二甲基亚砜涂剂改善吡柔比星外渗所致兔皮肤损伤

0　引言　肿瘤化疗是临床上常用的方法 [1 ,2 ] .在具体治疗操作中 ,有抗癌药物渗漏现象发生 .目前尚无较好的处理方法 .本研究建立抗癌药吡柔比星渗漏致皮肤溃疡的兔动物模型 ,990 g· L- 1二甲基亚砜分别涂用 2 ,7d,观察治疗效果 .1　材料和方法1.1　材料　实验兔 11只 ,体质量 1.5～ 2 kg,由本校动物实验中心提供 ;990 g· L- 1 二甲基亚砜 ,国产吡柔比星 ,剂量为10 mg/支 .1.2　方法　随机将实验兔 3只用于对照组 ,8只用于实验组 .乙醚吸入麻醉实验动物 ,将实验兔两肋腹部用医用备皮刀去毛 ,10 g· L- 1 吡柔比星 (溶剂为 5 0 g· L- …     

显示小鼠肠肌间神经丛铺片的方法

1　材料和方法1.1　材料　健康成年雄性昆明小鼠 5只 ,体质量 2 0～ 30 g,ip肌松药后以颈椎脱臼法通过腹部正中切口暴露腹腔 ,暴露的消化道器官不断用温和的 0 .0 1mol· L- 1 PBS(p H7.0 )清洗保持湿度 .食管、十二指肠、空肠、回肠、盲肠和结肠取材后用含尼莫地平 (10 - 6mol· L- 1 )的 0 .0 1m ol· L- 1 PBS冲洗 ,以 40 g· L- 1 的多聚甲醛充盈到最大程度后将各肠段两端扎紧 ,立即用 40 g· L- 1多聚甲醛液灌注固定 ,再放置其中固定6～ 8h(4℃ ) ,再移入 30 0 g·L- 1蔗糖液中 4℃过夜 .1.2　方法　各肠段沿肠系膜纵行剪开以 0 …     

亚低温对大鼠脑损伤后脑保护作用

实验资料　健康雄性SD大鼠 (医动字B0 8 0 0 5号 ,由西安交通大学实验动物中西提供 ) 4 5只 ,体质量 2 5 0～ 30 0g ,随机分为假手术组、损伤组和亚低温治疗组 3组 ,每组各 15只 .以5 0g·L-1氯胺酮 80～ 10 0mg·kg-1腹腔内注射 ,将麻醉后的大鼠俯卧固定于自制的简易落体致伤装置 ,参照Feeney法将顶部皮肤矢状切开 ,在“人”字缝前 3mm ,中线右 3mm顶部颅骨钻孔并扩大骨窗 (直径 5mm) ,不越过中线 ,暴露硬膜 ,将底面直径 3mm的致伤撞垫轻轻置于骨窗中央的硬膜上 ,用 2 0g重物自 4 0cm高处沿滑杆垂直落下打击撞垫 (冲击力为 80 0g·cm-2…     

尾悬吊模拟失重大鼠胃黏膜白细胞介素2表达的变化

1　材料和方法1.1　动物　健康雄性SD大鼠 15只 ,体重 2 5 0～ 30 0g(第四军医大学动物实验室提供 ) ,随机分为 2 8d实验组 10只 ,2 8d同步对照组 5只。健康雄性及雌性SD大鼠各 10只 ,体重 2 5 0～ 30 0g(空军总医院动物实验室提供 ) ,随机分为 14d实验组和 14d同步对照组各 10只 ,每组雌雄各半。采用尾悬吊 - 30°作为模拟失重模型。对照组除不悬吊外 ,其它条件与实验组相同。1.2　方法①标本制备 :悬吊组和对照组分别于 14和 2 8d悬吊结束时腹腔注射戊巴比妥钠 (4 5mg/kg)麻醉后开腹腔取出胃 ,沿胃小弯剖开 ,甲醛缓冲液固定标本 ,按常规…     

大鼠胃壁细胞的分离及培养

目的　完成胃壁细胞分离及纯化 ,建立原代培养胃壁细胞的方法 .方法　制备大鼠翻转的胃囊用含链霉蛋白酶E的消化液注入胃囊内孵育 ,并用磁力搅拌器轻轻搅拌而制备单个的胃底腺细胞 ,Percoll梯度离心富集胃壁细胞 ,用含10 0 m L· L- 1 血清的 PBS或培养液 ,时差贴壁去除成纤维细胞 ,然后 ,将壁细胞接种于培养板中 ,培养液用无血清的 1∶ 1Harm's F- 12 / DMEM培养 ,内含胰岛素 5 mg· L- 1 ,氢化可地松 4μg· L- 1 ,转铁蛋白 5 mg· L- 1 ,硒酸钠 5μg· L- 1 ,牛血清白蛋白 2 g· L- 1 ,表皮生长因子 2 5 μg· L- 1 ,葡萄糖 1.98g· L- 1持续培养可达 1wk以上 .结果　获得的壁细胞经吖啶橙 (acridine orange,AO)鉴定纯度达 80 %以上 ,原代培养经HE染色可见壁细胞呈分散小组式生长 ,且生长状态良好 .结论　此方法适宜于大鼠胃壁细胞的分离及体外培养 ,为体外进一步研究壁细胞的功能打下基础 .     

电镜测定神经细胞钙离子分布

1　材料和方法1 .1　材料　选用健康成年 SD雌性大鼠 75只 ,随机分为正常组、对照组、实验组 .实验组动物放入次声压力仓内 ,采用次声测量系统施以 1 6 Hz,90 d B,1 30 d B的次声作用 1 ,7,1 4 ,2 1次 ,共 8组 ,次声作用均为每次 2 h,1次· d-1 .对照组动物放入次声压力仓内不施加次声作用 ,放置时间及次数和观察时间点同实验组 .1 .2　方法　各组分别于次声作用后 0 .5,1 2 h后以 2 0 g·L-1戊巴比妥钠 ip麻醉后 ,迅速取出下丘脑组织 ,切成 1 m3小块 ,置入 30 ml· L-1戊二醛 - 90 mml· L-1草酸钾溶液中固定 2 h.经 75g· L-1蔗糖 90 …     

小鼠睾丸中神经激肽B受体(NK3r)的免疫组织化学

1　材料和方法1.1　材料　雄性成年 BAL B/ c小鼠 6只 ,体质量 2 5～ 2 8g.以颈椎脱臼法处死后立即取材 ,用 9g· L- 1 生理盐水迅速冲洗干净置入 40 g· L- 1 多聚甲醛固定 2 4h,再浸入含 30 0 g·L- 1蔗糖的缓冲液中浸泡 4℃过夜 ,包埋剂包埋后恒冷箱切片 ,分两套收集 ,片厚 4μm,贴于涂明胶载玻片上室温晾干 .1.2　方法　经 30 m L· L- 1 的甲醇双氧水封闭 30 min后 ,第一套切片按照 ABC法进行染色 :1进兔抗神经激肽 B受体 [1 ](1∶ 5 0 )染色 12～ 2 4h;2 Biotin标记的山羊抗兔 Ig G抗体(DAKO 1∶ 40 0 )染色 6～ 8h;3 Avidin…     

Ⅱ型胶原蛋白的提取纯化和鉴定

1　材料和方法1.1　材料　胃蛋白酶及 型胶原蛋白 (C )标准品购自美国Sigma公司 . Mr14 .4～ 97.4× 10 3低分子标准蛋白购自上海丽珠东风生化技术有限公司 .CS- 90 0 0薄层扫描仪购自日本岛津公司 .1:Protein marker;2 :C (Sigma) 2 g·L- 1 ;3 :C (Sigma) 1g·L- 1 ;4:C 1g· L- 1 ;5 :C 0 .5 g·L- 1 ;6:C 0 .2 5 g·L- 1 ;7:0 .12 5 g· L - 1 .图 1　 SDS- PAGE分析经 DEAE- 5 2纤维素柱层析纯化的 C 1.2　方法　新鲜牛软骨剥去骨膜 ,在液氮冷冻下磨成粉 ,称质量 ,用 10倍体积的 4 mol· L- 1 盐酸胍 - 0 .0 5 mmol· L…     

家兔卵巢移植入自体角膜板层模型的建立

1　材料和方法1.1　材料　 1雌家兔 (本校实验动物中心提供 )体质量 2 .0～ 2 .5 kg,双眼正常无病变 ,卵巢未排卵 ;2试剂 2 0 0 g· L- 1乌拉坦 ,5 g· L- 1 丁卡因 ,绒毛膜促性腺激素 (9911172 ,上海生物化学制药厂 ) ;3 Alcon板层刀 ,裂隙灯照像显微镜为德国 Opton公司生产 .1.2　方法　 1取卵巢皮质 2 0 0 g· L- 1 乌拉坦麻醉 ,固定 ,常规消毒铺单 ,行剖腹术 ,取新鲜卵巢组织 ;2同一只家兔用丁卡因滴眼作局部麻醉 ,在角巩缘内侧上方处用眼科弯剪刀切开结膜 ,约 90°,分离结膜及结膜下组织 ,做角膜板层分离 ,建立隧道接近瞳孔区 ,大小 …     

地塞米松降低腰部硬膜外麻醉腰背痛

目的　对比观察术前、术毕硬膜外腔地塞米松对腰部硬膜外麻醉腰背痛的预防效果 .方法　选择 ASA ～ 级在腰部硬膜外麻醉下手术患者 12 0 0例 ,均分为 4组 ,硬膜外腔首次量均为 19m L 利多卡因复合液 .组 ∶ 2 0 g· L- 1 利多卡因 18m L和 9g· L- 1氯化钠注射液 1m L;组 :同组 ,同时静注地塞米松 (Dexa) 1m L(5 mg) ;组 :2 0 g· L- 1 利多卡因 18m L加 Dexa 1m L (5 m g) ;组 :同组 ,但于术毕硬膜外腔注入 7.5 g· L- 1 丁哌卡因 5 m L 加 Dexa1m L(5 mg) .此后全组患者按手术需要硬膜外腔注入 5 g· L- 1 丁哌卡因5～ 8m L.结果　术后前 3d组 , , 和 腰背痛发生率分别为 2 4.7% ,2 3.3% ,8%和 8.7% .组 和组 腰背痛发生率明显多于组 和组 (P<0 .0 1) ,且疼痛程度明显重于后两组 ,组 和组 或组 和组 间无明显差异 (P>0 .0 5 ) .组 ,组 硬膜外穿刺次数与术后腰背痛明显正相关 (P<0 .0 1) ;组 ,组 腰背痛发生率及硬膜外穿刺次数与腰背痛无明显关系 (P>0 .0 5 ) .结论　硬膜外腔地塞米松有效预防腰部硬膜外麻醉后腰背痛 ,其疗效不受注药时机的影响 .