膜片钳的方法,观察不同浓度的氟康唑对HERG电流的影响。结果：氟康唑浓度依赖性的抑制HERG电流（Istep）和尾电流（Itail）。当浓度为0．01、0．1、1、3、10、30和100μM时,其抑制率分别为105&#177;1．69％（P〉0．05）;92．39&#177;1．00％：80．46&#177;2．39％;69．67&#177;53．26％;46．84&#177;2．62％;40．24&#177;2．06％;34．06&#177;1．21％（P〈0．05）,其ICEn值为3．41&#177;1.93μM。但氟康唑对HERG钾通道的激活曲线和失活曲线均无影响。     

旋光法测定槐果碱注射液的含量

目的采用旋光法测定槐果碱注射液的含量。方法将样品稀释10倍,于20℃直接测定旋光度。结果槐果碱的线性范围为4～40mg/mL(r=0.999 9),平均回收率为100.45%,RSD=0.96%(n=5)。结论方法快速、方便,适用于医院制剂的常规分析。     

苦豆子提取过程中氧化苦参碱与苦参碱、氧化槐果碱与槐果碱的相互转化

目的 研究苦豆子药用植物提取过程中氧化苦参碱与苦参碱、氧化槐果碱与槐果碱的相互转化。方法 采用不同提取溶媒(水及55%乙醇)、不同pH及不同提取时间3个因素,HPLC测定苦豆籽、苦豆草植物中氧化苦参碱与苦参碱,氧化槐果碱与槐果碱的含量。结果 随着提取时间的增加,氧化型生物碱转化为还原型生物碱的量随之增大;提取溶剂对苦豆子中生物碱转化的影响无明显差异;随着提取时间的增加,氧化苦参碱与苦参碱总量呈缓慢下降的趋势,氧化槐果碱与槐果碱总量也呈缓慢下降的趋势。结论 氧化型生物碱与还原型生物碱转化趋势可为苦豆子生物碱质量控制提供依据,也可为工业化提取苦豆子生产工艺提供依据。     

苦刺中槐果碱分离方法的比较

苦刺中槐果碱分离方法的比较郦敏，刘晓云，李耀，李书（陕西省中医药研究院西安７１０００３）槐果碱（ｓｏｐｈｏｃａｒｐｉｎｅ）具有较好的平喘等治疗恶性葡萄胎作用，且毒副作用很小［１，２］，槐果碱在苦参中含量低微，在苦豆子（Ｓｏｐｈｒａａｌｏｐｅｃｕｒｏｉ...     

抗心律失常药物作用的靶点——HERG K+通道

快速延迟整流钾电流(rapidly activating component of delayed rectifier potassium current，I_Kr)在心肌动作电位复极化过程中发挥重要作用。HERG基因编码心脏快速延迟整流钾通道的α亚基，HERG基因突变导致遗传性长QT间期综合征(long QT syndrome，LQTS)，另外I_Kr/HERG通道是绝大多数能引起心脏QT间期延长药物的作用靶标，其他一些化学结构不同的药物也可阻断该通道，引起QT间期延长，甚至发展成获得性心律失常。本文从门控机制及功能、HERG通道相关的心律失常、药物与通道相互作用机制、优化通道靶点的策略等四个方面综述I_Kr/HERG通道在抗心律失常方面的最新研究进展。     

槐果碱对哇巴因诱发豚鼠室性心律失常的影响

目的观察槐果碱的抗室性心律失常作用。方法将哇巴因诱发的室性心律失常豚鼠,分为对照组与不同剂量槐果碱组(5、2.5和1.25 mg·kg~(-1))。通过心电图仪连续观察记录室性早搏(室早)、室性心动过速(室速)、室扑、室颤及心脏停搏出现时间,计算哇巴因的累积量。结果槐果碱各组与对照组相比,仅5 mg·kg~(-1)组能增加出现室早、室速、室扑、室颤及心脏停搏的哇巴因累积量(P<0.01)。结论槐果碱对哇巴因诱发的豚鼠室性心律失常有一定的抑制作用,以5 mg·kg~(-1)的剂量为佳。     

羟苯氨酮激活家兔血管平滑肌细胞钙敏感钾通道

目的研究羟苯氨酮(oxyphenamone,Oxy)扩张血管作用机理。方法用全细胞膜片钳技术,监测家兔肠系膜阻力血管平滑肌细胞钙敏感钾通道电流变化以及Oxy对其的影响。结果0.1 μmol·L^-1 Oxy明显增加钙敏感钾通道电流,冲洗后恢复至给药前水平;0.01～10 μmol·L^-1 Oxy明显增加钙敏感钾通道电流,且呈现浓度依赖性。结论 Oxy呈浓度依赖性和可逆性的增大血管平滑肌细胞钙敏感钾通道电流。     

病理状态HERG/I_(Kr)通道角色及中药干预的研究

HERG/IKr通道在心脏动作电位复极化过程中发挥重要作用。在许多病理条件下例如心肌肥厚、心肌梗死和充血性心力衰竭HERG/IKr电流大小和通道动力学特性常发生改变。该文就疾病状态下HERG/IKr通道的改变及中药干预作用作一综述。     

吡喹酮对日本血吸虫雄虫的Ca2+,Mg2+,K+与Na+的含量及45Ca2+在虫体内分布的影响

日本血吸虫雄虫在4℃或37℃的HBS及无⁴⁵Ca²⁺的HBS中经吡喹酮1或30μg/ml作用0.5～2h后,未见虫的Ca²⁺,Mg²⁺含量有明显变化,但除4℃的HBS组外,余2组虫的K⁺含量明显减少,而虫的Na⁺含量的增加则不明显。在含30 mM Mg²⁺的HBS中,雄虫经吡喹酮作用1h后,虫的Mg²⁺含量明显增加。在37℃的HBS中,血吸虫雄虫经吡喹酮1μg/ml作用5～60min后,虫的皮层胞质中的⁴⁵²⁺含量的百分比较各相应对照组的明显减少,而虫体肌肉的则相反。在4℃的HBS或无⁴⁵Ca²⁺的HBS中,吡喹酮对⁴⁵²⁺在虫体内的分布无明显影响。     

Kv通道亚型在15-HETE收缩肺动脉过程中的作用

目的从组织功能及细胞分子水平研究电压门控型钾通道(Kv通道)亚型在15-羟化二十碳四烯酸(15-HETE)致大鼠肺动脉收缩过程中的作用。方法采用组织浴槽血管环法，使用Kv通道阻断剂，确定受15-HETE调控大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)膜上Kv亚型；使用RT-PCR和Western blotting技术观察受15-HETE调控PASMCs 膜上Kv亚型。结果阻断Kv1.1，Kv1.2，Kv1.3和Kv1.6通道并不影响15-HETE诱导肺动脉血管收缩；15-HETE不影响PASMCs膜上Kv1.1和Kv1.2通道蛋白质表达；15-HETE下调PASMCs膜上Kv1.5和Kv2.1通道mRNA和蛋白质表达。结论缺氧可能是通过15-HETE这一介导因子抑制Kv1.5和Kv2.1通道，减少PASMCs膜上功能性Kv1.5和Kv2.1通道数量，导致PASMCs收缩。