白血病患者WT1基因的表达及临床意义

目的：检测白血病患者WT1基因的表达水平，并探讨其与临床的关系。方法：应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术，检测58例初治急性白血病（AL）、20例慢性粒细胞白血病（CM）和10例非血液病患者WT1基因的表达。结果：10例非血液病患者WT1基因的表达均呈阴性。58例AL患者44例检测有WT1基因的表达，阳性率为75．9％，其中急性髓性白血病（AML）阳性率为86．4％，急性淋巴细胞白血病（ALL）为42．9％，两者差异有显著性（P＜0．01）；AML治疗前WT1的表达水平与完全缓解（CR）率无相关（P＞0．05），但倾向于WT1基因低表达者有更高的CT率（低表达组CR率为75．0％，高表达组率为34．8％）。CML慢性期WT1的表达水平极低，随临床分期进展水平增高，高表达者预示急变。结论：AL和CML急变期患者WT1基因过度表达，初治AML治疗前WT1的表达水平与疗效无相关，但低表达组CR为75％，高表达组CR为34．8％。     

FLT3基因在各种血液肿瘤患者中的表达及其临床意义

目的 为进一步研究各种类型血液肿瘤患者FLT3基因的表达情况。方法 采用多聚酶链反应（PCR）方法检测103例初治AML、76例急性淋巴细胞白血病（ALL）、53例慢性粒细胞白血病（CML）慢性期、31例CML急变期、11例慢性淋巴细胞白血病（CLL）、36骨髓增生异常综合征（MDS）患者、9例多发性骨髓瘤（MM）及13例伴有骨髓侵犯非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者FLT3基因表达情况。结果 FLT3基因在各种血液肿瘤表达为AML患者90．3％（93／103）、ALL患者60．5％（46／76）、CML慢性期患者5．7％（3／53）、CML急变期患者61．3％（19／31）、CLL患者9．1％（1／11）、MDS患者25．0％（9／36）。9例MM和7例伴有骨髓浸润NHL患者均未发现FLT3基因表达。AML患者FLT3基因检测阳性率显著高于其他类型白血病患者，CML急变期患者FLT3基因检测阳性率显著高于慢性期患者，ALL患者FLT3基因检测阳性率显著高于CLL患者。结论 各种类型白血病均可出现FLT3基因的表达，但表达率不同，以AML最高，而CLL和CML慢性期最低，FLT3基因在急性髓系白血病恶性克隆的增殖和维持中起重要作用。     

WT1基因在白血病中的表达及意义

目的 探讨WT1基因在白血病中的表达与临床意义。方法 采用筑巢式逆转录聚合酶链反应（Nest RT-PCR）检测K562白血病细胞系、39例急性白血病（AL）患者、5例慢性粒细胞白血病（CML）患者和22例正常对照骨髓或外周血细胞的WT1基因表达。结果30例初治或复发AL中有22例患者高表达WT1基因，阳性率73．3％。在急性非淋巴细胞白血病（ANLL）和急性淋巴细胞白血病（ALL）阳性率分别为70．8％和83．3％，两组无显著差异。随着WT1基因表达水平的升高，完全缓解（CR）率有明显下降的趋势，CR后WT1基因表达水平明显下降，复发后又显著升高。结论 用Nest RT-PCR测定WT1基因的表达可作为检测白血病微小残留病（MRD）的一项指标。     

MEIS1基因在急性白血病中的表达及其意义

目的 研究MEISI基因在急性白血病(AL)中的表达及其意义。方法 采用半定量RT-PCR方法分别检测HEL细胞系(HOX阳性细胞株)、20名健康对照者及92例AL患者MEISI基因的表达。结果 20名正常人骨髓单个核细胞(MNC)中无MEISI基因表达(阴性),HEL细胞系阳性。在92例AL中,急性淋巴细胞白血病(ALL)患者MEISI基因表达阳性率为5．26％(2／38);急性髓细胞白血病(AML)患者阳性率为42．59％(23／54);表达阳性者完全缓解(CR)率(39．13％)明显低于阴性者(74．19％)。结论 MEISI基因表达与AML有一定的相关性;MEISI基因表达阳性者CR率低,提示MEISI基因有一定的预后意义。     

PRAME与WT1基因在急性白血病患者中的表达及临床意义

目的 探讨急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞（BMMNC）PRAME（preferentially expressed antigen of melanoma）与WT1（Wilms’tumor）基因的表达及临床意义。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测54例AL患者PRAMEmRNA和WT1 mRNA的表达水平，并将两者检测结果进行比较。结果PRAME阳性表达率：ANLL为41．9％，ALL为38．5％，两组比较无显著性差异（P〉0．05）；WT1阳性表达率：ANLL为48．4％，ALL为46．2％，两组比较无显著性差异（P〉0．05）；而完全缓解组（complete remission，CR）及对照组PRAME和WT1的表达均阴性；有效组PRAME和WT1的表达水平显著低于无效组（P〈0．01）；对1例PRAME阳性和10例PRAME、WT1均阳性的患者进行随访，7例经化疗后PRAME表达水平不降，4例复发患者PRAME再次升高均早于临床复发，其中2例WT1的波动与PRAME同步，2例临床复发时才升高。结论与WT1基因一样，PRAME基因是急性白血病的一个重要标记基因，动态检测PRAME的表达水平可在一定程度上了解疾病的状态和体内白血病细胞的总负荷量，对AL患者的化学治疗、预后判断及监测微小残留病灶、防治复发有一定的意义。     

急性白血病MAGE-A3基因表达的临床意义

【目的】探讨MAGE-A3基因在急性白血病（AL）的表达及临床意义。【方法】初发AL93例,其中急性淋巴细胞白血病（ALL）27例、急性髓细胞白血病（AML）66例,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测MAGE-A3基因的表达,观察该基因表达与初治患者治疗效果关系。【结果】93例AL中MAGE-A3基因阳性表达45例,总阳性率48.4%,其中在ALL、AML的阳性率分别为51.9%和47.0%,两组比较无统计学差异。在非M3型AML患者中,MAGE-A3表达阳性与阴性的完全缓解（CR）率分别为64.0%和92.3%,两者比较有统计学差异（P〈0.05）。对表达阳性的21例AL治疗后MAGE-A3基因表达动态观察,当获得CR时,MAGE-A3表达可转阴性,持续阳性者可早期复发;未获CR者可持续表达阳性。【结论】MAGE-A3基因在AL中有一定的表达,在AML和ALL的表达率相仿。MAGE-A3基因阳性非M3型AML治疗CR率较低,MAGE-A3基因阳性表达可作为AML患者预后不良的一项指标。监测MAGE-A3基因表达变化可作为检测微小残留病的有效手段。     

急性和慢性白血病Livin基因表达的研究

目的：研究Livin基因在急、慢性白血病中的表达,探讨其临床意义。方法：采用半定量逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）检测91例急性白血病（AL）和17例慢性粒细胞性白血病（CML）患者LivinmRNA的表达水平,21名健康人的标本作正常对照。结果：初治AL患者中Livin的表达较正常对照明显升高,治疗缓解后的表达水平下降,复发时又再次升高;慢性粒细胞白血病慢性期（CML—CP）、加速／急变期（CML-AP／BP）患者Livin的表达水平均高于正常对照组;初治AL患者中,Livin阳性的患者缓解率低于表达阴性的患者。结论：Livin基因的过度表达参与了急、慢性白血病的发病,并且是AL复发的高危因素;Livin基因的高表达是判断急性白血病预后不良的指标之一。     

Evil基因表达在慢性粒细胞白血病急性变中的意义

目的：探讨Evil基因表达在慢性粒细胞白血病（慢粒）急性变中的意义，方法：笠定量RT－PCR方法检测了HEL白血病细胞系，87例慢粒患者（慢性期58例，加速期4例，急性变期25例）及10名正常对照组Evil基因的表达。结果：10正常对照骨髓单个核细胞中未测到Evil mRNA;HEL细胞系Evil阳性；87例慢粒中,慢性期组，加速期组，急性变组，急性生变组Evil基因表达的阳性率分别为3．5％（2／58）、50．0％（2／4）、48．0％（12／25）、66．7％（12／18）／但加速期及急性变化的Evil基因表达率高于慢性期（P＜0．01），而加速期组和急性变组的阳性率无显著性差异（P＝1．00），急性髓性变组的阳性率高于急淋变组，差异显著（P＜0．01）。慢性期组的阳性率较正常对照组相比差异无显著性（P＝1．00）；Evil基因阳性表达与慢粒临床分期，急性变化及预后相关，而急性变Evil阳性表达与年龄，性别，外周血象，bcr/abl融合基因无关，结论：Evil基因是预测慢性粒患者发生急性变的一个有用的基因标志，可看做是一个由慢性期向急性期转化的信号，并对慢性粒性生变或急淋变有鉴别诊断意义。     

RT-PCR检测WT1基因在白血病患者中的表达及临床意义(摘要)

目的：研究WT1基因在白血病患者中的表达及其临床意义．方法：运用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）的方法，检测WT1基因在50例白血病患者及8例正常人、3例血液系统非恶性肿瘤患者中的表达．分析WT1基因在白血病患者中的表达规律及其与白血病转归、预后等的关系．结果：RT～PCR检测WT1基因的灵敏性为10^-4．急性非淋巴细胞白血病（ANLL）22例，17例WT1表达阳性（77．3％）；急性淋巴细胞性白血病（ALL）11例，6例WT1表达阳性（54．5％）；急性混合细胞性白血病（AMLL）1例WT1表达阳性；提示FAB分型中各型急性白血病均可呈阳性表达．慢性粒细胞白血病（CML）15例，其中慢性期8例WT1表达均为阴性。     

伴髓系相关抗原表达的急性淋巴细胞性白血病的研究

目的：探讨伴髓系抗原表达的急性淋巴细胞白血病（My^＋-ALL）的免疫学特点及临床特征。方法：采用间接免疫荧光法检测81例惠性淋巴细胞白血病（ALL）的免疫表型。结果：81例ALL中有11例除表达淋系抗原外尚表达有髓系抗原（13．6％），其中CD　33阳性最常见（阳性率8．6％）。T-ALL和B—ALL髓系抗原表达差异无显著性，ALL各亚型间其阳性率无统计学意义（Ｐ〉0．05）。CD　34抗原表达阳性率为45．5％（5／11例），均为B—ALL，在T—ALL未见1例。My^＋-ALL与My^--ALL组在性别、年龄、外周血白细胞计数、肝脾淋巴结肿大等相比无统计学意义（P〉0．05）。结论：免疫表型分析对急淋白血病伴有髓系表达的诊断不可缺少；CD34表达与ALL亚型有关。     

分化抑制因子Idl基因在白血病细胞中的表达及意义

目的：研究分化抑制因子-1（inhibitors of differentiation，Idl）在白血病白细胞中的表达，探讨其与急性非淋巴细胞和慢性粒细胞白血病发病的相关性，为白血病的诊断、治疗提供参考。方法：应用1KT—PCR方法，检测Idl在健康志愿者、急性非淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病白细胞中的表达情况。结果：与健康自愿者相比，Idl基因在急性非淋巴细胞和慢性粒细胞白血病患者外周血白细胞中的表达均降低，有统计学意义（P〈0．05），而后两者比较无统计学意义。结论：Idl在白血病细胞中的表达明显降低，与白血病的发病有一定相关性。     

PTEN?VEGF?FLT1基因在髓系白血病中的表达及其相关性研究

目的:探讨肿瘤抑制基因PTEN及血管内皮生长因子(VEGF)及其受体FLT1(VEGFR1)在白血病中的表达及其相关性。方法:应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测50例初治急性髓系白血病(AML),10例缓解期AML,10例慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)、10例CML急变期(CML-BC)患者和10例正常人骨髓单个核细胞(MMNCs)中PTEN、VEGF、FLT1 mRNA的表达。结果:初治AML患者PTEN mRNA表达水平明显低于缓解组AML和正常对照组,CML-BC患者PTEN mRNA表达水平低于CML-CP患者,在AML初治白血病中PTEN mRNA与VEGF和FLT1 mRNA表达负相关,PTEN低表达、VEGF和FLT1高表达与AML缓解率及髓外浸润相关。结论:髓系白血病患者中低表达PTEN基因,高表达VEGF及FLT1基因,并与白血病预后不良及髓外浸润密切相关,三者相互作用共同参与了白血病的发病。     

BCL-1 rearrangement in acute lymphocytic leukemia and its clinical significance

Nonrandomized chromosomal translocation iscommon in lymphoid system tumor.These genes inbreak terminalof chromosome play a direct role in thegenesis of tumor.Immunoglobulin heavy chain(Ig H)gene at1 4q3 2 .3 and BCL- 1 gene at1 1 q1 3 formed therearrangementof BCL- 1 /Ig H gene,which leadsto theoverexpression of cell cyclin D1 protein. It wasreported abroad that BCL- 1 gene rearrangementmostly occurred in chronic lymphoid system malignanttumor including mantle cell lymphoma (MCL ) ,fewc…     

白血病患者外周血Flt3基因表达

目的 检测白血病患者外周血Flt3在不同类型白血病中的表达及分布情况．阐明Flt3的表达与疾病发生和发展的关系,与骨髓标本Flt3的表达作对照,确定检测外周血Flt3对白血病基因诊治的临床意义。方法 采用RT—PCR方法分析34例白血病患者外周血及部分骨髓标本Flt3的表达。结果 19例急性髓系白血病患者中16例阳性（84．2％）,其中6例强阳性,1例化疗后完全缓解的M3患者Flt3表达阳性;6例急性淋巴细胞白血病中3例阳性（50％）;5例慢性淋巴细胞白血病中2例（1例慢性期,1例急变期）阳性;2例骨髓异常综合征中1例阳性;2例急性混合细胞白血病均阳性。7例骨髓与外周血配对标本中阳性率差别无统计学意义。10例正常人表达均阴性。结论 外周血可以替代骨髓作为检测Flt3表达;急非淋患者Flt3表达强弱与外周血白细胞数相关（P〈0．05）;Flt3表达可作为白血病基因诊断及微小残留病灶的检测标志。     

抑癌基因PTEN在急性白血病发病中临床意义的探讨

目的：研究抑癌基因PTEN在恶性血液病中的表达情况,探讨其与急性白血病（AL）的相关性。方法：选取恶性血液病74例[AL35例,骨髓增生异常综合征（MDS）20例,慢性粒细胞白血病（CML）13例,骨髓增殖性疾病（MPD）6例]。另取非恶性血液病24例及正常骨髓10例作为对照。采用S-P免疫组织化学检测骨髓单个核细胞中的PTEN表达情况,同时分析PTEN与临床指标的相关性,并对疾病转归进行跟踪随访。结果：PTEN阳性表达率在对照组中非恶性血液病患者（83.33%）低于正常人（90.0%）,但差异无统计学意义（P〉0.05）,恶性血液病AL组（57.14%）与对照组差异有显著性（P〈0.05）;AL-完全缓解（AL-CR）组（63.16%）与对照组差异有显著性（0.05〉P〉0.01）,AL-初治组（55.17%）与AL-CR组无显著差异（P〉0.05）,MDS组难治性贫血伴原始细胞增多（MDS-RAEB）为53.33%,CML组为53.85%。MDS-RAEB组和CML组与对照组相比均有显著性差异（均P〈0.05）,但与AL-初治组相比差异无显著性（P〉0.05）。PTEN低表达与外周血中白细胞计数及发病时骨髓中原始细胞比例有一定相关性（r≈0.50）,与MDS-RAEB转化AL、慢性粒细胞白血病急性变（CML-AL）呈正相关性（r≈0.53）。结论：AL存在PTEN表达异常,PTEN与AL的发病可能有一定的关系,提示PTEN在AL的发病中有一定意义。     

BP1基因在急性白血病患者中的表达及相关研究

目的探讨BP1基因在急性白血病患者中的表达及其临床意义。方法运用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测HEL白血病细胞系（BP1阳性细胞株）、92例急性白血病（AL）患者及10名正常对照者BP1基因的表达水平;分析其在急性白血病中的表达规律及与临床预后的关系。结果10名正常人和急性淋巴细胞白血病患者的骨髓细胞中无BP1基因表达（阴性）;HEL细胞系BP1阳性;急性髓系白血病（AML）患者BP1基因总阳性率42.59%,在各亚型AML中均表达,AML各亚型间的阳性率无差异（P〉0.05）。AML初治、复发、完全缓解的BP1基因阳性率分别为50.00%、46.15%、11.11%,各组间无明显差异（P〉0.05）。AML初治患者中BP1阳性表达者首次完全缓解（CR1）后缓解持续时间短于BP1阴性表达者（P〈0.01）,早期病死率（确诊后3个月内死亡）明显升高（P〈0.01）。结论BP1基因在AML中有异常高表达,具有髓系特异性,可作为区别淋系和髓系的标志性基因。BP1基因在AML的发病中可能起一定作用,可作为判断AML预后的一个指标。     

细胞甩片、点片和涂片法原位杂交检测急性白血病多药耐药基因表达

目的：研究不同取材方法对检测白血病细胞多药耐药（ＭＤＲ１）基因表达的意义。方法：用细胞甩片、点片和涂片三种取材方法做原位杂交，检测了１０例急性白血病ＭＤＲ１基因表达水平。结果：发现１０例中７例表达ＭＤＲ１基因，ＭＤＲ１基因阳性率甩片法和点片法较高，涂片法较低；细胞形态学以甩片和涂片法较好，而点片法较差。结论：三种方法均可用于ＭＤＲ１基因检测，其中甩片法较可靠，涂片和点片法较简便     

急性白血病多药耐药相关蛋白基因表达及临床意义

（１）目的 探讨急性白血病（ＡＬ）多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因的表达及临床意义。（２）方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法,对７７例ＡＬ病人及１０例健康人基因表达进行检测。（３）结果 ７７例ＡＬ病人ＭＲＰ平均表达水平与对照组比较差异无显著性,复发组ＭＲＰ平均表达水平与初治组比较差异有显著性（ｔ＝５．３２,Ｐ〈０．０１）。（４）结论 ＡＬ的复发与ＭＲＰ表达有关,ＭＲＰ基因的过度表     

聚合酶链反应阵列同时定量检测37种白血病融合基因

目的建立一种同时定量检测多种白血病染色体易位形成的融合基因的荧光实时定量聚合酶链反应（real-time PCR）方法,了解阵列式PCR的应用可行性。方法组合使用82条引物,设立66个PCR平行管,同时定量检测37种白血病常见融合基因形成的125种剪切体和4种白血病常见的原癌基因活化。实时定量PCR采用Eva Green荧光染料法,用ABL基因做内参,用比较Ct法进行相对定量。用此方案对31例白血病患者标本进行检测,其中6例慢性粒细胞白血病（CML）患者做治疗前后或治疗过程中不同时间的对比检测,28人次与多重巢式PCR方案的检测结果进行对照。结果我们建立的PCR阵列方案有较大的线性检测范围（10^2～10^8拷贝／μl）,有较高的检测灵敏度（232拷贝／μl）和精确性;在31例患者标本的检测中,共检测到14种融合基因类型和所有4种原癌基因活化;检测到一例同时有5种融合基因阳性和两种原癌基因活化的患者;和多重巢式PCR检测结果的对比显示本方案灵敏度略低于巢式PCR,但差异没有统计学意义（P=0．009）;6例CML患者标本的检测显示治疗后患者标本中BCR／ABL融合基因及WT1和EVI1原癌基因表达量均呈现不同程度的降低,与临床治疗情况符合;基因定量分析的结果表明本方案能够对常见白血病融合基因和癌基因活化情况进行定量分析,在白血病的诊断及疗效监测中有应用价值。结论PCR阵列法同时定量检测多种白血病融合基因适于白血病初诊患者融合基因的筛查及微小残留病（MRD）的检测,对于检测同时有多种融合基因存在的病例及治疗过程中融合基因的变异情况更为有用。