原位逆转录PCR间接法检测人大肠癌组织和细胞株中CD44V6m …

探讨用原位逆转录ＰＣＲ间接法检测人类大肠癌组织及大肠癌细胞株内ＣＤ４４Ｖ６ｍＲＮ的表达。方法在大肠癌组织冰冻切片及ＨＴ２９和ＬｏＶｏ大肠癌细胞爬片上，先作蛋白酶Ｋ及ＤＮａｓｅ消化处理，再行逆转录、原位ＰＣＲＦＹ ＦＵ Ｔ ＲＹ ＦＵ ＲＧＤＲ ＷＵＧ ＶＳ ＵＱ ＳＷ     

CD44V6 mRNA在大肠癌组织及大肠癌细胞株中的表达

ＣＤ４４Ｖ６是肿瘤转移的相关受体之一，其基因可能是一种肿瘤转移相关基因，但与人类大肠癌转移的关系尚不明确［１］，我们采用敏感、特异的原位逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）间接法，检测人类大肠癌组织及大肠癌细胞株中ＣＤ４４Ｖ６ｍＲＮＡ的表达，以探讨其与...     

CD44V6在大肠癌组织和外周血表达及其临床意义

目的：检测大肠癌组织中 CD44V6的表达和外周血中 CD44V6的水平,分析与大肠癌的临床病理学特征和患者预后的关系。方法：收集57例大肠癌手术组织和外周血血清标本,分别应用免疫组织化学方法（SP）和酶联免疫吸附实验（ELISA）检测 CD44V6的表达,分析其与大肠癌的临床病理特征之间的关系以及与患者预后的相关性。结果：CD44V6在大肠癌组织中的表达（63．16％）明显高于其在正常大肠黏膜中的表达水平,差异有统计学意义（10．00％,P ＝0．002）。患者血清中 CD44V6为14．62±3．344ng ／mL,而正常对照组血清中为3．22±1．65ng ／mL,两组差异有统计学意义。大肠癌中的CD44V6表达与肿瘤的浸润深度、分化程度、淋巴结转移情况及临床分期有关。通过 Kaplan－Meier 生存分析发现,CD44V6高表达的患者五年生存率低于低表达患者,两组间差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：CD44V6在大肠癌组织和血清中高表达,并可能成为预测大肠癌浸润转移和预后的指标。     

CD44V6和E-cadherin在大肠癌中的表达及其意义

目的 研究CD44V6和E-cadherin(E-cad)在大肠癌生长转移过程中的作用，评价CD44V6和E-cad可否作为预测大肠癌转移和大肠癌患者预后的生物学指标。方法 用免疫组织化学（S－P法）对71例大肠癌标本同时检测CD44V6和E-cad二种指标。结果 在有淋巴结转移的病例CD44V6的阳性表达率为66.2%(47/71)，明显高于无淋巴结转移的病例（P＜0.01)。而在高分化大肠癌E-cad阳性表达率明显高于低分化大肠癌的表达率（P＜0.05)，有淋巴结转移的病例E-cad阳性表达率明显低于无淋巴结转移的病例（P＜0.05)。单因素分析提示：E-cad阴性者生存率要低于E－cad阳性者。COX比例风险模型多因素分析：Dukes分期高死亡相对危险度为相应较低病人的1.30倍、E-cad阳性病人的死亡相对危险为相应阴性病人的0.76倍。结论 CD44V6和E-cad在肿瘤细胞的分化及肿瘤的转移过程中起着重要的作用。CD44V6表达与大肠癌患者的不良预后有关；而E－cad的表达则对患者有保护趋势，这可为大肠癌患者的预后判断提供有效的依据。     

食管癌患者血清中SCD44V6及组织中CD44V6表达的临床意义

有研究显示CD44V6蛋白不仅可以存在于多种恶性肿瘤组织中还存在于正常人的外周血清中，血清中可溶性CD44V6的含量及癌组织中CD44V6蛋白表达变化的临床意义还不甚明了，我们利用酶联免疫吸附实验(ELISA)及免疫组织化学ABC技术，检测食管癌患者血清中及癌组织内CD44V6蛋白，结合临床病理资料，系统分析其表达变化在食管癌发生发展过程中的临床意义。     

实时定量PCR检测口腔组织中CD44 mRNA的表达

目的：研究细胞黏附分子CD44mRNA在口腔组织中的表达情况,探讨CD44与口腔鳞癌之间的关系.方法：应用实时定量PCR（real-time PCR,RT-PCR）检测17例正常口腔组织及14例口腔鳞癌组织中CD44mRNA的表达情况.结果：CD44 mRNA在口腔鳞癌组织中的表达显著低于正常口腔组织中的表达（P=0.038）;与正常口腔组织中CD44mRNA的表达水平相比较,其中有12例（86％）口腔鳞癌组织表达下调,2例（14％）口腔鳞癌组织表达上调.结论：口腔鳞癌组织中CD44mRNA的表达显著低于正常口腔组织中的表达,因此CD44的表达量可能与口腔鳞癌的发病及转移有关.     

大肠癌细胞标志物CD44V6对大肠癌预后评估作用的研究

目的:使用流式细胞术检测大肠癌细胞CD44V6抗原表达、并对其分选后测定癌细胞增殖活性,评估临床大肠癌预后。方法:使用流式细胞术测定30例大肠癌组织(T)、癌旁2 cm(P2)、癌旁5 cm(P5)、远癌切端正常组织(N)单细胞悬液CD44V6阳性细胞百分率,并与免疫组化方法比较;使用流式细胞术测定CD44V6分选前后大肠癌细胞DNA指数(DI),S期细胞百分比(SPF)、细胞分裂增殖指数(PI)。结果:(1)大肠癌组织中CD44V6阳性细胞百分率明显升高,且在淋巴结转移组中升高更为明显。(2)流式细胞计检测效率明显高于传统的免疫组化方法。(3)流式细胞术分选CD44V6前后检测大肠癌细胞DI、PI值有明显差异。结论:流式细胞术检测大肠癌细胞CD44V6、并于分选后测定其DI、PI值,可作为临床评估大肠癌预后的有效检测指标。     

CD44V9在大肠癌患者组织中的表达及其临床意义

目的探讨CD44V9在大肠癌组织中的表达,分析其与临床病理因素及其预后的关系。方法采用免疫组化S-P法,检测了24例大肠癌患者癌组织和癌旁组织中的表达水平。结果大肠癌组CD44V9阳性表达率为高于癌旁组织(P=0.000);伴有远处淋巴转移的大肠癌组高于无淋巴转移组(P=0.001);高中分化的大肠癌组与低分化、黏液腺癌组的CD44V9阳性表达无显著性差别(P=0.282)。结论 CD44V9在大肠癌发生、发展、侵袭转移过程中起重要作用,检测其表达水平有助于对预后的判断。     

胃癌组织中CD44V6表达的定量测定

目的:测定胃癌组织中细胞黏附分子CD44V6的表达水平并探讨其临床生物学意义.方法:应用流式细胞分析技术定量分析了96例手术切除的新鲜胃癌组织、癌旁正常胃黏膜组织及20例胃溃疡组织、溃疡旁正常胃黏膜组织中CD44V6的表达水平.结果:4种组织中均有CD44V6的表达,但胃癌组织中CD44V6的阳性率(64.5%,62/96)明显高于癌旁正常胃黏膜组织(27.1%,26/96)、胃溃疡组织(25.0%,5/20)及溃疡旁正常胃黏膜组织(20.0%,4/20),P＜0.05;CD44V6的表达水平与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移有关(P＜0.05),且与肿瘤pTNM分期关系密切(P＜0.001).结论:CD44V6高水平表达可能意味着胃癌恶性程度较高且病期较晚,测定胃癌组织中CD44V6的水平对判断胃癌浸润、转移及病期进展情况有一定的诊断价值.     

CD44v6在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨CD44v6表达与结直肠癌发生、发展及转移的关系。方法 采用SP免疫组织化学方法,检测62例原发性结直肠腺癌、45例结直肠腺瘤和17例结直肠正常粘膜中CD44v6的表达情况。结果 结直肠腺瘤和腺癌组织中CD44v6阳性表达率分别为57．8％、77．4％,明显高于正常粘膜的阳性表达率。CD44v6阳性表达与腺癌浸润深度、分化程度无关,但与淋巴结转移相关,淋巴结转移组阳性表达率（87．5％）高于无淋巴结转移组（71．1％）,两组比较有显著性差异（P〈0．001）。结论 CD44v66表达与结直肠癌的发生、发展及转移有一定关系。     

黏附分子CD44s?CD44v6的表达与大肠癌生物学特性的关系

目的:探讨CD44s?CD44v6蛋白在大肠癌组织中的表达及其相关临床意义?方法:应用Envision TM 免疫组化法,回顾性分析57例大肠癌组织中CD44s?CD44v6的表达情况?结果:CD44s?CD44v6在大肠癌中的表达阳性率分别为66.7%?63.2%?CD44s?CD44v6的表达率与肿瘤细胞分化程度?肿瘤分期密切相关(P < 0.05),CD44v6的表达率还与淋巴结转移呈显著相关(P < 0.01)?Kaplan-Meier生存曲线,Log-rank检验单因素生存分析结果显示,CD44s阴性?阳性患者的5年生存率分别为78.95%?55.26%,两者之间差异无显著性(P = 0.062 5);CD44v6阴性?阳性患者的5年生存率分别为80.95%?52.78%,两者之间差异存在显著性(P = 0.014 6)?COX回归多因素生存分析显示,CD44v6对生存有影响(P < 0.05)?结论:CD44s?CD44v6蛋白在大肠癌浸润转移中起重要作用,可以作为一种辅助生物学指标来判断大肠癌浸润转移的潜能,CD44v6可以作为大肠癌独立的预后指标?     

CD44V6基因表达与胃癌预后的关系

目的 检测CD44V6在胃癌及癌前组织的表达,并分析其与临床病理学及患者生存的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测92例胃癌及30例正常胃黏膜组织中CD44V6的表达.结果 CD44V6与胃癌的发生、分化程度及侵袭转移密切相关,CD44V6阳性表达与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤组织的大小及病理类型均无显著相关性(P＞0.05).结论 CD44V6的表达与胃癌临床生物学行为有密切的关系,通过对胃癌发生、发展及转移中CD44V6的表达,为探讨胃癌等恶性肿瘤发病机理以及为临床诊断和治疗提供有益的帮助.     

用组织芯片研究结直肠腺癌组织中nm23 mRNA,CD44s和CD44v6 的表达意义

目的　研究 nm2 3m RNA,CD44 s和 CD44 v6表达与结直肠腺癌发生、发展及转移的关系 .方法　应用组织芯片技术 ,通过原位杂交和免疫组织化学方法分别检测 40例结直肠腺癌标本和 2 2例正常结直肠组织标本中 nm2 3m RNA,CD44 s和 CD44 v6表达情况 .结果　 nm2 3m RNA在结直肠腺癌组织和正常组织中表达无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ,且与结直肠腺癌的分化程度无相关性 (P>0 .0 5 ) ,但与癌细胞的侵润及淋巴结转移呈明显负相关 (r=- 0 .49,P<0 .0 1) .CD44 s在结直肠腺癌组织和正常组织中阳性率分别为 42 %(17/ 40 )和 18. 1%(4 / 2 2 ) ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,而CD44 v6只在结直肠腺癌组织中表达 ,阳性率为 5 5 . 8%(2 2 / 40 ) ,且与结直肠腺癌淋巴结转移和癌侵润呈明显正相关(r=0 .47,P<0 .0 1) .在高、中分化腺癌组织中 ,CD44 v6阳性率分别为 45 .8%(11/ 2 4)和 6 8.7%(11/ 16 ) ,有显著性差异(P<0 .0 5 ) ,但在直肠腺癌组织与结肠腺癌组织间表达无显著性差别 (P>0 .0 5 ) .结论　 CD44 s、CD44 v6在结直肠腺癌组织中过量表达伴随 nm 2 3m RNA表达缺失 ,与结直肠腺癌转移和侵润密切相关 ,联合检测 3种基因能更准确判断结直肠腺癌转移和侵润状态 . CD44 v6表达过量与结直肠腺癌分化程度相关 .     

甲状腺癌中CD44V6和基质金属蛋白酶-2的表达

目的研究黏附分子CD44V6、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在甲状腺癌中的表达、相互关系及其与甲状腺癌侵袭转移的相关性。方法应用S—P免疫组化染色法检测82例甲状腺乳头状癌（PTC）中CD44V6和MMP-2表达。结果82例甲状腺乳头状癌（PTC）中CD44V6和MMP-2阳性表达率为67．1％和68．3％，均高于甲袱腺腺瘤周围正常甲状腺组织，P〈0．01。CD44V6和MMP-2阳性表达与淋巴结转移呈正相关，P〈0．05，且随侵袭程度增加而升高。结论CD44V6、MMP-2在促进甲状腺癌的浸润与转移中呈协同效应。CD44V6和MMP-2表达的综合检测对甲状腺癌转移趋势和预后评估具有重要的参考价值，可能是甲状腺癌侵袭转移、预后判断的分子标志。     

CD44V6在宫颈癌中的表达及其意义

目的探讨CD44V66在宫颈癌中的表达及其意义.方法选取我院1995年2月～1999年4月,从未接受过放射治疗、化学治疗及其他特殊治疗的宫颈癌患者标本60例,其中经手术切除的Ⅰ～Ⅱ期宫颈癌标本37例,Ⅲ～Ⅳ期宫颈癌活检标本23例.同期选取正常宫颈上皮组织标本10例,宫颈上皮内瘤样病变(CIN)标本14例.采用免疫组织化学SP法观察各组织标本CD44V6的表达.结果随着由正常宫颈组织向宫颈上皮内瘤样病变乃到宫颈癌的逐步发展,CD44V6的表达逐渐增强,其中正常宫颈组织与宫颈癌间存在显著性差异(P＜0.05);其在宫颈癌病理学分级中的阳性表达率亦有显著差异(P＜0.05),癌细胞分化越差,CD44V6的阳性表达率越高;CD44V6在有淋巴结转移者中的阳性表达率较无淋巴结转移者明显增高(p＜0.05);此外,CD44V6的阳性表达率与宫颈癌的临床分期有关,Ⅰ～Ⅱ期宫颈癌中CD44v6的阳性表达率低于Ⅲ～Ⅳ期者,但两者间无显著性差异(p＞0.05).结论CD44V6在宫颈癌的发生、发展及转移过程中发挥着重要作用.     

CD44s和CD44V6在非小细胞肺癌组织中的表达

目的 探讨CD44s和CD44V6在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及与预后的关系。方法 应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶连接法（S－P法），对62例非癌组织和60例非小细胞肺癌组织进行了CD44s和CD44V6蛋白的检测。结果 CD44s和CD44V6在非癌组织中均有表达，前者的阳性表达率显著高于后者，P值小于0.05；CD44s在NSCLC的早期和无淋巴结转移时分别为72.7%和75％，显著高于中后期（50％）和有淋巴结转移者（50％），P值均小于0.05；CD44V6在NSCLC的中后期和有淋巴结转移时分别为84.2%和85％，显著高于早期（54.5%）和无淋巴结转移者（50％），P值均小于0.05。结论 CD44s强表达和CD44V6弱表达的NSCLC病人多为早期，发生转移的可能性较小，是NSCLC预后良好的一个指标，相反，预后较差。检测这两个指标可以指导NSCLC病人的临床治疗。     

CD44V6与Ezrin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:探讨CD44V6与Ezrin在肺癌组织中的表达、关系及临床意义.方法:采用免疫组化二步法检测65例肺癌及15例正常肺组织标本中CD44V6与Ezrin的表达,结合肺癌的临床病理特点进行分析.结果:CD44V6在NSCLC中的阳性表达率69.23%,与临床分期、淋巴结转移成正相关,与病理类型、组织分化程度无关;而在肺良性病变中无阳性表达.肺癌组织中Ezrin的阳性表达率(72.3%)较正常肺组织(100%)有所降低,两者比较差异有统计学意义(P<0.05).Ezrin表达下降与肺癌患者病理类型、组织分化程度无关,与有无区域淋巴结及远处转移有关.此外,肺癌组织Ezfin表达有从胞膜向胞浆移位的倾向.结论:CD44v6与Ezrin在肺癌的发生,发展及转移过程中发挥调控作用,可作为判断肺癌转移及预后的重要生物学指标.