L20B细胞吸附法用于环境水中病毒的分离培养

目的：建立一种用于检测外环境水中脊髓灰质炎病毒的方法。方法：细胞吸附浓集法：将自然沉清的水样抗菌、等渗处理后，加入适量的L20B细胞，混匀，充分吸收水中的脊髓灰质炎病毒，然后收集细胞培养、分离病毒。同时用AlCl3-NaCl沉淀法浓集病毒，接种L20B细胞分离病毒，作为对照。结果：40份水样，用L20B细胞吸附法检出10株脊髓灰质炎病毒，用AlCl3-NaCl沉淀法未检出脊髓灰质炎病毒。结论：新建立的细胞吸附浓集法可用于外环境水中的脊髓灰质炎病毒的检测，且检测的敏感性明显高于AlCl3-NaCl沉淀法。     

RD、Hep-2、L20B细胞用于脊髓灰质炎病毒学监测的实验研究

目的：观察RD、Hep—2和L20B用于脊髓灰质炎病毒学常规监测的实验结果，提高脊髓灰质炎病毒的检出率。方法：对RD、Hep—2和L20B用于脊髓灰质炎病毒监测进行了实验研究。用细胞培养法进行病毒分离。结果：L20B细胞对脊髓灰质炎病毒具有较强的敏感性和特异性，但非脊髓灰质炎肠道病毒(NPEV)在RD细胞上呈选择性增值，可能会造成NPEV检出率下降。结论：RD、HeP—2和L20B细胞可用于脊髓灰质炎病毒学常规监测。     

不同细胞对脊髓灰质炎病毒敏感性的测定

目的：脊灰病毒在不同细胞株中的增殖情况和敏感性测定;方法：用微量板法测定脊灰Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型病毒在接种RD,Hep-2,L20B细胞后不同时间的病毒滴定,绘制出增殖曲线图;结果：（1）各型脊灰病毒在3种细胞中增殖情况基本一致;（RD,Hep-2细胞对脊灰病毒敏感 性一致,L20B细胞的敏感性相对于RD,Hep-2细胞低一些,结论：在脊灰病毒分离工作中要使用多种敏感,才能提高病毒分离率,防止脊灰病毒漏检。     

柯萨奇B5型病毒引起类脊髓灰质炎麻痹2例

柯萨奇Ｂ_５型病毒引起类脊髓灰质炎麻痹２例汕头大学医学院第二附属医院传染科邱杰文，周小辉，谢若男，袁广卿［病例１］男性，１３岁。因不规则发热、在下肢无力７天于１９９３年１０月９日入院。患孩一贯身体健康，从未服用脊髓灰质炎糖丸。入院检查：Ｔ３８℃，Ｒ３?..     

高脊髓灰质炎疫苗接种率下的健康儿童肠道病毒变化研究

目的：探讨脊髓灰质炎疫苗接种下的健康儿童肠道病毒变化。方法：对平顶山市2007年0～4岁健康儿童进行肠道病毒变化的研究分析。结果：2007年本市区0～4岁健康儿童肠道带毒率为10%,在阳性标本中脊髓灰质炎病毒占20%,均为疫苗株,显示出疫苗株取代野毒株,其他肠道病毒占80%,以柯萨奇病毒（Coxsackie）的B3、B5型为流行优势株。结论：在今后消灭脊髓灰质炎工作中需要密切注意其在流行病学上的作用。     

青海省2013-2017年脊髓灰质炎病原学监测结果分析

目的通过对青海省2013-2017年急性驰缓性麻痹(Acllte flaccid paralysis,AFP)病例与健康人群的病原学进行监测,为维持无脊灰状态提供准确、可靠的科学依据。方法采用RD、L20B细胞对AFP病例及健康人群的粪便标本进行病毒分离,分离到的脊髓灰质炎毒株送至国家脊髓灰质炎实验室进行鉴定。结果 2013-2017年共接收AFP病例粪便标本106份,分离到脊髓灰质炎病毒(Poliovirus,PV) 1株,分离率为0. 94%,分离到非脊灰肠道病毒(NonPolio Enterovirus,NPEV) 11株,分离率为10. 38%。共接收全省健康人群粪便标本790份,分离到PV 6株,分离率为0. 76%,分离到NPEV 143株,分离率为18. 10%。AFP病例及健康人群标本中分离到的所有PV毒株中,PVⅠ型5株,PVⅢ型1株,PVⅠ+PVⅢ混合型1株,均为脊灰疫苗相关株,无脊灰野病毒株。结论青海省2013-2017年无本地脊灰野毒株病例流行,阻断了脊灰本地野病毒的传播,保持了无脊灰状态。     

脊髓灰质炎病毒继发感染诱导细胞病变

目的 :脊髓灰质炎 (脊灰 )病毒是引起脊髓灰质炎 (小儿麻痹 )的病原体。脊灰病毒 (PV)通过和敏感细胞表面的脊灰病毒受体 (PVR)结合而感染细胞。脊灰病毒感染后 ,细胞出现显著形态学改变 ,即细胞病变。本文的研究目的是探讨PV诱导的细胞病变机制。方法 :用PV野毒或光敏感株感染人神经细胞株(SK -N -SH) ,观察细胞病变发生的动态变化。同时用蚀斑实验和间接免疫荧光实验法检测病毒滴度和病毒抗原的分布。结果 :病毒感染 4小时后 ,细胞开始出现病变并释放子代病毒。感染后 4小时内 (即子代病毒释放前 )用抗PV或抗PVR单克隆抗体处理细胞则可以预防PV感染诱导的细胞病变。抗体处理前用野毒株再次攻击感染的细胞同样诱导细胞病变。相反 ,抗体处理前用光敏感病毒再次攻击感染的细胞后则减少细胞病变的发生。结论 :本研究结果显示 ,脊灰病毒引起的细胞病变由感染后产生的子代病毒的继发感染引起。     

细胞吸附浓集法分离水中微量脊髓灰质炎病毒的实验研究

目的：建立一种简便、实用的检测大量水样中的微量病毒的方法。方法：将Ｌ２０Ｂ细胞加入大量的含微量脊髓灰质炎病毒的水中,充分作用后收集细胞,作病毒的分离培养。同时以ＮａＣｌ－ＡｌＣｌ３沉淀法作对照。结果：１０００ｍｌ水样中含病毒１００、１０ＴＣＤ５０时能全部检出;当含１－２ＴＣＤ５０时１４份样本可检出１３份。ＮａＣｌ－ＡｌＣｌ３沉淀法;在１００ＴＣＤ５０时４份样本中仅检出１份,其它各浓度的４份样都未能     

水中脊髓灰质炎病毒细胞感染模中病毒株与细胞株的筛选

根据５种细胞系对脊髓灰质炎病毒１型５个毒株的敏感性性筛选适用于病毒消毒实验的病毒株和细胞系。方法比较各毒株在不同细胞系中增殖３ｄ－７ｄ后的细胞病变作用、半数组织培养感染量、     

茶树油灭活脊髓灰质炎病毒的试验观察

目的　观察茶树油 (teatreeoil,TTO)对脊髓灰质炎病毒 (poliovirus ,PV)的杀灭效果 ,了解TTO对病毒的灭活能力。方法　根据消毒技术规范指定的方法 ,采用细胞感染试验测定病毒与各浓度TTO溶液作用前后感染细胞的滴度。结果　 0 .5 %TTO作用 40min和 60min能分别灭活PV 4.3 3log10和 5 .5log10 ;1.0 %TTO作用 40min和 60min能灭活PV 5 .3 3log10和 5 .5log10。结论　TTO对悬液中的PV有明显的杀灭作用。     

水中脊髓灰质炎病毒细胞感染模型中病毒株与细胞株的筛选

目的：根据5种细胞系对脊髓灰质炎病毒1型（PV1）5个毒株的敏感性筛选适用于病毒消毒实验的病毒株和细胞系．方法：比较各毒株在不同细胞系中增殖3d～7d后的细胞病变作用（CPE）、半数组织培养感染里（TCⅡ）50）、蚀斑计数（PFU）及免疫印迹（DIBA）试验结果．结果：CPE与TCID）检测表明，同一细胞系Hep2和Hela中病毒感染细胞作用强弱为Henan，Hebei＞Brunhide，Mahony＞Sabin株；不同细胞系对同一病毒株的敏感性为Hep－2＞BGM＞Hela,Vero＞RD细胞．DBA检测提示，Henan株较Brun－hide更易检出．结论：Henan株及Hep－2细胞可作为PV消毒实验所用的病毒和细胞．     

移情法在口服脊髓灰质炎疫苗中的应用

脊髓灰质炎（脊灰）是脊髓灰质炎病毒所致的传染病。本病可防难治，一旦引起肢体麻痹易成为终身残疾。脊髓灰质炎疫苗是用于预防脊髓灰质炎的，该疫苗的接种是采用口服、的方法。因为是口服，婴儿在服苗时因脊髓灰质炎疫苗“异味”容易引起呕吐，这样一是引起了服苗者的痛苦，二是影响了疫苗的效果，三是导致了疫苗的浪费。针对这些问题在服苗过程中我们采用移情法喂服脊髓灰质炎疫苗，大大减少婴儿呕吐的情况。现报道如下：     

青海脊髓灰质炎实验室2016-2017年细胞敏感性监测结果分析

目的通过对青海省脊髓灰质炎(脊灰)实验室2016-2017年两年的细胞敏感性(cell sensitivity,CS)监测结果进行分析,评估其在脊灰实验室检测质量控制中的重要作用。方法统一使用96孔微量板病毒滴定法在表达脊灰病毒受体的小鼠肺(Mouse Lung Cells that Express Receptors for Human Polioviruses,L20B)细胞和人横纹肌肉瘤(Rhabdomyosarcoma,RD)细胞上对Ⅰ型及Ⅲ型,两个型别的脊灰病毒的敏感性进行检测。结果 2016-2017年共开展8次常规CS监测并按时向国家脊灰实验室上报结果,CS监测结果显示青海省脊灰实验室的实验室质量控制(Quality control of laboratory,LQC)株滴度均在正常范围±0. 5logCCID50/0. 1 ml波动。结论青海省2016-2017年脊灰实验室所用的L20B和RD细胞对脊灰病毒敏感性处于正常范围内。CS监测作为中国脊灰实验室网络(Chinese Poliomyelitis Laboratory Network,CPLN)质量控制的重要指标,保证了实验室检测脊灰病毒的敏感性。     

柯萨奇B组病毒IgM检测在病毒性心肌炎诊断中的应用

肠道病毒 ( EV)感染 ,尤其是柯萨奇病毒感染是病毒性心肌炎的主要病因。笔者采用酶联免疫吸附测定法 ( ELISA)检测血清中柯萨奇 B组病毒 Ig M( CBV- Ig M) ,用于小儿病毒性心肌炎的诊断 ,效果较好 ,现报告如下。1　资料与方法1 .1　一般资料　按小儿病毒性心肌炎诊断标准 ,临床诊断或疑诊病毒性心肌炎患者 32例 ,其中男 1 0例 ,女 2 2例 ;年龄 1～ 1 2岁 ,平均 8.5岁。均系本院儿科住院病人。血标本采集时间为心肌炎首次症状发作后 1～ 8周。1 .2　方法　ELISA法 ,试剂盒由北京高远生物技术研究所提供 ,取患者静脉血 2 ml,分离血清…     

抗原嵌合性（Ⅰ／Ⅱ型）脊髓灰质炎病毒小鼠神经毒力的实验观察

为探讨脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Lansing株中和抗原位点1(N-Ag1)在对小鼠适应能力和神经毒力中的意义和作用,本实验采用DNA重组技术构建的2株抗原嵌合性(Ⅰ/Ⅱ型)PVXF414和XF324,对小鼠适应性和神经毒力进行研究。证明Ⅰ型Mahoney株中的N-Ag1被LansingⅡ型毒株的N-Ag1肽段取代后,形成的抗原嵌合性PV Ⅰ/Ⅱ型毒株脑内接种能引起小鼠中枢神经系统脊髓灰质炎病变,导致四肢麻痹或死亡。从麻痹小鼠大脑组织中分离到与接种病毒抗原性相同的活病毒,表明N-Ag1上这一小段氨基酸序列在决定PV宿主适应性中起重要作用;N-Ag1可能与病毒吸附和穿入小鼠中枢神经组织细胞有关。     

BAFF受体在人B淋巴瘤细胞中的作用研究

目的测定B 细胞活化因子（BAFF）受体在人B 淋巴瘤细胞中的表达水平,探讨B 细胞活化因子受体（BAFF-R）信号转导在人淋巴瘤细胞中的作用。方法选取3 种人B 淋巴瘤细胞系Raji、Daudi、BALL-1,通过流式细胞术、实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）及Western blot检测BAFF 的表达。结果流式细胞术结果显示,在3 种人B 淋巴瘤细胞系中均检出BAFF-R 阳性表达,qRT-PCR和Western blot检测显示,在3 种人B淋巴瘤细胞系中, BAFF-R 基因与蛋白表达水平上调。结论人B 淋巴瘤细胞系Raji、Daudi、BALL-1呈阳性表达,BAFF-R 与B淋巴瘤细胞的生长、增殖关系密切。     

中国西南地区老年人EB病毒阳性弥漫大B细胞淋巴瘤的临床病理特点及预后分析

目的 探讨中国西南地区老年人EB病毒阳性弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的临床病理特点及预后相关因素。 方法 结合组织芯片技术,对42例老年人EB病毒阳性的DLBCL进行回顾性研究,包括临床特点总结、病理形态学复习、免疫组化染色以及预后相关因素分析。 结果 从586例DLBCL中筛选出42例（7.17%）EB病毒阳性DLBCL。患者发病年龄51 ~87岁,中位年龄62.5岁,男女之比为2.23∶1。其中69.05%（29/42）为淋巴结病变;30.95%（13/42）为结外病变,包括脾脏、胃、扁桃体、鼻腔和鼻咽部。其主要临床表现为淋巴结肿大、脾大、肝大、发热、乏力、体质量减轻。组织学亚型中绝大多数（90.48%,38/42）为多形性亚型,少数（9.52%,4/42）为单形性亚型,“星空”现象、血管浸润和肿瘤性坏死分别占21.43%（9/42）、47.62%（20/42）和45.24%（19/42）。其免疫表型分析示CD30、CD5、BCL-2、 P53、NF-κB/P65的阳性率分别为52.38%（22/42）、54.76%（23/42）、54.76%（23/42）、87.5%（35/40）和0%（0/40）;35例（83.33%）为Hans分型的non-GCB型。获得随访的23名患者中有14例（60.87%）患者死亡,中位生存时间为40个月,总体5年生存率为16.5%。多因素分析显示是否LDH升高、具有“星空”现象、肿瘤性坏死、BCL-2阳性表达与预后有关。 结论 中国西南地区老年人EB病毒阳性DLBCL的发生率不低,常见于淋巴结,以多形性组织学亚型多见,LDH升高、具有“星空”现象和BCL-2阳性者预后更差。     

致敏绵羊红细胞在EV71细胞嗜性研究中的应用

目的 以致敏绵羊红细胞为工具研究肠道病毒71型（EV71）的细胞嗜性,并探讨传代培养细胞表面EV71受体表达情况。方法 EV71致敏的绵羊红细胞与传代培养细胞作用,观察不同方法处理的培养细胞吸附致敏绵羊红细胞的情况,分析EV71的细胞嗜性,并探讨培养细胞表面EV71受体的表达情况。结果 EV71致敏绵羊红细胞能吸附在人喉癌上皮细胞（Hep-2）、恒河猴胚肾细胞（MA104）的细胞表面,并且胰酶能破坏MA104的吸附功能,对Hep-2却无影响,而狗肾细胞（MDCK）与EV71致敏的绵羊红细胞未见吸附现象,这与病毒直接感染细胞结果一致。结论 该方法能直接、有效地反映病毒的细胞嗜性及培养细胞表面病毒受体的表达情况,在病毒学尤其是病毒受体研究中具有较强的可行性及应用价值。     

疱疹性咽峡炎患儿体内3种相关病毒检测及临床意义

目的检测疱疹性咽峡炎患儿体内肠道病毒(EV)、巨细胞病毒(CMV)和单纯疱疹病毒-1型(HSV-1)病毒核酸,并分析其临床意义。方法选取2014年3月—2015年8月唐山市妇幼保健院儿科就诊的疱疹性咽峡炎患儿394例,采用实时荧光PCR方法检测肠道病毒通用型(EV)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)RNA以及CMV、HSV-1病毒DNA。结果检出EV71阳性83例,Cox A16阳性79例,其它EV阳性124例,EV总检出率为72.6%;CMV阳性87例;HSV-1阳性21例。EV71合并CMV阳性10例,Cox A16合并CMV阳性11例,其它EV合并CMV阳性21例;EV合并HSV-1阳性2例,HSV-1合并CMV阳性1例。合并CMV感染在EV71和Cox A16组间比较差异无统计学意义(P0.05);CMV合并EV感染率高于HSV-1合并EV(P0.01)。患儿中有69例发展成重症病例,其中单纯EV71阳性26例,单纯Cox A16阳性12例,其它EV阳性6例;单纯CMV阳性5例,单纯HSV-1阳性2例;EV71合并CMV阳性8例,Cox A16合并CMV阳性6例,其它EV合并CMV阳性4例。EV71感染重症率高于Cox A16感染(P0.01),且Cox A16重症率高于其它EV病毒感染(P0.05);单纯CMV和HSV-1感染重症率无统计学差异(P0.05);合并感染重症病例的发生率均高于单个EV病毒感染(P0.01)。结论 EV、CMV和HSV-1检测对疱疹性咽峡炎的诊断有重要意义;疱疹性咽峡炎也可出现重症病例,双重感染对病程发展有明显促进作用。