红芪水提浓缩液对快速老化小鼠学习记忆和单胺类神经递质的影响

目的观察红芪水提浓缩液(HRCF)对快速老化小鼠学习记忆能力的改善作用和对脑组织内单胺类神经递质的影响,探讨其改善小鼠学习和记忆能力的作用机制。方法将老化小鼠随机分为抗快速老化亚系1(SAMR1)对照组、快速老化亚系8(SAMP8)模型组、HRCF组和安理申组,每组20只,持续灌胃给药3个月。给药结束后,通过Morris水迷宫测试各组小鼠学习和记忆成绩的变化,采用高效液相色谱法检测各组小鼠脑组织中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的变化。结果模型组快速老化小鼠隐蔽平台的逃避潜伏期明显延长,脑组织中NE、DA、5-HT及5-HIAA含量显著降低(P＜0.01)。与模型组比较,HRCF组小鼠隐蔽平台的逃避潜伏期明显缩短,脑组织中NE、DA、5-HT及5-HIAA含量明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01)。结论 HRCF能够改善痴呆模型小鼠的学习和记忆能力,其机制可能与调节脑组织内单胺类神经递质的含量有关。     

百合地黄汤对抑郁模型小鼠脑内单胺类神经递质的影响

目的 :观察百合地黄汤对小鼠孤养加慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁模型的影响。 方法 :以孤养加慢性温和不可预知应激所致抑郁症小鼠为模型,灌服百合地黄汤21d,以荧光分光光度法测定脑组织中单胺类神经递质多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量。 结果 :与模型组相比,高剂量百合地黄汤可显著增加脑组织内单胺类神经递质DA,5-HT的含量( P <0.01);低剂量组能有效增加5-HT含量( P <0.05)。 结论 :百合地黄汤能显著增加脑组织内单胺类神经递质DA,5-HT含量。提示百合地黄汤有很好的抗抑郁作用,其机制可能是通过增加脑内单胺类递质含量来实现。     

脑忆源片对大鼠脑组织中5种单胺类递质含量的影响

目的 研究脑忆源片对大鼠脑组织中单胺类递质含量的影响,为探讨其改善学习记忆作用的机制提供理论依据.方法 大鼠连续给药15 d后取样,采用HPLC-ECD法检测空白组和给药组大鼠脑组织中单胺类神经递质的含量;色谱柱:Phenomenex luna C18(150×4.60 mm,5μm);流动相:200 mmol·L-1磷酸二氢钠水溶液-乙腈(87:13);流速:1 ml·min-1;柱温:35 ℃.结果 NE、E、DA、5-HIAA及5-HT五种物质在0.0095～10.5 ng·μL-1之间线性关系均良好(r≥0.9996);E的最低检测限低于5 ng·mL-1,NE、DA、5-HIAA、5-HT的最低检测限均低于1.21 ng·mL-1,五种物质平均回收率均在84.41%～100.92%之间.与空白组相比,高、中、低剂量组NE、E、DA含量均升高,5-HT含量均降低,且NE、DA及5-HT含量变化与剂量呈量效关系.结论 该方法具有准确、灵敏、简便等优点,可用于大鼠脑组织中单胺类神经递质的检测;脑忆源片能明显提高大鼠脑组织中NE、DA等易化记忆过程递质的含量,同时,又降低了对记忆有阻抑作用的5-HT的含量,提示脑忆源片辅助改善学习记忆的作用可能与其改变脑组织内单胺类递质的含量有关.     

隔药灸脐对D-半乳糖致衰老大鼠脑内单胺类神经递质水平的影响

目的:观察隔药灸脐对衰老大鼠学习记忆力及脑内单胺类神经递质多巴胺(DA)、去甲肾上腺(NE)和五羟色胺(5-HT)的影响,探讨其延缓衰老的作用机制。方法:实验大鼠随机分成正常对照组、衰老模型组、衰老隔药灸脐组及衰老西药对照组。D-半乳糖连续皮下注射制作衰老的大鼠模型,采用Morris水迷宫检测各组大鼠的空间学习记忆能力及采用高效液相色谱电化学法检测各组大鼠脑组织NE、DA、5-HT的含量。结果:D-半乳糖衰老大鼠空间学习记忆能力明显下降,并且衰老大鼠脑组织NE、DA、5-HT的含量明显降低(与正常对照组大鼠相比P<0.01或P<0.05);隔药灸脐可明显改善衰老大鼠的空间学习记忆能力及提高脑单胺类神经递质的含量(P<0.01或P<0.05)。结论:隔药灸脐可有效改善中枢神经递质的合成,提高衰老大鼠的学习记忆能力,具有良好的延缓衰老的作用。     

“益气调血、挟本培元”针法对SAMPIO鼠痴呆状况和大脑总胆固醇的影响

目的观察快速老化痴呆鼠SAMP10痴呆状况与大脑总胆固醇异常的相关性，并探讨“益气调血、挟本培元”针法改善痴呆的机制。方法设立正常老化鼠SAMR1对照组，SAMP10对照组、针刺组及非穴组，通过Morris水迷宫测试各组小鼠学习记忆功能，Folch法和比色法测量大脑总胆固醇的含量。结果与SAMR1对照组相比，SAMP10对照组小鼠出现明显的学习记忆障碍，其大脑总胆固醇含量明显增加，差异有统计学意义（P〈0．05）；而针刺组可降低大脑总胆固醇含量，改善其学习记忆能力与SAMP10对照组比较差异亦有统计学意义（P〈0．05）。结论调节大脑胆固醇的稳态可能是“益气调血、扶本培元”针法改善SAMP10鼠痴呆状况的机制之一。     

菟丝子提取物对失眠大鼠学习记忆能力及神经递质的影响

目的:研究菟丝子提取物对对氯苯丙氨酸(PCPA)致失眠大鼠神经递质5-羟色胺(5-HT)及多巴胺(DA)含量的影响,探讨菟丝子治疗失眠的作用及可能机制。方法:采用腹腔注射PCPA建立大鼠失眠模型,同时给予灌胃不同浓度的菟丝子提取物,给药7天后,通过Y迷宫评价法观察各组大鼠的学习记忆改变,采用高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)测定5-HT和DA含量来研究菟丝子治疗失眠的作用。结果:菟丝子提取物能明显改善失眠模型大鼠的学习记忆能力,显著升高血清中5-HT含量,降低血清中DA的含量。结论:菟丝子提取物改善失眠大鼠的睡眠机制可能与调节单胺类神经递质有关。     

当归-红芪超滤膜提取物对老龄大鼠记忆功能和神经递质的影响

目的： 探讨不同相对分子质量当归-红芪（当归:红芪 1:5）超滤膜提取物对老龄大鼠记忆功能和神经递质的影响。方法： 本实验选3月龄Wistar大鼠12只作为青年对照组（A组）,24月龄Wistar大鼠48只随机分为老年空白对照组（B组）、当归-红芪超滤膜提取物相对分子质量5万Da（C组）、相对分子质量10万Da（D组）、20万Da组（E组）,用药组分别给予相对分子质量为5万Da（1.87 g·kg^-1·d^-1）、10万Da（2.14 g·kg^-1·d^-1）、20万Da（2.47 g·kg^-1·d^-1）的当归-红芪超滤膜提取物,其余2组给予同体积生理盐水,连续灌胃70 d,观察各组大鼠学习记忆功能,显微镜下海马,大脑皮质组织形态改变,检测脑组织中枢神经递质乙酰胆碱（Ach）,单胺类神经递质5羟色胺（5-HT）,多巴胺（DA）,去甲肾上腺素（NE）含量。结果： 老年组大鼠与青年组大鼠相比学习能力下降;海马,大脑皮质组织形态改变存在差异, 神经递质Ach,DA,NE,5-HT含量显著降低（P<0.05）;与衰老组大鼠相比,当归红芪超滤膜提取物组大鼠脑组织中Ach,DA,NE,5-HT含量增高,有显著差异（P<0.05）;与10万Da相对分子质量组相比,5万Da,20万Da相对分子质量组大鼠脑组织神经递质含量的影响不及10万Da相对分子质量组明显（P<0.05）。结论： 当归红芪超滤膜提取物可以通过提高神经递质Ach,DA,NE,5-HT含量来改善老龄大鼠记忆功能,尤以10万Da相对分子质量组为优。     

健脾丸对脾虚大鼠大脑5-羟色胺、多巴胺的影响

目的:研究脾虚大鼠不同脑区单胺类神经递质含量的变化和健脾丸干预的途径。方法:将45只大鼠分为对照组、模型组和治疗组,使用高效液相检测大鼠不同脑区中5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)的含量。结果:与对照组比较,脾虚组大鼠各脑区内5-HT水平显著升高,DA水平显著下降(P<0.05);脾虚大鼠使用健脾丸干预后,不同脑区内5-HT和DA水平基本恢复正常,与对照组无显著性差异,而DA水平与脾虚组大鼠有显著性差异(P<0.05)。结论:脾虚证与大鼠中枢单胺类神经递质的含量有密切联系,脾虚证存在有中枢机制,而健脾丸可通过改善中枢单胺类神经递质含量达到健脾治疗的目的。     

安神补脑液对未成年小鼠学习记忆功能及脑内单胺类神经递质含量的影响

目的：研究安神补脑液对未成年小鼠学习记忆功能及脑内单胺类递质含量的影响。方法：用Y-型水迷宫法测定未成年小鼠的学习记忆能力，荧光法测定脑内单胺类神经递质的含量。结果：安神补脑液对未成年小鼠的记忆能力有增强作用；并能显著增加小鼠脑内5-羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NA）的含量，但对5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）含量无明显影响。结论：安神补脑液能提高未成年小鼠的学习记忆能力，其作用机制可能与其提高脑内5-HT，DA，NA的含量有关。     

中药天年饮对衰老大鼠学习记忆及脑单胺类神经递质含量的影响

目的观察中药天年饮(Tiann ianyin,TNY)对D-半乳糖衰老大鼠学习记忆及脑单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量的影响。方法选用成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只:正常组、衰老模型组、TNY用药组、阴性对照组。D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型,采用Morris水迷宫检测各组大鼠的空间学习记忆能力及采用高效液相色谱-电化学法检测各组大鼠下丘脑、海马NE,DA,5-HT的含量。结果D-半乳糖衰老大鼠空间学习记忆能力明显下降并且衰老大鼠下丘脑,海马NE,DA,5-HT的含量明显降低(与正常大鼠相比P<0.01);TNY可明显改善衰老大鼠的空间学习记忆能力及提高脑单胺类神经递质的含量(P<0.01或P<0.05)。结论TNY可有效调整中枢神经递质的合成及提高学习记忆能力,具有良好的延缓衰老的作用。     

快速老化痴呆小鼠海马、皮层p130表达的增龄变化及针刺的影响

目的:观察针刺对快速老化痴呆小鼠(SAMP10,简称P10)脑中p130表达的影响,探讨针刺治疗痴呆的可能机制。方法:随机将P10分为对照组、针刺组、非穴组,同源正常老化小鼠(SAMR1,简称R1)为正常对照。针刺组采用"益气调血,扶本培元"针法(简称"气血"针法),选穴"膻中"中脘"气海"、双侧"足三里"、双侧"血海"。"血海"用捻转泻法,余穴施捻转补法,每穴30s,每天1次,第7天暂停,连续13d。运用western blotting技术,观察2、4、6、8、10、12月龄P10海马和皮层中p130表达的增龄变化,以及"气血"针法对8月龄P10海马和皮层p130表达的影响。结果:①p130表达在正常老化R1海马和皮层均随增龄呈平稳上升趋势,6月龄后与2月龄存在明显差异(P<0.05,0.01)。P10则呈波动下降趋势,海马中4月龄后表达即下降,6月龄达谷值(P<0.01),6至8月龄回升,8月龄低于2月龄水平(P<0.05),8至12月龄又下降;皮层中2至4月龄下降,4月龄后开始上升,至6月龄达峰值(P<0.01),6至8月龄下降至低谷,8至12月龄又上升,但仍停留在较低水平。②与8月龄R1相比,p130在P10海马和皮层表达分别呈上调与下调。"气血"针法具有腧穴特异性,可良性调节皮层的蛋白表达,使之接近R1水平。结论:p130表达在R1与P10同脑区间随增龄存在差异,且p130的波动期与报道的P10生物学特征出现的时间段接近。"气血"针法可良性调节8月龄P10皮层p130的表达。     

针刺治疗轻中度血管性痴呆临床观察

目的:观察“益气调血、扶本培源”针法治疗轻中度血管性痴呆的临床疗效。方法:将63例轻中度血管性痴呆的患者随机分为针刺组32例和对照组31例,针刺组施与“益气调血、扶本培源”针法,对照组给与喜得镇,分别于治疗前和治疗12周后,观察简易精神状态检查表(MMSE)、Bless行为量表(BBS)、中医证候积分表(SDSVD)等指标,进行疗效评价。结果:针刺组治疗后,认知能力、行为能力、中医证候评分均较治疗前明显改善(P<0.01),对照组治疗后,认知能力、行为能力较治疗前明显改善(P<0.05),中医证候评分无明显变化;治疗后,认知能力、行为能力、中医证候评分等指标针刺组明显优于对照组,(P<0.01)。结论:“益气调血、扶本培源”针法可显著改善轻中度血管性痴呆患者认知、行为能力和中医证候,疗效明显优于对照组。     

针刺对快速老化痴呆小白鼠脑组织CA神经递质的影响

目的：探讨针刺治疗痴呆的中枢作用机制。方法：采用快速老化痴呆小白鼠（SAMP8）为模型，以补肾、健脾针刺法作为处理因素，用高效液相色谱电化学检测法测脑组织儿茶酚胺类（CA）神经递质。结果和结论：10月龄SAMP8较正常老化小白鼠（SAMR1）脑组织CA神经递质降低；补肾针法对于改善痴呆和升高降低的CA神经递质的作用优于健脾针法。针刺疗法具有穴位特异性。     

SAMP10鼠脑衰老相关基因HSP86、HSP84的表达及针刺影响的研究

目的：探讨针刺延缓衰老的作用机制。方法：采用快速老化小鼠SAMP10、SAMR1为模型，运用RT-PCR和地高辛标记的非放射性Northern blot技术，观察8月龄SAMR1对照组、SAMP10对照组、SAMP10针刺组及SAMP10非穴位刺激组全脑、皮层和海马HSP84、HSP86基因表达的变化。结果：SAMP10对照组小鼠热休克蛋白HSP84、HSP86在全脑、皮层、海马中的表达下调，针刺后表达上调并趋向于正常组。结论：SAMP10小鼠脑衰老与热休克蛋白HSP84、HSP86基因表达异常有关，针刺可以通过调节HSP84、HSP86基因表达增强细胞保护、抑制细胞凋亡、抵抗氧化应激，从而起到延缓衰老的作用。     

针刺对快速老化小鼠SAMP10转录调节因子NF-E2、YB-1、LRG47的影响

目的:探讨针刺延缓衰老的机制。方法:采用快速老化小鼠(SAMP10)、正常老化小鼠(SAMR1)为模型,运用地高辛标记的非放射性Northernblot技术,观察8月龄SAMR1对照组、SAMP10对照组、SAMP10针刺组及SAMP10非穴位刺激组全脑、皮层和海马NF-E2、YB-1、LRG47基因表达的变化。结果:SAMP10对照组小鼠NF-E2、YB-1、LRG47在全脑、皮层、海马中的表达下调,针刺后表达上调并趋向于正常组。结论:SAMP10小鼠脑衰老与NF-E2、YB-1、LRG47基因表达异常有关,针刺可以通过调节NF-E2、YB-1、LRG47基因表达增强红细胞系统功能和细胞增殖,提高细胞抗菌免疫,从而起到延缓衰老的作用。     

双向电泳分析快速老化痴呆鼠脑蛋白质的异常表达及针刺的影响

目的:从整体上观察快速老化及伴随的痴呆对脑蛋白质组的影响以及针刺对其的调节作用。方法:以8月龄快速老化痴呆鼠SAMP10和同源正常老化鼠SAMR1为材料,分为P10针刺组、P10非穴组、P10对照组和R1对照组。针刺组施以“益气调血,扶本培元”针法,针刺“膻中”“中脘”“气海”“血海”“足三里”;非穴组针刺双胁下非穴固定点。双向电泳展示各组小鼠大脑蛋白图谱。结果:双向电泳显示,伴随着快速老化和痴呆,3个蛋白发生了质的变化,其中一个蛋白为P10所特有,两个为R1所特有;9个蛋白发生了量的变化,其中7个蛋白伴快速老化和痴呆高表达,2个低表达。针刺穴位具有良性调节作用,可明显改善上述某些蛋白的表达异常,减缓衰老;而非穴无特异性。结论:伴快速老化,SAMP10痴呆鼠大脑某些蛋白的表达发生了异常,针刺可改善其中某些蛋白的异常,并具有穴位特异性。     

针刺对快速老化骨质疏松小鼠P6骨代谢因子OPG、BMP-2的影响

目的:探讨针刺治疗骨质疏松的机制。方法:以快速老化骨质疏松小鼠P6(SAMP6)及正常同源抗快速老化小鼠R1(SAMR1)为模型,采用Western Blot等方法,观察SAMP6对照组、SAMP6针刺组、SAMP6非穴位刺激组和SAMR1对照组股骨护骨素(OPG)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)蛋白表达的变化。结果:SAMP6对照组股骨OPG、BMP-2表达显著下调(P<0.05);针刺后两者表达上调并趋于正常(P<0.05)。结论:SAMP6小鼠发生骨质疏松与OPG、BMP-2等骨代谢因子表达异常有关,针刺可通过促进成骨细胞形成并分泌骨代谢因子来刺激骨形成,降低骨转换率,达到改善骨质疏松的作用。     

针刺抑制p53mRNA过表达并改善SAMP8小鼠的认知能力

[目的]探讨针刺延缓脑衰老的机制。[方法]将快速老化痴呆小鼠(SAMP8)及其正常同源对照小鼠(SAMR1)分为SAMR1对照组、SAMP8对照组、SAMP8针刺组和SAMP8非穴组。针刺组给予"益气调血,扶本培元"针法治疗;非穴组针刺双胁下两个固定非穴位点;其余两组给予等量的捉抓刺激;每天1次,持续15 d。采用Morris水迷宫测定动物的学习记忆能力;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定海马p53mRNA表达。[结果]与SAMR1对照组相比,SAMP8各组的学习能力及记忆保持能力出现明显损伤,表现为思维僵化、学习过程减慢;其海马p53mRNA表达明显升高。针刺明显改善SAMP8的认知能力,并降低海马p53mRNA表达,甚至低于正常组。[结论]SAMP8的认知损害与p53基因表达异常有关,针刺通过调节p53mRNA表达延缓SAMP8脑衰老的进程,是针刺改善衰老后认知能力下降的原因之一。     

清开灵对快速老化痴呆小鼠学习记忆能力的影响及作用机制研究

目的探讨清开灵对快速老化痴呆小鼠(senescence accelerated mouse-prone/8,SAMP8)学习记忆能力、全脑神经递质及磷脂酰肌醇3激酶激活的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B磷酸化(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路的影响。方法将SAMP8老化鼠随机分为模型组、清开灵组[1.3mL/(kg·d)]及安理申组[0.58 mg/(kg·d)],治疗90天;抗快速老化亚系小鼠(senescence acceleratedmouse-resistance/1,SAMR1)作为对照组。采用水迷宫方法检测小鼠学习记忆能力,以高效液相电化学法检测小鼠全脑乙酰胆碱(ACh)及单胺类神经递质含量,蛋白质印迹法(Western-blot)测定脑Gab1(Grb2-associatedbinder-1)、AKT、473位点丝氨酸磷酸化蛋白激酶B(phospho-serine/threonine protein kinase B,pAKT473)的蛋白表达。结果与对照组SAMR1鼠比较,模型组SAMP8小鼠在隐平台试验和反向试验第3天潜伏期显著升高(P0.05,P0.01),ACh、5-羟色胺(5-HT)水平显著降低(P0.01,P0.05),Gab1蛋白表达水平显著降低(P0.01)。给药后,清开灵组小鼠在第2～5天隐平台试验和反向试验中潜伏期较模型组显著降低(P0.05),ACh、5-HT含量明显升高(P0.05),Gab1蛋白表达水平显著增加(P0.01),AKT蛋白磷酸化水平显著增加(P0.05)。结论清开灵能改善AD模型小鼠的学习记忆能力,这一作用可能与其提高脑内ACh、5-HT的水平,激活PI3K/AKT通路有关。     

利用基因芯片研究针刺对快速老化小鼠海马基因表达的影响

[目的]利用基因芯片技术研究“益气调血,扶本培元”针法对快速老化小鼠(SAMP10)海马基因表达的影响。[方法]选取雄性8月龄快速老化小鼠(SAMP10)(分成针刺腧穴组,针刺非穴组,对照组)和同源正常老化小鼠(SAMR1),采用cDNAmicroarray技术,分析伴随快速老化SAMP10海马基因表达谱的变化以及针刺对其的影响。[结果]芯片结果显示,伴快速老化,P10海马共有7类10个基因的表达发生变化,8个基因表达下调,2个基因表达上调,施予“益气调血,扶本培元”针法后,所有与SAMP10快速老化相关基因的表达均被部分或全部的逆转,显示针刺具有特异性。[结论]“益气调血,扶本培元”针法能够良性调节脑老化相关基因的表达,并可能通过该种作用延缓脑衰老。