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以抗原受体基因重排为标志,通过多聚酶链反应(PCR)检测急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留病(MRD),近年来在国内外已较广泛地开展起来。但以往的检测方法多是从新鲜骨髓液或外周血液中提取细胞DNA模板,用于PCR扩增,不仅取材不便,标本的保存、送检有困难,DNA抽提方法也较繁锁。我们最近从骨髓涂片中提取DNA,通过PCR检测MRD,取得较好效果,现报告如下。骨髓涂片中DNA的提取方法一、主要度剂和仪器从骨髓涂片中提取DNA所需试剂少,仪器简单,主要有:NIDPK缓冲液(50mMKCl;10mMTris-Cl,pH8.3;2.5mMgCl2;0… 相似文献
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《中国实用儿科杂志》2016,(4)
近年来,虽然白血病的治疗效果日益改善,但微小残留病(MRD)导致的复发仍然是治愈白血病的一大难题。目前关于急性淋巴细胞白血病(ALL)MRD检测的研究较为完善,而其他类型白血病MRD的相关研究尚须进一步深入。检测MRD的两大主要技术有分子生物学技术如聚合酶链反应(PCR)及分子免疫学技术如流式细胞术(FCM)。临床应了解白血病MRD检测的相关进展。 相似文献
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目的探讨微小残留病(MRD)在儿童急性白血病的临床意义。方法对1996年2月~2005年3月在我科正规治疗的30例急性白血病患儿采用外周血,利用单克隆抗体直接免疫荧光标记法和流式细胞仪多参数分析技术进行MRD的检测,并动态随访。结果在已停药的14例患儿中,7例MRD持续阴性或由阳转阴,7例由阴性转阳性,其中2例复发;在维持治疗的16例中,缓解后MRD持续阴性者6例,缓解时MRD阳性者8例(其中2例分别于缓解后3月、8月复发,4例经治疗后转阴),缓解时MRD可疑阳性2例(其中1例转阳性)。结论诱导治疗能杀死大量的白血病细胞,但尚未彻底清除MRD;缓解期一定时间内的病人MRD阳性不一定复发;维持治疗的后期或停药后MRD持续阳性,则有可能复发,MRD持续阴性的患儿预后较好。因此,连续监测MRD对指导临床治疗、早期预测复发有重要意义。 相似文献
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随着现代联合化疗方案、干细胞移植等治疗方法的进展,儿童白血病的诱导缓解率和5a生存率均有了显著提高,但仍有约20%白血病患儿复发。诸多研究表明,微小残留病(MRD)是儿童白血病复发的主要原因。通过敏感度高、特异性强的方法定量检测MRD,对儿童白血病疗效的评价、化疗方案的确定、预后的判断、复发的监测和移植物的净化等方面均有重要意义。本文就对儿童白血病MRD定量检测方法及其临床应用作一综述。 相似文献
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儿童急性白血病微小残留病的检测及意义 总被引:1,自引:0,他引:1
金润铭 《中国实用儿科杂志》2002,17(6):339-342
通常急性白血病(AL)在诊断时,体内白血病细胞总数将达到1012(重量约为1kg),经诱导化疗取得临床完全缓解后,残留的白血病细胞总数应低于109(重量约为1g),这种体内仍残存少量白血病细胞的状态称为白血病微小残留病(minimal residual disease,MRD),目前已经明确MRD是造成AL复发的重要原因之一,因此,正确认识MRD检测的重要性并提高MRD检测的灵敏度是AL诊治过程中急待解决的问题. 相似文献
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白血病的微小残留病常成为白血病复发的根源,定量检测微小残留病对指导临床治疗具有重要意义.目前常用的定量检测方法有三种,包括检测异常抗原表型的流式细胞技术、抗原受体基因重排的PCR扩增技术、融合基因的PCR扩增技术.每种方法原理及特点不同导致I临床应用范围不同.根据患者自身特点,选择合适的检测方法,能使微小残留病定量更准确. 相似文献
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白血病的微小残留病常成为白血病复发的根源,定量检测微小残留病对指导临床治疗具有重要意义.目前常用的定量检测方法有三种,包括检测异常抗原表型的流式细胞技术、抗原受体基因重排的PCR扩增技术、融合基因的PCR扩增技术.每种方法原理及特点不同导致I临床应用范围不同.根据患者自身特点,选择合适的检测方法,能使微小残留病定量更准... 相似文献
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中枢神经系统微小残留白血病检测的临床意义 总被引:2,自引:0,他引:2
急性白血病是儿童时期最常见的恶性肿瘤。由于血脑屏障的存在,使化疗药物浓度不易达到中枢神经系统(CNS)的治疗水平而成为白血病细胞残留的最佳庇护所。中枢神经系统白血病(CNSL)是导致白血病复发的主要原因之一;初诊时是否合并CNSL是评判儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)危险度的独立因素之一,对制订适宜的治疗方案、判断预后具有重要意义。因此CNSL的早期诊断和有效防治已成为儿童急性白血病患儿获得长期生存的关键之一。本研究采用单克隆抗体双重直接免疫荧光素标记法,对急性白血病患儿脑脊液(CSF)微小残留病(MRD)的检出和临床意义进行探讨。 相似文献
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目的:探讨急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患儿微小残留病(MRD)监测的临床指导价值。方法采用多参数流式细胞术对2006年1月1日-2008年12月31日在北京儿童医院治疗的60例T-ALL患儿在治疗不同时间点进行追踪监测,分析不同MRD水平患儿的临床特征及预后。结果诱导治疗第33 d MRD≥1×10-4组患儿易复发,P=0.03;诱导治疗第33 d MRD<1×10-4组患儿预计5年无事件生存率(EFS)为100%,而MRD≥1×10-4组患儿5年EFS为(62.5±7.1)%,两组之间差异有显著性(P=0.018)。结论监测T-ALL患儿MRD水平在评估早期治疗反应、监测复发以及估计预后中具有重要临床价值。 相似文献
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急性淋巴细胞白血病微小残留病的检测及临床意义 总被引:3,自引:0,他引:3
采用IgH和TcRy基因重排两个标志相结合的方法,通过聚合酶链反应(PCR)检测微小残留病(MRD)。18例急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿在终止治疗后有9例检出MRD。受检病例在检测后随访1.5~102个月,结果9例MRD阳性者有3例于3~6个月内复发;而MRD阴性的9例无1例复发,提示治疗终止后仍存在MRD者以后有复发的危险,应进行定期监测;MRD阴性可作为临床停药观察的一个客观指标。该方法检测MRD简便、阳性率较高,适于临床应用。 相似文献
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流式细胞术在急性白血病微小残留病检测中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
汤永民 《中国实用儿科杂志》2002,17(6):370-372
白血病微小残留病 (MRD)是白血病复发的首要原因。近年来的研究表明 ,白血病MRD的定量检测对于儿童和成人白血病预后的判断、临床治疗的指导以及造血干 /祖细胞移植时机的选择等均具有非常重要的意义[1~ 4] 。目前 ,检测白血病MRD有三种较为有效的方法 ,即细胞遗传学 相似文献
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为探讨联合追踪急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿骨髓(BM)、外周血(PB)、脑脊液(CSF)等多种微小残留病(MRD)的临床意义。采用巢式PCR法检测28例ALL患儿,对其中14例联合追踪完全缓解(CR)后BM、PB、CSF多种标本MRD的消长。结果BM、PB、CSF标本在CR后一段时间有MRD存在,但分布不均,随访14例中,8例CR后BM、PB、CSFMRD渐少者呈持续缓解,而4例BM的MRD持续阳性或由阴转归者骨髓复发,CSF的MRD1例持续阳性,另1例由阴转阳性,发生中枢神经系统自血病(CNSL)。提示多标本联合追踪急淋缓解期MRD对指导治疗、预测复发有重要意义。 相似文献
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目的探讨巢式PCR法检测急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留细胞(MRD)在评价疗效、预测复发、判断预后的意义。方法对28例ALL的患儿采用巢式PCR法扩增T细胞受体TCR的Vδ2─Dδ3重排片段,检测急淋患儿的骨髓(BM)及外周血(PB)标本。结果在完全缓解(CR)后一段时间内仍有MRD存在,随访8例中,CR后MRD存在但渐少者呈持续缓解,而CR后MRD持续阳性或由阴转阳,提示复发机会增大。结论巢式PCR检测急淋缓解期MRD对预测复发、指导治疗有重要意义。 相似文献
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儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病的检测及其临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
现代联合化疗方案使儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的治愈率得到了显著提高,但复发是阻碍长期无病生存的主要原因。个体化治疗可极大地提高ALL患儿的预后及长期生活质量。近年来,随着免疫学及分子生物学技术的发展,作为制定个体化治疗重要依据的微小残留病检测大规模用于临床已成为可能。该文总结分析了目前检测微小残留病的常用技术,特别是聚合酶链反应的原理、优缺点及微小残留病检测的临床意义。 相似文献
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现代联合化疗方案使儿童急性淋巴细胞白血病 (ALL)的治愈率得到了显著提高 ,但复发是阻碍长期无病生存的主要原因。个体化治疗可极大地提高ALL患儿的预后及长期生活质量。近年来 ,随着免疫学及分子生物学技术的发展 ,作为制定个体化治疗重要依据的微小残留病检测大规模用于临床已成为可能。该文总结分析了目前检测微小残留病的常用技术 ,特别是聚合酶链反应的原理、优缺点及微小残留病检测的临床意义。 相似文献
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尽管目前儿童急性淋巴细胞白血病诱导缓解率已明显提高,但仍有部分患儿完全缓解后复发.微小残留病(MRD)的存在是导致其复发的主要原因.研究表明MRD的有无及其高低不但反映了个体对治疗的反应情况,还能用于临床危险度分型及移植后复发风险的评估.该文对MRD的检测方法及临床意义作一综述. 相似文献
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杜春燕 《中国小儿血液与肿瘤杂志》2015,20(3):159-162
<正>儿童急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)占儿童急性白血病(acute leukemia,AL)的20%左右,却占儿童AL病死人数的50%以上。目前使用新型药物及造血干细胞移植的先进治疗方案可使患者获得接近70%的长期无病生存(disease free survival,DFS)和超过50%的5年无事件生存率(event free survival,EFS),但是复发率和病死率依然较高~([1])。AML患者初诊时体内约存在10~(12)以上的白血病细胞,而经过化疗达完全缓解后 相似文献