辅酶Q10对人RPE细胞氧化应激损伤的保护作用及机制研究

目的:分析辅酶Q100对人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cell,RPE)细胞氧化应激损伤的作用效果与机制。方法:实验分为4组:氧化应激模型组,用H_2O_2进行处理;实验高、低剂量组,采用不同剂量辅酶Q10预处理细胞,然后再经H_2O_2诱导;正常细胞对照组,不用辅酶Q10和H_2O_2处理。采用CCK-8法检测细胞活性;应用DCFH-DA荧光探针检测法检测细胞内活性氧含量;Western blot法检测细胞中Caspase-3、Bcl-2、Bax、磷酸化-Akt、Akt的表达量。结果:辅酶Q10能够增强H_2O_2处理后的人视网膜色素上皮细胞的活性;降低由于H_2O_2引起的细胞内活性氧的水平,抑制人视网膜色素上皮细胞中Caspase-3、Bax的表达,促进细胞中Bcl-2的表达水平;抑制人视网膜色素上皮细胞中Akt的磷酸化水平。结论:辅酶Q10对人RPE细胞氧化应激损伤具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制细胞氧化损伤与凋亡发生相关因子的表达,促进凋亡抑制因子Bcl-2表达,抑制Akt发生磷酸化等多个方面起作用。     

光老化人角质形成细胞模型的构建

目的:探讨中波紫外线(UVB)辐射导致人角质形成细胞(HaCaT细胞)光老化的模型构建及机制研究.方法:体外培养HaCaT细胞分为空白组和实验组,模型组细胞用不同照射剂量的UVB照射,空白组细胞不予紫外线照射,采用CCK-8法检测细胞相对活力,筛选出最适合的照射剂量用于建立光老化模型;应用同样的方法体外培养HaCaT细...     

芦荟多糖对UVB辐射人角质形成细胞氧化损伤的保护作用

目的利用中波紫外线辐射体外培养人永生化角质形成细胞株（HaCaT细胞株）建立紫外线损伤人表皮细胞的模型,探讨芦荟多糖（AP）在紫外辐射HaCaT细胞氧化损伤中的保护作用及其机制。方法在HaCaT细胞培养的基础上,采用UVB辐射HaCaT后,立即加入AP进行干预,同时设置空白组与UVB对照组,分别运用MTT法及生化比色法检测不同浓度的芦荟多糖对UVB辐射人角质形成细胞增殖及抗氧化酶活性的影响。结果 UVB辐射对HaCaT造成明显损伤,AP可提高UVB辐射后HaCaT细胞增值活性,提高超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性,降低脂质过氧化物酶（MDA）活性（P〈0.05）。结论 UVB对HaCaT细胞有损伤作用,AP可拮抗UVB所致HaCaT细胞抗氧化酶活性的降低,具有光保护作用。     

枸杞多糖在UVB辐射人角质形成细胞氧化损伤中的保护作用

目的利用中波紫外线辐射体外培养的人角质形成细胞（HaCaT）建立紫外线损伤模型,探讨枸杞多糖（LBP）在紫外线辐射HaCaT氧化损伤中的作用及其机制,为抗氧化剂的研发提供理论依据。方法在HaCaT培养的基础上设置空白对照组、UVB照射组和不同浓度的LBP干预组,采用UVB辐射HaCaT进行造模,运用酶生化法检测不同浓度的枸杞多糖对UVB辐射HaCaT后的细胞增殖及抗氧化酶的影响。结果 UVB辐射对HaCaT造成明显损伤,LBP可提高UVB辐射后HaCaT细胞增值活性（MTT）,提高超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性,降低丙二醛（MDA）产生。（P〈0.05）。结论 UVB对HaCaT细胞有损伤作用,LBP可拮抗UVB所致HaCaT细胞抗氧化酶活性的降低,从而具有抗氧化光保护作用。     

丹参和枸杞对中波紫外线损伤角质形成细胞的保护作用

目的:观察丹参和枸杞对中波紫外线(UVB)损伤角质形成细胞的保护作用及作用机制。方法:用丹参和枸杞对HaCaT细胞进行预处理24小时,采用20、40、60mJ/cm2剂量的UVB照射细胞,以MTT法检测细胞生存率,以酶联免疫吸附实验检测细胞上清液中TNF-α及IL-1β的分泌量。结果:角质形成细胞损伤程度与UVB照射剂量有关,丹参和枸杞均可提高UVB照射后角质形成细胞的生存率,丹参可抑制角质形成细胞释放TNF-α和IL-1β;枸杞只抑制TNF-α的释放,而对IL-1β无明显抑制作用。结论:UVB对角质形成细胞有损伤作用,且与剂量相关;丹参、枸杞可以通过降低UVB引起的炎症因子TNF-α和(或)IL-1β的分泌从而减轻紫外线辐射引起的皮肤损伤。     

辅酶Q10对砷致人外周血淋巴细胞毒的保护作用

目的：研究辅酶Q10对砷致人外周血淋巴细胞毒的保护作用,为治疗地方性砷中毒提供理论依据。方法：采用常规微量全血培养法,体外培养人外周血淋巴细胞,培养24h后,以30μmol/mL砷终浓度染毒,同时辅酶Q10进行预防性干预,分别以150μg/mL、300μg/mL、600μg/mL终浓度作用,继续培养48h,离心,低渗,滴片,镜下观察。结果：低、中、高3种剂量的辅酶Q10干预组的畸变发生率分别为18%、12.4%、11.4%：微核率分别为13.5%、8.6%、7.5%,经统计学检验,低剂量辅酶Q10干预组与亚砷酸钠单独作用组二者畸变发生率和微核率的差异没有统计学意义,而中、高剂量干预组畸变发生率和微核率显著低于单独染砷组20%、15%（P〈0.05）。结论：辅酶Q10对砷致人外周血淋巴细胞毒有一定保护作用,并在一定浓度范围内呈现显著的剂量依赖关系。     

UVA对人角质形成细胞的氧化损伤作用

①目的　探讨紫外线A(UVA)对人角质形成细胞氧化损伤的机制。②方法　用 5J/cm2 UVA照射角质形成细胞 ,酶生化法检测活性氧 (ROS)的含量及超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX)活性的变化 ,流式细胞仪测定紫外线对角质形成细胞凋亡的影响 ,原位杂交技术观察 p2 1mRNA的变化 ,并与非照射组比较。③结果　与对照组比较 ,UVA照射组ROS含量升高 (t =113.6 8,P <0 .0 0 1) ,SOD、GSH PX活性下降 (t =5 7.2 3、19.0 4 ,P <0 .0 0 1) ,细胞凋亡率升高 (t=5 3.2 8,P <0 .0 0 1) ,p2 1mRNA表达增强。④结论　UVA对人角质形成细胞的损伤与氧自由基生成增多及细胞抗氧化能力抑制有关     

中波紫外线对人角质形成细胞分泌白介素-8的影响

目的　探讨中波紫外线 (UVB)对人角质形成细胞 (HKC)分泌白介素 - 8(IL - 8)的影响。方法　采用不同强度的 U VB照射体外培养的 HKC,2 4 h后用 EL ISA法检测上清液中 IL - 8的质量浓度 ;以及在相同强度UVB照射后的不同时间点检测 HKC分泌 IL - 8的水平。结果　 U VB照射可使 HKC分泌 IL - 8增加 ,该效应在 10～4 0 m J/ cm2 时呈强度依赖性 ,UVB强度为 2 0～ 70 m J/ cm2 时各组 IL - 8质量浓度与对照组 (0 m J/ cm2 )比较差异有显著性 (P<0 .0 1)。 HKC接受 30 m J/ cm2 U VB照射后 ,其 IL - 8的分泌在 1h内开始增加 ,12 h达到高峰 ;照射后 3h、6 h、12 h、2 4 h时 HKC分泌 IL - 8的水平与 0 h时比较差异有显著性 (P<0 .0 1)。结论　 U VB可使 HKC IL - 8分泌增加 ,该效应在一定范围内呈强度依赖性。     

辅酶Q10乳剂对阿霉素致小鼠心肌损伤的保护作用

目的:观察辅酶Q10乳剂对阿霉素致小鼠心肌损伤的保护作用,并初步探讨其可能机制?方法:每天分别给予小鼠辅酶Q10胶囊或辅酶Q10乳剂低?中?高剂量,连续5 d,于第3天时腹腔注射阿霉素造成心肌损伤模型,72 h后检测小鼠心电图,测定小鼠心肌组织中乳酸脱氢酶(LDH)?超氧化物歧化酶(SOD)?丙二醛(MDA)和肌酸激酶(CK)的含量,并用免疫组化方法检测p53蛋白含量?结果:辅酶Q10乳剂可改善阿霉素致心肌损伤小鼠心脏组织中LDH?SOD?MDA和CK的含量,但并未发现其存在明显的剂量依赖性?同时辅酶Q10乳剂可降低小鼠心律失常发生率,并抬高QRS波,且其作用优于辅酶Q10胶囊?结论:辅酶Q10乳剂对阿霉素导致的小鼠心肌损伤具有一定的保护作用,且其对降低小鼠心律失常发生率的作用优于辅酶Q10胶囊,其机制可能与其拮抗阿霉素引起的氧自由基损伤有关?     

CoQ10对DA损伤PC12细胞保护作用的实验研究

目的：探讨辅酶QIO（CoQ10）在以PCI2细胞建立的多巴胺神经元损伤细胞模型中的作用。方法：实验于2007年4月-2008年4月在辽宁医学院科技实验中心进行。在体外培养PCI2细胞的条件下。加入多巴胺以损伤PC12细胞,同时加入一定浓度的CoQ10,检测细胞的生长活力及培养液MDA含量,比较多巴胺损伤的PC12细胞在加与不加CoQ10时损伤的差异。结果：CoQ10＋多巴胺组PC12死亡率及MDA含量较多巴胺组显著降低（P〈O．05）。结论：CoQ10能减轻多巴胺对PCI2细胞的损害。     

葛根素对中波紫外线损伤HaCaT细胞的抗氧化作用

目的研究葛根素不同处理方式对其抗氧化能力的影响。方法以30mJ/cm2中波紫外线(UVB)和1.0mg/mL葛根素处理HaCaT细胞。实验分为阴性对照组、模型组、UVB照射前给药组、UVB照射后给药组和UVB照射前后给药组。UVB照射后24h收集细胞,检测细胞内活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)。结果 UVB照射前给药处理和UVB照射前后给药处理,使细胞内T-AOC、CAT、GSH-Px升高,而ROS和MDA降低(P<0.05);UVB照射后给药处理可以升高SOD(P<0.05),但对其他指标无影响(P>0.05)。结论葛根素不同处理方式影响其抗氧化能力,其中预防性结合治疗性处理效果最佳,单纯预防性处理其次,单纯治疗性处理最差。     

含MT蛋奶粉对小鼠辐射损伤的保护作用

目的：研究含金属硫蛋白（MT）蛋奶粉对小鼠电离辐射损伤的保护作用。 方法：小鼠受2.5 Gy （12.5 mGy·min^-1）X射线照射后,灌胃给予含 MT蛋奶粉,连续14 d后检测外周血白细胞数、淋巴细胞增殖率、股骨骨髓细胞DNA含量、胸腺细胞周期进程以及肝脏和肾脏丙二醛（MDA）含量和抗氧化酶（SOD、CAT和GSH-Px）活性。 结果：受照射小鼠给予含MT蛋奶粉后,尤其是含中高剂量MT蛋奶粉组,白细胞数、淋巴细胞增殖率和股骨骨髓细胞DNA含量明显高于辐射对照组（P<0.01）; 含MT蛋奶粉加照射组胸腺细胞G0/G₁期细胞数明显低于辐射对照组（P<0.01）,S期和G₂/M期细胞数明显高于辐射对照组（P<0.01或P<0.05）;照射组小鼠肝脏和肾脏MDA含量较正常对照组显著增加（P<0.01或P<0.05）,抗氧化酶SOD、CAT和GSH-Px活性则较正常对照组显著降低（P<0.01或P<0.05）,而含MT蛋奶粉加照射组与辐射对照组比较,肝脏和肾脏MDA水平明显降低（P<0.01）,抗氧化酶SOD、CAT和GSH-Px活性显著增高（P<0.01或P<0.05）。 结论：含MT蛋奶粉可明显改善X射线照射对小鼠的损伤效应,具有保护作用。 ［关键词］ ［中图分类号］     

硒对微波辐照致PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨硒对微波致神经细胞损伤的保护作用.方法以离体培养的PC12细胞为研究对象,采用65 mW/cm2的微波照射20 min进行致伤,以细胞存活率、MDA含量、SOD和GSH-Px活性为实验指标反映Na2SeO3预处理对微波辐照致PC12细胞损伤的影响.结果微波辐照后PC12细胞存活率明显降低,MDA含量增加,SOD、GSH-Px活性降低,而经过Na2SeO3预处理后再接受微波辐照,以上指标的变化明显减轻,并且高剂量Na2SeO3预处理作用更明显.结论硒可以提高PC12细胞的抗氧化能力,保护神经细胞对抗微波辐射导致的细胞损伤.     

氯沙坦对肾小管损害保护作用的观察

目的:研究氯沙坦对慢性肾脏病(CKD)患者肾小管损害的保护作用。方法:慢性肾脏病患者80例随机分为氯沙坦治疗组和对照组,比较两组肾小管损害标志蛋白(尿β2-微球蛋白和尿视黄醇结合蛋白)的变化。结果:治疗后氯沙坦治疗组尿中β2-微球蛋白和视黄醇结合蛋白明显减少,显著优于对照组(P<0.05)。结论:氯沙坦对慢性肾脏病患者的肾小管损害具有较好的保护作用。     

人角朊细胞培养的实验研究

目的 :探讨实验室条件下人体角朊细胞的培养技术 ,观察角朊细胞培养生长过程。方法 :采用改良的有血清培养技术进行人体角朊细胞的培养。结果 :培养的角朊细胞 5天融合达 70 % ,9天达 90 % ,1 1天左右完全融合 ,细胞分裂指数高峰在 9天左右 ,可达 1 1 %。结论 :利用改良的有血清培养技术体外培养角朊细胞生长好 ,9～ 1 1天即可形成膜片 ,可达到移植条件 ,对临床上救治大面积烧伤病人具有重要意义     

辅酶Q10对动物学习记忆的促进作用研究

目的:观察辅酶Q10(CoQ10)对东莨菪碱所致记忆障碍模型小鼠和N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)单侧损伤Meynert基底核大鼠学习记忆的促进作用.方法:利用东莨菪碱所致记忆障碍模型小鼠和NMDA单侧损伤Meynert基底核大鼠,采用水迷宫和Y迷宫评价促智作用,采用放射化学法测定大鼠皮层内乙酰胆碱转移酶(ChAT)活性.结果:辅酶Q10能改善东莨菪碱所致小鼠的空间辨别学习记忆障碍,对胆碱能损伤记忆功能具有恢复作用,能防止ChAT活性降低.结论:辅酶Q10对动物学习记忆有明显促进作用.     

NADH抗紫外线诱导的肝细胞株L02凋亡

目的研究还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)抗紫外线照射所致的细胞损伤的分子机制。方法采用UVB紫外线照射正常肝细胞株L02(照射剂量为200J/m2),实验组加/对照组不加NADH(400μg/ml)培养24h。AnnexinV/PI法检测细胞凋亡率,DNA凝胶电泳观察DNA断裂片断,流式细胞仪检测p53、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果NADH可明显抑制紫外线诱导的肝细胞凋亡,并且能够上调Bcl-2蛋白表达,下调p53、Bax蛋白表达。经紫外线照射后的肝细胞存在自身修复。结论NADH能够抗紫外线诱导的细胞凋亡,其机制可能与上调Bcl-2,下调p53、Bax表达有关。