黄芩甙诱导C6胶质瘤细胞凋亡的实验研究

[目的]研究黄芩甙对C6胶质瘤细胞致凋亡作用及其方式。[方法]用不同浓度的黄芩甙溶液处理C6胶质瘤细胞，MTT法观察增殖抑制，透射电镜观察用药后细胞形态的变化，用琼脂糖凝胶电泳观察用药后细胞DNA断裂情况，用流式细胞术定量观察C6细胞凋亡和细胞周期情况。[结果]经1．0mg／ml、2．0mg／ml、4．0mg/ml、8．0mg／ml黄芩甙溶液处理12h的C6胶质瘤细胞增殖能力降低；1．0mg／ml、2．0mg／ml、4．0mg/ml、8．0mg／ml黄芩甙溶液均可以使C6细胞显示明显凋亡征象、DNA断裂现象，并有浓度依赖性。[结论]黄芩甙溶液在体外能诱导C6胶质瘤细胞凋亡．抑制细胞增殖，是一种具有抗胶质瘤作用的药物。     

鲜壁虎提取物抑制C6胶质瘤细胞增殖和诱导凋亡的研究

 目的　研究鲜壁虎提取液对C6胶质瘤细胞的致凋亡作用及其方式。方法　用不同浓度的鲜壁虎液处理处理C6胶质瘤细胞 ,用MTT法观察增殖抑制 ,用透射电镜观察用药后细胞形态的变化 ,用琼脂糖凝胶电泳观察用药后细胞DNA断裂情况 ,用流式细胞术定量观察C6细胞凋亡情况。结果　经5 0mg/L鲜壁虎液处理的C6胶质瘤细胞 ,增殖能力降低 ;5mg/L ,30mg/L ,5 0mg/L鲜壁虎液均可以使C6细胞显示明显凋亡征象 ,有DNA断裂现象 ,并有浓度和时间依赖性。结论　鲜壁虎液在体外能诱导C6胶质瘤细胞凋亡 ,抑制细胞增殖 ,是一种具有抗肿瘤作用的天然药物。     

苦参碱诱导胶质瘤C6细胞凋亡及其可能的基因机制

摘 要 目的: 探讨苦参碱诱导C6胶质瘤细胞凋亡的作用特点和可能的基因作用机制。 方法：MTT法测定不同浓度苦参碱对C6细胞增殖的抑制率，求出IC50值；倒置显微镜及透射电镜观察苦参碱诱导C6细胞凋亡的形态学改变；Annexin/FITC染色流式细胞术检测不同浓度苦参碱诱导C6细胞的凋亡率；实时定量PCR芯片（Realtime PCR Array）检测苦参碱作用后C6细胞凋亡相关基因的差异表达；免疫细胞化学及Western blotting方法检测苦参碱对C6细胞caspase3表达的影响。结果：苦参碱对C6细胞增殖的抑制率随着药物剂量的增加（0.1~1.0 mg/ml）而增加（P<005），其IC50为0.715 mg/ml。倒置显微镜观察显示苦参碱可诱导胶质瘤细胞出现凋亡改变，透射电镜观察显示苦参碱诱导胶质瘤细胞出现凋亡的超微形态改变，流式细胞术检测显示胶质瘤细胞的凋亡率随着药物剂量的增加（0.2~1.0 mg/ml）而增大[(3.56±0.73)%~(27.55±1.92)%](P<0.05)。胶质瘤细胞经苦参碱作用后出现显著表达差异基因共68个，其中57个基因表达明显上调、11个基因表达明显下调，其中有22个基因与诱导凋亡的死亡受体相关，15个基因与线粒体途径有关；ICC及Western blotting检测都显示苦参碱可诱导C6胶质瘤细胞caspase3表达的上调(P<0.05)。 结论：苦参碱能诱导C6胶质瘤细胞的凋亡，其机制与死亡受体途径和线粒体途径的众多基因有关。     

榄香烯诱导神经胶质瘤细胞凋亡的实验研究

背景与目的：榄香烯是从姜科植物莪术中提取的抗肿瘤药物,我们应用榄香烯治疗神经胶质瘤取得了较为显著的疗效,本研究探讨榄香烯的抗胶质瘤细胞增殖和诱导凋亡作用。方法：^3H-TdR掺入法检测榄香烯对鼠源性C6胶质瘤细胞及人源性SHG-44胶质瘤细胞的体外增殖抑制效应,Hoechst33258／PI荧光染色法观察细胞形态学改变,流式细胞仪和DNA凝胶电泳检测细胞凋亡。结果：榄香烯能有效抑制C6／SHG-44胶质瘤细胞的恶性增殖,^3H-TdR掺入法检测榄香烯处理不同时间(1～4天)的IC50,C6细胞为7．33--11．02mg／L,SHC-44细胞为13．29～27．16mg／L。在相同药物浓度下,C6细胞较SHG-44细胞敏感。经榄香烯作用后,C6／SHG-44胶质瘤细胞核固缩、边集,核浆比例减小并见有凋亡小体形成,DNA直方图观察到特征性亚倍体峰(Ap峰),DNA凝胶电泳出现有明显的梯状条带。结论：榄香烯有显著的抗胶质瘤细胞增殖作用,并能诱导胶质瘤细胞凋亡。     

白首乌C-21甾体总苷体外抑制大鼠胶质瘤细胞生长的作用研究

[目的]探讨白首乌C-21甾体总苷(CGB)体外抑制大鼠胶质瘤细胞(C6细胞)生长的作用,并初步探讨其作用机制。[方法]采用MTT法检测CGB对C6细胞活性的影响,倒置普通光学及荧光显微镜观察CGB对细胞核形态的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率。[结果]CGB对C6细胞的生长呈浓度依赖性抑制;CGB 90mg/L处理48h后,C6细胞的凋亡率显著增高(P<0.01),细胞核出现固缩、断裂;CGB作用48h对体外培养8d的神经元毒性小。[结论]CGB能明显抑制体外培养的C6细胞的生长;诱导肿瘤细胞凋亡是其作用机制之一。     

人参皂甙Rh2诱导C6胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的:观察不同浓度人参皂甙Rh2(G-Rh2)对C6胶质瘤细胞的诱导凋亡作用,并在分子水平探讨其作用机理。方法:细胞计数法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞的DNA组织含量变化,电镜下观察细胞的超微结构改变。结果:1)不同浓度G-Rh22、4、8μmol/L对C6胶质瘤细胞有增殖抑制作用,且呈明显量效关系;2)流式细胞术分析经G-Rh2作用72h的C6胶质瘤细胞的DNA组织直方图提示有凋亡发生;3)不同浓度G-Rh22、4、8μmol/L可使G0/G1期细胞比率下降(P<0.05,P<0.01),S期细胞比率明显升高(P<0.05,P<0.01),而G2/M期细胞相对稳定(P>0.05);4)电镜结果提示经4μmol/LG-Rh2作用72h的C6细胞呈典型的凋亡形态学改变。结论:G-Rh2对C6胶质瘤细胞有诱导凋亡作用,呈剂量依赖性抑制C6胶质瘤细胞增殖,对脑胶质瘤的治疗有重要意义。     

热休克蛋白70反义寡核苷酸诱导胶质细胞瘤凋亡的研究

目的：探讨热休克蛋白70（HSP70）反义寡核苷酸阻断胶质瘤细胞的HSP70的表达及对胶质瘤细胞凋亡的影响。方法：用MTT法、流式细胞术、琼脂糖凝胶DNA电泳方法观察HSP70反义寡核苷酸对体外培养的胶质瘤C6细胞株HSP70表达的抑制及其对生长和凋亡的影响。结果：用HSP70反义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞表现出明显的生长抑制,琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞DNA降解的特征性DNA阶梯图;MTT法测定的生长抑制率和流式细胞术分析的凋亡率与HSP70反义寡核苷酸呈剂量、时间依赖性关系。结论：HSP70反义寡核苷酸通过抑制HSP70表达而诱导胶质瘤C6细胞株凋亡并抑制其生长,可作为基因治疗胶质瘤的新靶向。     

丙戊酸钠诱导急性淋巴细胞白血病原代细胞凋亡机制的研究

目的 探讨丙戊酸钠（VPA）对急性淋巴细胞白血病（ALL）原代细胞凋亡现象与去甲基化机制之间的联系.方法 选取10例AIL患者原代细胞,MTT法检测VPA对ALL原代细胞增殖抑制作用,DNA ladder试验观察细胞凋亡,Annexin-V-FITC/PI检测细胞早期凋亡,半巢式甲基化特异PCR检测p15INK4B基因甲基化,反转录PCR方法检测p15基因表达水平.实验数据采用SPSS 16.0统计软件处理.结果 VPA可明显抑制细胞增殖,对原代细胞IC50为1.898 mmol/L;DNA ladder试验显示VPA对原代ALL细胞的凋亡作用明显.Annexin-V-FITC/PI检测1.0、2.0、4.0 mmol/LVPA组的凋亡率分别是（5.80±0.65）％、（48.46±2.49）％、（76.45±2.98）％,与未用药组的（0.44±0.04）％比较差异有统计学意义（P＜0.05）.原代ALL细胞经VPA作用后,p15INK4B甲基化水平明显下降,2.0、4.0 mmol/LVPA组与未用药组相比,p15 mRNA表达水平增强,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 VPA通过使p15INK4B基因去甲基化,促进p15基因表达上调,从而促进原代ALL细胞凋亡.     

香加皮宝霍甙-Ⅰ诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的实验研究

背景与目的:研究香加皮宝霍甙-Ⅰ诱导人食管癌细胞Eca_109的凋亡作用及其作用机制。材料与方法:采用MTT法分析不同浓度(12.5、25、50μg/ml)宝霍甙-Ⅰ分别作用Eca_109细胞24h、48h、72h后,对细胞增殖的抑制作用;经不同浓度(12.5、25、50μg/ml)宝霍甙-Ⅰ作用Eca-109细胞48h后,用流式细胞术分析细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Survivin的表达;用透射电镜观察凋亡细胞的超微结构变化;用RT-PCR技术检测SurvivinmRNA的表达。结果:不同浓度宝霍甙-Ⅰ均可明显抑制Eca-109细胞的增殖(P均<0.05)且随浓度的增加和作用时间的延长抑制作用增强,作用48h后的半数抑制浓度IC50为24.8μg/ml。不同浓度宝霍甙-Ⅰ作用48h后,均可诱导Eca_109细胞凋亡,50μg/ml时细胞凋亡率达55.26,且导致Eca-109细胞发生凋亡特征性超微结构改变,并使Eca-109细胞SurvivinmRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)。结论:香加皮宝霍甙-Ⅰ可抑制Eca-109细胞增殖,诱导细胞凋亡,该作用可能与下调细胞Survivin表达有关。     

香加皮宝霍甙-I诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的实验研究

背景与目的:研究香加皮宝霍甙-I诱导人食管癌细胞Eca-109的凋亡作用及其作用机制.材料与方法:采用MTY法分析不同浓度(12.5、25、50 μg/ml)宝霍甙-I分别作用Eca-109细胞24 h、48 h、72 h后,对细胞增殖的抑制作用;经不同浓度(12.5、25、50 μg/ml)宝霍甙-I作用Eea-109细胞48 h后,用流式细胞术分析细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Survivin的表达;用透射电镜观察凋亡细胞的超微结构变化;用RT-PCR技术检测Survivin mRNA的表达.结果:不同浓度宝霍甙-I均可明显抑制Eca-109细胞的增殖(P均相似文献