仙花活骨丹颗粒含药血清对血管内皮细胞增殖及黏附分子表达的影响

目的以血清药理学方法观察仙花活骨丹颗粒对血管内皮细胞增殖及黏附分子表达的影响,探讨仙花活骨丹颗粒治疗股骨头缺血性坏死的药理学机制。方法建立人脐静脉内皮细胞体外培养模型,将ECV304细胞与仙花活骨丹颗粒不同剂量含药血清一起培养,MTT法观察细胞增殖情况,同时对细胞黏附分子表达进行测定。结景仙花活骨丹颗粒舍药血清处理24h后能不同程度促进血管内皮细胞ECV304的增殖（P〈0．05）,中剂量12h、48h、72h增值最明显（P〈0．01）;但72h较48h增值情况又有所下降。含药血清组CD54（ICAM-1）表达明显较空白对照组增多（P〈0．05）。中剂量组CD54（ICAM-1）表达呈高峰,而大剂量组CD54（ICAM-1）表达又有所降低。中剂量仙花活骨丹颗粒是促进的最佳浓度。结论仙花活骨丹颗粒能够促进内皮细胞的增殖以及细胞粘附分子的表达。     

络泰治疗激素性股骨头坏死的实验研究

目的：评价络泰对激素性股骨头坏死的治疗作用。方法：将30只兔随机分为空白对照组，模型组，治疗组，于实验后8，16周分别进行血液流变学，血脂测定，16周处死动物行组织形态学观察。结果：治疗组动物血浆和全血粘度，红细胞聚集指数，总胆固醇，甘油三酯均明显低于模型组（P＜0．05），股骨头空骨缺窝数虽没有达到降低正常水平，但较模型组有明显改善（P＜0．05），结论：iv经股动脉穿刺介入给大剂量络泰治疗股骨头坏死，可以降低血脂，改善血液循环，改善股骨头的供血情况，从而促进坏死骨修复和新生骨再生。     

介入治疗激素性股骨头坏死的实验研究

目的：探讨介入治疗激素性股骨头坏死的作用机制。方法：将24只兔子随机分为对照组、模型组、介入组。于介入前后行血管造影检查，并于治疗后8周，分别进行血液流变学、血脂及病理学观察。结果：介入组血管中断现象改善，终末小血管数目增我。全血粘度、血浆粘度，红细胞聚集指数、总胆固醇、甘油三脂，股骨头空骨陷窝率均明显低于模型组（P＜0．05），软骨下区血管数目增多（P＜0．01）。结论：介入、静脉注射治疗股骨头坏死，可以降低血脂，改善血液循环，通过改善股骨头血供，降低骨内压，促进坏死骨修复和新骨再生。     

普伐他汀对激素性坏死股骨头内Cbfa1表达的影响

目的 研究普伐他汀对激素性坏死股骨头内Cbfal基因表达的影响．方法 54只新西兰白兔随机分为正常组（A组）、模型组（B组）和普伐他汀治疗组（C组），每组18只．B、C两组应用大肠杆菌内毒素及甲强龙造成股骨头坏死模型，C组于造模后4周开始用普伐他汀灌胃，A、B两组以等量蒸馏水灌胃．分别于喂药后第4、8、12周分批取兔股骨头行实时荧光定量PCR检测股骨头内Cbfal mRNA的表达．结果 B、C两组各时相点Cbfal mRNA的表达水平均低于A组，但C组喂药后第8、12周的表达量明显高于B组，差异有显著性（P〈0．01）．结论 普伐他汀可促进激素性坏死股骨头内Cbfal mRNA的表达，有可能成为临床治疗激素性股骨头坏死的有效药物．     

激素性股骨头缺血坏死股骨头VEGF表达及其意义

观察激素性股骨头缺血性坏死股骨头血管内皮生长因子（VEGF）的表达，探讨其发病机理。采用模型大白兔检测股骨头VEGF的表达，结果正常组股骨头中有VEGF的表达，激素性股骨头缺血性坏死有一段时间内VEGF表达增高，但随着时间推移其表达越来越弱（P〈0．001）。说明激素抑制了股骨头VEGF的表达，阻碍了血管重建，加重了股骨头缺血性坏死。     

再生颗粒对兔股骨头坏死骨保护素和骨保护素配体mRNA表达影响的实验研究

目的:研究再生颗粒对兔股骨头坏死骨保护素和骨保护素配体mRNA表达水平的影响。方法:选用肌注甲强龙20mg/(kg.d),2次/周,连续注射4周制造兔股骨头坏死模型,再生颗粒治疗4周、8周后实时定量PCR检测骨保护素和骨保护素配体mRNA的表达情况。结果:再生颗粒治疗组在各时间点骨保护素的表达水平明显高于对照组,而骨保护素配体的表达明显低于对照组。结论:再生颗粒可以提升兔股骨头坏死骨保护素mRNA的表达水平,抑制骨保护素配体的表达,从而促进坏死骨组织的修复。     

兔股骨头缺血坏死模型的建立研究及比较

目的：为研究股骨头坏死治疗建立理想的动物模型．方法：采用健康的成年新西兰兔24只,随机分为3组,A组：注射马血清及地塞米松（n=10）;B组：用液氮将股骨头冷冻坏死（n=10）;C组：正常对照组（n=4）．术后定期行X线检查,并取股骨头行组织切片,通过计算空骨陷窝率比较股骨头坏死情况．结果：光镜下A,B两组均股骨头均出现缺血性坏死表现,空骨陷窝率比C组均有升高（P〈0．05,P〈0．01）,A组8wk时的模型复制成功率小于55％;B组8wk后的成功率大于95％．结论：通过异种血清加激素或液氮冷冻股骨头均可建立兔的股骨头缺血坏死动物模型,但异种血清加激素的方法并非一定能引起股骨头坏死;通过液氮冷冻方法建立的兔股骨头缺血坏死模型方法简便、坏死明显,可作为研究股骨头缺血坏死治疗的理想动物模型．     

骨痹通消颗粒调控成血管化与细胞凋亡干预兔激素性股骨头坏死

目的：探讨骨痹通消颗粒对糖皮质激素致股骨头坏死过程中血管形成及细胞凋亡的干预作用。方法：将30只实验用新西兰兔随机分组,除对照组外,使用脂多糖联合糖皮质激素建立模拟激素性股骨头坏死动物模型。造模成功后,实验组给予骨痹通消颗粒灌胃治疗,模型组和对照组则给予等量生理盐水灌胃,1次/d,持续8周后处死实验动物,取出各组兔双侧股骨头进行苏木精-伊红染色并对蛋白CD34、CYR61及VEGF进行免疫组化染色定位;采用TUNEL染色法观察股骨头区细胞凋亡情况;WB检测凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达水平;RT-qPCR分析VEGF、eNOs、Bax及Bcl-2等基因表达情况。结果：与模型组相比,骨痹通消颗粒能够减少骨组织中空骨陷窝数和凋亡阳性细胞数（P<0.01）,上调股骨头组织中CD34、CYR61及VEGF表达。与对照组相比,模型组中促凋亡蛋白Bax的表达量增多且抗凋亡蛋白Bcl-2、VEGF及eNOs mRNA的表达量下降明显（P<0.01）,实验组经骨痹通消颗粒干预治疗后得到相反的结果（P<0.05）。结论：骨痹通消颗粒能够提高激素性股骨头坏死兔模型骨组织中成血管基因表达量...     

仙花活骨丹颗粒治疗早期股骨头坏死43例

目的观察仙花活骨丹颗粒治疗股骨头坏死的临床疗效。方法将43例股骨头坏死患者随机分为治疗组21例，服用仙花活骨丹颗粒；对照组22例，服用健骨生丸，两组患者均进行负重控制，疗程均为1年。以Harris评分和影像学指标进行综合临床疗效评定。结果治疗组临床总有效率为71．43％，对照组为68．18％，组间比较无显著性差异，P〉0．05；两组Harris评分改善程度比较无显著性差异，P〉0．05。结论仙花活骨丹颗粒治疗早期股骨头坏死有确切疗效。     

股骨头坏死愈胶囊对兔激素性股骨头坏死血管内皮生长因子表达影响的实验研究

目的观察股骨头坏死愈胶囊对兔激素性股骨头缺血性坏死血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨其对激素性股骨头坏死(SANFH)的防治效果及作用机制。方法将诱导成功的模型分为正常组,模型组,通络生骨胶囊组,股骨头坏死愈胶囊低剂量组、高剂量组,分别给予通络生骨胶囊、股骨头坏死愈胶囊混悬液灌胃,于治疗8周后处死取材,行常规HE染色及VEGF染色观察。结果正常组VEGF表达的阳性细胞数目比率最高,模型组最低,股骨头坏死愈胶囊高剂量组和通络生骨胶囊组相当,但较正常组均低,且高剂量组和通络生骨胶囊组均高于低剂量组(P<0.05)。结论股骨头坏死愈胶囊抑制了激素促使VEGF表达持续减弱的趋势,有效改善股骨头内微循环,扭转股骨头缺血状态,促进骨小梁再生与修复,达到防治SANFH的发生和发展。     

体外冲击波对兔激素性股骨头坏死中OPG含量及表达的影响

目的观察体外冲击波对兔激素性股骨头缺血坏死血浆中骨保护素（osteoprotegerin,OPG）的变化及表达的影响。方法健康成年雄性日本大耳兔54只,随机选取18只为正常对照组（A组）,余36只造模后随机分为模型组（B组）、冲击波治疗组（c组）各18只,c组给药后第二周行兔股骨头冲击波干预,A组、B组不干预。各组于第4、6、8周随机选取6只兔耳动脉采血后处死,ELISA法测血OPG含量。留取股骨头标本,HE染色法观察股骨头病理组织学变化,免疫组化染色观察股骨头中OPG阳性表达,并进行半定量分析。结果4周时B组与C组血浆中OPG含量无差别（P〉0．05）但均较A组降低（P〈0．05）;6周、8周时血浆中OPG含量B组较A组、C组降低（P〈0．05）,A组、c组间无差别（P〉0．05）。股骨头中OPG阳性表达：4、6、8周时B组较A组、c组低（P〈0．05）,A组、c组间无差别（P〉0．05）。结论兔激素性股骨头坏死冲击波干预后,血浆中OPG含量增高,局部坏死区OPG表达增强。     

辨证运用骨蚀宁Ⅰ号、Ⅱ号对激素性股骨头坏死兔股骨头血管内皮生长因子表达的影响

目的 探讨骨蚀宁Ⅰ号、Ⅱ号治疗激素性股骨头坏死的作用机制,为其临床应用提供理论依据。方法 选取60只家兔,随机抽取6只作为正常组,其余54只用于复制激素性股骨头坏死模型,模型复制成功后随机分为模型组、阳性对照组和治疗组,每组18只。三酰甘油大于1.00 mmol/L判为血瘀证。模型组灌胃生理盐水,阳性对照组灌胃健骨生丸,治疗组辨证给予骨蚀宁Ⅰ号、Ⅱ号（血瘀证用Ⅰ号,肾虚证用Ⅱ号）。于模型复制后4周、8周、12周分批处死家兔,每组6只,光镜下观察股骨头组织形态变化,采用免疫组织化学法检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达水平。结果 治疗组和阳性对照组骨坏死比模型组减轻,空缺骨陷窝数百分比明显低于模型组（P＜0.05）;模型复制第4周,模型组VEGF灰度值明显低于正常组（P＜0.05）;阳性对照组、治疗组灰度值比模型组显著升高（P＜0.05）;模型复制后8周,模型组灰度值明显高于其他两组（P＜0.05）;模型复制后12周,阳性对照组、治疗组VEGF灰度值明显低于模型组（P＜0.05）,治疗组VEGF灰度值明显低于阳性对照组（P＜0.05）。结论 骨蚀宁Ⅰ号、Ⅱ号通过增强VEGF的表达,促进激素性股骨头坏死的血管形成和骨坏死修复。     

葛根素对激素性股骨头坏死大鼠骨组织及PI3K/Akt信号转导通路的影响

目的探究葛根素对激素性股骨头坏死大鼠骨组织及PI3K/Akt信号转导通路的影响。方法将大鼠分为对照组、模型组和观察组,用臀肌注射甲泼尼龙琥珀酸钠方法复制激素性股骨头坏死大鼠模型。模型复制后观察组大鼠腹腔注射葛根素注射液。比较各组大鼠一般状态、股骨头病理切片和股骨头骨密度、血清血管内皮生长因子（VEGF）和一氧化氮（NO）水平、股骨头中Akt和p-Akt蛋白表达水平。结果观察组大鼠给药后活动程度显著提高,毛发有色泽,精神状态良好。模型组大鼠血清中的VEGF和NO水平低于对照组（P < 0.01）;观察组大鼠血清中的VEGF和NO水平高于模型组（P < 0.01）。3组大鼠股骨头中Akt蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）;模型组大鼠股骨头中p-Akt蛋白表达水平显著高于对照组（P < 0.01）;观察组大鼠股骨头中p-Akt蛋白表达水平显著高于模型组（P < 0.01）。结论葛根素对激素性股骨头坏死模型大鼠有治疗作用,其作用机制可能为升高血清中促进血管新生活性因子水平的升高,进而促进血管新生,重建供血和血液循环,促进坏死部位新骨生成。     

速效骨伤愈合剂治疗激素性股骨头坏死的实验研究

目的：探讨速效骨伤愈合剂治疗激素性股骨头坏死的作用机理．方法：用糖皮质激素造成兔激素性股骨头坏死动物模型，测不同时期速效骨伤愈组、模型组及空白对照组血清胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白量并行光镜及透射电镜观察．结果：速效骨伤愈组与模型组比较，速效骨伤愈组的血清胆固醇、甘油三酯明显降低（P＜0．01)，高密度脂蛋白明显升高（P＜0．01)．光镜及透射电镜观察速效骨伤愈组股骨头坏死程度轻而修复快．结论：速效骨伤愈合剂治疗激素性股骨头坏死的作用机理可能与其具有降脂、抗凝、纤溶和抗炎的多种作用有关．     

髓芯减压联合VEGF与胶原基骨移植材料对兔股骨头缺血坏死的修复作用

探讨髓芯减压联合血管内皮生长因子（VEGF）与胶原基骨移植材料对兔股骨头缺血坏死的修复作用。方法 对24只SPF级家兔股骨头内注射无水乙醇建立兔股骨头坏死模型,然后将家兔随机分为模型对照组（A组）、髓芯减压+自体松质骨组（B组）、髓芯减压+胶原基骨修复材料组（C组）和髓芯减压+胶原基骨修复材料+VEGF组（D组）,每组6只,共治疗12周。通过苏木精伊红（HE）染色观察组织切片形态。采用骨密度分析系统（QCT PRO V6.1）测量家兔股骨头骨密度(BMD)。Western blot检测VEGF、Collagen I、Runt相关转录因子2（RUNX2）、骨钙素（OCN）、Wnt-3a、β-catenin和GSK-3β的蛋白表达。结果 术后12周时,与B、C组比较,D组家兔股骨头骨小梁排列较整齐,骨髓中观察到大量微血管的形成,可见明显成骨,且坏死区基本被修复。与A组相比,B组、C组和D组家兔股骨头空骨陷窝比率均显著降低(P＜0.05);D组家兔股骨头空骨陷窝比率小于B组和C组(P＜0.05)。与A组相比,B组、C组和D组家兔股骨头的骨密度均显著升高(P＜0.05);D组骨密度显著高于B组和C组(P＜0.05)。与B组和C组相比,D组VEGF、Collagen I、RUNX2和OCN的蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）;与B组和C组相比,D组Wnt-3a和β-catenin的蛋白表达水平均显著升高,GSK-3β的蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。结论 髓芯减压联合VEGF与胶原基骨移植材料对兔股骨头缺血坏死可有效促进坏死股骨头的修复,提高骨密度及成骨蛋白的表达     

骨髓基质干细胞复合同种骨移植治疗创伤性股骨头坏死实验研究

目的探讨骨艇基质干细胞复合同种骨移植在治疗创伤性股骨头坏死中的成骨作用。方法6月龄SD大鼠36只,随机分为模型组、髓芯减压组及复合骨组。每组12只。取4周龄SD大鼠骨髓基质干细胞体外分离培养,取生长状态良好的第三代细胞复合同种骨粉;采用圆韧带离断方法制备大鼠创伤性股骨头坏死动物模型;于术后1、2、4、6周分别处死动物;光镜下观察三组间病理形态学改变;骨形态计量学参数测量及计算新骨生成量,得出骨小梁相对体积（BV／TV）、骨小梁厚度（Tb．Th）、骨小梁数量（Tb．N）、骨小梁分离度（Tb．Sp）。结果成功的复制出大鼠股骨头坏死模型,呈现出典型股骨头坏死不同时期病理改变;术后6周,骨形态计量学参数检测结果：复合骨组新骨生成量均多于模型组及髓芯减压组,其参数BV／TV、Tb．N、Tb．Th、Tb．Sp与其他二组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论BMSCs复合同种骨支架可作为“活骨”用于ONFH模型治疗并在其修复中可提高诱导成骨能力及股骨头坏死的骨修复能力,其作用优于单纯髓芯减压。     

骨松灵合剂对去卵巢大鼠骨组织雌激素受体表达的影响

目的探讨骨松灵合剂对去卵巢大鼠骨组织雌激素受体（ER）表达的影响。方法本实验采用免疫组织化学方法检测雌性大鼠去卵巢后骨组织中ER的变化,以及骨松灵合剂、雌激素治疗后对其产生的影响。结果椎体松质骨中ERα、ERB主要分布于骨小梁周围的成骨细胞、破骨细胞及骨髓基质细胞中,阳性颗粒为棕黄色,胞浆胞核均有表达,但胞核着色较深,与假手术组（sham组）（ERα：140．6±5．7;ERB：118．6±6．5）比较,去卵巢对照组（OVX组）（ERα：119．2±7．1;ERβ：80．8±3．7）大鼠骨小梁周围及骨髓中阳性细胞灰度明显降低（P〈0．01）,而中药组（ERα：137．5±4．9;ERβ：113．8±7．4）、E2组（ERα：143．8±6．2;ERβ：116．6±4．8）阳性细胞灰度与OVX组相比显著增加（P〈0．01）,中药组与E2组相比较差异无明显统计学意义（P〉0．05）。结论骨松灵合剂可以上调大鼠去卵巢后骨组织中ERα、ERβ表达,促进骨形成,可能是治疗骨质疏松症的重要机制。     

兔激素性股骨头坏死发生早期的性别差异

目的建立雄性与雌性兔激素性股骨头缺血性坏死模型,探讨兔激素性股骨头缺血性坏死发生早期的性别差异。方法选取20只新西兰大白兔,雌雄各半,使用马血清加醋酸泼尼松龙制备兔激素性股骨头坏死模型。在激素注射完毕2周后,检测兔的甘油三酯、总胆固醇、空骨陷窝率、骨髓脂肪细胞直径与面积。结果10只雄性动物中有8只发生了早期骨坏死,10只雌性动物中3只发生了骨坏死（P=0．025）。雄性动物造模后的甘油三酯（1．37±0．07）mmol／L、总胆固醇（1．35±0．08）mmol／L、空骨陷窝率（18．70±1．79）％、骨髓脂肪细胞面积（34．41±2．99）mm。与直径（37．27±3．37）μm均比雌性动物组有统计学意义（P〈0．05）。结论兔激素性股骨头缺血坏死模型发生早期存在性别差异,雄性动物更容易受激素影响发生骨损伤。     

股骨头缺血性坏死与DR片上股骨头密度改变的关系分析

目的：探讨DR片上股骨头密度的改变与股骨头缺血性坏死关系的相关性。方法：将股骨标本60具根据骨厚度值大小分为5组（观察组），第6组作为正常对照组，然后进行股骨头缺血性坏死的模型制作，采用骨密度测量仪与DR进行股骨头密度测定。结果：观察组DR骨密度测量值在0．31～0．52g/cm2之间，平均值为0．38±0．04g/cm2，与双能X线骨密度测量值对比无明显差异（P＞0．05），都表现为随着骨厚度的增加，骨密度值也明显增加。观察组的屈服载荷随着厚度的增加而明显增加，但是都明显少于对照组的屈服载荷。Pearson相关分析表明股骨头密度的改变与股骨头缺血性坏死关系呈现正相关性（P＜0．05）。结论：DR片是诊断股骨头缺血性坏死的常规手段，DR上股骨头密度的改变可作为早期股骨头缺血坏死的诊断指标。     

中药活血补髓汤治疗股骨头坏死21例

目的观察活血补髓汤对股骨头坏死的治疗效果，探讨中药作用机理。方法41例患者随机分为治疗组服用活血补髓汤，对照试服用健骨生丸，均以3个月为1个疗程。于治疗前后对患者临床症状及X线表现进行评定。结果活血补髓汤对股骨头坏死的总有效率为80．95％；对照组为75．0％，两组比较无显著性差异。从X线片改变来看，两组患者在服药3个月后都能促进死骨吸收和新骨形成，活血补髓汤组78．94％有死骨吸收，而健骨生丸组36．84％有死骨吸收；活血补髓汤52．63％有新骨形成，而健骨生组21．05％有新骨形成，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论中药活血补髓汤对股骨头坏死的修复作用优于对照药。